Производные хитоолигосахаридов, обладающие иммуномодулирующей и противоопухолевой активностью

 

Изобретение касается Сахаров, в частности хитоолигосахаридов ,4-олигосахаридов2-амино-2-дезокси-О-глюкозы общей формулы 8е 1 j,сф0 ля-е (о)-(си,-с1о)он «H-ctol-CHi-c- j-lCH n-en, где а) к 1,1-0. m 1, n 6, Rt-H;6)k 1. l.m- l.n-10. Ri -H;e)k- 1.. m-1, n- 14, Ri- H; r)k 1, I-O, m- 1. n 10, Ri -OH; fl)k 1.1 0, m-1.n-10, Ri-0-C 0 - СНз; e) k - 0.1 - 1, m - 1. n - 10. Ri - ОН; ж) k - 2. I - 0, m - 1, n - 10, Ri - H; 3)k 2.l 0, m 1, n 10, Ri-OH;n)k 1, I 0, m 2. n 10, Ri-OH;K)k 3, 1 0. m 1. n 10, Ri - Н; л) k 3, I 0, m 1. n 10, Ri -OH; M) k 1, I 0, m 1, n 2, Ri - Н, н) k 1, l 0, m 1. n 10, Ri-0-C 0 -CH3, обладающих иммуномоделирующей и противоЧэпухолевой активностью, что может быть использовано в медицине и биологии. Цель изобретения - создание новых менее токсичных соединений указанного класса. Синтез ведут избирательным ацилированием аминогрупп, содержащихся в молекуле хитоолигосахарида, взаимодействием эквимолекулярных количеств аминосахара и ацилирующих агентов, в качестве которых используют хлорангидриды жирных кислот или жирные кислоты в смеси с конденсирующими агентами, или активные эфиры жирных кислот в среде смеси воды и органического растворителя. Выход, %, брутто-формула: а) 22,4; С22Н42Ою№С1; б) 38; C26HsoOioN2CI; в) 14; СзоНиОю С ; г) 16,3; С2бН5оОцМ2С1: д) 15,5; C4oH76Oi2N2CI; е) 49.8; ж) 37,4; нет; з) 26,1; Сз2Нбз015№С12; и) 6.8; СюНадО зС : к) 26,5: Сз8Н7б01дМ4С1з; л)37,8; СзвН7б02оМ4С1з; м) .11: CieH340ioN2CI: н) 37,2; C2pH520i2N2CI. Новые соединения имеют токсичность ЛДзд -92 - 110 мг/кг (против 0,1 -0,5 мг/кг). Они стимулируют продукцию клетками иммунной системы интерлейкина-1 и фактора некрозаопухоли ,усиливают: туморостатическую активность макрофагов, проявляют противоопухолевое действие In vivo. 7 табл. г fe О ел ю OJ ю

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4484196/04 (22) 25.07.88 (46) 30.05.91, Бюл, М 20 (71) Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного научного центра AH СССР, Всесоюзный онкологический научный центр AMH СССР и Институт морфологии человека AMH СССР (72) B.È.Ãîðáà÷, И,Н.Красикова, П.АЛукьянов, Ю,Н.Лоенко, T.Ô.Cîëîàüeâà, !О.С.Оводов, Л.В,Мороз, А.А.Пименов, Е.А,Грубова, В.B.Äååâ, И.В.Кириллова, А.Л.Рахмилевич, Т,Л.Мигдал, Б.Б.Фукс и М.С.Рахимова (53) 547.458.41 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

N. 1540244, кл. С 07 Н 13/06, 1987, (54) ПРОИЗВОДНЫЕ ХИТООЛИГОСАХАРИДОВ, ОБЛАДАЮЩИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ

АКТИВНОСТЬЮ (57) Изобретение касается сахаров, в частностихитоолигосахаридов(P-1,4-олигосахаридов 2-амино-2-деэокси-0-глюкозы)общей формулы где а) k 1, - О, m - 1, n - 6. R1 — Н; б) k = 1, I - 1, m - 1, п 10, R1 — Н; в) k - 1, I - О, m - 1, п-14, й1 — Н; r) k-1, !-О, m-1, п-10, Я1

- ОН; pj k. 1, I - О, е = 1, и - 10, R1 — Π— С(О) — (СН2)12 — СН3; е) k - 0, = 1, m - -1, n - 10, R1 — ОН; ж) k = 2, = О, m = 1, и - 10, R l — Н;

„,!Ж,, 1652319 А1 (s!)s С 07 Н 13/06, А 61 К 31 70

3) k = 2, I = О, m = 1, n = 10, R1 — Он; и) k =. 1,

=Î, m=2, и =10, R1-0Н; «)k=3, = О, m =1, n = 10, R1 — Н; л) k = 3, l = О, m = 1, п = 10, R1 — ОН;м)k=1, l=О,m=1, n=2,R1 — Н;н)

k = 1, - О, m = 1, и = 10, Rl — О -С(0) — СН3, обладающих иммуномоделирующей и противбопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине и биологии.

Цель изобретения — создание новых менее токсичных соединений указанного класса.

Син-.ез ведут избирательным ацилированием аминогрупп, содержащихся в молекуле хитоолигосахарида, взаимодействием эквимолекулярных количеств аминосахара и ацилирующих агентов, в качестве которых используют хлорангидриды жирных кислот Я или жирные кислоты в смеси с конденсирующими агентами, или активные эфиры жирных кислот в среде смеси воды и органического растворителя. Выход, 7 „ брутто-формула: а} 22,4; С22Н4201ой2С!; б)

38; С28Н5оО1oN2CI; в) 14: СзоН5801о!ч2С!; г)

16,3; C28Hso011N2CI; д) 15,5; CaoHm012N2CI; е) 49,8; СзоН54014М2; ж} 37,4; нет; з) 26,1;

С32Н83018йэС!2; и) 6,8; С48Н8801тйэС!; к) 26,5; О

С38Н16О19йаС!3: л)37,8; C38H7602pN4CI3; м) Q3 .11; С18Н3401оМС!; н) 37,2; С28Н52012МС!.

Новые соединения имеют токсичность ЛД8о. („), 92- 110 мг/кг (против 0,1 -0,5 мг/кг). Они стимулируют продукцию клетками иммунной системы интерлейкина-1 и фактора не- . кроза опухоли, усиливают, туморостатическую активность макрофагов,,ф проявляют противоопухолевое действие "ln.

vIvo". 7 табл.!

6523 .9

У1забретение относится к химии сахаров,. конкретно к новым хитООлигасахаридам ф 1,4-олигасахаридам 2-амина-2-дезокси-0глюкозы) оби ей формулы (ЯЯ)- — IQ» ..)

»»с» » »»»н-с(0)-»сн 1»-с(0)ОВ»»»»-с(0)-» ь»-GtR» IcH»4».Г»» где 1а} k - 1, 1- О, в - 1, n - 6, R < — Н; 16) k -=

1, I =- О, rn - 1, и 10, RI — Н; 1в) k * 1, I =- О, гп-1, и 14, й1 — Н; Ir)k=1, I =0, гп--1, n = I0, Л4 — ОН; 1д) k = 1, = О, гп = I, и == »О, R I OCG(CI I2)12CH3i 16) k = О, I = 1, и» = 1, п=10,R< — GH;1ж)k 2,I О,в- I,n 10, Rl — H; 1з) k 2, I = О, m = 1, и =- 10, R< = ОН;

1и)к=-1 =Оп =2 и-10 Я1 — О - 1к)

) =- О, m - 1, n - 10, 8> Н; 1л) k = 3,, I =- О, m = ll, n = 10, й1 — ОН; 1М) k -- I, I О, 1п 1, n = 2, Й1 . — Н; 1Н) k = 1, i = О, m -- 1, п = 10, R I—

ССОСНз, обладающим иммунамодулирующей и протиВОопухалеВай актиВнастью, кОторые могут найти применение в биологии и медицине, Цель изобретения — понижение токсичности в ряду производных углеводов, обладающих иммунамадулируюв „ей и противоопухолевой активностью.

Пример 1. Мана-N-каприниат хитобиозы (1а). (2-Дезокси-2-деканоиламино-4-О-(2-амина-2-дезокси- Р-Э-глюкопи ранозил)-О-глюкоза гидрохларид).

К раствору 200 мг (0,48 ммол ь) гидрохлорида хитобиазы в смеси 2 мл воды и 18 мл зтанала Добавляют 0,175 мл тризтиламина, затем по каплям с перемешиванием 95,3 мг (0,5 ммоль каприлхларида, смесь перемешивают В течение 18 ч при 2ООС, подкисляют соляной кислотой, упарива ат, остаток зкстрагируют ацетонам, растворяют в 10 мл воды. Смесь фильтруют, фильтрат зкстагируют и-бутаналом (2x10 мл). Бутанольный зкстрактупаривают, остаток растворяют в 5 мл этанола, продукт осаждают добавлением

50 мл ацетона, осадок Отделяют фильтрованием. Выход соединения 1а 57,5 мг (22.4®.

Белый порошок с (а&5+ 15,9О(с 0,35; Вода).

Найдено, %: С 48,66; Н 7,93; N 5,32.

C22H42Q >oN2CI.

Вычислено, ф,; С 49,85; Н 7,99; М 5,29.

П р < м е р 2. Чона-N-миристиат хитабиазы (1б), К раствору 750 мг (l,81 MMollb) гиДрОхлааида хитобиозы в смеси 5 мл воды и 45 мл зтс Яала добавляют 0,66 мл тризтиламинз и

"О

15 ?Q

3» .

470 :лг, 1,9 ммаль) миристаилхлорида, Дальнейшую обработку проводят па примеру 1.

Выход:,си=».»У:.нения 1б 404 мг (38,0%). Белый порошок: I jP + 14,7 (с 0,3; водя), Най»тена, %: С 52,86; Н 8,64; И 4.89.

С26Н 5ОО 10 2С1

Вычислена, %: С 53,28; Н 8,60; N 4,78.

Пример 3. Мона-М-стеарат хитабиозы (1В).

К раствору 200 мг (0,48 ммаль) гидрахлорида хитабиазы в смеси 1 мл воды и 4 мл

ДМФА добавляют 0,15 мл тризтиламина и

205 мг (0,54 ммаль) N-àêñèñóêLtèíèìèäíîrî эфира ствааиновай кислоты в 10 мл зтанола.

Дальнейшую обработку проводят по примеру 1, Выход соединения 1в 43,8 мг (14%), Белий араша..:с hxjp+29,0О(с0,1; Вада— зтзнОл 1:1).

Найдена, %; С 54 8- 1. Н 9,57; М 4,.64, С„а Н » О кй2С!

Вычисле» а, %, С 56,10; Ч 9,10; N 4,36.

П р и:» е р 4. Моно-Е-R, S-3-оксимиристиат хитобиоз-.: (1 г), Раствор 290 Mr (0,7 ммаль) гидрахларид,= хитабиазы в 5 мл воды пропускают через колонку с 2 мл ионаобменной сь1алы Даузкс

".,<Ь (»».-»», кай»»нку rlpol".ь»вают 3 I»»lll Ho+hi, злюат L»» г!Рамывные Воды упаривают да эбьема 2 мл, к этому pBcYBop)» ДабаВляют растворы 190 мг (0,7 ммаль) R,S-3-аксими<.»Истинавай кислоты в 10 мл пиридина и 290 мг (1,4 ммаль) М,И -дициклогексилкарбади» имида а I0 мл пиридина. Смесь перемешиВа ат 24 ч при 2G C, осадок

Отфильтровывают, фильтрат Yrl8pMI33loT, ос-:-атак зкстрагируют ацетонам, Дальнейшую обработку нерастворившегося остатка проводят по примеру 1, Выход соединения 1 r

82,4 мг (19,5%), Для очистки продукт растворяют в воде, наносят на колонку с сарбентсм Палихрам-1 (5 MR), злюцию проводят водой (10 мл), а затем увеличивающимся градиентам этанала в ваде. Контроль за храматаграф:::.;» проводят методам Т СХ в системе н-Бион — EtOH — Н2Π— 25% NH40H

40;40;15:5(па объему), Саединечие 1 г выходит с колонки в 20 — 30%-нам зтаноле. После осаждения из спирта ацетонам выход сое50 динения I r 68,9 мг (16,3%). Белый порошок

Iy$5+ I6 00 (0 3 Вада), »- :;éäâIIr3, % . С 53Я2, Н 8,67; М 4,53, C2F I-I5oO I I N2CI

Е=,,ислено, %,: С 55, i2; H 8,83; N 4,95.

55 П . » и м е р 5. Мона-N-R, S-3-ми ис.roKсимирис гиат хитабиазы (1д).

К раствору 200 мг(0,48 ммоль) гидрахларида хитобиозы В смеси 1 мл воды и 4 мл

ДМФА добавляют 0,15 мл тризтиламина и раствор 280 мг (0,51 ммаль) N-Оксисукцини1652319 мидного эфира R, Я-3-миристоксимиристиновой кислоты в 10 мл зтанола. Дальнейшую обработку проводят по примеру 1. После дополнительной очи,тки на колонке с сорбентом

Полихром-1 выход соединения 1д, элюируюьцегося в 40 -50 -ном этаноле,61 мг (15,5 (,}.

Белый порошок с (a)g + 16,3 (с 0,3; вода).

Найдено, С 57,63: Н 9,38; и 4,00.

С4оН76012М2С!

Вычислено, : С 59,13, Н 9,43; N 3,45.

Пример 6. N-R, S-3-Оксимиристиат-N

-сукциниат хитобиозы (1е).

К раствору 390 мг (0,65 ммоль) соединения 1г в 20 мл метанола добавляют 0,08 мл триэтиламина, а затем порциями с перемешиванием — 150 мг янтарного ангидрида.

Через 3 ч при 20 Сс,месь упаривают, остаток растворяют в 4 мл воды., подщелоченной до рН 9,0 с триэтиламином, раствор подкисляют до рН 3,0 соляной кислотой, осадок отделяют центрифугированием. Выход соединения 1е 215 мг (49,8 ). Белый порошок с (а)9+22,2 (с 0,2; вода).

Найдено, : С 53,77; Н 8,59; N 5,00.

СзоН540 маг

Вычислено, : С 54,04; Н 8,76; N 4,2О.

Пример 7, Моно-N-м ;ристиат хитотриозы (1 ж}.

К раствору 500 мг (0,82 ммоль) гидрохлорида хитотриозы в 5 мл воды и 45 мл этанола добавляют 0,56 мл триэтиламина и 212 мг (0,86 мМ} миристоилхлорида. Дальнейшую обработку проводят по примеру 1, Выход соединения 1ж 240 мг (37,4%). Белый порошок с(a$5+ 7,2 (c 0,3; вода}.

Пример 8, Моно-N-R, S-3-оксимиристиат хитотриозы (1 з) и ди-N, N -R, S-3-оксимиристиат хитотриозы (1 и).

К раствору 200 мг (0,33 ммоль) гидрохлорида хитотриозы в 2 мл воды добавляют

0,116 мл триэтиламлна и раствор 1 l7 мг (0,34 ммоль) N-оксисукцинимидного эфира

R, S-3-оксимиристиновой кислоты в 20 мл зтанола, Дальнейшую обработку пповодят по примеру 1. Выход смеси соеди::ений 1з и 1и 110 мг, продукт растворяют в воде и наносят на колонку с гидрофобным сорбентом Qcfadecyl Si 60 Polyol (Sevva, ФРГ), элюцию проводят по примеру 4, разделение веществ контролируют TCX. После осаждения из зтанола ацетоном выход соединения

1з 68,5 мг (26,1 ). Белый порошок с (a)P+

6,3О(с 0,3; вода).

Найдено, : С 48,05; Н 8,40. N 5,07, СзгН6зО юйзСяг

Вычислено, : С 48,0; Н 7,93; N 5,25.

По осаждении из этанола ацетоном выход соединения 1 и 22 мг (6,8 }, Белый порошок с (а) " + 13,5О (с 0,25; вода).

Найдено, %: С 54,38; Н 9.26; N 4,72.

С46Н88О17йзС!

Вычислено, : С 55,77: Н 8,95; N 4,24.

Пример 9, Моно-N-миристиат хитотетраозы (1 к).

К раствору 500 мг (0,62 ммол ь) гидрохло рида хитотетраозы в 5 мл воды и 45 мл зтанола добавляют 0,34 мл тризтиламина и

160 мг (0,65 ммоль) миристоилхлорида. Через 24 ч при 20 С образовавшийся осадок отфильтоовывают, дальнейшую обработку фильграта проводят по примеру 1. Выход соединения 1к 160 мг (26,5 (,). Белый порошок с (аЯ + 1,5 (с 0,3; вода).

Найдено, : С 45,27: Н 8,03; N 5,24.

С38Н76019М4С!3

Вычислено, : С 45,67; Н 7,67; N 5,61.

Пример 10. Моно-N-R, S-3-оксимиристиат хитотетраозы (1 л).

К раствору 200 мг (0,25 ммоль) гидрохлорида хитотетраозы в 1 мл воды и 4 мл ДМФА добавляют 0,112 мл тризтиламина и раствор

88,6 мг (0.26 ммоль) N-оксисукцинимидного эфира R, S-3-оксимиристиновой кислоты в 5 мл этанола. Дальнейшую обработку проводят по примеру 1. После очистки на колонке с сорбентом Полихром- 1 выход соединения

1л, элюирующегося в 15 — 257;-ном этаноле, 95 мг(37,8%). Белый порошок с „аЯ + 2,6 (с

0,3; вода).

35 Найдено, %: С 44,91; Н 8,11; N 5,56.

СззН7602ой4С!з

Вычислено, : С 44,95; Н 7,54; N 5,52.

Пример 11. Моно-N-R, S-3-ацетоксимиристиат хитобиозы (1 н).

40 K раствору 200 мг (0,48 ммоль) гидрохлорида хитобиозы в1 мл воды и 4 мл ДМФА добавляют 0,15 мл триэтиламина и раствор 193 мг(0,5 ммоль) N-оксисукцинимидного эфира R. S-Зацетоксимиристиновой кислоты в 5 мл этанола.

45 Дальнейшую обработку проводят по примеру 1. Выход соединения 1н 116 мг (37,2 }.

Белый порошок с (a)5 + 15,4 » (с 0,3; вода).

Найдено, : С 50,94; Н 7,68; N 4,11.

C28 520 32N2Cl

Вычислено, : С 52,21; Н 8,14; N 4,35.

Пример 12. Моно-N-капрониат хитобиозы (1 м).

К раствору 300 мг (0,73 ммоль) гидрохлорида хитобиозы в смеси 3 мл воды и 200 мл этанола добавляют 0,256 мл триэтиламина и

103 мг (0,75 ммоль) капроилхлорида. Дальнейшую обработку проводят по примеру 1.

Выход соединения 1м 37,3 мг (11 ). Белый порошок с (a)P + 18,3 (с 0,3; вода).

1652319

Найдено, : С 44,68; H 7,32; г 5,."- 7.

С18Н34О10Й2О

Вычислено, ф,: C 45,62; Н 7,=3; И 5,91.

В ИК-спектрах соединений 1Я вЂ” 1н имеются полосы поглощения при 1528, 1644, 2856, 2922 см, характерные для остатка жирной кислоты, связанного амидной связью, в спектре соединений (1 в, 1н). Кроме того, име8тся полОса пОГлОЩВния при 1716 см, xepGK,терная для остатка жирной кислоты„ связанного сложнсэфирной связью.

Структура соединения 1г как ма НО-й-3ОксимиристоильнОГО прОизвсдноГО хитсби озы доказана с помощью сиектрасксп;.. и

1З я

В табл. 1 приведены данные спектров

1зС-ЯДР хитобиозы и соединения 1Г.

Изучение биологических свойств н:явь х соединений проводят ня мышах в опытах In

vIvo и 1п vitro, Предварительна исследуют токсичность-препаратов на мышах линии

СВА (18 — 20 r) по методу Кербера, Время

: наблюдения за животными после введения, препаратов составляет 15 сут. Установлено, что ЛД5а для исследованных соединений составляет соответственна, мг/кг: 1я 102; 16

92; 1в 110; 1г 98; 1д 98; 1ж 96; 1э 9О; 1у 106:

1к 97; 1л 100; 1М 108; 1н 96.

Таким Образом, вс8 исслеДО Ванные Ape" пяраты производных хитОалиГссзхяридав имеют ЛДба В пределах 92 — 110 мг/кг и

MoryT быть Отнесены к разряду малатоксичных соединений.

Летальная доза для липаполисахаридя и липида А для мышей 0,1 — 0,5 мг/кг.

Среди различных методов, применяе" .Мых при скрининге иммунамодуг:,яторав„ выбраны тесты, характеризующие степень продукции монокинсв мзкрофагами и клетками селезенки по следующим причинам: увеличение прсДукции интерлейкинз" 1 (ИЛ-1) и фактора некроза опухали (ФНО)

npAMQ ксраелируется Г торможением спуха левого роста In vivo; указанные методики широко используются для оценки иммунсмодулщующегс действия липаполисахаридов (ЛПС), липидз

А и его аналогов, PeeóëüòeTè экспериментов приведены в табл. 2 — 6.

К8К ВиДнО, из данных табл. 3, соеДине ния 1Г, 1Д, 18, I3, 1л проявляют Выраженную способность стимулировать продукцик- ИЛ-I макрофагами, увеличимющуюся flpN ПОвышении дОзы препарата, причем соединение 1д в концентрации 10 мкг/мл является более активным стимулятором, чем липид A. В эксперименте с низкими дозами соединений, эквимолярными

100 нг/мл липополисахзрида, соедлнение

1а более активна, -;ем ЛПС (индекс ст. МуФ Q

Р 5 ляции для соединения 1а равен 2,27, для

Л П С вЂ” 1.6).

Все изученные соединения являются инду .торами ФНО, макрафагами либо клетками селезенки мышей в опытах In vitro (табл. 3), причем в первом случае они более активны, а Во втором близки па активности к ЛПС и липиду A.

В табл, 2 дана продукция ИЛ-1 перитонезльными макрафа ами мышей при активации производными хитоолигосахаридов in .!Тго.

В табл. 3 дана продукция ФНО пеританеальнымл макрафагами мышей при активации праиэваДными хитаалиГссахзриДОВ In и тгс.

Кроме тога, проводят испытания произидных хитаалаасяхяридав на иммунамадулирую".цую активность по критери а продукции фактора некроза опухолей (ФНО) In Лиа В эксперименте:.1а инбседных глыш х.",табл. 1), Инт.:к ным мышам линии ВА В/с вводят внутрибрюшиннс Однократно па 500 мкг/кг хитсалигссяхзридав или ли-.: да А, либо 5 мг/кг астазигидз (эфир сахарсзы и ненасыщеннйх жирных кисл" r), что соответствует однократной терапевтической дозе препаратов. Через два часа у животных.берут кровь и палуче Гч»ую и- нее сывор, тки тестируют Не наличие фактора некроза опухали по цитоток сичнастл г= отношении ув-., вительной мишени — клеток опухоли <, 29. Оценку реакции проводят ст.-.:.ндэртным методом по окраске клеток кристаллическим фиолетовым с паследу ащей цитафотометрией.

Из представленных данных можно сделать вывод, To исследованные хитаалигасахзриды обладают способностью стимулировать продукцию фактора некроза опухслл 1п Лиа, существенна не уступая r«o э аму показателю липиду А. В отличие ат хитоолигссахаридов липяд А в данной концентрации проявляет токсичность В организме. Астазилид не является индуктаром фактора >-;;-;краза, что позволяет утверждать а ДРигам : "СРаВНВНИЮ C ХИТООЛИГОСаХЗРИдами) ме»-.знизме иммуномодулирующего и

r.ративаапухсл8ваго действия этого препарата.

Соединение !r Вызывает продукцию

ОНО В сь .в рогку крови нормальных мышей, так же как липополисахзрид и липид А (табл. :.), з ряд соединений 1а, 1r, 188, 1л инДуциРУют -Г1/мсРостзтлческУю активность макре,Ьагов па отношению к опухалевым клеткам (табл, 6).

В табл. 5 Дана продукция ФНО в сыворотку крсви нормальных мышей через 2 ч после внутрявеннОГО Введения соединения

1 Г, липидо А и ЛПС.

1652319 соединения обладают рядом ценных биологических свойств: они стимулируют продукцию кле ками иммунной системы ИЛ-1 и

ФНО, усиливают туморостатическую активность макрофагов, проявляют противоопухслевое действие Iп vIvo, а также просты в получении.

Формула изобретения

Производные хитоолигосахаридов общей формулы I

В табл, 6 дана туморостатическая активность макрофагов по отношению к опухолевым клеткам Р 815.

Таким образом, исследованные соединения являются иммуномодуляторами, сти- 5 мулирующими ключевые звенья противоопухолевого иммунитета, и могут рассматриваться как потенциальные противоопухолевые препараты.

Противоопухолевую активность соеди- 10 нений изучают на мышах линии СВА массой

18 — 20 r (самцы) с перевиваемой линейно неспецифической асцитной карциномой

Эрлиха. Критерием противоопухолевого действия препаратов служит сравнение 15 средней продолжительности жизни (СПЖ) животных в опухолевой и контрольной группах, препараты вводят в дозе 60 мг/кг в течение 5 дней (табл. 7).

8 табл; 7 показано противоопухолевое 20 действие производных хитоолигосахаридов.

Иэ результатов, приведенных е табл. 7, видно, что все исследованные соединения проявляют противоопухолевые свойства, 25 наиболее активным является соединение 1б (УПЖ 1887). Таким образом, установлено противоопухолевое действие производных хитоолигосахаридов в отношении асцитной формы карциномы Эрлиха. 30

Таким образом, соединения 1и - 1н значительно менее токсичны, чем структурные аналоги(липид А и ЛПС), и в то же время эти ом щ мс

I со со

t 1 (.смг)в см соом смо, I (смз)»

Cll3 где 1а) k = 1, I = О, m - 1, n = 6, R < — Н; 1б) k = 1, I =О, m=1, n=1О, R> — Н; 1в)k=1,1=0, m =1, n = 14, R1 — Н; 1г) 1с = 1, 1 = О, m; 1. n = 10, R I — ОН; 1д)k=1,1=0, m=1, п =10, R>—

OC0(CH2)12CH3; 1е) k = О. 1 = 1, m = 1, n = 10, R1 — 0H; 1ж) k = 2,1= О, m = 1, n = 10, R1 — Н;

1з) k = 2, 1 = О, m = 1, n = 10, Я1 — ОН; 1и) k = 1, 1- 0, m = 2, п = 10, Я1,- 0Н; 1к) k = 3, 1- О, m = 1, n = 10, R> — Й; 1л) М = 3, I = 0, m = 1, n=1О, R> — OH; 1м)k=1,1=0, m =1, п =2, R> — Н;1н)k=1,1=0, m=1, n =10, В1—

ОСОСНэ, обладающие иммуномодулирующей и противоопухолевой активностью.

Таблица 1

Таблица 2

" Кроме этого, в спектре имеются сигналы углеродных атомов остатка жирной кислоты при 14.4; 23,2; 26,4; 30,6;32,6; 37,8; 8.44; 2,69; 5; 173,3 м.д.

12

Таблица 3 * Доза препаратов эквимолюона 100 нг/мл липо

Таблица 5

Таблица 6 Соединения аэлтм в дозах, зквимолярних 100 нг/мл липополисахарида.

1652319

Таблица 7

* Увеличение продолжительности жизни мышей по сравнению с контролем.

Составитель H. Нарышкова

Редактор M.Ïåòðîâà ТехредМ.Моргентал Корректор ЭЯончакова

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 1746 Тираж 253 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

f f3035, Moc«sa, Ж-З5, Рауская наб.. ОП