Питательная среда для культивирования энтеробактерий

 

Изобретение относится к микробиологии, а именно к питательнь1м средам для культивирования бактерий, и. может быть использовано в микробиологической промышленности. Целью изобретения является упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. Предложена питательная среда для культивирования энтеробактерий, содержащая следующие ингредиенты, г: натрий фосфорнокислый двузамещенмый 8,2-8,7; калий фосфорнокислый однозамещенный 2,2-2,7; гуминовая кислота 0,01-0.04; дистиллированная вода до 1 л. 1 табл.^w'ЁИзобретение относися к микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования, кишечных бактерий, и может быть использовано в микробиологической промышленности для расширения арсенала заменителей натуральных мясных и рыбных продуктов непищевыми источниками сырья.В микробиологии известны питательные среды для культивирования кишечных бактерий, в которых используют ферментолизат биомассы микроорганизмов - дрожжей и бактерий, выращенных на Н-парафиновой нефти и лактопептоне, с добавлением остальных необходимых компонентов.Наиболее близка к предлагаемому магниевая среда следующего состава;Раствор А:Пептон, г4.2Хлорид натрия, г7,0Дрожжевой гидроли-зат, г20.0Фосфат калия, г1.5Дистиллированнаявода, мл890Раствор Б:Хлорид магния, г3,6Дистиллированная вода, мл90Раствор В:Бриллиантовыйзеленый, мл (водныйраствор 0,5%)0,9рН7,4Недостатками известной среды являются многокомпонентность, сложность приготовления и использование в качестве основного сырья ценных пищевых продуктов (мясо, дрожжи, рыба, пептон).Цель изобретения - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.VI о00 00 СА>& J^

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s С 12 N 1/20

ГОСУДАРСТВЕН-АЛЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

890

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4808531/13 (22) 02.04.90 (46) 30.01.92. Бюл. М 4 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии CO АМН

СССР (72) Л.С.Бузолева и З.В.Пручкина (53) 576.8.093.3(088.8) (56) Чудинова А.Д., Яковлев Т,E., Лавченко Е.Г. и др. Методы и средства диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней животных. М., 1985, с, 132 — l35.

Булашова Л.А. Койтроль качества химических препаратов. М., 1987, с.65 — 68.

Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. M., 1978, с. 349, 362.

Изобретение относися к микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования кишечных бактерий, и может быть использовано в микробиологической промышленности для расширения арсенала заменителей натуральных мясных и рыбных продуктов непищевыми источниками сырья.

В микробиологии известны питательные среды для культивирования кишечных бактерий, в которых используют ферментолизат биомассы микроорганизмов— дрожжей и бактерий, выращенных на

Н-парафиновой нефти и лактопептоне, с добавлением остальных необходимых компонентов.

Наиболее близка к предлагаемому магниевая среда следующего состава:

Раствор А:

Пептон, г 4,2

Хлорид натрия, г 7,0

« . Ж 1708834 А1 (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ (57) Изобретение относится к микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования бактерий, и может быть использовано в микробиологической промышленности. Целью изобретения является упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. Предложена питательная среда для культивирования энтеробактерий, содержащая следующие ингредиенты, r: натрий фосфорнокислый двузамещенный 8,2 — 8,7; калий фосфорнокислый одноэамещенный 2,2 — 2,7; гуминовая кислота 0,01 — 0,04; дистиллированная вода до 1 л. 1 табл. t

Дрожжевой гидролизат, r 20,0

Фосфат калия, г 1,5

Дистиллированная вода, мл

Раствор Б:

Хлорид магния, г 3,6

Дистиллированная вода,мл 90

Раствор В:

Бриллиантовый зеленый, мл (водный раствор 0,5 ) 0,9 рН 7,4

Недостатками известной среды являются многокомпонентность, сложность приготовления и использование в качестве основного сырья ценных пищевых продуктов (мясо, дрожжи, рыба, пептон).

Цель изобретения — упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.

1708834

Поставленная цель достигается тем, что культивирование бактерий проводят в питательной среде, представляющей собой гуминовую кислоту, растворенную в фосфатном буфере (рН 7,4).

Среду готовят следующим образом.

8,2-8,7 r натрия фосфорнокислого однозамещенного, 2,2 — 2,7 r калил фосфорнокислого однозамещенного, 0,01 — 0,04 г гуминовой кислоты разводят в 100 мл дистиллированной воды, затем доводят обьем до 1000 мл и стерилизуют в автоклаве при

0,5 атм в течение 30 мин. Питательная среда имеет светло-коричневый оттенок без специфического запаха, рН среды 7,4.

П р и м о р 1. Готовят среду как описано выше, ин редиенты берут в следующих количествах(минимальные запредельные значения), г:

Натрий фосфорнокислый двузэмещенный 7,9

Калий фосфорнокислый однозэмещенный 2,0

Гуминовая кислота 0.005

Дистиллированная вода, л До 1

После стерилизации в питательную среду дозировано вносят суспензию бактерий штаммсв Salmonella enteritidis, Salmonella

typhlmurlutn, Shlgelia Sonnei u Shlgella йехпег1 длл накопления биомассы. Пробирки ". инокулированной питательной средой инкубируют в термостате при 37 С в течение суток. Затем длл определения прироста бактериальной массы производят серийные высева бактерий на чашки Петри с соответствующими дифференциально-диагностическими средами (среда Плостерева, висмут-сульфидный агар) с учетом необходимых разведений, Пример 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (минимальные и редельные значения), r:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный 8,2

Калий фосфорнокислый однозамещенпый 2,2

Гуминовая кислота 0,01

Дистиллированная вода, л До 1

При учете колоний нэ чашках Петри (таблица)установлено, что при заражающей до .е микр. кл/мл количество шигелл за сутки культивироьания увеличилось в прототипе до 28 +6 х 10 микр кл/мл, а в

2,7

0,04

Пример 5. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (масимальные запредельные значения ингредиентов), г;

Натрий фосфорнокислый двузамещенный 9,0

Калий фосфорнокислый однозамепредлагаемом варианте среды до 26 + 5 х х10, тогда как сальмонелл 222 + 23 х 10 и

215 ь 26 х 10 соответственно, Различия сравниваемых показателей в

5 прототипе и в предлагаемой среде недостоверны, Пример 3. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (оптимальный вариант), г:

10 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 8,5

Калий фосфорнокислый однозамещен15 ный 2,5

Гуминовая кислота 0,02

Дистиллированная вода, л До 1

При учете колоний на чашках Петри

20 (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивирования увеличилось в прото-ипе до 28 6 х 10 микр.кл/мл, а в

6 предлагаемой среде до 36 + 4 х 10 сальмоиелл 222 23 х 10 и 226 + 21 х 10

25 соответственно.

Различия сравниваемых показателей статистически недостоверны.

Пример 4. Готовят среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих

30 количествах (максимальные предельные значения); г:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный, r 8.7

35 Калий фосфорнокислый однозамещенный

Гуминовая кислота

Дистиллирован40 нэя вода, л До 1

При учете колоний на чашках Петри (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивирования увеличилось в прототипе до 28:" 6 х 10, а в-предлага45 емой среде до 24 +. 55 х 106, сальмонелл

222 +. 23 х 10 и 190 + 18 х 10 соответст- венно.

Различия сравниваемых показателей статистически недостоверны.

1708834 заменить дефицитные пищевые продукты (мясо, рыбу, дрожжи) на дешевое непищевое сырье — гуминовые кислоты, Процесс приготовления питательной

5 среды прост, не требует специального оборудования и реактивов. Применение предлагаемой среды для культивирования бактерий в микробиологической промышленности и микробиологических исследо1Ь ваниях позволяет снизить себестоимость целевого продукта.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования знтеробактерий, содержащая пита15 тельную основу, минеральные соли и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а яс я тем, что, с целью упрощения состава среды при сохранении ее ростовых свойств, в качестве питательноР основы. она со20 держит гуминовую кислоту, а в качестве минеральных солей — фосфорнокислый двузамещенный натрий и фосфорнокислый однозамещенный калий при следующем количественном соотношении

25 компонентов, г/л:

Фосфорнокислый двузамещенный натрий 8,2 — 8,7

Фосфорнокислый однозамещенный

30 калий 2,2 — 2,7

Гуминовая кислота 0,01 — 0,04

Дистиллированная вода, л

3,0

0,08 щенный

Гуминовая кислота

Дистиллированная вода, л До 1

При учете результатов (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивирования увеличилось в прототипе до 28 +. 6 х10б, а в предлагаемой среде только до 9 + 1,3 х10, сальмонелл 222х +

23 х10 и 50 + 10 х10 соответственно.. Различия показателей статистически достоверны.

Результаты роста кишечных бактерий на различных питательных средах приведены в таблице.

Из приведенных данных видно, что размножение бактерий происходит в питательной среде, содержащей 0,01 — 0,04 г гуминовой кислоты; 2,2 — 2,7 r калия фссфорнокислого однозамещенного; 8,2 — 8,7 г натрия фосфонокислого двузамещенного.

Увеличение концентрации ингредиентов в питательной среде не спссобствует увеличению концентрации бактерий, напротив, количество бактерий уменьшается на 68—

76 % no сравнению с прототипом.

Таким образом, предлагаемая среда по сравнению с известными обеспечивает равнозначное размножение бактерий, прирост бактериальной массы в обоих случаях составлял 4 — 6 %. Ее использование позволит

До 1

Составитель Л.Бузолева

Техред М.Моргентал Корректор M.Ìàêñèìèøèíåö

Редактор А.Долинич

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул, Гагарина, 101

Заказ 103 Ти раж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5