Способ сенсибилизации ланцета аллергеном для диагностики поллиноза

 

Изобретение относится к медицине, в частности для диагностики поллинозов. Цель изобретения - разработка способа, обеспечивающего сенсибилизацию ланцета со специфической активностью, стабильными и стандартными свойствами при хранении в течение года. Способ включает сенсибилизацию аллергеном, растворенным в 0,125 N бикарбонате аммония в соотношении мг/мл: 1,6-2,6:1. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУ6ЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР),. "!like т, « ;1ч(Г»,. », .;г,,", о(1 tf - А

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4918049/14 (22) 11.03.91 (46) 07.07.93. Бюл, N. 25 (71) Научно-производственное объединение

"Аллерген" (72) Н.А.Иллютович и В.Н.Райкис (56)Рекламный проспект фирмы "Фармация"

/Швеция/ — Фоэетспецифический стандарт, (54) СПОСОБ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЛАНЦЕТА АЛЛЕРГЕНОМ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ

ПОЛЛ ИНОЗА

Изобретение относится к медицине и может быть применено для диагностики аллергии.

Целью изобретения является разработка способа сенсибилизации ланцета пыльцевым аллергеном для диагностики поллиноза.

Поставленная цель достигается тем, что для обеспечения специфичности. стандартности, стабильности кожного тестирования лиофилиэированный очищенный аллерген растворяют в растворе бикарбоната аммония в соотношении мг/мл: 1,6-2,6: 1 и сенсибилиэируют до полного испарения раствора.

Способ осуществляют следующим образом.

Обезжиренную пыльцу промывают дистиллированной водой до визуального отсутствия в ней пигментов, 3-х кратно экстрагируют 0,125 N бикарбонатом аммония, лиофилизируют, вновь растворяют экстрагирующим раствором и стерилиэуют, Далее полученный аллерген контролируют на стерильность, токсичность. содержания азота белка, затем осуществляют сенсибилизацию ланцета. Для этого берут навеску

„,. Ж,, 1825620 А1 (5!)5 А 61 В 17/20 (57)Изобретение относится к медицине, в частности для диагностики поллинозов.

Цель изобретения — разработка способа, обеспечивающего сенсибилиэацию ланцета со специфической активностью, стабильными и стандартными свойствами при хранении в течение года. Способ включает сенсибилизацию аллергеном, растворенным в 0,125 N бикарбонате аммония в соотношении мг/мл: 1,6-2,6:1. 1 табл, лиофилизированного аллергена растворяют в растворе бикарбоната аммония, Далее раствор аллергена заливают в лунки плексиглазовых плашек куда помещают в вертикальном положении ланцеты и высушивают до полного испарения экстракта.

Затем осуществляют контроль специфичной активности сенсибилизированных ланцетов.

Полученный таким образом сенсибилиэированный ланцет готов к употреблению.

Пример 1. Берут 100 г пыльцы амбро- СО зии обеэжиривают этиловым эфиром, высу- 1, шивают при комнатной температуре, затем (Л промывают дистиллированной водой до ви- 0 зуального отсутствия в ней пигментов, после чего вновь высушивают и в холодильной камере при т+4 С проводят 3-х кратное экс- .. трагирование пыльцы 0,125 раствором бикарбоната аммония на магнитнои машапка )0я в течение 18, 4 и 4 ч. Для этого берут соот- -а ношение пыльцы и экстрагирующей жидкости 10:100 и последовательно экстрагируют пыльцу 50, 25 и 25 объема раствора бикарбоната аммония. После каждой экстракции надосадочную жидкость сливают в

1825620 ц Il(I3EI«t,f>v Hti« стаканы, центрифу(ируют и!)и }000 Об/мин в течение одного часа, 0..1 .«xс-рак fl обьединяются вместе. !

:.f;bf;)у«(, "Рпеэ бумажный фильтр и под;««рг(}к. (лиофильному высушиванию. Далее бе}.у 2 л«: лиофильно высушенного аллергена pact t3()ряют 1 мл 0,125 N раствора бикар)otIaTa аммония, фильтруют через с TeI:LtnL4oytolqL1e мембраны и контролируют на стери "} «ость. токсичность и содержание азота белк(3.

Затем стерильныи, не токсичный, содержащий 10000 P N и/мл раствор аллергена зал 1()atoi по 0,05 мл в лунки плексиглазовых

})}аи)ек и в каждук) лунку помещают по од, ому анце}у = ".åj)TLtêàëüíoì положении и

-:ыдг)ржи(30}c pltfloTb до полного испарения (ас3 Вора.

Далее полученные сенсибилизированrtbI(ЛаНцЕТЫ СтЕрИЛЬНО уПаКОВЫВаЮт И ПрОI3f рчю", их специфическую активность по кожному тестирова}4ик) в прик-тесте согласlIo методич«.с«:Itx рекол1е}4даций. При этОм

}олуч 3}OT с ()}«сибилизированный ланцет, об)};)да} )(ци}11 (. ()е(}(1 })и «еской активностью у

;)а(}и««4тс)(), «)«f!f:) в(1)ельных к пыльце амброз«)}1(у ..:-Ilt из 5-)и «)бследовл}}}}ь}х пациентов о I t 10 I«HI. резко I! оло.«,ит « л ьн ые и очень резкo () "о)«}1}ель «ы«})е,)кции} (т(3()лица),со сро .,",:" рл .:. ния в т "I(!I}11«. (()да, У больных.

:,е «усз («.);ел нь}х; рлстительнои )ьftbl!p.

ИР э,)р»; }1(.(г)(1(о !Io положительных прикI:.CT0l3 .PI«(1I)L1 IL13L1j)Of«3HHbfbtL1 ЛЯНЦРТа (ли.

II р Ll м Р р 2. Г} Особ осущес)вляют так же, га}: ft I)pit(1«1 за исключениеM того, I1o беру II,. tl)poxó липфильнг) высушенного

aлпер((нл 1,6) мг и 1 мл 0.125 « 1 раствора г)ь«каем(-0««ат-3 амм(HI1>1

При э г)м полу «а}с)1 сенсибилиэирован} } }, Й "а н цс! } .,) Г)(} ад 3}o«(L1и специфической ,)ктивнг)01„}0 у ()аци«)нтов. чувствительных к

II} }ль(. г --:>лб;)0.3}t 1 }, 4-х L13 5) 7L1 ОбслеpoBBH

«4 «.Ix })ОЙ,,, -, ы «, 0 Ioжи1 ель} } ы«з рРэко по}10 ж(13« }.}},} : ре,зкци}и} ()абли}(а 1) со сроком

:и- «ения . од. У больных нечувствительI„ °::;to л},tlo}1 пыльце. Hp. Эарегистрирог, )t-:;;ол(): ительных прик-тестов с

:;0tl«L билизир00а(}}«btл1и ланцетам(1

II р и л1 е р .3. (по(;об ()сy )цес}вляют так жp, vак я };римере 1 эа to) .Ttto««f3}(LI(того

«Io б«ру(««ав«OK y лис 4,ильн() t)bl(:óшеtlttofQ

«(} PI>; ен» 2).6 м((«1 мл I} 125 N рас)вора

Ь}1ка})г)она) а аммония Г}ри этом получают г(.}}сиб} ли )E1poB31«ttt}L«43}IILPT Обладак)щий .() "IIL4«tLt )вской л}«3(л}3}}()(;ть}0 у пациентов, I/f3(;3 (tI1T(ftüных r. (1 }л},це амброз}1и (f 5-ти и - . 5-ти )6)oft «) t(3P) tt t«bfx бол ьн ы х о (мечРны

It()",«) t:!ëгРл. }««л.; ррлкции} ((аб) ц 1} ) .-.и»:пл« . }1;)} « г (14 1 I ()д У 6oль

55 ных, нечувствительных к растительной пыльце, не зарегистрировано положительных прик-тестов с сенсибилизированными лан цетами.

Пример 4. Способ осуществляют так же, как в примере 1 за исключением того, что берут навеску лиофильно высушенного аллергена 2,8 мг в 1 мл 0,125 N раствора бикарбоната аммония. При этом получают сенсибилиэированный ланцет с резко выраженной аллергенной активностью (у 5ти иэ 5-ти обследованных отмечены очень резко положительные реакции, причем у

2-х пациентов развился лимфангоит(таблица), что делает нецелесообразным использование этой навески при сенсибилизации ланцета.

Пример 5. Способ осуществляют так же как в примере 1 эа исключением того, что берут навеску лиофильно высушенного аллергена на 1 4 мг а 1 мл 0 125 N раствора бикарбоната аммония, При этом получают сенсибилиэированный ланцет, который не обладал аллергенной активностью в достаточной степени (у 2-х из 5-ти обследованных отмечены положительная и резко положительная реакции) (таблица). что делает нецелесообразным использование этой навески при сенсибилизации ланцета.

Пример 6. Способ осуществляют так же, как в примере 1, за исключением того, что вместо пыльцы амброзии берут пыльцу ежи, в дальнейшем используя соотношения навески лиофильно высушенного аллергена (мг) и 0,125 N раствора бикарбоната аммония (мл) 2,0:1.0.

При этом получают сенсибилизированный ланцет. обладающий специфической активностью у пациентов чувствительных к пыльце ежи (у5-ти из 5-ти обследованных пациентов отмечены резко положительные и очень резко положительные реакции) со сроком хранения в течение года. У больных, нечувствительных к растительной пыльце. не зарегистрировано положительных приктестов с сенсибилизированными ланцетами,.

Предлагаемый способ сенсибилизации ланцета обеспечивает: воэможность получения специфически активного. стабильного и стандартного сенсибилизированного ланцета, сохраняющего свои свойства в течеНИР Года, Формула изобретения

Способ сенсибилиэации ланцета для диагностики поллиноэа. включающий нанесение аллергена на ланцет с последующим высушиванием, о т л и 4 а ю шийся тем. что, с целью обеспечения специфической активности стандартности и стабильности

1825620 при кожном тестировании, аллерген раство- стерилизуют фильтрацией, а после нанесеряют в 0,125 N растворе бикарбоната аммо- ния аллергена на ланцет выдерживают до н и я в соот н о ш е н и и 1. 6-2,6 м г; 1 мл, полного испарения раствора.

Результаты изучения специфической активности сенсибилиэированных ланцетов

Примечание

Не соответствует требованиям НТД

Не соответствует требованиям НТД

У всех больных кожные пробы вчень резко выражены: 12-15 мм с псевдоподиями, у 2-х больных развился лим агоит.

Составитель Н. Иллютович

Редактор С. Кулакова Техред М,Моргентал Корректор С. Патрушева

Заказ 2297 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Соотношение лиофилиэированного аллергена (мг) и бикарбоната аммония, мл

1,4. 1

1,6:1

2,0:1

2,6:1

2,8:1

Количество пациентов, которым . поставлены кожные пробы (приктест) с сенсибилиэированными ланцетами

Количество больных с положительными кожными пробами