Способ получения аминофлуоресцеина

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

l79330

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 24.Х!.1964 (№ 930945/23-4) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 08.II.1966. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 14.IV.1966

Кл. 12q, 19

22Ь, 8

MIIK С 07с

С 09Ь

УДК 547.663.6.07 (088.8) Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

Авторы изобретения Г. И. Михайлов, Н. М. Рыбкина и А. А. Былинкина

Заявитель Всесоюзный научно-исследовательский институт химических реактивов и особо чистых химических веществ

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОФЛУОРЕСЦЕИНА

Данное изобретение может быть использовано для получения изотиоцианата флуоресцеина — люминесцентного красителя для метки белков.

Известен способ получения аминофлуоресцеина путем восстановления нитрофлуоресцеина смесью сульфида натрия и кислого сернистого натрия при кипячении с последующим выделением целевого продукта известным способом. Продолжительность процесса 24 час.

С целью упрощения технологии и повышения степени чистоты целевого продукта, предлагается способ получения аминофлуоресцеина путем восстановления нитрофлуоресцеина дисульфидом натрия в спиртовом, водном или водноаммиачном растворе.

Пример 1. В колбу емкостью 0,5 л с шариковым холодильником и капельной воронкой загружают 23 г нитрофлуоресцеина (I изомер), 120 мл этилового спирта и нагревают до кипения. К кипящей суспензии в течение

5 мин приливают 100 лл трехмолярного раствора дисульфида натрия, приготовленного из

72 г девятиводного сернистого натрия и 9,6 г серы. Реакционную смесь кипятят в течение

1 час, охлаждают до 20 С и выливают в 250 мл дистиллированной воды, затем подкисляют уксусной кислотой (45 мл). После 12-часового отстаивания отфильтровывают аминофлуоресцеин. Сырой аминофлуоресцеин перекристаллизовывают из 6%-ной соляной кислоты (на

1 г берут 300 мл 6%-ной соляной кислоты) и полученную соль разлагают 0,5%-ным раствором едкого натра. Выход аминофлуоресцеина (1 изомер) около 15 — 16 г или 70—

75% от теории.

П р и и е р 2. 23 г нитрофлуоресцеина (П

10 изомер) вносят в 200 л л воды, прибавляют

20% аммиака, до полного растворения нитрофлуоресцеина, нагревают до кипения, прибавляют 100 мл т,техмол: рного раствора дисульфида натрия и кипятят 2 час. Затем охлаж15 дают, выделяют и очищают образовавшийся аминофлуоресцеин (II изомер), как описано выше. Выход аминофлуоресцеина 60—

65% от теории.

Предмет изобретения

Способ получения аминофлуоресцеина путем восстановления нитрофлуоресцеина, отличающийся тем, что, с целью упрощения технологического процесса и повышения степени

25 чистоты целевого продукта, в качестве восстановителя берут днсульфид натрия и процесс ведут в спиртовом или водном, или водноаммиачном растворе.