Способ получения гуанозина-с14

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

I89865

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Заявлено 26Л.1966 (№ 1051465/23-4) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 16.Х11.1966 Бюллетень ¹ 1

Кл. 12р, 7/10

МПК С 07d

УД К 547.877.7.07

Комитет оо делам каооретеиий и открытий

Заявитель

Государственный ордена Трудового Красного Знамени институт прикладной химии

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГУАНОЗИНА-С«

Известно получение гуанозина последовательной обработкой 2,6-диаминопурина уксусным ангидридом при кипячении, спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении, аммиаком, уксусной кислотой, нитратом натрия и метанольным раствором метилата натрия.

С целью расширения сырьевой базы и упрощения технологического процесса, предложено в качестве производного пурина применять гуанин-С«. Способ состоит в том, что гуанин-С«кипятят с уксусным ангидридом, обрабатывают спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении и метанольным раствором метилата натрия.

Пример, Смесь измельченного до пудры гуанина-8-С«(3,1 г с удельной активностью

0,92 лткюри/г, общая активность 2,8 лтк) и свежеперегнанного уксусного ангидрида (17 лтл) кипятят с обратным холодильником 4 час на металлической бане (сплав Вуда), нагретой до 145 — 150 С. Охлажденную до комнатной температуры суспензию фильтруют, осадок ацетилгуанина-8-С» промывают эфиром (200 лтл) . Получают 4,2 г неочищенного продукта.

Для очистки смесь ацетилгуанина-8-С« (л.2 г), воды (630 лтл) и угля БАУ (0,420 г) кипятят в течение 15 мин, горячий раствор фильтруют и оставляют на ночь в холодильнике. Кристаллы отделяют фильтрованием, промывают спиртом (5 лтл), затем эфиром (15 лтл) и высушивают при 35 — 40 С до постоянного веса. Вес продукта 1,69 г (43% от теоретического количества, в расчете на гуапин-8-C«). Удельная активность 0,65 лтк/г.

Из маточных растворов выделяют дополнительно 0,675 г ацетилгуанина-8-С«с удельной активностью 0,65 лтк/г. Таким образом выход продукта возрастает до 60%.

Ацетилгуанин-8-Ст (2,02 г с удельной активностью 0,65 лткюри/г, общяя активность

1,31 лткюри) растворяют в 50с/-ном водном этаноле (300 лтл) при кипячении смеси с обратным холодильником.

B кипящую смесь вносят водный раствор щелочи (0,42 г NaOH в 10 лтл воды) и сразу добавляют спиртовый раствор сулемы (2,84 г

HgC1> в 10 лл абсолютного спирта).

Навески щелочи v сулемы смывают водой и спиртом, соответственно (по 5 — 10 лтл) . Полученную смесь кипятят 5 — б,ттин, оставляют в бане со льдом на 2 час, затем осадок ртутной соли отделяют фильтрованием и промывают спиртом (25 лл) и эфиром (25 лтл). Соль, высушенная при 35 — 40 С, весит 4,33 г. Выход

96,5% от теоретического количества в расчете па ацетилгуанин-8-Стт. Содержание азота в соЗо ли 16 1 "4.

Вычислено для С-,НоО>N5 HgC1.

N 16 35о/о

Ртутную соль (2,92 г), предварительно измельченную до пудры, смешивают со свежеперегнанным ксилолом (100 л л) и подвергают азеотропной сушке, отбирая 40 лил ксилола.

К кипящей суспензии в течение 10 мин приливают раствор галогенозы (3,12 г) в ксилоле (20 мл). Капельную воронку промывают ксилолом (48 мл), который присоединяют к реакционной массе. В процессе загрузки раствора галогенозы азеотропную сушку смеси продолжают, отбирая еще 44 мл ксилола. Смесь кипятят с обратным холодильником без доступа влаги при энергичном перемешивании на бане со сплщюм Вуда (150 — 160 С) в течение

1,5 час; Затем реакционную смесь охлаждают на бане со л дом; добавляют к раствору петролейного эфира (350 мл, фракция 70 — 100 C) и оставляют на ночь. Продукт конденсации отделяют фильтрованием, промывают петролейным эфиром (30 мл) и высушивают при 35—

40 С. Вес кристаллов 4;69 г. Выход неочищенного продукта практически количественный.

Для очистки продукт конденсации (4,69 г) экстрагируют хлороформом (200 мл) при нагревании до 50 С. Экстракт фильтруют, прозрачный раствор упаривают в вакууме, на водяной бане при 35 — 40 С досуха. Вес остатка

3,17 г (74о от теоретического количества, в расчете на ртутную соль).

Продукт конденсации (3 г) растворяют в абсолютном метаноле (100 мл). К однородному прозрачному раствору приливают метанольный раствор метилата натрия (1,15 г Na в 75 мл абсолютного метилового спирта) .

189865

Смесь нагревают па водяной бане (80—

85 С) без доступа влаги в течение 1 «ас, Затем баню убирают, к смеси приливают 175 мл горячей воды и продолжают. кипятить на закрытой плитке 45 мин, Горячий раствор фильтруют, прозрачный фильтрат нейтрализуют ледяной уксусной кислотой до рН 6 — 7.

В нейтральном рабочем растворе определяют гуанозин. Содержание гуанозина-8-С14 (по анализу) колеблется от 280 до 580 мг. Выход составляет 10 — 27 от теоретического количества, в расчете на ртутную соль.

Высокоактивный продукт выделяют без носителя путем кристаллизации и перекристаллизации из воды. Остаток активного продукта выделяют на носителях (3 раза).

Общий радиохимический выход гуанозина8-С14 равен химическому и составляет 10—

27, в расчете на ртутную соль. Продукт хро20 матографически однороден. Радиохимическая чистота гуанозина-8-С14 98 /о.

Значение коэффициента молярной экстинкции при Х„, равно 254 — 257 ммк, в растворе

0,1 н. НСl; г = 11 5. 10з — 12 5. 10з

Предмет изобретения

Способ получения гуанозина-С 4 путем последовательной обработки производного пуриЗ0 на уксусным ангидридом при кипячении, спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении и метанольным раствором метилата натрия, отличающийся тем, что, с целью расширения сырь55 евой базы и упрощения технологического процесса, в качестве производного пурина применяют гуанин-С14.

Составч1ель H. Филиппова

Редактор Л. Г. Герасимова Техред Т, П. Курилко Корректоры: С. М. Белугина и С. H. Соколова

Заказ 4202/12 Тираж 535 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2