(s)(+)-2-этокси-4- @ n-[1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1- бутил]-аминокарбонилметил @ -бензойная кислота или ее гидрат, или фармацевтически переносимая соль, обладающие гипогликемическим действием

 

Использование: в качестве веществ, обладающих гипогликемическим действием. Сущность изобретения: продукт - (S)X+)-2- этокси-4-{М-{Н2-пиперидино-фенил)-3-ме тия-1 -бутил - аминокарбонил метил бензойная кислота; т.пл. 130-131 °С.а о20 +7,45° (с 1,06 в метаноле). Выход 87,7%. Реагент 1; сложный эфир (3)-2-этокси-4- М- /1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил/ аминохарбонилметил}-бензойной кислоты. Реагент 2: неорганическая или органическая кислота, или гидрокси натрия или калия , или катализатор гидрирования. Условия реакции: в среде органического растворителя. 2 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 07 D 295/12

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 5001104/04 (22) 29.07.91 . (46) 30,07.93. Бюл. N. 28

:P1) Др. Карл Томэ, ГмбХ (DE) (72) Вольфганг Грелль, Андреас Грайшель, Габриэле Цан, Михаэль Марк, Хансерг . Кнорр, Экхард Руппрехт и Ульрих Мюллер (0E) (56) Патент Е Р М 0147850, кл. C 07 D 295/12, 1989. (54) (S)(+)-2-ЭТО КСИ-4-{N-(1-(2-П ИП Е P ИДИНО-ФЕНИЛ)-3-МЕТИЛ-1-БУТИЛ)- АМИНОКАРБОНИЛМЕТИЛ}-БЕНЗОЙНАЯ

КИСЛОТА ИЛИ ЕЕ ГИДРАТ, ИЛИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПЕРЕНОСИМАЯ СОЛЬ, ОБЛАДАЮЩИЕ ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКИМ

ДЕЙСТВИЕМ

Изобретение относится к новому соединению, имеющему фармакологическое действие, в частности к (S)(+)2-этокси-4-{й-(1-(2-.пиперидино-фенил)3-метил-1-бутил) аминокарбонилметил)-бензойной кислоте, ее гидрату или физиологически переносимой соли, имеющим гипогликемическое действие, Известно, что производные бензойной кислоты, напр., рацемат 2-этокси-4-{Щ1-(2пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил) аминокарбонилметил)-бензойной кислоты формулы .

Ъ г

СН

I сн, 1,.н

C-NH-Со-СН2 )-СООН

ОС2Н

„„533,„, 1831481 А3

2 (57) Использование: в качестве веществ, обладающих гипогликемическим действием.

Сущность изобретения: продукт — (S))(+)-2этокси-4-{N-(1 2-и иперидино-фен ил)-3-ме тил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойная кислота; т,пл. 130-131 С,(а )О

+7,45 (с = 1,06 в метаноле), Выход 87,7 .

Реагент 1: сложный эфир (3)2-этокси-4(й/1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил / аминокарбонилметил)-бензойной кислоты, Реагент 2: неорганическая или органическая кислота, или гидрокси натрия или калия, или катализатор гидрирования.

Условия реакции: в среде органического растворителя. 2 ил. и его физиологически переносимые соли обладают гипогликемическим действием.

Цель изобретения — получение нового производного бензойной кислоты, обладающего повышенной эффективностью по сравнению с вышеназванным рацематом.

Поставленная цель достигается (S)-анантиомером 2-этокси-4-{N-(1-2пиперидино-фенил)3-метил-1-бутил) м аминокарбонилметил)-бензойной кислоты, ф ее гидратом или физиологически переносиу ъ мой солью. (S)-энантиомер получают следующим образом. а) Взаимодействие (Я-амина формулы

1831481 3 СН3 g

СН сн, (t) ! н

С вЂ” МН2

NQ с карбоновой кислотой общей формулы

ЙООС-СН В (П, ОС2Н5

15 где W означает карбоксильную группу или снабженную защитным радикалом карбоксильную группу, 20 или с ее получаемыми, в случае необходимости,1п з!м, реакционноспособными производными, и, в случае необходимости, последующее отщепление защитного рэдикала. 25

В качестве. реакционноспособного производного соединения общей формулы (й) можно использовать, например, его сложные эфиры, например, сложный метиловый. эфир,.сложный этиловый эфир или.сложный ® бензиловый эфир, его сложные тиаэфиры, например, сложный метилтиоэфир или сложный этилтиоэфир, его галогениды, например, хлорангидрид кислоты, его ангидриды или имидазолиды. 35

Взаимодействие целесообразно осуществляют в среде растворителя, например, метиленхлорида, хлороформа, четыреххлористого углерода, простого эфира, тетрагидрофурана, диоксана, бензола, толуола, 40 ацетонитрила или диметилформамида, в случае необходимости, в присутствии активирующего кислоту агента или обеэвоживающего агента, например, в присутствии сложного этилового эфира хлормуравьино- 45 вой кислоты, сложного изобутилового эфира хлормуравьиновой кислоты, тионилхлорида, треххлористого фосфора, полупятиокиси фосфора. N,N -äèöèêëîãeêñèëêàðáîäèèìèда, N,N -дициклогексилкарбодиимида и N ®

-оксисукцинимида, N,N -карбонилдиимидазола или N,N --тионилдиимидазола или грифенилфоисина и четырвххлористого углерода, или активирующего аминогруппу агента, например, треххлористого фосфора, 55 и, в случае необходимости, в присутствии неорганического основания, например, карбоната натрия, или третичного органического основания, например, триэтиламина или пиридина, которые одновременно могут служить в качестве растворителя, при температуре -25 — 250 С, предпочтительно, однако, между -10 С и температурой кипения используемого растворителя. Взаимодействие также можно осуществлять без растворителя, Кроме того, образующуюся во время взаимодействия воду можно удалять путем ацеотропной перегонки, например, путем нагревания с толуолом на водоотделителе или путем добавления сушильного агента, например, сульфата магния или молекулярного сита.

Возможно необходимое последующее отщепление защитного радикала предпочтительно осуществляют путем гидролиза, целесообразно или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например,,гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси метанола и воды,. этанола, смеси этанола и воды, смеси воды и изопропанола. или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120 С, например при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси.

Используемый в качестве защитного радикала трет.бутил можно отщеплять термически, в случае необходимости, в среде инертного растворителя, например, метиленхлорида, хлороформа, бензола, толуола, тетрагидрофурана, диоксана или ледяной уксусной кислоты, и предпочтительно сильной кислоты, например, трифторуксусной кислоты, бромистого водорода. и-толуолсульфокислоты,сернойкислоты, фосфорной кислоты или полифосфорной кислоты.

Используемый в качестве защитного радикала бензил можно отщеплять путем гидрогенолиза в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложного этилового эфира уксусной кислоты, диоксаиа или диметилформамида. б) Расщепление ($)-соединения общей формулы

CH Сн

3 3

1 сн

,.н г с-мн-со-сн A

N . OC2H5

1831481 где А означает группу, путем гидролиза, термолиза или гидрогенолизэ переводимую в карбоксильную группу.

Поддающейся гидролиэу группой могут являться, функциональные производные карбоксильные группы, например, ее незамещенные или зэмещенные амиды, сложные эфиры, сложйые тиоэфиры, сложные ортозфиры, простые иминоэфиры,амидины или ангидриды, нитрил, тетраэолил, незамещенный или замещенный 1,3-оксозол-2-ил или 1,3-оксэзолин-2-ил, отщепляемой путем термолиаа группой могут быть, сложные

10 эфиры с третичными спиртами, например, сложный трет,бутиловый эфир, э отщепляе- 15 мой путем гидрогенолиза группой могут являться аралкилы, например, бензил. а

Гидролиз целесообразно осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основэния, например, гидроокиси нэтрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, смеси воды и метанола, 25 этэнолэ, смеси воды и зтанолэ, смеси воды и изопропанола или смеси воды и диоксэнэ, при температуре -10-120 С, например. при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси. 30

В этом случае, если в соединении ябщей формулы (Ill) А означает нитрил или амино° кэрбонил, то данные группы можно переводить в карбоксильную группу 100 -ной осфорной кислотой, при температуре 100- 35

80ОС, предпочтительно при температуре

120-160 С, или нитритом, например, нитритом натрия, в присутствии кислоты, например, серной кислоты, причем последнюю целесообразно одновременно используют в 40 качестве растворителя, при температуре 050 С, В том случае, если в соединении общей формулы (П1) А означает, например, трет-бутилоксикэрбонил, то трет-бутил мож- 45 но отщеплять термически, в случае необходимости, в среде инертного растворителя, например, метиленхлорида. хлороформа. бенэола, толуолэ, тетрагидрофурана, диоксэна или ледяной уксусной кислоты. и, предпоч- 50 тительно, в присутствии сильной кислоты, например, трифторуксусной кислоты, бромистого водорода, и-толуолсульфокислоты. серной кислоты, фосфорной кислоты или полифосфорной кислоты, при температуре 0- 55

100ОС, предпочтительно при температуре между 20 С и точкой кипения используемого рэстворителя, В том случае, если в соединении общей формулы (П1) А означает. например, бенэилоксикарбонил, то бензил можно отщеплять путем гидрогенолиза в присутствии катализатора гидрирования, например, пэллэдия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанолэ, смеси метанола и воды, смеси этэнола и воды, ледяной уксусной кислоты, диоксэна или диметилформэмидэ, предпочтительно при темперэтуре 0-50 С, например, при комнатной температуре и водородном давлении 1-5 бэр. в) Взаимодействие (Я)-соединения общей формулы сн с з Нз

СН

СН2 н

ДC NH-СО-СН, rS ц иД он где W — означает карбоксильную группу или элкоксикэрбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкильная часть элкоксигруппы не замещена или замещена фенилом, с соединением общей формулы

Z CHz - СНз М где Z означает нуклеофильно заменяемую группу, например, атом галогенэ, сульфонилоксигруппу, или вместе с соседним атомом водорода диэзогруппу и, в случае необходимости, последующий гидролиз или гидрогенолиз. Взаимодействие целесообразно осуществляют с соответствующим галогенидом, сложным эфиром сульфокислоты или сложным диэфиром серной кислоты, например, этилбромидом, этилйодидом, дизтилсульфатом, сложным зтиловым эфиром и-толуолсульфокилоты или метансульфокислоты. или диаэоэтаном, в случае необходимости, в присутствии основания, например, гидрида натрия, кэрбонэта калия гидроокиси натрия, трет-бутилата алия или триэтиламина, предпочтительно а среде пригодного растворителя, например, ацетона, простого диэтилового эфира, тетрагидрофурана, диоксэна, пиридина или диметилформамидэ. при температуре 0100ОС, предпочтительно при темперэтуре

20-50 С.

В том случае, если в соединении общей формулы (IV) W означает карбоксильную группу, то ее можно переводить в соответствующий сложный эфир.

В случае необходимости последующий гидролиз осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты. сер1831481

10 щей формулы (VI) 15

40

55 ной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например р, гидроокиси натрия или калия. в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола. смеси воды и метанола, этанола, смеси воды и этанола, смеси воды и изопропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120 С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси, или последующий гидрогенолиэ осуществляют в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложного этилового эфира уксусной кислоты, диоксана или диметилформамида, при водородном давлении 1-10 бар. г) Энантиоселективное восстановление соединения общей формулы

/ где W означает карбоксильную группу или алкоксикарбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкильная часть алкоксигруппы не замещена или замещена фенилом, а

Y — группа формулы

rCH3 Нэ

H СН CH H — C-NH —, — С вЂ” NH—

II

СН3

СН

HAH

СН2

-С-N— в случае необходимости, с последующим гидролиэом.

Восстановление предпочтительно осуществляют водородом в присутствии пригодного хирального катализатора гидрирования в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, изопропанола, этилацетэта, диоксана, тетрагидрофурвна, смеси метанола и тетрагидрофурана, смеси метанола и метиленхлорида, смеси зтанола и метиленхлорида или смеси изопропанола и метиленхлорида, при температуре 0-100 С. предпочтительно, однако, при температуре

20-50 С, и водородном давлении 1-1000 бар, предпочтительно 5-100 бар, целесообразно с добавлением 0,1-5;ь, предпочтительно

0,3-1, тетраиэопропилата титана (IV), и, предпочтительно, с исключением кислорода воздуха. Предпочтительно восстановление осуществляют с (Z)-формой соединения обВ качестве хиральног0 катализатора гидрирования можно использовать соот ветствующие комплексы лиганда металла, например, Rv(OCO-СНз)2((5)-8 INAP), Я02С!а((S)-В%АР)2 х й(С2На)э. Rh((S)-B INAPNBD)CI04 или Rh((+NORPHOS-COD)BF4, При каталитическом гидрировании бензилоксикарбонил можно одновременно восстанавливать и переводить в карбоксильную группу, В случае необходимости последующий гидролиэ осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например, гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды. метанола, смеси метанола и воды, этанола, смеси этанола и воды, смеси воды и иэопропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120 С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси. д) Окисление ($)-соединения общей формулы Н3 CH3

CH

СН2 (н уС NH CO СНЩ Ц((Vl )

ОС2Н5 где W означает группу, путем окисления переводимую в карбоксильную группу, Такой поддающейся окислению группой может являться, например, формил и его ацеталы, оксиметил и его простые эфиры, незамещенный или замещенный ацил, например, ацетил, хлорацетил, пропионил, малоновая кислота-(1)-ил или сложный малоновый эфир-(1)-ил.

Взаимодействие осуществляют агентом окисления в среде пригодного растворителя, например, воды, ледяной уксусной кислоты, метиленхлорида. диоксана или простого диметилового эфира гликоля, при температуре 0-100 С, предпочтительно. однако, при

1831481

10 нии 1-10 бар.

Получаемый таким образом предлагае15 мый (S)-энантиомер, обладающий оптиче20

30

35 или лизин.

40 температуре 20-50 С. Предпочтительно же взаимодействие осуществляют окисью серебра в натровом щелоке, двуокисью марганца в ацетоне или метиленхлориде, перекисью водорода в натровом щелоке, бромом или хлором и натровом щелоке или растворе едкого кали, или трехокисью хрома в пиридине или пиридинхлорхромате. е) Разделение смеси, состоящей из любого количества (S)-энантиомера общей формулы

СН3 Сн

CH и любого количества (R)-энантиомера общей формулы

СНН3 CHHü . г

CH ! Н, (,н — NH-со-сн - -хх (1х ос,н, где W — означает карбоксильную группу ипи алкоксикарбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкильная часть алкоксигруппы не замещена или замещена фенилом, предпочтительно смеси с соотношением (S)- и (й)-энантиомеров 50:50, через их диастереомерные аддукты, комплексы или соли, в случае необходимости, с последующим гидролизом или гидрогенолиэом, Разделение предпочтительно осущест. вляют путем хроматографии на колонке или жидкостной хроматографии под давлением с помощью образования диастереомерных аддуктов или комплексов на хиральной среде.

8 случае необходимости последующий гидролиз осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты. серной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например, гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси метанола и воды, этанола. смеси этанола и воды, смеси воды и

55 изопропанола или смеси воды и диокса»а, при температуре -10-120 С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси, или последующий гидрогенолиз осуществляют в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложно о этилового эфира уксусной кислоты, диоксана ипи диметилформамида. при водородном давлеской чистотой по меньшей мере 90, путем фракционированной кристаллизации можно переводить в (S)-энантиомер, обладающий оптической чистотой по меньшей мере

95, предпочтительно 98-100 .

То же самое относится и к предлагаемым (S)-соединениям формул (III), (IV) и (Vll), в частности к их сложным эфирам.

Получаемый таким образом предлагаемый (5)-энантиомер неорганическими или органическими кислотами или основаниями можно переводить в его физиологически переносимые соли. При этом в качестве кислот можно испольэовать, например, соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, молочную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту или фумаровую кислоту, а в качестве основания - гидроокись натрия, калия или кальция, циклогексиламин, этанопамин, диэтаноламин, триэтаноламин, зтилендиамин

Используемые в качестве исходных соединений соединения формул (I)-(IX) или известны из литературы, или их получают с помощью известных методов. (S)-эмин формулы (I) можно получать из соответствующего рацем еского амина путем разделения рацематов, например, путем фракционированной кристаллизации диастереомерных солей пригодными оптически активными кислотами, предпочтительно N-ацетил-L-глутаминовой кислотой, и, в случае необходимости, перекристаллизации с последующим разложением солей, или путем хроматографии на колонке или жидкостной хроматографии под давлением на хиральных фазах, в случае необходимости в виде производного ацила, ипи путем образования диастереомерных соединений, их разделения и последующего расщепления.

1831481

20

35

50

Кроме того, ($)-амин формулы (I) можно получать путем энантиоселективного восстановления водородом в присутствии пригодного хирального катализатора гидрирования, исходя из соответствующего

N-ацил-кетимина или энамида, целесообразно с добавлением 0,1-5% тетраизопропилата титана, и, в случае необходимости, последующего отщепления ацильного радикала, например, формила или ацетила, или путем диастереоселективного восстановления соответствующего хирально замещенного у атома азота кетимина или гидразина, а именно водородом в присутствии пригодного.катализатора гидрирования, целесообразно с добавлением 0,1 5% тетраизопропилата титана, и, в случае необходимости, последующего отщепления хирального вспомогательного радикала, например, ($)-1-фенэтила путем каталитического гидрогенолиэа, или путем диастереоселективного присоединения соответствующего металлоорганического соединения, предпочтительно соединения Гриньяра или лития, к соответствующему хирально замещенному у атома азота альдимину, в случае необходимости, с добавлением 0,1-10% тетраизопропилата титана, последующего гидролиза и, в случае необходимости, разделения получаемых диастереомеров и последующего отщепления хирального вспомогательного радикала, например, (R)-1-фенэтила путем каталитического гидрогенолиза, и, в случае необходимости, его можно подвергать образованию соли пригодными с последующим разложением соли, в результате чего можно достичь высокой степени чистоты энантиомера.

Используемые в качестве исходных соединений соединения общих формул (П!), (IV) и (Vll) получают путем взаимодействия (S)-амина (I) с соответствующей карбоновой кислотой или ее реакционноспособным производным и, в случае необходимости, последующего отщепления используемого защитного радикала, Используемое в качестве исходного соединения соединение общей формулы (Vl) получают путем ацилироваиия соотввтствующего иминосоединения или его металлоорганического комплекса соответствуюЩей карбоновой кислотой или ее реакционноспособным производным, в случае необходимости, с последующим отщеплением сложного эфира.

Новый ($)-энантиомвр является практически нетоксичным. Например, в течение 14 дней после однократной аппликации через рост 1000 мг на кг (в виде суспензии в 1%ной метилцеллюлоэе) у 5-крыс- амцов и 5 крыс-самок не умер ни один из животных.

Благодаря фармакологическим и фармакокинетическим свойствам предлагаемый (S)-энантиомер и его физиологически переносимые соли пригодны для лечения сахарного диабета. Для этого ($)-энантиомер и его физиологически переносимые соли, в случае необходимости, вместе с другими активными веществами, можно. вводить в принятые лекарственные формы, например, таблетки, драже, капсулы, порошки, суппозитории, суспензии или инъекционные жидкости. При этом одна доза для взрослого человека составляет 0,1-20 мг, предпочтительно 0,25-5 мг, в частности 0,25, .0.5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0 или 5,0 мг, причем такую дозу апплицируют раз, дважды или трижды в день.

Фармакологические опыты, Оба энантиомера известного рацемата, а именно (S)(+)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пи перидино-фенил)-3-метил-1-бутил1 аминокарбо- нилметил}-бензойная кислота (в нижеследующем; "E S") и (R)(+2-это кси-4-(Иf1-(2-пиперидино-фенил)-Э-метил-1-бутил1 аминокарбонилметил)-бензойная кислота (в нижеследующем: "ER") исследовали в отношении их гипогликемического действия у к рыс-самок.

Неожиданно выявилось, что Е$ является эффективным энантиомером, и что его действие у крысы сохраняется больше чем в течение 6 ч.

Исходя из этих результатов опытов у крыс для человека предлагается использовать лишь Е$, благодаря чему дозу можно снижать на 50% по сравнению с дозой рацемата. Это и сравнительно большая длительность действия подтвердились в опытах на людях. Кроме того, в результате опытов на людях выявилось, что ES обладает неожиданными фармакокинетическими свойствами, которые. не могли предвидеть, исходя из данных по рацемату. Таким образом, ES имеет неожиданные терапевтические преимущества по сравнению с рацематом (в нижвследующем; "РАЦ").

Неожиданные результаты опытов на людях следующие: а) Концентрация Е$ в крови быстрее приближается к нулю, чем койцентрация

РАЦ, даже при одинаковой абсолютной доэв, чего .не ожидали из-за сравнительно большой длительности действия. б) По отношению к достигаемому снижению содержания сахара в крови появляется значительно меньшая концентрация

1831481

5

20

35

45

50 ооеринений, примеры 11-16 — получение жи

ES в плазме крови чем ожидали бы при

50 -ном снижении дозы РАЦ. в) После аппликации ES гипогликемическое действие наблюдается быстрее чем после аппликации РАЦ. .Решающая разница между двумя знантиомерами в.том, что неожиданно эффективный энантиомер, т.е., ES, несмотря на сравнительно большую длительность действия элиминируется значительно быстрее, чем неэффективный энантиомер ER, что показано на фиг. 1 и 2. Те., после подачи рацемата неэффективный энантиомер ER является излишним балластом не только в отношении одинаковой с ES концентрации в плазме крови, но и иэ-за s неожиданной степени больших максимальных и постоянных концентраций. Это при аппликации, например, одной таблетки, содержащей 2 мг

РАЦ, и одной таблетки, содержащей 1 мг ES, соответственно, в опыте у 12 и 6, соответственно, людей сказывается следующим образом. Максимальные концентрации составили 84+25 и 28 18 нгlмл, соответственно, концентрации по истечении 4 ч составили 19 8 и 0,7 +- 1,0 нг/мл, соответственно, концентрации по: истечении 5 ч составили 13 + 6 и 0,3 + 0,7 нг/мл, соответственно, а концентрации по истечении 6 ч составили 10 6 и 0,3 «+. 0;7 нгlмл, соответственно.

Неожиданно быстрое начало снижения содержания сахара в крови после аппликации Е$ по сравнению с РАЦ является особенно выгодным для больных диабетом потому, что оно позволяет оптимально контролировать данную болезнь.

Таким образом, неожиданное преимущество ES по сравнению с РАЦ в том, что избегают ненужно высокой и длительной нагрузки организма соответствующим веществом, что при длительном лечении, которое необходимо в случае сахарного диабета, имеет важное значение.

Опыты на людях показывают, что новый ($)-энантиомер как обладающее гипо ликемическим действием вещество благодаря неожиданно быстрой элиминации из крови, непредвиденной ввиду сравнительно большой длительности действия, по сравнению с РАЦ обладает значительными преимуществами, далеко выходящими за рамки

"обычных" преимуществ энантиомера перед его рацематом, в частности преимуществом воэможности 50 )(,.-ного снижения .55 дозы, В нижеследующем изобретение поясняется с помощью примеров, причем примеры 1-10 поясняют получение исходных промежуточных соединений, а примеры 1722 — получение новых соединений. (S)-энантиомера и(В)-энантиомера.

Пример 1.(S)-1-(2-Пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутиламин.

К размешиваемому раствору 122 г (0,495 моль) рацемического 1-(2-пиперидино-фенил}-3-метил-1-бутиламина в 1000 мл ацетонаа добавляют 93,7 r ((00,495 моль)

N-ацетил-L-глутаминовой кислоты. Нагревают на паровой ванне с обратным холодильником и порциями добавляют метанол (всего примерно 80 мл) до получения прозрачного раствора. Дают охлаждаться и оставляют стоять при комнатной температуре в течение ночи, затем полученные кристаллы отсасывают, дважды промывают 200 мл ацетоном температурой -15ОС и сушат.

Полученный продукт (98,8 г, точка плавления: 163-166 С, (а )D = +0,286 (с = 1 в метаноле)) перекристаллизуют из 1000 мл ацетона при добавлении 200 мл метанола, в результате чего получают (S)-1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутиламин в виде аддитивной соли N-ацетил-L-глутаминовой кислоты.

Выход: 65,1 г (60,4 теории), точка плавления: 168-171 С

Рассчитано,g: С 63,42; Н 8,56; N 9,65, Найдено, g: С 63.64; Н 8,86; N 9,60. (а)о =+0.357 (с = 1 в метаноле)

Свободный амин получают в виде масла путем выделения, например, из раствора гидроокиси натрия или аммиака, экстракции, например, из толуола, простого эфира, этилацетата или метиленхлорида, и сушки, фильтрации и упаривания экстракта в вакууме. (S)-конфигурацию амина доказывают следующим образом.

Взаимодействие амина c (S )1-фенэтилизоцианатом в простом эфире с получением соответствующего производного мочееины (точка плавления; 183-184ОС, (а)п = -2,25 (с

- 1 в метаноле)), выращивание кристаллов из смеси этанола и воды,=оотношение 8:1) и последующий ренгеноструктурный анализ, который показывает (S,S )-конфигурацию производного мочевины и таким образом ($)-конфигурацию используемого амина.

Чистоту энантиомера определяют следующим образом. .1. Ацетилирование пробы амина с 1,3 эквивалентами ацетан гидрида в ледя ной уксусной кислоте при температуре 20 С в течение ночи.

2. Исследование производного N-ацетила (точка плавления: 128-132 С) путем дкостной хроматографии под давлением

1831481 с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Бейкер, в которой (S)-N-(3,5-динитробензоил)-3-фенил-глицин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем (величина зерен: 5 мкм, шариковидный, величина пор

60 А, длина колонки:250 мм, внутренний диаметр; 4,6 мм, элюент: смесь п-гексана и .изопропанола в соотношении 100:5, скорость течения: 2 мл в минуту, температура:

20 С; УФ-детекция при 254 нм.

Найдено: .

Пик 1 (R); пик 2 (S) = 0,75 : 99,25 чистота энантиомера = 98,5% ($).

Эфирным раствором хлористого водо10 рода (S)-аин можно переводить в его гидрат дигидрохлорида.

Точка плавления: 135-145 С (разложение)

Рассчитано (х Н20), С 56;99; Н 8,97;

20 и 8 31; CI 21,02

Найдено, С 56,85; Н 8,93; N 8,38;

O 21,25. (a)p =+26,1 (с = 1 в метаноле) Пример 2, N-Ацетил-N (1-(2-пипери25 дино-фенил)-3-метил-1-бутен-1-ил)-амин

К раствору 20 r. (81,8 ммоль) свежеприготовленного изобутил-(2-пиперидино-.фенил)-кетимина в 200 мл ацетонитрила при . комнатной температуре добавляют 4,7 мл (81,8 ммоль) ледяной уксусной кислоты, 25,7

30 г (98,2 ммоль) трифенилфосфина, 34,2 мл (245 ммоль) триэтиламина и 7,9 мл (81,8 ммоль) четыреххлористого углерода и размешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем упаривают в вакууме и распределяют между этилацетатом и водой.

Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на ко40 лонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении

10:1), причем элюируется сперва (Е)-форма, а затем (Z)-форма. (Е)-форма .

Выход: 6,1 г (26% теории), точка плавления: 135-137 С (из смеси этилацетата.и петролейного эфира) Рассчитано,ф>, С 75,48; Н 9,15; N 9.78

Найдено,g: С 75,47: Н 9,35; И 9,70.

50 (Z}-форма:

Выход: 3,1 r (13% теории}, точка плавления: 140-143 С (из этилаце-. тета)

Рассчитано,%: С 75,48; Н 9,15; И 9.78. 55

Найдено, (: С 75,56; Н 9,30;; N 9,79.

Пример 3. N-Ацетил-N (1-(2-пиперидино-фенил)-метил-1-бутен-1-ил} амин.

К размешиваемому раствору 44 г (0,18 моль) свежеприготовленного изобутил-(2пиперидино-фенил)-кетимина в 440 мл толуола при внутренней. температуре О С каплям добавляют 17 мл (0,18 ммоль} ацетангидрида. Продолжают перемешивать при температуре 0 С в течение 3 ч, затем при комнатной температуре в течение 15 ч, затем упаривают в вакууме, остаток от упаривания растворяют в этилацетате и повторно встряхивают водным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу сушат, фильтруют и упаривают в вакууме, Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем(элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении-5:1), причем элюируется сперва (Е}-форма, а затем (Z)-форма. (Е)-форма:

Выход: 3,0 г (5,8% теории), (Z)форма:

Выход: 17,8 r (34,5 теории), точка плавления: 139-141 С (из этилацетата)

Рассчитано,%: С 75,48; Н 9,15; N 9,78.

Найдено, j,: С 75,68, Н 8,99; N 9,86, Пример 4. N-ацетил-N-f(S)-1-(2-пиперидино-фен ил}-3-метил-1-бутил-1)-амин, 0,57 г (1,99 ммоль) (Z)-N-ацетил-N-(1-(2пиперидино-фен ил}3-метил-1-бутен-1-ил)амина, имеющего точку плавления 139141 С, растворяют в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1) в среде аргона, затем его добавляют к раствору 16,8 r (1моль. ) катализатора Ноери (полученного из (RU(COD)CIz)> с (S)-2,2 -бис(дифенилфосфино)-1,1-бинафтилом, триэтиламином и ацетатом натрия) и 3;4 мг (0,5 моль. ) тетраизопропилата титана в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1). Реак-. ционную смесь подают в вакуумированный при 10 мбар автоклав. Повторно промывают водородом при давлении 4 бар, и при температуре 30 С и давлении 1 00 бар гидрируют до прекращения поглощения водорода (170 ч). Затем коричнево-красный раствор упаривают в вакууме, остаток от упаривания кипятят с обратным холодильником с 30 мл и-гексана и в горячем состоянии нерастворимые компоненты удаляют путем фильтрации, При охлаждении фильтрата происходит кристаллизация. . Выход: 0,31 г (54% теории), Точка плавления; 127-131 С, Чистота энантиомера - 82 $ (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см,пример 1);

Из полученного при кипячении с 30 мл

Il"råêñàí8 нерастворенного компонента путем дальнейшего кипячения с п-гексаном, 1831481 фильтрации и выкристаллизовывания из гексанового раствора получают 14 рацемического N-ацетил-амина; имеющего точку плавления 154-156 С.

Пример 5.(S)-1-(2-пиперидино-фе- 5 н ил)-3-метил-1-бутил а мин, i г (3,47 ммоль) N-ацетил-N ((S)-1-(2.-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)-амина, имеющего точку плавления 128-133 С, и чистоту 994%, в 10 мл концентрированной 10 соляной кислоты в течение 5,5 ч нагревают с обратным холодильником, охлаждают и выливают в смесь концентрированного аммиака. и льда. Дважды экстрагируют этилацетатом, органическую фазу промывают. 15 водой, сушат, фильтруют и упаривают в вакууме.

Выход: 0,84 г (98,8 теории) масляного амина, В результате реацетилирования с 0,42 20 мл (1,3 эквивалентными), ацетангидрида в

8,4 мл ледяной уксусной кислоты при комнатной температуре в течение ночи, упаривания в вакууме, распределения остатка от упаривания между этилацетатом и насы- 25 щенным водным раствором бикарбоната натрия, сушки, фильтрации и упаривания органического экстракта в вакууме получают 0,83 г(84,7% теории) N-ацетил-N-j(S)-1-(2пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутен-1-ами 30 на.

Точка плавления: 130-132 С, чистота энантиомера 99,4%.

Пример 6, Сложный этиловый эфир

2-этокси-4-jN-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-м 35 етил-1-бутен-1-ил)- аминокарбонилметил)бензойной кислоты, Получают аналогично примеру 2 из изобутил-(2-пиперидино-фенил)-кетимина и 3этокси-4-этоксикарбонил-.фенилуксусной 40 кислоты. Очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент. смеси толуола и ацетона в соотношении

10:1), причем элюируется сперва (Е)-форма, а затем (Z)-форма. 45 (Е)-форма . м

Выход: 4 теории, точка плавления; 101-103 С.

Рассчитано,g: С 72,77: Н 8,00; N 5,85.

Найдено, : С 72,74; Н 7,78; N5,86. 50 (Д-форма:

Выход: 28,17ь теории, точка плавления: 124-127 С (иэ смеси петролейного эфира и толуола в соотношении 5:1). 55

Рассчитано,g: С 72,77, Н 8,80; Й 5,85.

Найдено, : С 72 90: Н 7,86; N 5.83.

Пример 7. Щ($ )-1-фенэтил)-N-(($)-1(2-пиперидыно-фенил)-3-метил-1-бутил)-ам ин.

17 г (49 ммоль) М-(($ )-1-фензтил)-изобутил-(2-т)иперидино-фенил)-кетимина, имеющего точку плавления 150-155"С при 0,3 торр и полученного из изобутил-(2-пиперидино-фенил)-кетона и (S )-1-фенэтил-амина (чистота = 99,6%) в толуоле и триэтиламине путем добавления каплями раствора тетрахлорида титана в толуоле, растворяют в 170 мл безводного этанола. Добавляют 1,7 r тетраизопропилата титана и 8 г никеля Ренея и гидрируют при температуре 50 С при водородном давлении 200 бар. По истечении 20 ч добавляют еще раз 8 г никеля гРенея и гидрирут в тех же условиях в течение еще 52 ч. Катализатор удаляют фильтрацией через слой целита с использованием фритты марки G3, и фильтрат упаривают в вакууме.

Выход: 13,1.г(76,6 теории), точка плавления: 152 С при 0,2 Торр

Рассчитано,,4: С 82,23; Н 9,78: N 7,99.

Найденов: С 82,00; Н 10,03; N 7,74.

ja)o =-55,3 (с=1,1 в метаноле)

Чистоту диастереомера определяют путем жидкостной хроматографии под давлением с использованием колонки марки

Лихрозорб RP18 фирмы 3. Мерк; ОЕ; длина колонки: 250 мм, внутренний диаметр: 4 мм, величина частиц: 7 мкм. элюент: смесь метанола, диоксана и 0,1%-ного водного раствора ацетата натрия в соотношении 135;60:5, ледяной уксусной кислотой доведенная до значения рН, равного 405, температура;

23 С, УФ-детекция при 254 нм.

Найдено; Пик 1(S,S): пик2(К,S) =98,4"",ь:

: 1.4%. чистота диастереомера - 97,0 (S,S ).

Пример 8.(S)-1-(2-пиперидино -фенил)-3-метил-1-бутиламин.

12,5 г (36 ммоль) N-(($ )-1-фенэтил)-Nj(S)-.1-(2-п и периди но-фен ил(-3-метил-1-бут ил)амина чистотой 97,07 (S.S ) растворяют в 125 мл воды и 3,6 мл концентрированной соляной кислоты. Добавляют 1,3 г 10 -ного палладия на угле и гидрируют при температуре 50 С и водородном давлении 5 бар.

По окончании поглощения водорода (10 ч) катализатор удаляют путем фильтрации через слой целита. Фильтрат подщелачивают концентрированным аммиаком при добавлении льда и экстрагируют этилацетатом.

Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме.

Выход: 6,4 r (72;1 теории),точка плавления: 115-117 С при 0,44 торр, чистота энантиомера 93,5 ($). (путем жидкостной хроматографии под давлением (после предыруиявго вовтияироввиия). ом. иримвр 1).

1831481

Пример 9. N-f(R )-1-фенэтил)-Mf(S)-1(2-пиперидино-фенил)- 3-метил-1-бутил)амин.

К размешиваемому в ванне при температуре 60 С раствору 27,4 ммоль (4, эквивалента) бромида изобутилмагния в 22 мл безводного тетрагидрофурана каплями добавляют раствор 2 г(6,84 ммоль) N-({R$1-фен этил|-(2-пи перидино-бензальдими на), полученного из эквимолярных количеств 2пиперидино-бензальдегида и (R )1-фенэтиламина тем, что оставляют стоять при комнатной температуре в течение ночи и затем сушат над сульфатом натрия в растворе. простого эфира, в 20 мл безводного тетрагидрофурана. По истечении 18 ч температуру ванны повышают до 80 С, и добавляют еще 2 эквивалента бромида изобутилмагния в 11 мл тетрагидрофурана, Затем по истечении еще 12 ч при 80 С еще раэ добавляют 2 эквивалента раствора бромида изобутилмагния. По истечении примерно 90 ч при температуре 80 С охлаждают, разбавляют избытком концентрированной соляной кислоты и упаривают досуха в вакууме, создаваемом при помощи водоструйного насоса. Остаток от упаривания растворяют в воде и подщелачивают концентрированным аммиаком. Экстрагируют простым эфиром, органический экстракт сушат над сульфатом натрия, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и ацетона в соотношении 95:5).

Выход: 0,20 r (8,3% теории), точка плавления: < 200С, Чистоту диастереомера определяют описанным в примере 7 образом с помощью жидкостной хроматографии под давлением

Найдено: пик 1(В,R ): пик 2 (S,R) =4,4% 95 6% чистота диастереомера: 91,2% (S,R ).

При аналогичном исходном растворе с

2,0 г Шиффово основания и 6 эквивалентов бромида изобутилмагния в смеси толуола и тетрагидрофурана (соотношение: 4:1) и с добавлением 5% тетраизопропилата титана (IV) в результате нагревания при температуре 100 С в течение 60 ч достигают выхода

5% при чистоте диастереомера, равной

97,6% (S,R),, Пример 10, (S)1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил 1-бутиламин.

Раствор 0,15 r (0,428 ммоль) N f(R )-1-фен этил)-М-f(S)-1-(2-пиперидино-фен ил)-3-ме тил-1-бутил)-амина (чистота диастереомера

= 91,2%), 0,47 мл (0,47 ммоль) 1N-соляной кислоты и 1,5 мл воды гидрируют в присут10 фии под давлением (после предыдущего ацетилирования) см, пример 1).

Пример 11. Сложный этиловый эфир ($)2-этокси-4(И-(1 (2-пиперидино-фенил)

15 3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил1 бензойной кислоты.

К раствору 0;47 г (1,91 ммоль) (S)-3-ме,тил-1-(2-пиперидино-фен ил)-3-метил-1-бут иламина (чистота энантиомера = 98,5%) в 5

50

35 ствии 20 мг 10%-ного палладия на угле при температура 50 С и водородном давлении

3,4 бар в течение 5 ч. Фильтруют через кизельгур, подщелачивают концентрированным аммиаком и экстрагируют этилацетатом. Экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме., Выход; 0,066 г (62,8% теории), точка плавления: < 20 С, чистота энантиомера =

87,6% ($) (условия жидкостной хроматограмл безводного ацетонитрила последовательно добавляют 0.48 r(1,,91 ммоль) 3-этокси-4-этоксикарбонил-фенилуксусной кислоты, 0,60 r (2,29 ммоль) трифенилфосфина, 0,80 мл (5,73 ммоль) триэтиламина и 0,18 мл (1,91 моль) четыреххлористого водорода, Размешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем упаривают в вакууме и распределяют между этилацетатом и водой, Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем(элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 10:1).

Выход: 0,71 r (77,3% теории), точка плавления: 110-112 C..

Рассчитано,%: С 72,47; Н 8,39; N 5,83.

Найдено,%; С 72,29 Н 8,42: N 5,80.

Чистоту энантиомера определяют путем жидкостной хроматографии под давлением с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Бейкер, в которой ($)-N3,5-динитробензоил-лейцин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем; величина зерен; 5 мкм, шариковидный, величина пор 60 А, длина колонки: 250 мм, внутренний диаметр: 4,6 мм, элюент: смесь и-гексана, тетрагидрофурана, метиленхлоридя и этанола в соотношении 90:10:1:1, скорость течения; 2 мл в минуту, температура: 20 С, УФ-детекция при 242 нм.

Найдено: Пик 1(й): пик 2($) =0,75%: 99,25% чистота энантиомера - 98,5% (S).

Пример 12, Сложный этиловый эфир ($)2-это кси-4ф-(1(2-пиперидино-фен ил)

3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)бензойной кислоты, К раствору 2,71 r (11 ммоль) безводного ($)З-метил-1 (2-пиперидино-фенил)З-.мет ил-1-бутиламина (чистота энантиомера =

22

21

1831481

98,5%) в 30 мл абсолютного толуола при комнатной температуре добавляют 2,77 г (11 ммоль) 3-этокси-4-зтоксикарбонил-фенилуксусной кислоты и размешивают до получения раствора. Затем добавляют 2,38 г (11,55 ммоль) N,N -дициклогексил-карбодиимида и размешивают при комнатной температуре, По истечении 24 ч добавляют еще 0,54 r (2,14 ммоль) 3-этокси-4-зтоксикарбонил-фенилуксусной кислоты и 0,48 г (2,33. ммоль) N,N -дициклогексил-карбодиимида и размешивают в течение ночи, Затем охлаждают до внутренней температуры

+5 С, осадившееся вещество фильтруют на нутче и промывают 5 мл толуолом. Объединенные фильтраты от толуола сгущают в вакууме до обьема примерно 10 мл.

Полученный таким образом раствор нагревают на паровой ванне, и к нему порциями добавляют петролейный эфир {всего 55 мл) до останицейся мутности, Охлаждают льдом, причем происходит кристаллизация. Фильтруют на нутче и сушат при температуре

75 С и 4 торр. Полученный продукт (4,57 г, точка плавления 111-112 С, чистота энантиомера = 98,9%) суспендируют в 50 мл петролейного эфира. Нагревают на паровой ванне и порциями добавляют толуол (всего

8 мл) до получения раствора, Затем охлаждают льдом, кристаллизат фильтруют и сушат при температуре 75 С и 4 торр.

Выход; 3,93 г (74,3% теории), точка плавления: 117-118 С.

Рассчитано,%: С 72,47; Н 8,39; N 5.83.

Найдено,%: С 72,44; Н 8.43; N 5,93. (а)о =- +9,4 (с = 1,01 в метаноле)

Чистота энантиомера = 99,9% (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11), Пример 13. Сложный этиловый эфир (3)2-это кс и-4-(М-1-(2-пиперидино-фен ил)3

-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бенэойной кислоты, 0,79 г (1,65 ммоль) сложного этилового эфира (Z)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидинофенил)-3-метил-1-бутен-1-ил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты, имеющего точку плавления 124-127 С, в атмосфере аргона растворяют в 10 мл дегазированной омеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1) и добавляют к раствору 17 мг катализатора Ноери (полученного иэ (йц(СОВ)С!2) с (S)-2.2 -бис дифенилфосфино)-1,1 -бинафтилом, триэтиламином и ацетатом натрия) и 3 мг тетраизопропилата титана в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1). Реакционную смесь подают в автоклав, вакуумированный при 10 мбар. Пять раз промывают водородом под давлением 5 бар, затем гидрируют при температуре 30 С и давлении 100 бар до прекращения поглощения водорода (154 ч).

Коричнево-красный раствор упаривают в вакууме, остаток от упаривания растворяют в 80 мл простого эфира, нерастворенные хлопья фильтруют через активный уголь, и полученный таким образом прозрачный светло-желтый фильтрат упаривают в вакуу5

10 ме. Остаток от упаривания (0,60 г) кипятят с обра гным холодильником в 60. мл п-гексана, и в горячем состоянии путем фильтрации удаляют нерастворенный компонент. Филь15 трат оставляют стоять при комнатной температуре в течение ночи. Отфильтруют образовавшиеся кристаллы.

Выход: 0,45 г(56,7% теории), точка плавления: 131-133 С (после спекания, начиная

20 с 120 С).

Чистота энантиомера = 39,9% (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11).

Пример 14. Сложный этиловый эфир

25 (S)-2-этокси-4-(N-1-(2-пиперидино-фенил)-3

-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты.

К раствору 0,68 r (1,15 ммоль) сложного этилового эфира (S)-2-окси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокар30 бонилметил)-бе нзойной кислоты (точка плавления: 125-126 С, (ц)п =+12,87 (с =

1,01 в метаноле)) в 5 мл безводного диметилформамида добавляют 0,05 г (1,15 ммоль)

55, -ного гидрида натрия в масле и переме35 шивают при комнатной температуре в течение полчаса, Затем каплями добавляют раствор 0,12 мл (1,15 ммоль) этилйодида в

2,5 мл безводного диметилформамида и размешивают при комнатной температуре в

40 течение 5.ч. Упаривают в вакууме, распределяют между разбавленным натровым щелоком и хлороформом. органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме.

Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 10;1).

Выход: 0,48 r (67% теории), точка плав50 ления: 110-112 С.

Рассчитано,%: С 72;47; Н 8,39; N 5,83.

Найдено,%: С 72,61; Н 8,54; N 5,97.

Чистота энантиомера = 98,5% (S) (условия жидкостной хроматографии под давле55 нием см. пример 11), Пример 15. Сложный этиловый эфир (S)-2-этокси-4-(И 1-(2-и и пер иди но-ф е н ил)3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)бензойной кислоты, 23

18314S1

5

20

30

35 ном шкафу.

Получают аналогично и римеру 14 (из (S)2-о кси-4-(й (1-(2-и и и е риди но-фен ил)-3-мет ил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты, используя 2 эквивалента гидрида натрия и 2 эквивалента этилйодида.

Выход: 42% теории, точка плавления:

11 0-112 С.

Рассчитано,%: С 72,47; Н 8,39; N 5,83.

Найдено, : С 72,61; Н 8,54: N 5,99.

Чистота энантиомера = 98,37, (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11).

Пример 16. Сложный этиловый эфир (S)(+)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пипе ридино-фен ил

)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)бензойной кислоты, Сложный этиловый эфир (R)(+2-этокси4-(й-(1-(2-и и пер иди но-фен ил)-3-метил-1-бу тил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты, 920 мл сложного этилового эфира (++)-2этокси-4(N-{1-(2-пип еридино-фен ил)-3-мет ил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты разделяют на отдельные дозы размером 10 мг на пригодной для этого колонке фирмы Бейкер, в которой (5)-1ч-3,5-динитробензоил-лейцин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем (величина зерен:

40 мкм, длина колонки; 250 мл, внутренний диаметр: 20 мм, элюент; смесь п-гексана, тетрагидрофурана, этанола и метиленхлорида в соотношении 180:20:3:2, скорость течения: 21.25 мл в минуту, температура: 27ОС, УФ-детекция при 285 нм), причем элюируется сперва (Щ+энантиомер (пик 1), а затем (S)(+)-энантиомер (пик 2), Из разрезанных и собранных соответствующим образом фракций в результате упаривания в вакууме получают фракция "пик 1" (R), 423 мг (сырой), фракция "пик 2" (S); 325 мг (сырой);

Для удаления нежелаемых компонентов (например. содержащегося в тетрагидрофуране стабилизатора 2,6-ди-трет,бутил-4-метил-фенола) обе фракции очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и ацетона в соотношении 10:1). (В)(+эн а нтиоме р:

Выход: 234,5 мг (51 теории), точка плавления: 122-124 С (из смеси петролейного эфира и ацетона).

Рассчитано, : С 72,47; Н 8,39; N 5.83.

Найдено. : С 72.40; Н 8,18; N 5,71. (й)о = -8.3 (с = 1 в метаноле), (Я)-энантиомер:

Выход: 131,2 мг (28,57ь теории), точка плавления; 122-124 С (из смеси петролейного эфира и ацетона в соотношении 8:1), Рассчитано, : С 72,47; Н 8,39; N 5,83.

Найдено. : С 72,28; Н 8,44; N 5,70. (а)о = +8,3 С = 1 в метаноле), Для разделения энантиомеров также можно использовать колонку марки Хиралцель 00 фирмы Дзсель. На колонке длиной

250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм (элюент: смесь абсолютного этанала и и-гексана с 0,2 диэтиламина в соотношении

5:95, температура 40 С, УФ-детекция при

245 нм) (R)-энантиомер элюируется по истечении 6,8 мин, à (S)-энантиомер — по истечении 8,5 мин.

Пример 17. (S)-2-этокси-4-(й-(1 (2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил) аминокарбонилметил)-бензойная кислота.

Раствор 3,79 r (7,88 ммоль) сложного этилового эфира (Я)-2-этокси-4ф-11-(2-пи° перидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты (чистота энантиомера = 99,9 ) в 37 мл этанола размешивают в ванне температурой

60 С и добавляют 10 мл (10 ммоль) 1й-натрового щелока. После размешивания при температуре 60 С в течение 4 ч при сохранении температуры добавляют 10 мл (10 ммоль) 1N-соляной кислоты и охлаждают до комнатной температуры, После прививки оставляют стоять в течение ночи, затем охлаждают льдом при размешивании в течение часа. Кристаллиэат фильтруют на нутче и дважды промывают водой, каждый раз используя 5 мл. Затем сушат над полупятиокисью фосфора при температуре 75 С, в конце 100ЯС и 4 торр в вакуумном сушильВыход: 3,13 г (ST,S теории), точка плавления: 130-131 С (высокоплавкая форма).

Рассчитано, : С 71,64; Н 8.02; N 6,19, Найдено. : С 71,48; Н 7,87; N 6,39. (а)о = +7,45 (с = 1,06 в метаноле), Чистоту энантиомера определяют путем жидкостной хроматографии под давлением с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Хромтех (Швеция) с использованием фазы АОР(а 1-кислый гликопротеин); внутренний диаметр: 4,0 мм. длина:

100 мл, диаметр частиц; 5 мкм, температура:

20 С, элюент: О.1 -ный водный раствор

КН2Р04 (=А) и 20 -ный ацетонитрил (=-Б), повышение градиента на 40 в течение 4 мин (Б): скорость течения; 1 мл в минуту, УФ-детекция при 240 нм. Время удерживания (S)-энантиомер: 2,7 мин, время удерживания (К)-энантиомер; 4,1 мин.

Найдено. : (S):(R) = 99,85ь: 0;15 чистота анантиомера = 99,7 (S)

При повторной кристаллизации пробы из смеси этанола и воды (соотношение 2 1) точка плавления не изменяется.!

83!48!

В результате нагревания пробы в смеси петролейного эфира и толуола (соотношение 5:3), фильтрации нерастворенного компонента (точка плавления: 130-131 С) и быстрого охлаждения фильтрата получают 5 низкоплавкую форму целевого продукта. имеющую точку плавления 99-101 С, Рассчитано,о : С 71.64: Н 8,02; N 6,!9.

Найдено,%: С 71.66; Н 7,97; N 6,41.

Низкоплавкая и высокоплавкая формы 10 отличаются друг от друга относительно ИКспектра с использованием бромистого калия, однако. они не отличаются друг от друга относительно ИК-спектра с использованием раствора (метиленхлорида). 15

При нагревании пробы низкоплавкой формы выше точки плавления наблюдают вторую точку плавления при 127-130 C.

В результате перекристаллизации пробы низкоплавкой формы из смеси этанола и 20 воды (соотношение 2:1) получают высокоплавкую форму.

Высокоплавкую и низкоплавкую формы исследовали путем дифференциальной сканирующей калориметрии, используя аппа- 25 рат марки ТА-300-System фирмы Меттлер, Швейцария. Результать< исследования даны в таблице.

Пример 18. (R)(-)-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- амина- 30 карбонилметил)-бензойная кислота х 0,4

Н20, Получают аналогично примеру 17 из 150 мг (0,312 ммоль) сложного этилового эфира (R)(-)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил) 35

-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)бензойной кислоты (точка плавления 122124 С, (а)п = -8,3 (с == 1 в метаноле)) путем омыления 1N-натровым щелоком в этаноле, Выход: 95,8 мг (66,7% теории), точка 40 плавления: 103-105 С (иэ смеси толуола и петролейного эфира)

Рассчитано, (х 0,4 H20),%: С 70,51; Н 8,01; N 6,09.

Найдено, : С 70.88; Н 7,79, N 5,81.

Моль-пик M+: рассчитано: 452 45 найд2ено: 452 в (а)р = -6,5 (с =- 1 в метаноле) чистота этантиомера " 99,7 (R) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. и р. 17), 50

Пример 19. (S)(+}2-этокси-4-(Щ! (2пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойная кислота х 0.4

Н 20

Получают аналогично примеру 17 из 89 55 мг (0,198 ммоль) сложного этилового эфира S)(+)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)

-3-метил-1-бутил)- ами нокарбонилметил)бензойной кислоты (точка плавления 1221?4 Т. (a)<< --+8,3" (с =- 1 в мог<<оп .)) путем омыления 1N-нагровым <целоком в этаноле.

Выход: 44,5 мг (48,8% теор и). точка плавления: 102-103 С (из смеси <алуола и петролейного эфира)

Рассчитано (х 0,4 H20),%: С 70.51; Н

8,01.

Найдено,%: С 70,80; Н 8,06. (a)n "=-+6,5 (с = 1 в метаноле) чистота энантиомера = 99,6 (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. и р.17), Пример 20. (S)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойная кислота.

Гидрируют 0,26 г (0,47 ммоль) сложного бензилового эфира (S)-2-этокси-4-(N-(1-(2пиперидин о-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойной кислоты (точка плавления 91.-92 С, (a)n =+9,5 (с =

1,05 в метаноле)) в 10 мл этанола в присутствии 0,12 г 10%-ного палладия на угле при температуре 50" С и водородном давлении 5 бар. По истечении 5 ч катализатор удаляют фильтрацией с использованием кизельгура и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания кристаллизуют из смеси этанола и воды (соотношение 2:1).

Выход: 0,15 r (70% теории), то <ка плавления: 130-131 С.

Расс <итано,%: С 71.64: Н 8,02; N 6,19, Найдено,%: С 71,76; Н 8.12; и 6,05.

Чистота энантиомера =- 99,6% (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пр. 1 7).

Пример 21, (S)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил} аминокарбонилметил)-бензойная кислота.

102 мг (0.20 ммоль) сложного трет,бутилового эфира (S)-2-зтокси-4-(N-(!-(2-пипериди н о-фе н ил)-3-метил-1-6утил)аминокарбонилметил)-бензойной кислоты (точка плавления 122-12ЗЯС, (а)р =+8,7 (c

= 1 в метаноле)) в 5 мл бензола нагревают с обратным холодильником в течение полдня на некоторых кристаллов гидрата и-толуолсульфокислоты. В результате этого получают целевое соединение, что подтверждается значением Вг полученным в результате тонкослойной хроматографии, и масс-спектром.

Точка плавления; 129-131 С.

Моль-пик М;

Рассчитано.%; 452.

Найдено,%: 452.

Пример 22. (S)-2-этокси-4-(N-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил)-бензойная кислота.

200 мг (0,395 ммоль) сложного трет.бутилового эфира (S)-2-этокси-4-(М-(1 (2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)1831481

28

Испытываемые соединения (IHC), мг/мя

Испытываемые штаммы (а) (Ъ) (1) (2) (3) . (4) (5) (б) (7) (8) 3, 13 О, 78 О, 78 О, 39 О, 39 О, 2 О, 1 О, 1 О, 1

E.coli 36 1,56

P.aeruginosa 26

О, 78 О, 025 О, 1 0,05 О, 2 0,025 0,025 О, 05 0,025

0,39

P.aегоgiпоза 175

3, 13 0 1 О, 78 О, 39 О, 78 О, 39 О, 39 О, 2 О, 05 50 3, 13 0,78 1,56 0,78 0,39 1,56 0„39 1,56

3, t 3

Е.aегоgens 84

100 а

Продолввиив таблицы

Испытываемые соединения (HIC), мг/мл

Испытываег мые штаммы \ (9) (10) (11) (12) (13) (14) (15) (16) (17) 0,1 0 05 0,1 0,1 0,39 0,2 0,1 0,2 О,1

О, 1 О, 1 О, 1 0,05 0,05 0,025 0,025 0,025 О, 1

Е.coli 36

P.aeruginosa 26

P.aегоginosa 175

От39 Оа 78 Ов2 0.39 Оь 1 Oт39 Oв2 и

0,39 О, 78

Е.aегоgens 84

1,56 039 О 78 625 1,56 1,56 О 78 0> 78 1,56 аминокарбонилметил)-бензойной кислоты (точка плавления 122-123 С, fa)D -+8,7 (с

= 1 в метаноле)) в 2 мл метиленхлорида вместе с 0,45 г (3,95 ммоль) трифторуксусной кислоты размешивают при комнатной температуре в течение ночи. Упаривэют в вакууме, и остаток от упаривания распределяют между водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания кристаллизуют из смеси этанола и воды (соотношение

2:1), Выход: 115 мг (64,77ь .теории). точка плавления: 126-128 С.

Рассчитано,7: С 71,64; Н 8,02; N 6,19.

Найдено, $: С 71,39; Н 7,91; N 6,06.

fa)o - +6,97 (с - 0,975 в метаноле) чистота энантиомера = 99.8 ((условия жидкостной хроматографии под давлением см. пр. 17).

Формула изобретения (Я)(+)-2-это кси-4-.(й-(1-(2-пиперидино-ф

5 енил)-3-метил-1-бутил) аминокарбонилметил)-бензойная кислота формулы

CH3WCH3

CH

СН2

СН-МН-СΠ— СН2 " СООН

ОС,Н, или ее гидрат, или фармацевтически пере.носимая соль, обладающая гипогликемическим действием.

1831481

j >(ry 43 ! ln

70 сп

1

6 feJ

ФВ„. 1 Коггцентрацди ЕЯ д ER в клавде крови восле вдувривеииои аадлдхацид

1,0 кг РАц у куггчии (число вробаидовг 12) 8А кг КЯ ка бо

7 i i

6 b7

Ixr. Z Ионггекврацид ES д ER в клавке крови Восле аквлвхацдя дерев ров 1 р

1 0 кг

РАЦ в виде расввора у кухчик (число кробакиовг 12)

Составитель И.бочарова

Редактор С.Кулакова Техред М.Моргентал .Корректор

Заказ 2540 Тираж . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушскэя наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101