Способ отбора мутантных штаммов, продуцирующих ценные питательные вещества
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 19. IV.1965 (№ 1001185/28-13) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 09.VI.1966. Бюллетень Г Ъ 12
Дата опубликования описания 5У111.1966
Кл. 30h, 6
45h, 67/00 ба, 14
МПК А 61k
А Olk
С 12k
3 ДК 663 11:576 8 093 1 (088.8) Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
СПОСОБ ОТБОРА МУТАНТНЬ1Х ШТАММОВ, ПРОДУЦИРУ1О1ЦИХ ЦЕННЫЕ ПИТАТЕДЬНЬ|Е ВЕЩЕСТВА
Известен способ отбора мутантных штаммов, выделяющих ценные питательные вещества, путем совместного выращивания на агар изовани ой синтетической питательной среде популяризации штаммов с индикаторными микроорганизмами, потребляющими в процессе своей жизнедеятельности эти питательные вещества, и последую цего отбора колоний мутантных штаммов по интенсивному росту ин дикаторных микроорганизмов.
Предлагаемый способ заключается в сле. дующем. Приготавливают питательную среду следующего состава (в г/л): глюкоза 20, К НРО4 2, (NH4)sSO4 1, MgSO< 1, агар 20, затем ее стерилизуют, после чего вносят в нее смесь витаминов в объеме 1 лгл/л, На чашку Петри с приготовленной питательной средой засевают смесь клеток водорослей и дрожжей, причем клеткп водорослей предварительно облучают и разводят водой до количества 100 — 500 жизнеспособных клеток на одну. чашку.
Ауксотрофные, нуждающиеся в аминокислотах дрохкжи засевают из расчета 10 — 20 млн. клеток на чашку. Инкубация протекает при 30 С в темноте.
Через 7 — 8 дней после засева, когда образовавшиеся колонии водорослей побуреют в результате частичного автолиза Нх клеток, посевы просматривают с помощью бинокулярной лупы. Колонии водорослей, вокруг которых заметно более активное размножение дрожжей, рассматривают как предполагаемые мутанты-кормильцы. Эти колонии отсевают на сре5 ду, обеспечивающую рост водорослей и не дающую роста дрожжей, нуждающихся в аминокислотах.
Предполагаемые мутанты повторно оцениьают. Для этого их засевают в виде штрихов
10 на ча пку Петри с предварительно нанесенными на нее ауксотрофнымн дрожжами той же консистенции (10 — 20 млн. клеток на чашку). 1-1а эту же чашку для сравнения засевают суспснзию клеток исходного штамма водо15 рослей, Мутанты, подтвердившие способность подкармливать ауксотрофные дрожжи, являются мутантами-кормильцами. От примеси дрожхкевых клеток их очищают обычными метода20 ми выделения чистых ку льтур водорослей.
Полученные мутанты-кормильцы размножают. После проверки их биомассы биохимическим путем на содержание нужной аминокислоты мутанты-кормильцы используются для
25 выращивания одноклеточных водорослей в промышленных установках.
Предмет изобретения
Способ отбора мутантных штаммов, проду30 циру.ющих ценные питательные вещества пу182869
Составитель М. И. Андреева
Редактор В. П. Борисова Техред Г. Е. Петровская Корректоры: Г. E. Опарина и В. Е. Соколова
Заказ 2024/5 Тираж 1375 Формат бум. 60+90 /з Объем 013 изд. л. Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2 тем совместного выращивания на агаризован. ной синтетической питательной среде этих штаммов с другими микроорганизмами, потребляющими в процессе своей жизнедеятель ности питательные вещества, выделяемые при автолизе клеток отбираемых штаммов, отличаюи1ийся тем, что, с целью отбора штаммор с повышенным содержанием ценных аминокислот в биомассе микроорганизмов, в качестве последних используют водоросли, клетки ко1 торых перед посевом обрабатывают мутагеном, а для совместного выращивания с ними используют ауксотрофные дрожжи, нуждаю.
5 щиеся в этих аминокислотах, и по количеству дрожжей, выросших после автолиза краевых клеток водорослей, соприкасающихся с дрожжевыми клетками, судят о полноценности мутантных штаммов в отношении аминокислот,
