Способ контроля процесса стерилизации и стерилизованных изделий одноразового применения

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и технологии медицинских изделий и может быть использовано в любых отраслях, где происходит процесс стерилизации изделий. Способ контроля процесса стерилизации и стерилизованных изделий разового применения основан на том. что в стерилизуемое изделие закладывается носитель технологической микрофлоры до стерилизации в количестве не менее 500 микробных тед либо изделие обсеменяют таким же количеством микрофлоры Биотест закладывается в стерипизационную камеру в наиболее уязвимые для стерилизации места в количестве не менее 13 и не более 30 шт. Стерилизация осуществляется или паровым, или газовым, или радиационным иди другим способом. Контроль осуществляют через 24 ч путем термостатирования биотеста в индикаторной питательной среде при температуре, характерной для данной микрофлоры в течение 2 - 8 сут, и по изменению окраски питательной среды осуществляют контроль стерильности или нестерильности изделия и процесса стерилизации. При сохранении первоначальной окраски питательной среды изделие стерильно, а процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме, при изменении окраски питательной среды изделие нестерильно, нарушен процесс стерилизации или нарушена технология изделий.

Комитет Российской Федерации по иатентам и товарным знакам (19) КЦ (и1 200246G Ст (51) 5 A61L2 30 (О) 5025083/14 (22) 25.02.92 (46) 15.1 1.93 Бюл Ив 41-42 (76) Ковиня Галина Николаевна (54) СПОСОБ КОНТРОЛЯ ПРОЦЕССА СТЕРИЛИЗАЦИИ И СТЕРИЛИЗОВАННЫХ ИЗДЕЛИЙ

ОДНОРАЗОВОГО ПРИМЕНЕНИЯ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и технологии медицинских изделий и может быть использовано в любых отраслях, где происходит процесс стерилизации изделий. Способ контроля процесса стерилизации и стерилизованных изделий разового применения основан на том, что в.стерилизуемое иэделие закладывается носитель технологической микрофлоры до стерилизации в количестве не менее 500 микробных тел, либо изделие обсеменяют таким же количеством микрофлоры Биотест закладывается в стерилизационную камеру в наиболее уязвимые для стерилизации места в количестве не менее 13 и не более 30 шт.

Стерилизация осуществляется или паровым, или газовым, или радиационным или другим способом.

Контроль осуществляют через 24 ч путем термостатирования биотеста в индикаторной питательной среде при температуре, характерной для данной микрофлоры в течение 2 — 8 сут, и по изменению окраски питательной среды осуществляют контроль стерильности ипи нестерильности изделия и процесса стерилизации. При сохранении первоначальной окраски питательной среды издепие стерильно, а процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме, при изменении окраски питательной среды изделие нестерипьно, нарушен процесс стерилизации или нарушена технология изделий.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и технологии медицинских изделий и может быть использовано в любых отраслях, где происходит процесс стерилизации иэделий. 5

Известен способ-аналог, осуществляемый в соответствии с методическими указаниями, утвержденными Минздравом

РСФСР от 14.04.69 r. М 09j33-680.

В качестве носителя используются следующие культуры: стафилококк, устойчивый к температуре

60 С при 25-минутной экспозиции и к 2%ному раствору формалина при 20-минутной экспозиции: 15 кислотоупорный сапрофит, микобактерии 8-5, устойчивый к температуре 60 С при

60-минутной экспозиции и к 5 -ному раствору формг ина при 25-минутной экспозиции; 20 споры антракоида, устойчивые к дейст-, зию текучего пара 4-6 мин или к.кипячению в течение 25 мин.

Контроль стерилизации осуществляется на бязевых тест-объектах. Полоску ткани 25 размером 1,1х0,6 см стерилизуют 30 мин при 120 С, инфицируют двухмиллиардной взвесью односуточной культуры стафилококка, четырехсуточной культуры 8-5 и двухсуточной культуры антракоида, 30 сохраненного 5-7 сут при комнатной температуре в темном месте.

Инфицированные полоски ткани подсушивают дважды междудвумя листами фильтровальной бумаги и дпя окончательной 35 подсушки помещают в чашку Петри, слегка приоткрывают крышку и ставят в термостат на 15-20 мин. Затем тест-обьекты закладывают в стерильные конверты из хлопчатобумажной ткани ипи бумаги размером 4х5 см 40 (по 2 теста в конверт), а конверт укладывают в мешочки размером 10-15 см. Мешочки с тест-обьектами завертывают в стерильную бумагу и размещают среди вещей в камере в 15 точках. 45

После стерилизации мешочки извлекают из камеры, в боксах в асептических условиях производят лосев в пробирки с 5 мп мясо-пептонного ипи 2%-ному глицеринового бульона, 50

При обнаружении роста в посевах необходимо произвести пересев на плотные питательные среды для того, чтобы убедиться в наличии ро та исходной культуры.

Данный способ позволяет контропиро- 55 вать только процесс стерилизации и при нарушении его возможно обсеменение материала данной микрофлорой.

Прототипом предлагаемого изобретения является метод, осуществляемый согласно приказа Минздрава СССР М 60 от

17.01.79 r, (Приложение 6 "Методические рекомендации по контролю стерильности изделий медицинского назначения". 1989).

Контроль стерильности изделий однократного применения проводят в специально оборудованных помещениях с соблюдением правил асептики, Количество образцов для контроля на стерильность определяют по формуле 0,4 Й, где п — количество изделий, простерилизованных одновременно в одном стерилизаторе за один цикл (не менее 13 изделий).

Простерипизованные изделия погружают полностью в питательные среды: сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1 глюкозы), тиогпиколевую среду и бульон Сабуро. При контроле стерильности иэделий, простерилизованных радиационным методом, применяют бульон Хоттингера с 1 глюкозы. простерилизованных газовым и паровым методами — с 0,5 глюкозы.

Изделия большого обьема измельчают в стерильных условиях перед погружением в питательные среды. Среды с посевами помещают в термостат при температуре 32ОС (бульон Хоттингера и тиогликолевая среда) и 22ОС (бульон Сабуро), Учет результатов проводят через 8 (до 14) сут.

В случае прорастания посевов хотя бы в одной пробирке (колбе) — помутнение среды, образование пленки, осадка готовят мазки дпя бактериоскопического подтверждения роста микроорганизмов и делают повторный контроль стерильности удвоенного количества образцов данной партии.

Если при вторичном посеве не наблюдается проростов, то изделия данной партии считаются стерильными. В случае повторного пророста посевов данную партию изделий считают нестерильной и выбраковывают.

K недостаткам метода-прототипа отношу сится: низкая эффективность методики, позволяющая выявить нестерильное изделие только при массивной инциальной кантаминации всех изделий, Одномоментной стерилизации подвергается до 700 тысяч изделий, на контроль выбирается 13, это не позволяет уловить загрязнение иэделий; процесс производства стерильных изделий при современной технологии и санитарии производства дает отсутствие или низкую инициальную контаминацию, что затрудняет контроль стерильности производимых иэделий. При нарушении процесса стерилизации этой методикой невозможно

2002466

40

55 выявить нестерильные изделия (фиктивное благополучие); отсутствие контроля процесса Стерилизации; длительность по времени проведения всей методики контроля, что приводит к задержке выпуска готовой продукции; использование большого количества питательных сред; воэможность в процессе контроля вторичной контаминации; методика сложная, трудоемкая.

Задача, на решение которой направлен заявленный способ — одновременный контроль процесса стерилизации и стерильности различных видов медицинских изделий (шприцы инъекционные, иглы, система ïåреливания крови, гемодиализатор и др.) одноразового применения.

В результате решения этой задачи становится возможным 100; контроль процесса стерилизации производства стерильных изделий для данного вида стерилизации, стерильности или нестерильности изделий, выявления погрешности технологического процесса.

Заявляемый способ контроля процесса стерилизации и стерилизованных изделий может осуществляться при паровой, газовой и радиационной стерилизации.

Технологический результат достигается тем, что в готовое изделие закладывается тест с микрофлорой, либо изделие обсеменяется. Для обсеменения носителя используется технологическая микрофлора, представляющая собой смесь невирулентных штаммов термостойких, капсульных, спорообразующих микроорганизмов (возможно использование одного штамма)..

Учитывя низкую инициальную контаминацию при современной технологии производства медицинских изделий каждый биотест содержит не менее 500 микробных тел. Объяснение применяемым терминам: тест — это инфицированная фильтровальная бумага. изделие с заложенной в него инфицированной фильтровальной бумагой, обсемененное изделие. Тесты.высушивают на воздухе с помощью лиофилизации в термальной камере и другим способом; биотест — это тест, упакованный в материал стандартный для технологии контролируемого медицинского изделия, Биотесты закладывают в партию стерилизуемых изделий в количествах, зависящих от объема камеры стерилизации (не более 30 и не менее

13). Закладку биотестов осуществляют в самых уязвимых для процесса стерилизации местах — у дверей стерилизационной камеры, по диагоналям камеры на стеллажах сверху донизу.

Стерилизацию осуществляют стандартно для данного изделия, Биотесты выдерживают в течение 24 ч, затем берут на анализ, Анализ биотеста проводят в боксах в строго асептических условиях.

Биотесты — иглы погружают в индикаторную питательную среду, шприцы заполняют индикаторной питательной средой, из системы переливания крови, гемодиализатора и других сложных изделий извлекают носитель, погружают его в индикаторную питательную среду, с внутренней поверхности изделия индикаторной питательной средой дегают смыв. Ипользуют соответствующие данной технологической микрофлоре питательные среды: сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1 глюкозы), тиогликолевую среду и бульон Сабуро с добавлением индикатора, Посевы помещают в термостат при стандартной для данной микрофлоры температуре на время от 48 ч до 8 сут. Если в течение 48 ч (максимально 8 сут) питательные среды не изменяют цвета, стерилизация выдержана в заданном технологическом режиме, а изделие стерильно.

Если цвет индикатора питательных сред изменился, нарушены либо стерилизация, либо технологический режим, Осуществляют проверку технологического режима, устраняют причину нарушения процесса стерилизации, для чего проводят дополнительный контроль унифицированными биотестами.

Время, необходимое для учета результатов по контролю стерильности, может быть откорректировано в сторону увеличения при производстве данных изделий данНОГО производства.

Существенными отличительными признаками заявляемого способа контроля стерилизации и стерилизованных изделий являются. проведение одновременного контроля процесса стерилизации v. стерильных изделии; обсеменение готового изделия технологической микрофлорой в количестве не менее 500 микробных тел; контроль через 24 ч путем использования индикаторной питательной среды (максимально до 8 сут); термостатирование в индикаторной питательной среде при стандартной для данной микрофлоры температуре;

2002466 временной режим термостатирования от2до8сут; осуществление контроля по изменению окраски питательной среды; установление корреляции между окраской индикаторной среды и стерильностью изделия и эффективностью процесса стерилизации: неизмененная окраска — изделие стерильно, а процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме, измененная окраска — изделие нестерильно, нарушен процесс стерилизации либо технологических процесс изделия.

Причинно-следственная связь между существенными отличительными признаками и.техническим результатом: одновременный контроль процесса стерилизации и стерильных изделий позволяет выявить нарушения процесса стерилизации и стерильности и нестерильности иэделий, устранить нарушения процесса стерилизации и возможные нарушения в технологическом процессе изделий; высокая инициальная контаминация би= отеста относительно низкой коНтаминации иэделий дает 100%-ную гарантию контроля стерильности или нестерильности иэделий и процесса стерилизации; использование индикаторной питательной среды и биотеста при заявленном способе позволяет значительно упростить методику контроля по сравнению с применяемой по приказу Минздрава СССР ¹ 60 (Приложение 6), уменьшить количество питательных сред, приготовленных из мяса, сокращает время проведения анализа, ускоряет процесс реализации изделий, уменьшает. площади хранения готовых изделий; при радиационной стерилизации изделий с помощью биотеста возможно уменьшение дозы облучения, что увеличивает срок годности изделий (устранение деструкции полимера, коррозии металла); заявленный биотест может быть применен для контроля эффективности процесса стерилизации и простерилизованных изделий на всех промышленных предприятиях, выпускающих стерильную продукцию; биотест может быть изготовлен в любой бактериологической- лаборатории данного производства или подразделения.

Нарушение процесса стерилизации; нарушения температурного режима, при газовой стерилизации — недостаточное давление, загрязнение фильтров, недостаток окиси этилена в баллоне, при радиациoHkQA стерилизации - недостаточная или завышенная доза облучения, неправильное расположение стерилизуемых объектов и др.

50 среды при 32ОС и 37 С в течение 48 ч

Цвет индикаторной среды при термостатировании не изменился. Партия изделий стерильна, процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме. При параллельном контроле по Приложению 6 приказа Минздрава СССР ¹ 60 изделия стерильны, П р и M е р 2, Биотест — иглы инъекционные, упакованные в стандартную упаковку, загрузили в радиационный стерилизатор по

10 t5

Нарушение технологического процесса: погрешности в сборке, дефект материалов.

Выбор указанных режимов и количественных соотношений, Выбор технологической микрофлоры в количестве не менее 500 микробных тел обусловлен тем, что максимальная инициальная контаминация готовых изделий должна быть не более 10.микробных тел. При инициальной контаминации свыше 10 микробных тел происходит выбраковка изделий до стерилизации, так как повышенная микробная контаминация несет антигенность изделий с последующими возможными осложнениями у людей при использовании иэделий, Термостатирование иэделий or 2 до 8 сут является оптимальным, оно исключает воздействие остаточной окиси этилена при газовой стерилизации, и озона при радиационной стерилизации. Этот срок достаточен для прорастания вегетативной и споровой микрофлоры, Снижение времени термостатирования не позволит выявить микрофлору из-за подавления роста ее окисью этилена или озоном. Увеличение времени свыше 8 сут является нецелесообраным, За два года экспериментальных работ наблюдения за анализом биотестов.проводились в течение 14 сут, При этом полученный через 2 — 6 сут положительный или отрицательных результат ни разу не изменялся в течение последующего времени.

Пример 1. Биотест — 2-граммовые полимерные шприцы разового применения, упакованные в стандартную упаковку загрузили в газовый стерилизатор в уязвимые для стерилизации.,места — у дверей, на все стеллажи по диагонали сверху донизу идентично всем изделиям стерилиэуемой партии. После полного цикла стерилизации через 24 часа биотест брали на анализ. В боксе в асептических условиях освобождали шприцы от упаковки, заполняли индикаторной питательной средой — сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1% глюкозы), тиогликолевая срера, бульон Сабуро. Термостатировали бульон Сабуро при 22 С, остальные

2002466

10 схеме, После полного цикла стерилизации через 24 ч биотесты брали на анализ. B боксе в асептических условиях иглы освобождались от упаковки, погружались в индикаторные питательные среды — сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1 глюкозы), тиогликолевую среду, бульон Сабуро. Термостатировали среды Сабуро прй 22 С, остальные среды при+32 С и+37ОС в течение

2 суток. Цвет среды не изменился.

Партия изделий стерильна, процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме.

Параллельно иэделия проконтролированы методикой Приложения 6 приказа

Минздрава СССР hh 60. Изделия стерильны.

Пример 3. Биотест — систему переливания крови, упакованную в стандартную упаковку. загрузили в радиационный стерилизатор в уязвимые для стерилизации места — у дверей камеры, по диагонали на стеллажах сверху донизу. После. полного цикла стерилизации через 24 ч биотесты взяли на анализ. N3 биотеста извлекли носитель, погрузили в индикаторные питательные среды — сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1 глюкозы), тиогликолевую среду, бульон Сабура, с внутренней поверхности изделия данными питательными средами сделали смыв, поместили в пробирки. Посевы термостатировали на средах Сабура при температуре 22ОС, на остальных средах при температуре 32 С и 37ОС в течение 6 сут.

Цвет индикаторной питательной среды не изменился.

Иэделие стерильно. процесс стерилизации выдержан в технологическом режиме.

При параллельном контроле стерювности готового иэделия в соотаетстаии с Приложением 6 приказа Минздрава СССР M 60 получен результат — изделия стерильны.

Пример 4. Биотест — 2-граммовые полимерные шприца разового применения заложили в газовый стерилизатор по схеме.

После полного цикла стерилизации черкз 24 ч в боксе s асептических условиях заполнили шприцы индикаторной питательной средой — сахарный бульон Хоттингера (0,5 или

1;4 глюкозы), тиогликолевая среда. бульон

Сабуро. Термостатировали среды Сабуро при температуре 22 С, остальные среды при

32 С и.37 С в течение 2 сут.

Цвет индикаторной питательной среды изменился.

Партия изделий нестерильная, процесс стерилизации не выдержан в технологическом режиме, либо нарушен технологический процесс.

При параллельном контроле стерильности изделий по Приложению 6 к приказу

Минздрава СССР hL 60 изделия стерильны.

Дополнительным контролем установлено нарушение технологии сборки шприцев — при добавлении селиконовой смазки (разрешенной по ГОСТУ и ТУ) произошло плот5 ное прилегание штока к цилиндру и окись этилена не проникла до инч .чцированного участка шприца, Л р и м е р 5. Биотест — 2- граммовые полимерные шприцы разового применения

10 заложили в газовый стерилизатор по схеме.

После полного цикла стерилизации через 24 ч в боксе в асептических условиях заполнили шприцы индикаторной питательной средой - сахарный бульон Хоттингера {0,5 или .15 1 глюкозы), тиогликолевая среда и бульон

Сабуро, Термостатировали среды Сабура при 22ОС; остальные при 32 С и 37 C.

Цвет индикаторной питательной среды изменился.

20 Партия изделий нестерильная, процесс стерилизации не выдержан в технологическом режиме, либо нарушен технологический процесс. При дополнительном контроле выявлено нарушение температур25 ного режима в процессе стерилизации, При параллельном контроле по Приложению 6 к приказу Минздрава СССР М 60 шприцы нестерильны.

Пример 6. Биотест — 5-гоаммные

ЗО шприцы полимерные одноразового применения заложили s газовый стерилизатор по схеме, После полного цикла стерилизации через 24 ч в боксе в асептических условиях заполнили шприцы индикаторной питатель36 ной средой — сахарны, бульон Хоттингера

{0,5 или 1;ь глюкозы), тиогликолевая среда и бульон Сабуро. Термостатировали среды

Сабуро при.температуре 22 С, остальные среды при температуре 32 С и 37 С в тече40 ние2сут.

Цвет индикаторной питательной среды изменился. Изделия нестерильны, при контроле обнаружено недостаточное количество окиси этилена в баллонах.

45 При параллельном контроле в соответствии с.Приложением 6 приказа Минздрава

СССР N . 60 изделия стерильны.

Пример 7. Биотест — 2-граммовые

50 полимерные шприцы одноразового применения заложили в газовыйттерилиэатор по схеме. После полного цикла стерилизации через 24 ч в боксе в асептических условиях заполнили шп рицы индикаторной питатель55 ной средой — сахарный бульон Хоттингера (0,5 или 1Я, глюкозы), тиогликолевая среда и бульон Сабуро.

Термостатировали среды Сабуро при температуре 22 С, остальные среды при

32 С и 37 С в течение 6 сут.

2002466

Составитель Г.Ковиня

Редактор Т.Мельникова Техред M.Mîðråíõàë Корректор О.Густи

Тираж Подписное

НПО "Поиск" Роспатента

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5.Заказ 3199

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород. уп. Гагарина, 101

Цвет индикаторной питательной среды изменился, изделия нестерильны.

При дополнительном контроле выявлено нарушение процесса стерилизации — укороченный по времени цикл стерилизации, Формула изобретения

СПОСОБ КОНТРОЛЯ ПРОЦЕССА СТЕРИЛИЗАЦИИ И СТЕРИЛИЗОВАННЫХ

ИЗДЕЛИЙ. ОДНОРАЗОВОГО ПРИМЕНЕНИЯ с использованием питательных сред и термостатирования, отличающийся тем, что одновременно осуществляют контроль стерилизации, при этом в контролируемое изделие закладывают носитель технологической микрофлоры до стерилизации в количестве не менее 500 микробных тел либо изделие обсеменяют таким же количеством микрофлоры, упаковывают в стандартную для данного иэделия, упаковку, стерилизуют паровым, газовым или радиаПри параллельном контроле s соответствии с Приложением 6 к приказу Минздрава СССР N. 60 изделия стерильны, 5 (56) Методические указания Минздрава

РСФСР от 14.04.69 М 09/33-680, ционным способом. контроль осуществляют через 24 ч путем термостатирования

10 изделий в индикаторной питательной сре де при стандартной для данной микрофлоры температуре 2 - 8 суток и по изменению окраски питательной среды осуществляют

15 контроль стерильности или нестерильноети изделия, процесса стерилизации н технологического процесса, при этом при сохранении первоначальной окраски питательйой среды - иэделие стерильно и про20 цесс стерилизации выдержан в

0 технологическом режиме, а при изменений окраски питательной среды иэделие нестерильно и нарушен процесс стерилизации или технологического режима.