Способ модификации полимерных микросфер, содержащих альдегидные группы
Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, в частности к способам получения полимерных носителей путем химической модификации исходной полимерной матрицы. Изобретение может быть использовано в биотехнологии, медицине , ветеринарии, биохимии и других отраслях для получения носителей для ковалентной иммобилизации физиологически активных лигандов. Способ модификации полимерных микросфер, содержащих альдегидные группы, включает взаимодействие микросфер с аминосодержащим полиоснованием . Согласно изобретению после взаимодействия микросфер с аминосодержащим полиоснованием их обрабатывают поликислотой, затем диили полиальдегидом , выбранным из группы соединений, включающей диальдегиддекстран, полимеры на основе акролеина, глутаровый альдегид , полимеры на основе глутарового альдегида, причем аминосодержащее полиоснование добавляют в количестве 80- 200% от массы микросфер, а поликислоту - в количестве 2-20% от массы полиоснования . Это позволяет повысить связывающую способность микросфер в 2,6-4,4 раза (до 105 мг/г), снизить неспецифическое связывание физиологически активных лигандов в 125-515 раз, повысить коллоидную устойчивость дисперсий модифицированных микросфер к действию электролитов в 2,3-6,0 раза. 3 табл. С/) С о 00 ел о ел ел
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РеспуБлик
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4653123/05 (22) 22,02,89 (46) 23.10.91. Бюл, N. 39 (71) Научно-производственное объединение
"Биолар" АН СССР и Институт биоорганической химии им, M.M. Øåìÿ Kè Hà (72) Д.Н.Авдеев, M.Ê.Êëÿâèíüø, А.Х.Зицма-. нис, И.А,Грицкова, В.П,Зубов, lO.В.Лукин и
Е.П. Ерохин (53) 678.652 (088,8) (56) S.Margel, Polyacrolein Microspherer, Method of Enzymology., 1985, v. 112, р, 164—
175, Елисеева В.И. Полимерные дисперсии,— М,; Химия, 1980, с. 296.
S,Margel, M,0ffraim, Novel Effective
Immunoadsorbents Hazed. an AgarozePolyaldehyde Microspherez Веабг: Syntheziz .and Affinity Chromatography. Analytical
Biochenustry, 1983, v. 128, р. 342 — 350. (54) СПОСОБ МОДИФИКАЦИИ ПОЛИМЕР-.
НЫХ МИКРОСФЕР, СОДЕРЖАЩИХ АЛЬДЕГИДНЫЕ ГРУППЫ (57) Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, в частности к способам получения полимерных носителей путем химической модификации исходной полимерной матрицы. Изобретение может
Изобретение относится к химии высоко-. молекулярных соединений, в частности к способам получения полимерных носителей путем химической модификации исходной полимерной матрицы.
Цель изобретения — повышение . связывающей способности и специфичности связывания физиологиче-:
ÄÄ5UÄÄ 1685955 А1
<я)з С 08 6 81/00//С 08 G 12/06 быть использовано в биотехнологии, медицине, ветеринарии, биохимии и других отраслях для получения носителей для ковалентной иммобилизации физиологически активных лигандов. Способ модификации полимерных микросфер. содержащих альдегидные группы, включает взаимодействие микросфер с аминосодержащим полиоснованием. Согласно изобретению после взаимодействия микросфер с аминосодержащим полиоснованием их обрабатывают поликислотой, затем ди- или полиальдегидом, выбранным из группы соединений, включающей диальдегиддекстран, полимеры на основе акролеина, глутаровый альдегид, полимеры на основе глутарового альдегида, причем аминосодержащее полиоснование добавляют в количестве 80.200 от массы микросфер, а поликислоту— в количестве 2-20 от массы полиоснования. Это позволяет повысить связывающую способность микросфер в 2,6 — 4,4 раза (до
105 мг/г), снизить неспецифическое связывание физиологически активных лигандов в"
125 — 515 раэ, повысить коллоидную устойчивость дисперсий модифицированных микросфер к действию электролитов в 2,3 — 6,0 раза. 3 табл, ски активных лигандов модифицированными микросферами, повышение коллоидной устойчивости микросфер к действию электролитов, Согласно предлагаемому способу модификацию полиальдегидных сфер проводят следующим образом.
1685955
Таблица 1
Полиальдегид-, ные микросферы
2,0
6,0
10,0
4,0
8,0
5,0
6,0
2,0
5,0
9,0
2,0
6,0
4,0
5,0
9,0
К дисперсии полиальдегидных микросфер в фосфатном буфере с рН 7,2 и концентрацией 2 — 10 мас.$ при 20 С добавляют необходимое количество водного раствора высокомолекулярного аминосодержащего лигайда (полиоснование) с концентрацией
1-6 мас. ф, и перемешивают в течение 16 — 24 ч, Затем микросферы промывают на микрофил ьтре 10-кратн ы м изб ыт ком дистиллированной воды, переносят в колбу и добавляют водный flàñòâoð поликислоты с концентрацией 0,5 — 2 мас. $ в необходимом количестве, перемешивают в течение
0,5 — 2,0 ч. После этого микросферы снова промывают на фильтре 10-кратным избытком дистиллированной воды и редиспергируют в растворе ди- или полиальдегида в фосфатном буфере с рН 7,2 и концентрацией 0,25 — 2,0 мас.7 таким образом, чтобы концентрация микросфер составляла 2 — 5 мас. После этого микросферы промывают на микрофильтре 20-кратным избытком дистиллированной воды, и редиспергируя их в фосфатном буфере с рН 5;3, получают готовую для коньюгации с физиологически активными лигандами дисперсию модифицированных микросфер, Способ иллюстрируется примерами, приведенными в табл. 1, В табл, 2 представлены сравнительныеданные по известному и предлагаемому способами модификации полиальдегидных микросфер. В табл. 3 указаны конкретные полиоснования, поликислоты и полиальдегиды, применяемые в примерах.
Таким образом, предлагаемый способ модификации полиальдегидных микросфер по сравнению с известными обеспечивает увеличение связывающей способности в
5 2,6 — 4,4 раза, снижение неспецифического связывания физиологически активных лигандов в 125-515 раз, а также повышение коллоидной устойчивости дисперсий модифицированных микросфер к действию элек1Î тролитов в 2,3 — 6,0 раз.
Формула изобретения
Способ модификации полимерных мик15 росфер, содержащих альдегидные группы, включающий взаимодействие указанных микросфер с аминосодержащим полиоснованием, отличающийся тем, что, с целью повышения связующей способности
20 и специфичности связывания физиологически активных лигандов модифицированными микросферами, повышения коллоидной устойчивости микросфер к действию электролитов, после взаимодействия микросфер
25 с аминосодержащим полиоснованием их обрабатывают поликислотой, затем ди- или полиальдегидом, выбранным из группы соединений, включающей диальдегиддекстран, полимер на основе акролеина, 30 глутаровой альдегид, полимеры на основе глутарового альдегида, причем аминосодержащее полиоснование добавляют в количестве 80 — 200 jo от массы микросфер, а поликислоту — в количестве 2 — 20% от массы
35 полиоснования.
1685955
С 1
Ю
Ю с
Ю
СЧ
Ю
VI
1О
С 4 с
Ch
СЧ
Ю
Сс) с
Ю с
СЧ
С 4
CO с
Ю
С»4 с
4
С 4
Ю л с
»О
C 1
С Ъ
СЧ
\Pi
D с
СЧ
* о
М
ОЪ
4
Ю О
С 4
Оь с
СЧ
1О
Ю
% и
О
С 1 с
Ю О с
С 4
I»I
44 с
Ю с
ВЧ с
4» В о v
СЧ
Я
СС аР CII я.он хо>м
ы о ю Э
44ИО 5ЬЬС»&
vvvxvxыхv, 1 (О 44 о ф 8 и С» 0 и 3
Ю о
44 а м
СО о
v о
Ct
44
Ol
Ф
1685955
Та блица 3 в ты а и ll*l!H гид
Полиэтиленполиамин Сопрлимер акриловой Глутаровый диальдегид кислоты и винилпирро-. лидона
То ве
Полиаллил амин
Водорастворимый полиакролеин
Пололи зин
Суль|ат декстрана диальдегиддекстран
Полиэткпенополиайин
Полилизин
Полиакриловая кисло- Сополимер метакролеи та на с винилпирролидонок
Полиэтиленполи амин
Полиаллилаиин
ЧО
Полиэтнлеиполиамин Сополимер итаконовой Глутаровый альдегид
ЧЧ кислоты и винилпирролидона
Полиаллил амин
Полили вин
Полиаллиламин
Составитель И.Стояченко
Техред ММоргентал Корректор М.Демцик
Редактор Н.йцола
Заказ 3574 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьчтилм при ГКНТ СССР
3Ч3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул,Гагарина, 1Q1
Сополимер аллиламина с винилпирротщцоном
Сополимер виниламана с акриламнном
Сополимер аллиламина с акрнламином
Сополимер аллил амина с винилпнрролидоном
Сополимер метакрило- Глутаровый диальдегид вой кислоты с винилацетатом
Сополимер акриловой Сополимер акрелеипа с кислоты с метакрисом виншпшрролидоном глюкозамином
Сополнмер метакрило- Пиальдегиддекстран вой кислоты с впннлпирролидоном
Сополимер виннлсуль- Водорастворнмый пофокнслоты с нинин- лиакролеин аце гатом
Сополимер акриловай Водорастворимый поли« кислоты с гидрокси- глутараль этилметакрилатом
Сополимер винилсуль- Глутаровый диальдегид фокислоты с винилпирролидоном
Сополимер итаконовой Водорастворнмый полпкислоты и метакрило акролеин илглюкозамина
Сополимер малеиновой Глутаровый кислоты н гидрокси- днальдегид этнлакрилата
Сополимер цитраконо- Дппльдегпддекстран вой кислоты с винил капролактамом
Сополимер пдтраконо- Глутсровый днальдегид вой кислоты с винилпирродидоном
