Способ получения амикацина в виде сульфатной соли

 

Сущность изобретения: продукт - амикацин. микробиологический тест 690 мкг/мг. Реагент 1: 3,6 -ди-Ы- бензил(окси)карбонил канамицин. Реагент 2: 1М-5-4-бензил окси(карбонил)эмино-2-гидрокси(бумирил)ок си сукцинимид, Условия реакции: в среде смеси воды и органического растворителя с последующим гидрированием. Перед реакцией ацилирования проводят комплексообразование с ацетатом цинка в присутствии воды в 50-80% по отношению к органическому растворителю.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСГ1УБЛИК (я)5 С 07 H 15/22

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К ПАТЕНТУ

I»

О» » (21) 4028258/04 (22) 09.10.86 (31) 22425 А/85 (32) 10.10.85 (33) IT (46) 23.10.92. Бюл, Nг 39 (71) Пьеррел С. п.А. (IT) (72) Альберто Мангиа, Винченцо Джоббио и Джорджо Орнато (!Т) (56) Патент США

N4424343,,кл,,С 07 Н 15/22, 1984..

Патент США

N. 4136254, кл. 536-10; 1979.

Изобретение относится к способу селективного синтеза амикацина, который яв- . ляется полусинтетическим антибиотиком, широко используемым в терапии.

Известен способ (1) получения амикацина ацилированием полисилированного производного канамицина А. Получение полис ил и рован ного и роиз водного канамицина или защищенного канамицина осуществляют путем взаимодействия канамицинового субстрата в органическом растворителе, предпочтительно в ацетонитриле, с несколькими силанизирующими агентами. среди которых предпочтителен гексаметилдисилазан.

К недостаткам метода относятся образование смеси позиционных изомеров ацилирования, что приводит к необходимости хроматографического разделения продуктов, а также использование сильно токсических реагентов и растворителей.

Описан способ получения амикацина (2) с использованием комплексообразования с

» ЫЛ«, 1771477 АЗ (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИКАЦИНА В

ВИДЕ СУЛЬФАТНОЙ СОЛИ (57) Сущность изобретения: продукт — амикацин. микробиологический тест 690 мкг/мг, Реа гент 1: 3,6 -ди-N-(бензил(окси)карбонил)канамицин. Реагент2: N-S-4-бензил(ок.си(карбонил)амино-2-гидрокси(бумирил)ок си)сукцинимид, Условия реакции: в среде смеси воды и органического растворителя с последующим гидрированием. Перед реакцией ацилирования проводят комплексообразование с ацетатом цинка в присутствии воды в 50-80% по отношению к органическому растворителю. тяжелыми металлами, однако это приводило к дифференциации реакционной способности грfllll N3, Nl и групп N 6 ийз аминогликозидного антибиотика. В результате выход целевого продукта не достаточно высок.

Целью данного изобретения является повышение выхода целевого продукта, что достигается перед реакцией ацилирования проведением комплексообразования с ацетатом цинка в присутствии воды в качестве сорастворителя с органическим растворителем в определенных соотношениях.

Следующие примеры иллюстрируют данный метод;

Пример 1. 5,2 r 3,6-ди-N-бензилоксикарбонилканамицина А, имеющего титр

85%-ный (5,87 моль), суспендируют в 20 мл метанола: быстро прибавляют уксуснокислый цинк (3,9 r в качестве безводного продукта), растворенный в 80 мл воды и перемешивают 2 часа при комнатной температуре.

1771477

Образовавшийся комплекс между канамицином и ацетатом цинка имел следующие химико-физические характеристики:

1) Инфракрасный спектральный анализ 5

Инфракрасный спектр эквимолярной механической смеси диацетилата канамицина и цинка ацетата имеет пик при

1690 см (растяжение С = 0), а в комплексе этот пик смещен к 1700 см 10

2) Ультрафиолетовый спектральный анализ в видимой области.

В ультрафиолетовом спектре также заметна существенная разница между поглощением отдельных молекул и комплекса. 15

3) Рентгено-структурный анализ

Проведен анализ образцов диацетилата канамицина, ацетата цинка, механической смеси диацетилат канамицина и ацетата цинка и комплекса. 20

Полученные результаты: а) диацетилат канамицина обладает определен ной кристалличностью;

b) ацетат цинка обладает значительной кристалличностью; 25 с) смесь диацетилата канамицина с ацетатом цинка точно воспроизводит сумму пиков двух соединений:

d) комплекс абсолютно аморфен и не дает ни одного иэ пиков этих соединений. 30

Далее к полученному раствору добавля- ют 3,28 г (9,35 моль) сложного эфира L-(-)-4карбобензилоксиамино-2-оксимасляной кислоты с N-оксисукцинимидом (1-НАБА), растворенного в 100 мл метиленхлорида. 35

После отстаивания в течение ночи при комнатной температуре смесь, после выпаривания метиленхлорида, разбавляют водой и аммиаком(5%, 150 мл). После осуществления отфильтровывания твердого тела и вы- 40 сушивания получают 6.5 г продукта, имеющего название 3.6 -ди-К-бензилоксикарбонил-.1-N-tL-(+ ) -бензилоксикарбониламино- а -оксибутирил)канамицин А; с выходом 49,8%. соответствующим стехио- 45 метрическому выходу 57 /.

Исходный продукт, который все еще присутствует, соответствует 17 отделенного продукта, равным 25 стехиометрической величины. 50

Продукт. полученный в результате ацилирования. суспендируют B 100 мл воды.

Добавляют 3.5 r 5/о ного Pd/С. Перколируют 7 мл муравьиной кислоты, растворенной в 20 мл воды. По завершении перемешива- 55 ния в течение ночи смесь фильтруют и твердый остаток промывают водой. Полученный раствор (223 мл) имеет следующий. состав: мг/мл

8,2

0,3

0,3 отн, 63,3

2,3

2,3

Амикацин

В В-К29

ВВ-К11

Диацилированный 0,69 5,3

Канамицин А 3,46 26,7

* Продукт с остатком L-НАВА в положениях N-1 и N3", имеющий относительную чистоту амикацина по отношению к его гомологам (кроме Канамицина} выше, чем

90 j..

Раствор доводят до рН 7 и затем перколируют.через колонку, наполненную слабокислотной ионообмен ной смолой в аммиачной форме. Элюирование осуществляют раствором аммиака, и фракции, содержащие канамицин А и амикацин, разделяют.

Из первого продукта, комбинированного, выпаренного и концентрированного. получают 1,1 г сульфата канамицина после осаждения метанолом из 20%-ного концен-. трированного раствора. Фракции, содержащие амикацин, концентрируют до 20О/, и после подкисления 50 /о-ной серной кислотой, обработки углеродом и добавления метанола получают 2,6 г (51,3 p) сульфата амикацина, имеющего микробиологический титр 680 мкг/мг.

Г1 р и м е р 2. 5,31 r 3,6-ди-N-бензилоксикарбонилканамицина А, имеющего титр

85% (6 ммолей) суспендируют в 50 мл метанола, ацетат цинка (4 г как безводный продукт) растворяют в воде (50 Mn) и быстро добавляют к полученному раствору. После двух часов перемешивания при комнатной температуре добавляют 3,28 r (9,35 ммолей) эфира 1-(-)-4-карбобензилоксиамино-2-гидроксибутиловой кислоты с

N-гидроксисукцинимидом (L-ÍÀÂÀ), растворенным в 100 мл метиленхлорида одновременно. После выдерживания B течение ночи при комнатной температуре смесь разбавляют, после выпаривания метиленхлорида, водой и аммиаком (5%, 150 мл}. После фильтрации твердой части и сушки получают

6,46 г 3,6 -.N-дибензилоксикарбонил-1-М-(L)(-)-гаммабензилоксикарбонил амино- а-гидроксибутил)канамицина А с HPLC образцом

51,2 соответственно со стехиометрическим выходом 57%. Количество исходного соединения в выделенном продукте соответствует 17/, что равно 25 / от стехиометрической величины. Полученный ацилированием продукт суспендируют в 100 мл воды. Добавляют 3,5 r 5 /, Pd/С, 7 мл муравьиной кислоты рас гворяют в 20 мл воды и процеживают. После перемешивания в течение ночи смесь фильтруют и твердый осадок

" "771477

Н20 (вода) сул ь фаты

=g o

=24,3 в сухом виде

=80,2 3, 5

5 рН (С = 1, Н20) =3,2

Формула изобретения

Составитель Г, Коннова

Техред М,Моргентал Корректор M. Андрушенко

Редактор Г. Бельская

Заказ 3754 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 промывают водой, полученный раствор (200 мл) имеет следующий состав: мг/мл Отношение % амикацин ц 34 65,5

ВВ-К29 0,2 1,4

В В-К11 0,4 2,6 диацилированный 0,8 5,6 канамицин А 3,5 3,5

* Продукт с остатком 1:НАБА в позициях

N-1 и N3". Чистота амикацина с учетом его гомологов (отдельно от канамицина) выше

g0O

Такой раствор доводят до рН 7 и затем фильтруют через колонку, заполненную слабо подкисленной ионообменной смолой B форме аммиака.

3люент раствора аммиака и фракции, содержащие канамицин А и амикацин отделяют, соединяют, выпарива1от и концентрируют. Из первой получают 1,4 r канэмицин сульфата после высаживания метанолом из

20 концентрированного раствора. Фракцию, содержащую амикацин концентрируют до 20 и после закисления 50 серной кислотой обрабатывают углеродом и дополнительно метанолом, получая 2,65 г {52,3 ) амикацин сульфата, имеющего микробиологический титр 690 мкг/мг в виде белого кристалли .еского продукта, имеющего следующие характеристики:

ВВ-К11, канамицин меньше, чем 0,5

Таким образом, способ позволяет получать амикацин с достаточно высоким выхо10 дом, превышающим 50 .

Способ получения амикацина в виде сульфатной соли путем взаимодействия 3,6

-ди-N-бензилоксикарбонил канамицина с NS-4-бензилоксикарбониламино-2-гидрокси бутирилоксисукцинимидом s смеси воды и полярного органического растворителя, смешивающегося с водой, с последующим удалением защитных группировок каталитическим гидрированием в присутствии

Pd/С и выделением продукта реакции стандартными приемами, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта, пеоед реакцией ацилирования осуществляют комплексообразование исходного вещества с ацетатом цинка s присутствии в качестве растворителя воды в

50-80 rio отношению к органическому растворителю.