Способ прогнозирования течения воспалительного процесса

 

Использование: в медицине, в клинической и хирургической практике. Сущность изобретения: проводят диск-электрофорез в ПААГ двух параллельных проб сыворотки крови, в первой пробе определяют локализацию фракций белка, а во второй гелевый столбик разрезают на поперечные диски с учетом локализации отдельных электрофоретических фракций белка и помещают их в чашки Петри для определения содержания иммуноглобулина G по Маичини, а при снижении его содержания ниже 0,35,0,49 и 0,56 г/л в гелевых дисках, соответствующих локализации фракций с Rf подвижностью по трансферину, равной 0,17, 0,20 и 0,23, прогнозируют неблагоприятное течение воспалительного процесса. Положительный эффект. Использование изобретения позволит в 1,5 раза точнее прогнозировать течение воспалительного процесса. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з G 01 N ЗЗ/561

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ С8ИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4753125/14 (22) 26.10.89 (46) 15.12.92. Бюл. ¹ 46 (71) Ивано-Франковский государственный медицинский институт . (72) М.Д.Василюк, В.П.Процюк, О.М.Макарчук, В.Е.Нейко, M.À.Äoìàëü÷óê и Б,С.Макарчук (56) Василюк M,Ä. Хирургическое лечение посттромбофлебитического синдрома нижних конечностей при изьязвлении и индурации тканей. Автореф. дис. д-ра мед. наук, Киев, 1984, с, 40, (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА (57) Использование: в медицине. в клинической и хирургической практике. Сущность изобретения: проводят диск-электрофорез

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической и хирургической практике для прогнозирования течения воспалительного процесса при различных заболеваниях.

Известен способ диагностики и прогнозирования воспалительного процесса при хирургическом лечении посттромбофлебитического синдрома нижних конечностей при изъязвлении и индурации тканей.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что определяют содержание иммуноглобулина

G в фракциях сывороточного белка дискэлектрофореграммы в палиакриламидном геле, соответствующих локализации фракций с относительной электрофоретической подвижностью по трансферину равной 0,17, 0.20 и 0,23 и при снижении его содержания Ы,, 1781609 А1 о ПААГ двух параллельных проб сыворотки крови, в первой пробе определяют локализацию фракций белка,.а во второй гелевый столбик разрезают на поперечные диски с учетом локализации отдельных электрофоретических фракций белка и помещают их в чашки Петри для определения содержания иммуноглобулина G по Манчини, а при снижении его содержания ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л в гелевых дисках, соответствующих локализации фракций с Rf подвижностью по трансферину, равной 0,17, 0,20 и 0,23, прогнозируют неблагоприятное течение воспа. лительного процесса. Положительный эффект. Использование изобретения позволит в 1,5 раза точнее прогнозировать течение воспалительного процесса. 1 табл. ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л прогнозируют неблагоприятнЬе течение воспалительного процесса, Способ осуществляют следующим образом, Проводят диск-злектрофорез двух параллельных проб сыворотки крови в

7,5%-ном полиакриламидном геле с длиной

76 мм разделяющего и 8 мм концентрирующего геля и диаметром трубочек 6 мм при режиме.2 мА и напряжении 600 W на пробу в течение 30 мин с последующим увеличением силы тока до 5 мА в течение 1 ч, После электрофореза одну из проб фиксируют в

10 -ном растворе ТХУ в течение 10 мин, окрашивают в 0,1 -ном растворе амидочерного 10 В в течение 10 мин и промывают в 7 -ном растворе уксусной кислоты, Столбик геля другой неокрашенной пробы разрезают на 27-28 поперечных дисков, соответствующих локализации опреде1781609 ленным фракциям белка диск-электрофореграммы 1-й окрашенной пробы. Отдельные диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в пронумерованные лунки чашки Петри с агаром и заливают агаром с диспергированной моноспецифической антисывороткой иммуноглобулина G до полного покрытия дисков. После 48 ч инкубации во влажной камере при комнатной температуре производят фиксацию в 10 0 ТХУ и промывку в 7 Д-ном уксусной кислоте. В агаре вокруг дисков, в которых присутствует иммуноглобулин G, возникают кольца иммунодиффузии различных диаметров. Одновременно в отдельной чашке Петри определяют общее содержание иммуноглобулина 6 в исследуемой сыворотке крови по известному способу Манчини, Для расчета содержания иммуноглобулина G в отдельных дисфракциях измеряют диаметры колец иммунодиффузии всех дисков. При этом общее содержание иммуноглобулина в сыворотке крови, определенное по Манчини в г/л, соответствует сумме квадратов диаметров всех колец иммунодиффузии в мм . На основании этого содержание иммуноглобулина G в отдельных диск-фракциях соответствует произведению величины общего содержания иммуноглобулина в сыворотке крови и отношения квадрата диаметра кольца иммунодиффузии отдельного диска к сумме квадратов диаметров колец иммунодиффузии всех диск-фракций.

На основании наших исследований было установлено, что у больных с недостаточностью иммуноглобулина G отмечается резкое снижение его содержания особенно в 23-21 фракциях сывороточного белка диск-электрофореграммы в ПААГ, где локализуются иммуноглобулины относящиеся к. нормальным или естественным антителам, функция которых связана с индивидуальной устойчивостью организма к инфекциям. Поэтому снижение содержания иммуноглобулина G в фракциях 23-й ниже 0,35 г/л, 22-й — 0,49 г/л и 21-й — 0,56 г/л соответственно указывает на недостаточность иммуноглобулина G в организме и прогнозирует неблагоприятное течение воспалительного процесса.

Такое состояние иммунитета встречается при пиодермиях, фурункулезах, частых простудных заболеваниях и пневмониях, а также при системном аллергозе и у больных, перенесших тяжелые оперативные вмешательства.

Средние количественные данные содержания иммуноглобулинов G в фракциях сывороточного белка дис-электрофорегсоставило в 23 фракции диск-электрофореграммы 0,37 г/л, в 22 фракции — 0,56 г/л и в

50 21 фракции — 0,45 г/л.

Таким образом, как видно из таблицы и конкретного примера, использование предлагаемого способа позволяет установить индивидуальную недостаточность

55 определенных фракций иммуноглобулина 6 в организме и повысить в 1,5 раза точность прогноза течения воспалительного процесса, Формула изобретения

Способ прогнозирования течения воспалительного процесса, включающий про5

45 раммы в ПААГ у здоровых людей и больных с воспалительными процессами приведены в таблице. Из таблицы видно, что у больных содержание иммуноглобулина 6 снижено особенно в 23-21 фракциях, что указывает на недостаточность естественных антител в организме по сравнению с группой здоровых лиц.

Содержание иммуноглобулина G в фракциях сывороточного белка у здоровых людей и у больных с воспалительными процессами представлено в таблице.

В качестве конкретного примера использования способа служит следующий клинический случай: Больная Н.Д., 67 лет, поступила в клинику с диагнозом: рецидивирующий карбункул затылочной области, сахарный диабет в тяжелой форме. Больной проведено широкое костообразное раскрытие карбункула с иссечением некротических тканей, с последующей антибиотикотерапией, общеукрепляющим лечением и коррекцией сахарного диабета. Однако, некротически-гнойный процесс не имел тенденции к ограничению и распространился почти на всю затылочную область. Содержание иммуноглобулина G в сыворотке крови по Манчини составило 9,3 г/л, что соответствует таковому показателю у здоровь1х лиц, В то же время при исследовании иммунограммы сывороточного белка выявлено отсутствие иммуноглобулинов 6 в фракциях

21-23 диск-электрофореграммы и наличие их только в 19, 20 и 27 фракциях и в крупнопористом геле, На основании этого у больной была установлена недостаточность определенных фракций иммуноглобулина G в сыворотке крови. Многократные гемотрасфузии свежей донорской крови. антистафилококковой плазмы, введение гаммаглобулина и антибиотиков и др. мероприятия позволили ограничить воспалительный процесс. Наступило выздоровление.

Показатели иммунограммы сыворотки крови при выписке указывали на наличие иммуноглобулина G, содержание которого

1781609

20 >>омер Фракцин н алектрофоретнческал лоденаность сыеороточного белка диск-электрсфореграммы а лолнакрнла>е>дном геле ло отноюенню к трансФеррмну

Обцее колнчестео ннмуно- глобулмноа

G е сыаоъотке кроен по Найчини, г/л

Иммуноглобу- . лнны С а Фракцнлх сыеороточ ного белка дискзлектрофореграммы, г/л

27 26

18

О ° 35о 39

17 16

20

19

0,29"

0>31

О ° 090,1

23 22

О,140,15

0,220,23

0,41

0,44

0,03- 0,06o,o4 q, o8

0,260,27 о,480,53

О.17- о 19о,18 о, 2o

У адороеых лю- - Н t2>2 дед m t 52

У больных . И 8 ° 25

m 1,46

1,60 1,48

0,13 0,12

0 ° 46 1,23

0,1,0,2

1,45 1>18 0,8 0,2

О,ll О,t 0,09 0,06

0,34

О,tl - °

О ° 16 0,62 0,85

0,09 0,08 0,06

0,87 1,24 1, 16

0,21 0,32 0>16

1,22 1,52 0,14 О ° 12

0,27 o,l>2

О ° 08 0,07

0,85

0,1

О,76

0,3

0,35

0,08 t ° 46

0,42

Составитель Г.Тюнина

Редактор В.Трубченко Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор, О.Густи

Заказ 4271 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государс1 венного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35,, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ведение диск-электрофореза двух параллельных проб сыворотки крови в 7,5%-ном полиакриламидном геле, затем одну пробу фиксируют и прокрашивают для определения локализации фракций белка, а столбик геля другой пробы используют для определения иммуноглобулина G, для чего его разрезают ° на поперечные диски, соответствующие локализации отдельных фракций белка электрофореграммы, диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в чашки Петри и заливают агаром с моноспецифической антисывороткой, инкубируют во влажной среде при комнатной температуре в течение 48 ч, фиксируют

10%-ным раствором ТХУ, промывают 77ьным раствором уксусной кислоты и определяют диаметр колец иммунодиффузии для расчета количества иммуноглобулина G в отдельных диск-фракциях по формуле в виде произведения общего содержания иммуноглобулина 6 в сыворотке крови, 5 определенного по Манчини, на д6лю вели- . чины квадрата диаметра одного кольца иммунодиффузии по отношению к сумме квадратов диаметров всех колец иммунадиффузии,отл ича ю щи йс я тем,что, с

10 целью повышения точности способа, определение иммуноглобулина 6 проводят в трех гелевых дисках, соответствующих локализации фракций белка с электрофоретической подвижностью 017, 0,2 и 0,23 по

15 отношению к трансферрину, и при снижении его содержания ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л прогнозируют неблагоприятное течение воспалительного процесса.