Питательная среда для выделения бактерий рода самрylовастеr

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике для выделения и идентификации кампилобактерий. Цель изобретения - повышение селективности среды в отношении Campylobacter pylori. Среду готовят следующим образом. В 1 л дистиллированной воды вносят компоненты, г/лферментативный гидролизат казеина 13-16, глюкоза 4-6, экстракт кормовых дрожжей 4-6, хлорид натрия 6,3-6,5, карбонат натрия 0,5-0,95, цистеин дигидрохлорид 0,7-0,8. мочевину 2-10, тиогликолят натрия 0,4-0.6, бромтимоловый синий 0,02-0,03 и агар 0,5-0.7. Смесь доводят до кипения и стерилизуют. Отдельно готовят раствор, содержащий, г/л амфотерицин В 0,002-0,004, метронидазол 0,0005-0,001 и нзлидиксовую кислоту 0,025-0,05, стерилизуют его и вносят в основной состав. Среду разливают по пробиркам и используют для посева. При росте С. pylori цвет среды изменяется с травянисто-, зеленого или оливкового в синий. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 С 12 .0 1/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4427027/13 (22) 01;06.88 (46) 23.05.91. Бюл. М 19 (71) Временный научный коллектив "Отклик" (72) М.A.Ðîæaâèí, В.В.Сологуб, И.Ю.Микитюк и В.И.Струк (53) 576.8.093.1(088.8) (56) Авторское свидетел ьство СССР

И. 1342017, кл. С 12 О 1/04, 1986.

:(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЙ РОДА САМРт 1 ОВАСТЕК (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано s бактериологической диагностике для выделения и идентификации кампилобактерий. Цель изобретения — повышение селективности среды в отношении

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике для выделения и идентификации кампилобакте. рий.

Цель изобретения — повышение селективности среды в отношении Campylobacter

pylori.

Пример 1. Для получения 1 л среды смешивают компоненты в следук цих соотношениях, г/л: ферментативный гидролизат казеина 13; глюкоза 4; экстракт кормовых дрожжей 4; хлорид натрия 6,3; карбонат натрия 0,5; цистеин дигидрохаорид 0,7; мочевина 2; тиогликолят натрия 0,6; бромтимоловый синий 0,02; агар 0,5.

Компоненты в указанных количествах вносят в 1 л дистиллированной воды, смесь

5U 1650701 А1

Campylobacter pylori. Среду готовят следующим образом. В 1 л дистиллированной воды вносят компоненты, г/л: ферментативный гидролизат казеина 13-16, глюкоза 4 — 6, экстракт кормовых дрожжей 4 — 6, хлорид натрия 6,3 — 6,5, карбонат натрия 0,5 — 0,95, цистеин дигидрохлорид 0,7 — 0,8, мочевину

2-10, тиогликолят натрия 0,4 — 0,6, бромтимоловый синий 0,02 — 0,03 и агар 0,5-0,7.

Смесь доводят до кипения и стерилизуют.

Отдельно готовят раствор, содержащий, г/л амФотеоицин В 0,002 — 0,004, метронидазол

0,0005-0,001 и налидиксовую кислоту

0,025-0,05, стерилиэуют его и вносят в основной состав. Среду разливают по пробиркам и используют для посева, При росте С.

pylori цвет среды изменяется с травянисто-, зеленого или оливкового в синий, 1 табл. доводят до кипения, разливают во флаконы и автоклавируют при 1 ати в течение 20 мин. . После автоклавирования 1 н. раствором соляной кислоты доводят рН среды до 7,0.

После охлаждения среды до 50 С добавляют амфотерицин В 0,002 г, метронидазол О

0,0005 г, налидиксовую кислоту 0,025 г, 3 предварительно растворенные в 5 мл дис- О тиллированной воды и простерилизованные и фильтрацией через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм.

Готовую среду разливают стерильно по

Iha6h

5 мл в пробирки, Пример 2. Готовят среду в соответ- ствии с примером 1, но компоненты берут в следующем количестве, г/1л воды:

Ферментативный гидролизат каэеина 14

Глюкоза 5

1650701

П р и м е ч а н и е. В скобках количество в процентах.

Экстракт кормовых дроЖжей 5

Хлорид натрия. 6,4

Карбонат натрия 0,7

Цистеин дигидрохлорид 0,75

Мочевина 6,0

Тиогликолят натрия 0,5

Амфотерицин 8 0,003

Метронидазол 0,0008

Налидиксовая кислота 0,04

Бромтимоловый синий. 0,025

Агар 0,6

Пример 3. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующем количестве, г/1л воды;

Ферментативный гидролизат казеина 16

Глюкоза 6

Экстракт кормовых дрожжей б

Хлорид натрия 6,5

Карбонат натрия 0,95

Цистеин дигидрохлорид 0,8

Мочевинэ 10

Тиогликолят натрия 0,6

Амфотерицин В 0,004

Метро нида зол 0,001

Налидиксовая кислота 0,05

Бромтимоловый синий 0,03

Агар 0,7

Пример 4, Три варианта сред засева-. ют исследуемой культурой, Посевы инкубируют при 37 С в течение 4 — 5 сут в обычных аэробных условиях (до 20 кислорода), При изменении окраски среды с травянисто-зеленой(оливковой) на синюю определяют наличие С. pylori, Отдельные штаммы стрептококков, растущие на данной среде, окрашивают среду в желтый цвет. Чувствительность среды 10 микр, кл/мЛ.

Среда подавляет рост Proteus spp„

Escherichia coli, Pseudomonas aeruglnosa, Bacillus spp., Candida albicans и большинство штаммов Streptococcus spp.

При посеве нэ среду обсемененного патологического материала (биоптаты, операционный материал и т.д.) С. ру!оп выявляют через 30 — 120 мин инкубации по появлению синей окраски на инфицированных кампилобактериями участках ткани.

5 Результаты испытания среды по выделению и идентификации С. pylori представлены в таблице.

Использование, питательной среды позволяет повысить точность выявления С.

10 pylori за счет повышения селективных свойств среды.

Формула изобретения

Питательная среда для выделения бак15 терий рода Campylobacter, содержащая питательную основу, глюкозу, экстракт кормовых дрожжей, минеральные соли, селективные агенты, агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с

20 целью повышения селективности среды в отношении Campylobacter pylori, она дополнительно содержит цистеин дигидрохлорид, мочевину, тиогликолят натрия и бромтимоловый синий, в качестве питатель25 ной основы она содержит ферментативный гидролизат казеина, в качестве минеральных солей — хлорид натрия и карбонат натрия, в качестве селективных агентов— амфотерицин В, метронидазол и налидиксо30 вую кислоту при следующем количественном соотношении компонентов, г/л;

Ферментативный гидролизат казеина 13 — 16

Глюкоза 4 вЂ

35 Экстракт кормовых дрожжей 4 — 6

Хлорид натрия 6,3-6,5

Карбонат натрия 0,5 — 0,95

Цистеин дигидрохлорид 0,7-0,8

40 Мочевина 2 — 10

Тиогликолят натрия 0,4-0,6

Амфотерицин В 0,002 — 0,004

Метронидазол 0,0005 — 0,001

Налидиксовая кислота 0,025 — 0,05

45 Бромтимоловый синий 0,02 — 0,03

Агар 0„5-0,7

Дистиллированная вода 1л