Способ отбора пробирочных растений земляники для беспересадочного хранения

 

Изобретение м.б. использовано в сельском хозяйстве, биотехнологии для создания коллекции оздоровленного сортового материала вегетативно размножаемых растений . Отбор пробирочных растений земляники для беспересадочного хранения осуществляют путем определения уровня Замедленной люминесценции листьев, который определяют в динамике в течение 6-8 недель при культивировании растений после посадки их на питательную среду, а для хранения отбирают растения с постоянно нарастающим уровнем замедленной люминесценции . 2 ил., 2 табл. (Л

союз советских социллистических

РЕСПУБЛИК (! 9) (! !) (5!)ю А 01 Н 4/00

ГОСУДАРСТ8ЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4815448/13 (22) 19,04.90 (46) 30.07.92. Бюл. hb 28 (71) МГУ им. M.B,Ëoìîíîñoâà (72) В,А. Веселовский, Т, В. Веселова и

О.H.Ñàìñîíîâà (56) Самсонова О.Н, Некоторые аспекты старения растений в связи с хранением растительного материала земляники in vitro—

Проблемы современного садоводства: Тезисы докладов Республиканской научно-практической конференции, посвященной

60-летию УкрНИИ садоводства. ч.1 — Киев, 1989, с, 37-39, Изобретение относится к сельскому хозяйству, биотехнологии, в частности к созданию In vitro коллекции оздоровленного сортового материала вегетативно размножаемых растений, а точнее к отбору растений для депонирования без обновления питательной среды.

Известен способ отбора растений земляники для длительного сохранения In vitro, основанный на отборе медленно растущих растений из массы культивируемых в обычных условиях эксплантов.

Наиболее близким к предлагаемому является способ визуальнои оцен ки пробирочных растений земляники при их длительном сохранении по четырехбальной системе.

К недостаткам способа относятся субьективность визуальных оценок жизнеспо(54) СПОСОБ ОТБОРА ПРОБИРОЧНЫХ

РАСТЕНИЙ ЗЕМЛЯНИКИ ДЛЯ БЕСПЕРЕСАДОЧНОГО ХРАНЕНИЯ (57) Изобретение м.б. использовано в сельском хозяйстве, биотехнологии для создания коллекции оздоровленного сортового материала вегетативно размножаемых растений. Отбор пробирочных растений земля. ники для беспересадочного хранения осуществляют путем определения уровня

Замедленной люминесценции листьев, который определяют в динамике в течение 6-8 недель при культивировании растений после посадки их на питательную среду, а для хранения отбирают растения с постоянно а нарастающим уровнем замедленной люминесценции, 2 ил„2 табл.

4 собности растений, невозможность прогна- Ц эирования изменения их состояния, а также отсутствие возможкостй отбора долгоживу- Л щих пробирочных растений..

Цель изобретения — повышение эффективности способа. 0

Поставленная. цель достигается тем, что на протяжении депонирования периодически (раз в две недели) регистрируют через стекло замедленную люминесценцию (ЗЛ) листьев растений, не вынимая их из пробирки, причем долгоживущие растения отличаются постепенным увеличением уровня ЗЛ и его стабилизацией на 4-6 неделе культивирования, тогда как короткоживущие характеризуются резким воэростанием и внезапным снижением максимального и стацйонарного уровней ЗЛ уже в первые

1750556.недели культивирования, на графике выгля дящие как скачкообразные изменения (фиг.1, 2).

Способ основан на том, что с возрастанием фотосинтетической активности возрастают уровни ЗЛ, как максимальный, так и стационарный: для долгоживущих растений, сохраняемых в пробирках без обновления питательной среды, характерно постепенное нарастание фотосинтеза и стабильное поддержание его уровня в течение длительного времени, в отличие от неустойчивого фотосинтеза короткоживущих растений, Замедленной люминесценцией называется испускание света фотосинтезирующими тканями, например листьями растений, в течение некоторого времени после прекращения их освещения, Объект освещают кратковременными (в несколько миллисе-. кунд) импульсами света, в промежутках между которыми регистрируют излучение от объекта известным устройством для определения влажности семян, При включении света уровень ЗЛ листьев (находившихся предварительно в темноте) резко возрастает, достигает максимума (максимальный уровень ЗЛ-li axc), затем снижается к уровню, который не йзменяется в течение некоторого времени (стационарный уровень 1„). По мере роста и развития растений эти уровни постепенно увеличиваются, что свидетельствует об увеличении их фотосинтетической активности.

Пример 1. Экспланты земляники сорта Зефир в пробирках на агаровой среде, имеющие один или несколько зеленых листьев, культивируют в стандартных условиях:

16 ч —; 8 ч — темнота; освещенность на свету 5-8 клк, температура 20-25 С, Раэ в две недели начиная со второй недели культивирования регистрируют ЗЛ листьев земляники, не вынимая их из пробирки и не нарушая их целостности, через стекло. 3fl возбуждают красным светом (640 нм), что предотвращает люминесценцию стекла, которая возбу>кдается ультрафиолетовым и синим светом (550 нм). Динамика уровней

ЗЛ в течение 10 недель культивирования у долгоживущих и короткоживущих пробирочных растений приведена в табл,1 и на фиг,2.

Из табл.1 видйо, что у менее жизнеспособных, короткоживущих растений, погибших к концу срока культивирования, в первые две недели культивирования регистрируется резкое возрастание уровней ЗЛ и вйезапное их снижение, в отличие от долгоживущих. Достижение максимального значения уровней ЗЛ наступает тем позже, . чем дольше живет растение, т,е. чем выше его жизнеспособность. Регистрация ЗЛ позволяет выделить из массы объектов те, которые способны сохраняться длительное

5 время без пересадки на свежую питательную среду.

Пример 2, Экспланты земляники сортов Зефир, Зенит, Алая зорька. Золушка в пробирках на агаровой среде, имеющие

10 один или несколько зеленых листьев, культивируют условиях по примеру 1. Динамика уровней ЗЛ втечение 10 недель культивирования у двух контрастных по жизнеспособности вариантов сопоставлена в табл.2 с

15 изменениями визуальной оценки жизнеспособности в баллах тех же растений. В табл.2 приведены средние значения по 20 растениям указанных сортов, Как видно из табл.2, визуальная оценка растений двух вариантов совпадает до 6 не20 дель культивирования. Однако уровни ЗЛ как максимальный, так и стационарный, у растений I варианта достигает максимального значения на 4-й неделе культивирования, а затем снижается. -Визуальные

25 признаки, которые свидетельствуют о снижении жизнеспособности, в это время еще отсутствуют. Снижение ЗЛ позволяет предполагать, что растения первого варианта теряют жизнеспособность. Действительно, к

30 десятой неделе культивирования они практически все погибли. У растений il варианта нарастание уровней ЗЛ происходило медленно и их жизнеспособность держалась на относительно высоком уровне в течение

35 всего срока культивирования. Таким образом, с помощью контроля эа изменением ЗЛ можно прогнозировать поведение эксплантов при депонировании их беэ обновления питательных сред, определять предельные

40 сроки пересадок на свежую питательную среду.

Предлагаемый способ позволяет проводить оценку жизнеспособности пробирочных растений, их устойчивости к

45 длительному хранению 1п чего независимо от субъективного мнения экспериментаторов при обеспечении целостности и стерильности объектов. Кроме того, он позволяет определять предельный срок

50 культивирования эксплантов беэ обновления питательной среды, а также отбирать долгоживущие растения земляники, наиболее пригодные для депонирования.

Формула изобретения

Способ отбора пробирочных растений земляники для беспересадочного хранения, включающий определение. характеристик состояния растения, отличающийся

1750556 недель при культивировании растений после посадки их на питательную среду, и для хранения отбирают растения с постоянно нарастающим уровнем замедленной люми5 несценции.

Таблица 1

Таблица 2

П р и м е ч а н и е. "-" -растения погибли.

Время

Фиг. f тем, что, с целью повышения эффективности способа в качестве характеристики состояния растения используют уровень замедленной люминесценции листьев, который определяют в динамике в течение 6-3

П р и м е ч а н и е, "-" -растение погибло.

à — 8 > едель нулыпи5ьроба «я

1750556

"i не3ель

В."(1 о

В

Ф

Ф

0) и

0)

1"

О о

0

E" о

X о

М о

Ф

Е

-й.

Вреия

Редактор Л.Пчолинская Техред M,Ìîðãåíòàë

Корректор M.Maêñèìèøèíeö

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 2632 Тираж Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5