Способ выделения биомассы из культуральной жидкости
Использование: область концентрирования и выделения бактериальной биомассы и микробиологические производства. С целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса предложен способ выделения биомассы из культуральной жидкости, предусматривающий обработку агрегирующим агентом, где в качестве агрегирующего агента берут формалин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости и процесс ведут при рН 3,0-4,0. 1 табл.
СО(03 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (si)s С 12 N 1/02
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4907276/13 (22) 26.11.90 (46) 15.04.93. Бюл. ¹ 14 (71) Казанский химико-технологический институт им.С.М,Кирова и Марийское биофармацевтическое производственное объединение "Марбиофарм" (72) E,È.Âåäåðíèêîâ, И,Н,Лукина, Г,И.Фурзиков, Л.Б.Свердлов и И.Э.Мукменев (56) Патент США ¹ 3625832, кл, С 12 N 1/02, 1971, Изобретение относится к концентрированию и выделению биомассы и может найти применение в микробиологических производствах.
Целью изобретения является увеличение выхода биомассы и упрощение процесса выделения.
Указанная цель достигается тем, что в способе выделения биомассы из культуральной жидкости в качестве агрегирующего агента используют формалин в концентрации 0,01-0,07% к объему при рН
3,0-4,0.
Формалин технический (ГОСТ 1625-75)
37-40% раствор формальдегида в воде —. бесцветная жидкость со специфическим запахом, плотность-1,076-1,101 г/см, температура самовоспламенения 435 С, пределы взрываемости — 7-73%. ПДК в воздухе 0,5 мг/м . Стоимость 0,4 руб/кг. Используется
3 в качестве дезинфицирующего и дезодориру|ощего средства, жидкость для сохране,,. >Ы„„1808868 А1 (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОМАССЫ ИЗ
КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ (57) Использование, область концентрирования и выделения бактериальной биомассы и микробиологические производства. С целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса предложен способ выделения биомассы из культуральной жидкости, предус. матривающий обработку агрегирующим агентом, где в качестве агрегирующего агента берут формалин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости и процесс ведут при рН 3,0-4,0. 1 табл. ния анатомических препаратов, Производится.
Способ осуществляют следующим образом.
В кул ьтурал ьную жидкость, полученную — а при культивировании ацидофильных бакте- ОО рий Glycon,ocsid вводят формалин в коли- С) честве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости, Производят нагрев биосуспензии до 60-65 С. Биосусйензия разделяется в течение 2-5 мин, Клеточную массу отделяют йа сепараторах, подавая обработанную культу- О© ральную жидкость под давлением 0,2-0,3 кгс/см . Доочистку отсепарированного раствора можно производить с использовани- а ем активированного угля или других методов доочистки, Зольность сгущенной биомассы при этом практически не меняется. Степень выделения биомассы предложенным способом составляет 98-99,5 .
Эффективность предложенного способа достигается, по-видимому, вследствие
1808868
4 флокуляции клеток в присутствии формалина.
Пример 1 (no заявляемому объекту).
В культуральную жидкость, полученную при культивировании ацидофильных бактерий 5
Glycon. ocsid добавляют 10 раствор H Ci (в случае необходимости закисления куль уральной жидкости до рН З,О), вводят формалин, доводя его концентрацию до 0,07ф, к объему культуральной жидкости до 60 С.
Происходит активное образование клеточных агрегатов. Биосуспензйю подают на сепаратор под давлением 0;2-0,3 кгс/см, 2
Мутность биосуспензии при этом снижается с 344 до 24,5 усл.единиц, цветность — со
160 до 20,5 усл. единиц.
Способ осуществляли согласно примеру 1. Результаты выполнения приведены в таблице.
Спектрофогометрический контроль мутности и цветности биосуспензии до и после осветления в центробежноФГполе на сепараторе определяется тем, что используемая культура представляет собой окрашенную суспензию. 25
Как видно из таблицы, наиболее эффективное выделение биомассы происходит при введении в культуральную жидкость формалина в концен рации 0,01-0,07 к объему культуральной жидкости при рН 3,0- ЗО
4,0, температурный режим оказывает влияние на скорость агрегации (см,примеры в таблице).
Проведенные аналитические исследования не обнаружили присутствия формальдегида (формалина) в осветленной культуральной жидкости и в сгущенной биомассе, что может быть связано с разложением данного соединения в процессе нагрева биосуспензии до заданной температуры.
Использование в качестве агрегатирующего агента одного реагента по сравнению с прототипом, где необходимо использование двух реагентов позволяет упростить выполнение способа выделения биомассы.
3а базовый объект принят существующий в настоящее время в промышленности сепарационный метод выделения биомассы из культуральной жидкости (см.выше), по сравнению с которым заявляемый способ обеспечивает повышение эффективности отделения биомассы, упрощение процесса, снижение капитальных и эксплуатационных затрат.
Формула изобретения
Способ выделения биомассы из культуральной жидкости, включающий обработку концентрирующим агентом, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что, с целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса, в качестве концентрирующего агента используют формалин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости и обработку ведут при рН 3,0-4,0, 1808868
Время
arperaLIHH i мин
Уровень рН
Темпера" л тура, С
Концентр. агента,1
2,8 3,0 3,5 4,0
4,5 мутность/цветность, усл.ед.
344
344
160
344
344
344
344
344
344
344
344
160
344
344
344
344
344 !
344
1ЬО
344
344
160
Контроль (культуральная w-ть без добавки формалина) 1ЬО
344
344
344
344
344
1СО
344
344 !
344
160
160
344
344
1ЬО
344
344
Ь5
160.
344
344
0,001
32-70
I6О
je
56
73
52
5!
63
49
8,8 8,5
6,6
6,1
34
151
79
56
73
7 .! г56
0,01
137
73
53
67
51
62
66
63
130
127
8,1 е,2
7,7
5,7
36
29
72
51
68
53
54
46
37
3,9
2,9
2,8
60
7,7
5,8
5,2
37
70!
32
0,07
141
126
ЬО
112
ЬО
70
97
78
90.
74
82
71
69
27
29
24
34
2Ь
0,l
132
124
118
60
65
34
33
33
70 а
Верхняя цифра указывает мутность, ннкняя - цеетность осветленной аидкости
Составитель О.Скородумова
Редактор В.Трубченко Техред М.Моргентал КоРРектоР М.Петрова
Заказ 1258 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, 7К-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
72
51
69
5З
54
46
46
38
5,7
5, 4
З,В
3,7
3!
26
98
79
91
82
71
5!
27
29
344
1ЬО
344
344
344
344
160 344
344
344
78
56
72
52
49
62
8,1
7 7
5,7
5,2
3Ь
29
73
52
68
53
47
46
38
3,9
3,5 3,0
2,8
31
26
98
79
74
82
71
68
34
27
29
72
52
69
53
47
47
ЗВ
З,В
3,5
3,0
2,9
32
26
98
79
91
74
82
72
51
36
2е
7е
56
73
52
66
63
48
8,0
8,0
6,8
6,2
З7
29
72
52
68
53
56
47 47
ЗВ
5,7
5,5
4,2
З,В
Зз
27
98
79
74
83
72
51
36
28
34
