Способ приготовления электронномикроскопических препаратов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Со!ее Сюветеиил

Социал иотичеокил

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Кл. 30h, 14

Заявлено ОЗ.И.1966 (№ 1079973/31-16) с присоединением заявки №

Комитет по делаа иаоЯретеииЯ и открытиЯ при Совете Миииотрое

СССР

1Ч.ПК А 61b

УД К Л612.086:578.085.1 (088.8) Приоритет

Опубликовано 28.VI.1967. Бголлетень № 14

Дата опубликования описания 28Х11.19б7

Авторы изобретения В. Н. Рейнгольд, H. M. Шестопалова, M. 6. Королев и В. М

Заявитель

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов

Академии медицинских наук СССР

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ЭЛЕКТРОННОМИКРОСКОПИ11ЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

Предмет изобретения

Известны способы приготовления электронномикроскопических препаратов, заключающиеся в обработке исследуемых клеток или тканей фиксатором, сохраняющим ультраструктуру клеток и реактивность антигенов, промывке в фосфатном буфере, проводке через батарею обезвоживающего реагента, пропитке пластической прозрачной массой и ультр амикротомии.

Предложенный способ отличается тем, что перед проводкой через обезвоживающую батарею на исследуемый препарат наслаивают имунную сыворотку, меченную флуорохромом.

Это позволяет последовательно изучать препарат в люминесцентном и электронном микроскопах.

Для приго говления электронномикроскопи ческого препарата по предлагаемому спосо= бу берут биологический материал, например монослой культуры тканей, и обрабатывают фиксатором, сохранягощим ультраструктуру и реактогенность клеток и антигена к специфическим антителам, например альдегидным

Фиксатором. Затем материал промывают в фосфатном оуфере для удаления следов фиксатора и наслаивают имунную сыворотку, ме-!

1енну1о флуорохромом. Затем материал отмы2 вают от следов сыворотки в том же буфере и обезвоживают проводкой через батарею растворов обсзвоживающего реагента, например ацетона. После обезвоживания материал пропитывают и заливают жидкой пластической прозрачной массой.

Отвержденньш препарат изучают в люминесцентном микроскопе, а его ультратонкие срезы в электронном микроскопе.

Способ приготовления электронномикроско.

15 пических препаратов, заключающийся в ооработке исследуемых клеток нли тканей фиксатором, сохра11яющим ультраструктуру клеток и реактивность антигенов, промывке в фосфатном буфере, проводке через батарею обез20 воживающсго реагента, пропиткс пластической прозрачной массой н ультрамикротомии, отлнчаг0игай ся тем, что, с пельIo последовательного изучения препарата в люминесцент-.

I I O !i I 11 э:i .I T > O I I I I O !i! и 1!к р о с ко и а х H $ II p O III e II I (II

25 элскт1)о!!нов!1!к1)оскопического исследования, перед проводкой через обезво>кивающую оатарсю на препарат наслаивают иммунную сыворотку, ме !енггуго флуорохромом.