Способ получения ферментных препаратов
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
1Сл. 6а, 22/04
30h, 14
Заявлено 03.т .1965 (№ 1005989/28-13) с присоединением заявки №
П р и ор итет
Опубликовано 12 1Х.1966. Бюллетень № 18
Дата опубликования описания 20.Х.1966
МПК С 12k
Л 61k
УДЕ, 637.333.1:576..8.093.1 (088.8) Комитет по делам изобретений и открытий лри Совете Министров
СССР
Лвторы изобретения
И. Я. Веселов, A. И. Веселов, М. С. Мосичев и Д. Я Типограф 1 1- - ЫЗИдг
l;-, "" "I
Заявитель
СПОСОБ OÎËÓ×ÅHHß ФЕРМЕИТНЫХ tlPEHAPATOB
Известен способ получения ферментных препаратов, согласно которому на питательной среде, содержащей отвар солодовых ростков, в аэробных условиях выращивают продуцирующие их микроорганизмы, отделяют культуральную жидкость от бактериального мицелия одним из известных приемов, например фильтрацией, концентрируют ее вымораживанием, после чего из полученного концентрата адсорбируют препарат.
Предлагаемый способ обеспечивает получение активного сычужного ферментного препарата, свободного от примеси сопутствую1цих ферментов. Достигается это тем, что в качестве его продуцента используют штамм бактерий Bacillus mesentericus sp. renninus № 61, кроме того, адсорбируют препарат из культуральной среды при помощи кизельгура с последующей десорбцией его молочной сывороткой.
Предлагаемый способ заключается в следующем.
Штамм бактерий Bacillus mesentericus sp.
renninus № 61 культивируют на стерильной питательной среде, содержащей отвар солодовых ростков, поверхностным или глубинным методом с аэрацией при 30 С в течение 48—
72 час.
Для приготовления среды расходуют светлые солодовые ростки в количестве 3 — 4о, которые отваривают. Полученный отвар фильтруют, затем сепарируют, доводят до рН=
=6,2 — 6,0 и стерилизуют.
Окончив выращивание, среду подвергают грубому фильтрованию для отделения основной части бактериальной биомассы, после чего для полного удаления бактерий ее сепарируют.
10 Прозрачный фильтрат, содержащий сычужный и протеолитические ферменты, смешивают с раствором поваренной соли, получая раствор 4 — 5",о-ной плотности, который затем подвергают концентрированию путем вымора15 жив ания.
Полученную полужидкую массу, содержащую твердую фазу — чешуйчатый лед и жидкую фазу — концентрат ферментов в солевом растворе, подвергают разделению на цен20 трифугах. После этого для выделения сычужного препарата концентрат подвергают адсорбции на кизельгуре, получая при этом две фракции — сычужный фермент на носителе и жидкий концентрат протеолитических фермен25 тов в фильтрате. Лдсорбированный на кизельгуре сычужный фермент элюируют молочной сывороткой. жидкий концентрат сепарируют до полной прозрачности и используют для получения
30 протеолитических ферментов.! 8,)822
Составитель М. И. Андреева
Редактор 3. Н. Шибаева Техред Т. П. Курилко Корректоры: Ю. М. Федулова и С. М. Белугина
Заказ 3042/1 Тираж 825 Формат бум. 60 90 /, Объем 0,1 изд. л. Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2
Полученный после элюции сычужпого фермента фильтрат концентрируют методом вымораживания. Концентрат хранится при температуре минус 10 С, в течение 6 — 12 месяцев.
Из концентрата можно получить кристаллический сычужный фермент.
Предмет изобретения
Способ получения ферментных препаратов путем выращивания из продуцента в аэробных условиях на питательной среде, содержащей отвар солодовых ростков, отделения культуральной жидкости от бактериального мицслия одним из известных приемов, например фильтрацией, концентрирования ее вымораживанием с последующей адсорбцией препа5 рата из полученного концентрата, отличаюи1ийся тем, что, с целью получения активного сычужного ферментного препарата без примеси сопутствующих ферментов, в качестве его продуцента используют штамм бактерий
lo Bacillus mesentericus sp, renninus ¹ 61, а адсорбцию препарата из культуральной среды производят при помощи кизельгура с последующей десорбцией его молочной сывороткой.
