Способ выделения биомассы из культуральной жидкости
Использование: область концентриро-. вания и выделения бактериальной биомассы и микробиологические производства. Сущность изобретения: с целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса предложен способ выделения биомассы из культуральной жидкости, предусматривающий обработку агрегирующим агентом, где в качестве агрегирующего агента берут монохлорамин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости и процесс ведут при рН 3,0-4,0. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (si)s С 12 N 1/02
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4907277/13 (22) 26.11;90 (46) 15.04.93. Бюл. М 14 (71) Казанский химико-технологический институт им,С.М,Кирова, Марийское биофармацевтическое производственное объединение "Марбиофарм" (72) Е.И.Ведерников, И.Н,Лукина, Г.И.Фурэиков, Л,Б.Свердлов и И.Э.Мукменев (56) Патент США N. 3625832, кл. С 12 N 1/02, 1971.
Изобретение относится к концентрированию и выделению биомассы и может най и применение в микробиологических производствах.
Целью изобретения является увеличение выхода биомассы и упрощение процесса, Указанная цель достигается тем, что в способе выделения биомассы из культуральной жидкости, включающем обработку агрегирующим агентом, в качестве агрегирующего агента используют монохлорамин в концентрации 0,01-0,07% к объему при рН
3,0-4,0.
Монохлорамин ХБ (гидрат натриевой соли монохлорамида и-хлорбенэолсульфокислоты) — кристаллы светло-желтого цвета, растворимы в воде (7,4%), разлагаются при
180 С. Используют водные 0,25-0,5% растворы для лечения инфицированных ран, Й2 1808869 А1
2 (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОМАССЫ ИЗ
КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ . (57) Использование: область концентриро-. вания и выделения бактериальной биомассы и микробиологические производства;
Сущность изобретения: с целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса предложен способ выделения биомассы из культуральной жидкости, предусматриваю-. щий обработку агрегирующим агентом, где в качестве агрегирующего агента берут мо-. нохлорамин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости и. процесс ведут при рН 3,0-4,0. I табл. для дезинфекции предметов ухода за больными при кишечных и капельных инфекциях, для дегаэации некоторых отравляющих веществ, отбеливатель в текстильной про- ® .. мышленности, Способ осуществляют следующим абра- 00 эом.. (ф
В культуральную жидкость, полученную ( при культивировании ацидофильных бакте- 0 рий Gtycon.ocsld вводят монохлорамин в количестве 0,01-0,07% к объему культуральной жидкости, Производят нагрев биосуспензии до 60-65 С. Биосуспензия разделяется в течение 2-5 мин. Клеточную . массу отделяют на сепараторах, подавая обработанную культуральную жидкость под давлением 0,2-0,3 кгс/см . Доочистку отсепарированного раствора можно производить с использованием активированного угля или других методов доочистки. Степень
1808869
3 выделения биомассы предложенным cllOGQбом составляет 98,8-99,7 .
Эффективность предложенного спосо6а. достигается, по-видимому, вследствие потери агрегативной и седиментационной 5 устойчивости клеток в присутствии монохлорамина.
Пример 1 (по заявляемому объекту).
8 культуральную жидкость, полученную при культивировании ацидофильных бактерий "0 вводят монохлорамин в виде водного 2 ), раствора, доводя его концентрацию до
0,07 к объему культуральной жидкости.
Производят нагрев биосуспензии до 60 С, Происходит активное образование клеточ- 15 ных агрегатов. В случае необходимости устанавливают рН биосуспензии в интервале
3,0-4,0 с помощью 107; раствора HCl, Обработанную биосуспензию подают на сепаратор под давлением 0,2-0,3 кгс/см ..20
Мутность биосуспензии при этом снижается с 344 до 25,6 усл,eд., цветность — до 24,5 усл,ед.
Способ осуществляли согласно примеру 1. Результаты выполнения способа при- 25 ведены в таблице. . Спектрофотометрический контроль. мутности и цветности биосуспензии до и после осветления в центробежном поле на сепараторе определяется тем, что использу- 30 емая культура представляет собой окрашенную суспензию.
Как видно из таблицы наиболее эффективное выделение биомассы происходит
35 при введении в культуральную жидкость монохлорамина в концентрации 0,01-0,07 к объему культуральной жидкости при рН 3,04,0. Режим температуры оказывает влияние на скорость клеточной агрегации.
Проведенные аналитические исследования не выявили содержания монохлорамина в осветленной жидкости и сгущенной биомассе. Это может быть объяснено термической нестойкостью данного соединения.
Использование в качестве агрегирующего агента одного соединения по сравнению с прототипом, где необходимо использование двух реагентов, позволяет упростить выполнение способа.
3а базовый объект принят существующий в настоящее время в промышленности сепарационный метод выделения биомассы из культуральной жидкости (см.выше}, по сравнению с которым заявляемый способ обеспечивает повышение эффективности отделения биомассы, упрощение процесса, снижение капитальных и эксплуатационных затрат.
Формула изобретения
Способ выделения биомассы из культуральной жидкости, включающий обработку агрегирующим агентом, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью увеличения выхода биомассы и упрощения процесса, в качестве агрегирующего агента берут монохлорамин в количестве 0,01-0,07 к объему культуральной жидкости и обработку ведут при рН
3,0-4,0.
1808869
Температура," С
Конце нт р. агента, Уровень рц
Время агрегации, мин
2,8 мутность/цвет ность, усл. ед.
344
344
344
160
Контроль 32 (культуральная жидкость без монохлорамина) 45
160
160
344
344
160
344
344
160
344
344
344
160
344
344
344
160
60
344
160
344
160
32-70
344
160
344
160
344
160
О, 001
0,01
76
61
76
62
76
62
32
154
62
77
62
55
122
4,7
4,3
3,8
3.3
32
4,7
4,3
3,8
3,3
32
2г
68
53
5,8
5,5
5,2
5,7
5,3
34
5,3
5,9
5,4
33
69
53
36
70
68
53
34
0,07
32
116
53
55
57.
5,3
5,1
5,2
5,0
3,3
3.1
3,3
3,1
0,8
0,7
0,7 () 2,8
3,0
2>9
19
0,8
24
1)
19
0,1
87
87
73
68
49
24
87
123
73
55
72
103
49
24
60
29
27
23
29
18
33
65
l9
21
19
19
70
33
31
2С
31
Верхняя цифра указывает мутность, нижняя - цветность осветленной жидкости
Составитель О.Скородумова
Редактор В.Трубченко Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор M.Ïåòðoâà
Заказ 1258 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, yn,Гагарина, 101
344
344
160 .344
344
344
344
344
160
4,7
4,3
3,8
3,3
32
68
53
35, 27
3,3
3,1
0,7
0,7
19
18
86
73
69
49
24
344
344
344
344
344
344
344
160
„44
344
344
344
344
344
344
344
160
