Способ дифференциальной диагностики острого инфаркта миокарда и стенокардии

 

Изобретение относится к области медицины , а именно к иммунологии и кардиологии. Целью является повышение точности дифференциальной диагностики. Цель достигается тем, что исследуют нейтрофилы крови, в которых определяют интенсивность свечения кепов мембран клеток и при интенсивности этого свечения от 0,009 ус.ед. и ниже определяют острый инфаркт, а при интенсивности свечения от0.010-0,014усл.ед. -стенокардию. Способ позволяет равно провести диагностику ИБС и скорректировать последующее лечение.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (sl)s G 01 N 1/26

ГОСУДАРСТВЕН.ЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4382122/14 (22) 25.02.88 (46) 07.01,92. Бюл. N. 1 (71) Саратовский филиал Научно-исследовательского института кардиологии и Институт иммунологии (72) Н.Е.Чаляк и И.М.Петяев (53) 616-0.888(088.8) (56) Клебанов Г.И. и др. Гетерогенность рецепторного аппарата полиморфно-ядерных лейкоцитов крови. — В кн.: Биологические мембраны. 1977. 4, 10, 1084-1091.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и предназначено для диагностики острого инфаркта миокарда и стенокардии.

Цель изобретения — повышение точности способа диагностики острога инфаркта миокарда и стенокардии.

Способ осуществляется следующим образом.

Иэ венозной крови в количестве 10 мл выделяют нейтрофилы на градиенте плотности верографинафиколла. Для этого кровь, отобранную с Na-солью этилендиаминтетрауксусной кислотой. разводят в 4 раза

0.9;6-ным раствором NBCI и наслаивают на раствор верографинфиколла (d - 1,0771,078 г/смз) по 7 мл в каждую, пробирку и центрифугируют 40 мин при 400 g. После центрифугирования образуется осадок эритроцитов и гранулоцитов. Нейтрофилы располагаются пленкой на поверхности осадка.

„„5U„„1704011 А1 (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ИНФАРКТА МИОКАРДА И СТЕНОКАРДИИ (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и кардиологии.

Целью является повышение точности дифференциальной диагностики. Цель достигается тем, что исследуют нейтрофилы крови, в которых определяют интенсивность свечения кепов" мембран клеток и при интенсивности этого свечения от 0,009 ус.ед. и ниже определяют острый инфаркт, а при интенсивности свечения от 0,010-0014 усл.ед. — стенокардию.

Способ позволяет равно провести диагностику

ИБС и скорректировать последующее лечение.

Для получения взвеси гранулоцитое удаляют верофиколл, а осадок, содержащ.1й эритроциты и гранулоциты, разводят в 1 мл физиологического раствора. Содержимое пробирок объединяют и переносят в силиконированные пробирки, где осаждают эритроциты 10 (,-ным раствором желатина (конечная концентрация желатина — 17,). В течение 45-60 мин при 37 С эритроциты лизируют 0.83 -ным раствором NH4CI. После перемешивания осадка фракции. содержащей гранулоциты с десятикратным объем раствора NH4CI, центрифугируют ее 5 — 10 мин при 400 9, Процедуру повторяют несколько раэ до полного освобождения гранулоцитов от эритроцитов. Проверяют жизнеспособность клеток по трипановому синему и подсчитывают в камере Горяева

Выделенные клетки доводят до рабОчей концентрации 2,0-2,5 10 кл/мл и инкубируют с люминесцентными коньюгатами кроличьих иммуноглобулинов против иммуноглобули1704011

20 нов человека в течение 15 мин при 37 С.

Отмывают двукратно в среде 199 и делают препараты, которые просматривают с помощью люминесцентного микроскопа ЛМИ2 с использованием объектива х60(водная иммерсия) и окуляра х8.

Подсчитывают на мазке 50 нейтрофилов и среди них выделяют следующие морфологические варианты или типы свечения: ринг (г1п9) — кольцо флюоресценции, видимое в ультрафиолетовом свете, демонстрирует равномерность распределения меченых комплексов на клеточной поверхности. пэтч (patch) — нарушается равномерность свечения клеточной поверхности, образуются разрывы кольца с появлением зон с усиленным или ослабленным свечением; кэп (сар) или шапочка — процесс перераспределения в плоскости мембраны заканчивается объединением мелких комплексов в массивный агрегат, который принято называть колпачком.

Иэ перечисленных трех морфологических форм выбирают для анализа только клетки с кэпами как наиболее демонстративные по типу свечения мембраны.

Интенсивность свечения выбранных клеток измеряют в условных единицах, показания снимаются с фотоэлектронного умножителя, установленного на микроскопе.

Подсчитывают интенсивность свечения каждой клети следующим образом: регистрируют показания ФУ единичной клетки и вычитают иэ него значение интенсивности свечения фона -участка "чистого поля", расположенного рядом с этой клеткой.

Рассчитывают среднее арифметическое значение интенсивности свечения анализируемых клеток, В том случае, если величина рассчитываемого показателя йаходится в диапазоне 0,009 усл.ед . и ниже, то ставится диагноз острый инфаркт миокарда; диапазон 0,010 — 0.014 усл.ед.— стенокардия, значение интенсивности свечения нейтрофилов 0,014 усл. ед, и выше характерны для здоровых лиц.

Пример 1. Больной Ш., 55 лет, поступил в клиническое отделение кардиологии с диагнозом — подозрение на инфаркт миокарда. Клинические данные соответствовали классической картине острого инфаркта миокарда; наличие выраженного

1 олевого синдрома, симптомов недостаточности кровообращения (сердечная астма) существенное снижение уровня артериального давления (95/55 мм рт.ст.).

Забор крови был произведен в первые сутки с момента поступления больного в клинику. По представленному способу оп25

55 реде ена интенсивность свечения кзпов—

0,007 усл. ед. что позволило поставить диагноз — острый инфаркт миокарда.

П ри м е р 2. Больной 6.,50лет, поступил в клинику кардиологии с интенсивными болевыми приступами за грудиной с иррадиацией в левое плечо и лопатку. Боли держались в течение 6 ч до момента купирования их фармакологическими средствами.

Исследование пробы, взятой в первые сутки с момента поступления больного..в клинику, на определение функционального состояния рецепторного аппарата нейтрофилов показали значения интенсивности свечения капов 0,012 усл.ед., что позволило предположить у больного наличие стенокардии.

Дальнейшее наблюдение эа состоянием больного показало, что произошло длительное и существенное снижение длительности и интенсивности приступов боли в области сердца, уровень АД за время наблюдения был стабильным (130/180 мм рт.ст.). Лабораторно-биохимические методы исследования позволили исключить наличие у больного острой ишемии миокарда. ЭКГ не отражала признаков нарушения коронарного кровообращения, гиперферментемия отсутстввовала.

Результаты ЭКГ с дозированной физической нагрузкой, толерантность 75 Вт х 3 мин, причина прекращения пробы-типичный приступ стенокардии, смещение сегмента Т в двух отведениях на 1 мм. Совокупность вышеизложенных данных позволила клиницистам определить диагноз как ИБС, стенокардия напряжения И функциональный класс.

Способ позволяет корректно судить о состоянии рецепторного аппарата нейтрофилов эа счет о енки функционально активных его компонентов на поверхности клеток. При этом отработаны количественные критерии, позволяющие проводить дифференциальную диагностику острого инфаркта миокарда и стенокардии. Использование данного метода позволит адекватно судить об эффективности фармакорегуляции синтеза рецепторов, кэппинге, сбросе их или интернализации. Контролирование и коррекция этих процессов принципиально необходимы при реализации современных методов терапии, предлагаемых молекулярной иммунологией.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики острого инфаркта миокарда стенокардии путем иммунофлуоресцентного исследования полиморфно-ядерных лейкоцитов крови, отличающийся тем, что, с целью

1704011

Составитель Л.Стебаева

Техред М.Моргентал Корректор C.Vepw

Редактор Е.Папп

Заказ 56 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г, Ужгород, ул. Гагарина. 101 повышения точности способа, исследуют нейтрофилы, в которых определяют интенсивность свечения капов мембран клеток и при свечении 0,009 усл.ед. н ниже диагносцируют острый инфаркт, а hpH свечении

0,010M),014 усл. ед. — стенокардию.