Способ разделения смесей полисахаридов

 

О П И С А Н И Е l70504

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 25,1V.1964 (№ 897546/23-4) Кл 12о 27 с присоединением заявки №

Приоритет

Государственный комитет по делам изобретений и открытий СССР

МПК С 07с

УДК 547.458 (088.8) Опубликовано 23.1V.1965. Бюллетень № 9

Дата опубликования описания 26Х.1965

1 СРСЖ0.;, Н. П. Елинов, Г. А. Витовская и С. С. Строев

АД("», Авторы изобретения

Заявитель

СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ СМЕСЕЙ ПОЛИСАХАРИДОВ

Подписная группа М 50

Известен способ разделения смесей полисахаридов при помощи цетавлона. Принцип разделения заключается в том, что цетавлон осаждает боратные комплексы полисахаридов при разных значениях рН.

С целью расширения сырьевой базы предложено разделение смесей некоторых полисахаридов при помощи додекарбениумхлорида (додецилкарбамилметилбензилдиметиламмонийхлорида). Для этого смесь полисахаридов растворяют в дистиллированной воде, добавляют водный раствор додекарбониумхлорида и боратный буфер.

Принцип разделения заключается в том, что додекарбониумхлорид осаждает боратные комплексы нейтральных полисахаридов из растворов при разных значениях рН.

Пример. Разделяют следующие смеси: а) очищенный маннан+ гликоген (по 25 мл каждого), б) очищенный маннан+декстран (по 25мл кахкдого) .

Смесь полисахаридов растворяют в 3 мл дистиллированной воды и к раствору добавляют 3 мл 10 /,-ного водного раствора додекарбониумхлорида и 3 мл боратного буфера (рН 8,5). Выпавший тут же осадок (фракция

I) центрифугируют (6000 об/мин в течение

5 мин), промывают небольшим количеством дистиллированной воды (1 мл), трижды по

5 л л этанолом (96 -ным) и дважды по 5 мл этиловым (серным) эфиром. Осадок представляет собой чистый маннан. Из тщательно огцентрифугированной жидкости осаждают

5 гликоген добавлением 4 об. о/о (12 мл)

lo/о-ного боратного буфера (рН 10). В случае осаждения декстрана к осадочной жидкости добавляют 2 об. о/, (6 л л) этанола (96 /,-ного). Получаемый осадок (фракция II)

10 гликогена или декстрана промывают этиловым спиртом и этиловым эфиром так же, как указано выше. Осадки сушат при 37 С в течение суток. Выход полисахаридов при этом следующий, мг:

Из смеси а) — фракция 1 (маннан) 22,6 — фракция II (гликоген) 22

Из смеси б) — фракция I (маннан) 22,6 — фракция II (декстран) 22,6

Кроме искусственных смесей полисахаридов легко разделяется смесь природных полисахаридов, которые выделяют, например, из дрожжевых организмов Rhodotorula glutinis с по25 мощью -нафтола (см. Н. П. Ел и нов. Сборник работ 1-й Всероссийской конференции врачей дерматовенерологов, М 96, 1958).

1 г дрожжевого полисахарида растворяют

Зо в 30 мл дистиллированной воды; к раствору

170504

Составитель Л. М. Иоффе

Редактор Л. Г. Герасимова Текред Т. П. Курилко

Корректор О. Б. Тюрина

Заказ 974,! Тираж 675 Формат бум. 60 901/s Объем 013 изд. л. Цена 5 коп.

ЦНКИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2

3 добавляют равные объемы 5оД -ного раствора додекарбониумхлорида и 0,5 М раствора буры (по 30 ял). Образуется плотный сгусток (фракция I), который отделяют центрифугированием и промывают 10 мл дистиллированной воды, а затем растворяют в 10 ил 2 н. уксусной кислоты. Полученный раствор вливают в этанол (96 ) при последующем доведении рН раствора 10о/,-ным едким натром до 4. Образуется осадок (галактан), который промывают 2 — 3 раза этиловым спиртом (96 ) и затем 2 раза серным эфиром. Осадок высушивают при 37 С в течение суток. К осадочной жидкости (после центрифугирования) добавляют 2 об. оД, этанола (96 ). При этом образуется осадок (фракция (II) глюкана, обрабатываемый и высушиваемый аналогичным обр азом.

При опытных проверках разделения 1 г природного полисахарида из Rhodotorula glutinis получено (в среднем):

Фракции 1 (галактана) 0,5 г

Фракции II (глюкана) 0,25 г

Состав выделенных индивидуальных полисахаридов определяется хроматографией на бумаге после кислотного (2NH3SO4) гидролиза.

Предмет изобретения

Способ разделения смесей полисахаридов при помощи четвертичных аммониевых соединений с применением боратного буфера, отли15 чаюи1ийся тем, что, с целью расширения сырьевой базы, в качестве четвертичного аммониевого соединения применяют додецилкарбамилметилбензилдиметиламмонийхлорид.