Способ получения производных глутаминовой кислоты или их фармацевтически приемлемых солей

Авторы патента:

(19) R (11) (51) С 7 9 471 04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 4614259/04 (22). 24.05,89 (31) 88 198201; 88 198207 . (32) 25.0588; 25,05.88 (33) uS;uS (46) 15.11.93 Ьол hh 41-42

P1) Дзе Трастиз оф Принстон Юниверсити (US)

Эли Липли энд Компани (US) (723 Чуан Ших(ТМф Эдвард С.Тэйлор{Щ (73) Дзэ Трастиз оф Принстон Юниверсити (Щ

Эли Липли энд Компани (US) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ глутдминовой кислоты или их вачаАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕЫЫХ СОЛЕЙ (57) Использование: медицина Сущность изобретениу способ получения производных глугаминовой киототы общей формулы

* н-с(я ) -с-сн -e -(сн) -CONHcн сн),срн

NH .

tge R,ЙН, R óãëåðîä-углеродная связь, 2 Э (С -С 1 цикпогексипен ипи группе фориупы

1 4

СН вЂ” (»- CH где б}-сера ипи ниспород; R =H, Сс к, койфигурация окопа aroMa обозначенная, является 3-конфигурацией или их фармацевтически приемлемых солей Pear åíò f э *

Н-С(В )-С-СÍ - -(CH)R -CONHCH(Сн ) C00R

И 2.9 22 2

С и - -NH CÍ C00R г 2

NHR

R и и вЂ” Указаны выше; и Н вЂ” или карбоксиза1 3 г щитная группа; R H или аминозащитная группа и

4 по крайнем мере один из R и Я отличен от водо2 4 рода Соединения малотоксичны и обладают высокой антибластомной активностью.

2002747

Изобретение относится к способам получения новых производных глутаминовой кислоты, обладающих ингибирующей активностью на ферменты фолиевой кислоты и ее метаболитов и которые могут найти применение в лечении бластом в медицине.

Цель изобретения вЂ” способ получения новых производных глутаминовой кислоты, обладающих более высокой антибластомной активностью и меньшей токсичностью.

Поставленная цель достигается способом получения производных глутаминовой кислоты общей формулы I

RiH H

СНiСН Я -CGNHCHCH ù СООН н

2 йон н где R1 вЂ” ОН или -NH2, а . йз вЂ” углерод-углеродная связь, С1-С4алкилен, циклогексилен или группа формулы где Q является -S вЂ” или -0-, R5 вЂ” водород, хлор или фтор, и конфигурация около атома углерода, обозначенная, является -S-конфигурацией, или их фармацевтически приемлемых солей, заключающийся в том„что проводят гидролиз . соединения общей формулы И

Я,нн

И" СН СН -Я -CO4HCHCH7СН СООЙ, 1

RqNH соор н

Ф где R1, йз и имеют указанные значения, R2 вЂ” водород или карбоксизащитная группа; R4 вЂ” водород или аминозащитная группа, и, по крайней мвре, один из R2 и R4 отличен от водорода, с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или виде соли.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение. В данных по ПМР "с" означает синглет, "д" означает дуплет, "т" означает триплет, "кв" вЂ” квартет, "м" означает мультиплет, а "шир" относится к широкому пику.

Пример 1. Диметил-М-(6-(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)-пиримидин-6- ил)гекс-5-иноил)-1=глутамат

Смесь 1,94 г (6 ммолей) 2-пивалоиламино-4-гидрокси-6-бромпиридо(2,3-б)пиримидина, 1,6 r (6 ммолей) диметил-М-(гекс-5иноил)- =глутамата,0,11гпалладийхлорида, 0,32 r трифенилфосфина, 0,05 г иодида меди и 2,6 мл триэтиламина в 150 мл ацетонитрила кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем охлаждают до комнатной температуры. Растворитель удаляют при пониженном давлении, а остаток хроматографи1о руют на силикагеле, злюируя смесью 1:9 метанол:метиленхлорид до получения диметил-N (6-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-пири до(2,3-б)пиримидин- 6-ил)гекс-5-иноил)-1=

15 глутамата, т. пл. 159-160 С.

Вычислено, C 58,47; Н 6,08; N 13,64.

С25НЗ1ЙБО?

Найдено, : С 58,23; Н 5,97; N 13,43.

20 Аналогичным образом, но заменяя эквивалентным количеством диметил-N-(пент-4иноил)-L-глута матади метил-N-(гекс

-5-иноил)-L-глутамат в вышеуказанной

25 процедуре, получают диметил-N-(5-(2пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2, 3-б)-пиримидин- 6.-ил)пент-4-иноил)(-глутамат, т,пл, 162-163 С.. зо - Вычислено, g: С 57,71; Н 5,84; N 14,02.

С24Н29 507

Найдено, g: .С 57,94; H 5,72; N 13,99.

Аналогичным образом из дйметил-N-ак35 рилоил-1=глутамата и диметил-й-(бут-3-иноил)-L-глутамата соответствен но получают диметил-ЩЗ-(2-пивалоиламино-4-гидрокси пи ридо(2.3-d) и иримиди н-6-ил)а к рил о4о ил)-1 -глутамат и диметил-N-(4-(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3 вЂ” б)п иримидин6-ил)бут-3-иноил)-1=глутамат, Заменяя эквивалентным количеством

45 диметил-N-(гепт-6-еноил)- -глутамата диметил-й-(гекс-5-иноил)-4=глутамат, в вышеописанной процедуре, получают диметил-N-(7-(2-пивалоиламино-4-гид-

5о рокси:пирило(2,3-б)пиримидин- 6ил)гепт-6-еноил)-1 -глутамат, т.г1л. 79вЂ”

810С, Вычислено, : С 58,01; Н 6,82; N 13,53, 55 С26Н361ч 507.

Найдено, 7: С 58,47; Н 6,48; N 12,80.

Диметил-N-(гекс-5-иноил)-(-глутамат получают взаимодействием хлорангидрида гекс-5-иновой кислотой (полученному обработкой гекс-5-иновой кислоты тионилхлоридом) с диметил-1-глутаматом в присутствии триэтиламина. В свою очередь, гекс-5-иновую кислоту можно получить, например, щелочным гидролизом 5-цианопент-1-ина..

Ди метил-Й-акр ил о ил-1 -гл ута мат, ди„метил-Й-(пент-4-иноил)-1 -глутамат, диметил-й-(бут-3-иноил)-L-ã Jtóòàìàòè диметил-N-(гепт-6-еноил)-1 -глутамат получают аналогичным образом из хлорангидр@дов акриловой кислоты, пент-4-иновой кислоты. ут-3-иновой кислоты и гепт-бено вой кислоты, соответственно, и диметил-(: глутамата.

Il р и м е р 2. Диметил-И-(6-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо. (2,3-б)пиримидин 6-ил)гексаноил)- глутамат .

К раствору 1,0 г диметил-И-(6-{2-йивалоилэмино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пиримидин- 6-ил)гекс-5-иноил)- =глутвмата в 20 мл ледяной уксусной кислоты добавляют 300 мг оксида платины, Полученную. смесь гидрируют при атмосферном давлении при перемешивании в течение 4 ч, катализатор отфильтровывают, з полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении.

После хроматографической обработки на силикагеле при элюировзнйи смесью: 1:19 . метанол-хлороформ получают 0,84 r (82,7 ) диметил-Щ6-(2-пиввлоиламинМ-.гидрокси-5.6,7,8- тетрагидропиридо(2,3 вЂ” б)пиримидин-6-ил)гексзноил)-1=глутамзта; т.пл.

162-166 С.

: Вычислено, $: С 57.57; H 7,54; N 13,43.

С25Н39Й 507, .Найдено, $: С 57,31; Н 7,25: и 14,15.

Аналогичным образом получают из диметил-й-(5-{2-пивал оил-амино-4-гидрокеии иридо(2,3-d) пиримидин-6-ил)пент-4-иноил)-(:глутамэта диметил N-(5(2-пивэлоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрзгидропиридо (2,3-б)пиримидин-6-ил)пентаноил 4ллутз мат, тл1л, 151-159 С.

Вычислено. $: C56,79; Н 7,35; и 13,80.

С24Н37Й507

Найдено, : С 57,06; Н 7,22: И 13 86.

Аналогичным образом получают диметил-И-(3-(2"пивзлоил-амиио+гидрокси-5,6 ,7,8-тетрэгидропиридо: (2,3-б)пиримидин6-ил)-пропионил)+глутамат и диметилN (4-(2-йивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7, 8-тетрагидрониридо (2,3-б)пиримидин-6ил)бутирил)-(=глутамат из й-(3-(2-пивалоила минно-4-гидро ксипи ридо(2,3-б)пи римидин-6-ил) акрилоил)-.Ьлутамата и диметил-N-(4-(2.-пивалоилзмийо-Фгйдроксипиридо(2,3-б)пиримидин- 6- ил)бут-3-иноил -1= . глутамата, соответственно.

Используя эквивалентное количество диметил-й-(7(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пири миди н- 6-ил)гепт- 6-еноиф=глутэматэ, получают диметил-й-(7-(2пивалоиламино-4-гидрокси-5;6,7,8-тетрагидроп и ридо (2,3 вЂ” d)ïuðuìèäuí-6-ил)-гептаноил)-(-глутамат, т,пл. 152-160ОС, Вычислено, ф: С 58,30; Н 7,72; N 13,08, С26Н41Й507

Найдено, ь: С 58,51; Н 7„61; N.12,87.

Пример 3. Диэтил-N-{4-(2-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропй5

1о ридо (2,3-б)пиримидин-б-ил)зтил)циклогексил-1-un)-L-глутамат

А. 5 г 2-пивалоилэмино-4-гидрокси-6-(4карбоксифенилэтинил)пиридо(2,3-d) пиримидинэ и 1,60 r оксида платины в 200 мл трифторуксусной кислоты гидрируют в аппэрзте Парра при комнатной температуре и:

4,2 зти в течение 24 ч. После удаления катализаторэ фильтрованием и концентрирования полученного фильтрата получают

2-пивэлоиламино-4-гидрокси-6(2-(4-карбоксициклогекс-1-ил)этил)- 5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-б)пиримидина в аиде белого твердого продукта, который далее очищают на хромзтографической колонке

2о (water 200), элюируя смесью 1:9 метанол:дихлорметан, т.пл. 218-234 С, Вычислено, 7;: С 63,35; 7,97; N 13.85.

С2 Нз2й404

25 Найдено, $: С 63,30; Н 7,48; N 13,57, B. К раствору 2,40 r 2-пивалоиламино-4гидрокси-6-(2-{4-карбоксициклогекс-1-ил) этил)- 5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3зо б)пиримидинз в 50 мл сухого N-метилпирролидона и2,25мл N-метилморфолина добавляют 2,75 r фенил-й-фенилфосфоаминохлоридэтз. Полученную смесь перемеши-. з5 вают при О С в атмосфере азота в течение

45 мин, з затем добавляют 2,45 r дизтил-1= глутзмата и после этого продолжают перемешивзние при комнатной температуре в ао течение 72 ч.

Растворитель отгоняют при 0,2 мм рт.ст./60 С, э остаток хроматогрэфируют на силикзгеле, элюируя смесью 1:19 метанол45 хлороформ до получения 1,67 г (48 ) диэтил-й-{4(2(2-.пйвалоилзмино-4-гидрокси-5 ,6,7,8-тетрагидропиридо (2.3-б)пиримидин6-ил)атил)циклогекс-1-ил)-1=глутамата, т пл, 5о 160-170 С. .Вычислено, : С 61,10; Н 8,03; N 11,87.

СЗОН47М507

Найдено, )ь: С 61,38; Н 7,90; N 11,84.

55 Пример 4. Щ6(2-амино-4-гидрокси5,6,7,8-тетрзгидропиридо(2;3 вЂ” d) пиримиди н-6-ил) ге к с а н о ил)-1 -глутами но вз я кислота .

Раствор 0,5 г диметил-Щб-(2-пивзлоиламино-4-гидро кси-5,6,7,8-тетра гидро и иридо (2,3-б)пиримидин-6-ил)гексзноил)-1глутамата в 75 мл 1,0 н. водном гидроксиде . натрия перемешивают при комнатной температуре в течение -120 ч, а затем рН 7.0 устанавливают осторожным добавлением

5,0 н. соляной кислоты. Воду отгоняют при пониженном давлении, а.концентрированный- раствор охлаждают затем нз ледяной бане. Образующуюся твердую часть отфил ьтровывают и сушат при 30 С, получают N-(б(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрзгидропи2002747 го

35 ридо(2,3 вЂ” d) пиримидин-3-ил)-гексаноил)-1глутаминовую кислоту, т.пл. (вспенивание)

135 G, при 180-195GG.

ЯМР (ДМСО-бь, 300 МГц) д: 9,80 (с. шир. 1Н), 7,90 (с, 3 = 8 Гц, 1H), 6,20(с, 1Н).

5,95 (с, 2 Н), 4,08 (м, 1Н), 3,10 (м, 1Н), 2,63 (т, З -10 Гц,1H),2,40(м,1Н,2,20 Ст, З-9 Гц, 2Н);2,05(т,З 9Гц,2Н), 1,84(м;"1Н), 1,70(м, 2Н), 1,55 (м, ЗН), 1,20 (м, 6Н).

Аналогичным образом .получают иэ диметил-(5-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-.5.6 ,7,8-тетрагидропиридо (2,3-б)пиримидин-6ил)пентаноил)-(=глутамата й-(5.(2-амино-4тидрокси-5,6,7,8-тетрагидрогьфидо(2,3-d) пиримидин- 6-ил)пентаноил)-1;глутаминовую кислоту, т.пл. l44 Ñ (размягчение и вспенивание):

ЯМР (ДМСО-бв, 300 МГц) д: 9,70 (с. шир, 1Н), 8,01 (д, 3 - 6 Гц, 1H), 6,17 (с, 1Н), . 5,88(с, 2Н), 4,13 (м, 1 Н), 3,17 (и, 1Н), 2,68 (т, J 6 Гц, 1Н), 2,42 (м, 1Н). 2,22 (т, J 5 Гц, 2Н),2,07(т, J 5 Гц,2Н), 1,86(м, 1Н), 1,70(м, 2Н), 1,44 (м, ЗН), 1,24 (м. 4Н).

N-(3-(2-амино-4-гидрокси 5,6.7,8-тет рагидропиридо(2,3-б)пиримидин- 6ил)пропионил)-L-глутаминовую кислоту и и -(4-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-б)пиримидин- 6-ил)бутирил)-L-глутаминовую кислоту получает аналогичным образом из диметил-й-(3.(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетра гидро п иридо (2,3-б)пирямидин-б-ил)пропионил)4 = глутамата и диметил-Щ4-(2-пивалоиламино4-гидро кси-5,6,7,8-тетра гидропиридо (2,3 вЂ” б)пир и мидян-6-ил)бутирил)-1=глутамата соответственно.

Аналогичным образом, N-(7-(2-амино-4гидрокси-5,6.7,8-тетрагидропиридо(2,3-d) пи римидин-6-ил}гептаноил)-L-глутаминовую кислоту получают из дяметил-И-(7-(2пивалоиламино-4-гидроксм-6,6,7,8-тетраг идропиридо (2,3-б)пириаадин+ил)-геатаноил)-1=глутамата, т.пл, 185 вЂ” 195 С (со аспениванием);

ЯМР (ДМСО-ов, 300 МГц) д: 9,68 (с, йир, 1Н), 8,01 (д,.J 10 Гц, 1Н), 6,20 (с, 1Н), . 5,88(с, 2Н), 4,14 (м, 1Н), 3,10(м, 1Н), 2,66(т, 3 =9ГЦ,1Н),2,35(м,1Н),2,20(т, Э- 5ГЦ, 2H),2,05(т, J 5Гц,2Н), 1,89(м, 1Н), 1,67(м, 2H), 1,45 (м, ЗН), 1,20 (м, 8Н), Аналогичным образом, используя диэтил-N-4-(2-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5 ,6,7,8-тетрагидропиридо (2,3-б)пиримидин6-ил)зтил)циклогекс-1-ил-1=глутамат. получают

N-4-(2-(2-амино-4-гидро кси-5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-б) пиримядин-6-ил)этил)циклогекс-1-ил)4=глутаминовую кислоту, т.пл. 210225оС

ЯМР (ДМСО-б6, 300 МГц) д: 9,70 (с, шир, 1H), 7,90(м, 1Н), 6,23(с, 1H),5,92(с. 2Н), 4,17 (м,.1H), 3,18 (м, 1H), 2,72 (т, J = 9 Гц, 1 Н), 2,45(м, 1Н), 2,27 (т, J 6 Гц, 2Н), 2,09 (м, 1H), 1,96 (м, 1 Н), 1.74 (м, ЗН), 1,45 (м, 5Н), 1,27 (м, 8Н).

П р и и е р 5. Диметил-Щ5-(2-пивалоиламино-4-гидро ксипиридо(2.3-б)пи римидин- 6-ил)этинил)(тиен-2-илкарбонил)-L ãëóтамат

А, Раствор 1 50 г (7,25 ммоль) 5-бром-2тиофенкврбоновой кислоты, несколько капель диметилформамида и 2,21 мл тионилхлорида нагревают с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Растворитель удаляет при пониженном давлении, а остаток растворяют в 10 мл сухого метиленхлорида. Этот раствор добавляют по каплям к осажденному льдом раствору 1,62 г диметил-L-глутаматгидрохлорида. 10 мг диметиламинопиридина и 2,11.мл триэтиламина в

25 мл сухого метиленхлорида. После завершения добавления полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч, а затем разбавляют водой и экстрагируют метиленхлоридом. Органические экстракты промывают 0,1 н. соляной кислотой и насыщенным раствором бяка;.доната натрия, а затем выпаривают, получают

2,71 г (100 ) диметил-й-(5-бромтяе -.-2-илкарбонил)-1=глутамата в виде вязкого масла, которое можно использовать в дальнейшем без последующей очистки..

Диметил-й-(5-бромофур-2-илкарбонил)

4:глутамат, также в виде вязкого масла, получают аналогичным образом из 5-бром2-фуранкарбоновой кислоты.

Диметил-г4-(5-бромтиен-3-илкарбонил}

-1=глутама можно получить аналогичным образом из 5-бромтиенилкарбоновой кислоты.

8. Смесь 1,70 г (6,32 ммоля) 2-пивалоиламино-4-гидрокси-б-этинилпиридо(2,3-о) пиримидана, 2,3Q г (6,32 ммоль) диметил-1(5-бромтиен-2-илкарбонил)-1:глутамата, 44 мг палладий-хлорида, 130 мг трифенилфосфина, 25 мг иодида меди ()) и 1,13 мл триэтиламина в 30 мл ацетонитряла нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем. охлаждают до комнатной температуры. Рвстворитель удаляют при йониженном давлении, а остаток обрабатывают на хроматографической колонке(Ф/атегз 500), элюируя смесью 1:19 метанол:метиленхлорид до получения диметил-Щ5-(2-пи валоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пиримидин-6ил)этинил)(тиен-2-илкарбонил)-L-глутамата, 2 2 8-230оС

Вычислено, $: С56,41; Н 4,92; N12,65;

S 5,79.

2002747

1О

15 илкарбонил)-L-глутамата диметил-Щ5-(2- ил (2-ливвлоилвиино-д-гидролои-5.6.т,в-тетC26H27N507S

Найдено, : С 56.64; Н 4,77; N 12,88; S

5 58.

Аналогичным образом, заменяя эквивалентным количеством диметил-й-(5-бромфур-2-илкарбонил)-L-глутамата диметил-й-(5-бромoтиeн-2-илхарбонил)1: глутамат в вышеописанной процедуре, получают диметил-.N-(5-(2-пивалоиламино-4гидро кси и и ридо(2,3-б)пиримидин6-ил)(фур-2-илкарбониф=глутамат, т.пл, 135ОС (с потемнением), 181 С (разложение).

Вычислено. $: С 58,32; Н 4,71; N 13,08.

C26+25N 506

Найдено, ф,: С 58,58; Н 4,92; N 13;11.

Аналогично, заменяя эквивалентным .2о количеством диметил-й-(5-бромтиен-3-илкарбонил)-L-глутамата диметил-N-(5-бромтиен-2-илкарбонил)- -глутаматв вышеописанной процедуре, получают диметил-Щ5-(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пиримидин- 6-ил)этил)(тиен-3илкэрбонил)-1:глутамат.

Пример 6. Диметил-N-(5-(2-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8- тетрагидропи ридо(2,3-б)пиримидин-6-ил)этил))тиен-2

-ил кар бонил-1: глутамат

К раствору 0,5 r диметил-1=(5-(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пиримидин-6- ил)этинил)тиен-2-илкарбонил)4.-глутамата s 30- мл ледяной уксусной кисл ты добавляют 1,5 r 57 палладия на угле. Полученную смесь гидрируют при давлении 1 ати при перемешивании в течение 18 ч,.катализатор отфильтровывают, а полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. После хроматографической обработки на силикагеле при элюировании смесью 1:19 метанол:хлороформ, получают

100 мг 19,7 / диметил-й-(5-(2-(2-йивалоиламино4-гидроксипиридо(2,3-чЦ пиримидин6-ил)этил)тиен-2-илкарбонил)+глутамата и

204 мг (40,2; ) целевого диметил-М-(5-(2-(2пивалоиламиио-4-гидрокси-5,6,7,8- тетра- 55 гидропи ридо(2,3-4)пиримидин-6-ил) атил) тиен-2-илкарбонил)-i- глутзмата, т.пл.

152-160 С.

Вычислено, $: C55,60; Н 6,28; и 12,47.

C25HXN507

Найдено, : С 55,76; Н 6,23; И 12,26, Частично гидрированные побочные продукты можно повторно гидрировать до получения дополнительного количества целевого продукта.

Аналогичным образом получают из диметил-N-(5-пивал оиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)Пиримидин-6-ил) этинил(фур-2рагидропиридо (2,3-4)пиримидин-б-ил)атил)фур-2-илкарбонил)-L-глутамат. т. пл, 155 вЂ” 162 С., Вычислено, : С 57,45; Н 6,12; N 12,88, С26Нззй508

Найдено. 7ь: С 57,22; Н 6,08; N 12,66.

Аналогичным образом можно получить диметил-й-(5-(2-(2-и ивалоилами но-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо (2.3-б)пиримидин-6-ил)этил)тиен-3-илкарбонил)-Lглутамат иэ диметил-Щ5-(2-пивалоиламино-4-гидроксипиридо(2,3-б)пиримидин-6ил)этинил)тион-3-илкарбонил- -глутамата.

П"р и м е р 7. N-(5-(2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6-ил)этил)тиен-2-илкарбон ил)-1=глутаминовая кислота

Раствор 100 мг диметил-N- 5"(2-(2-пивалоиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо (2,3-б)пиримидин-б-ил)этил)тиен2-илкарбонил)-L-rnyvavaxa в 15 мл 1,0 н. водного гидроксида натрия перемешивают при комнатной температуре в течение 12О ч, а затем рН 7,0 устанавливают путем осторожного добавления 5,0 н. соляной кислоты, Образующийся твердый продукт собирают фильтрованием и сушат при 80ОС, получают

61,5 мг (76,8 ) N-{5-(2-(2-амино-4-гидрокси5,6,7,8-твтрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6-ил)атил)тион-2-ил карба пил)-Е-глутаминовой кислоты, т,пл. 226-240 С (вспенивание и разложение).

ЙМР(ДМСО-d6) д: 9,80(c, шир, 1Н), 8,45 (д,з 9гц,-1Н),7,62(д. J-3 Гц,1Н),6,87(p, J 3Гц, 1Н), 6,ЭО(с, 1Н), 6,04(с,2Н),4,28(ш, 1Н),3,12(м, 1Н);2,84(м, 3Н), 2;36(м, 1Н), 2,02 (м, 1H), 1,83 (м, 2Н), 1,57 (м, ЗН), Аналогичйым образом иэ диметил-N 2(2-пивал оиламино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидрапиридо (2,3-б)пиримидин-б-ил)этил)фур2-илкарбонил}-1=глутамата получают N-(5-(2(2-амино4-гидро кси-5,6,7,8-тетрагидро пири до(2,3-б) пиримидин-6-ил)этил)фур-2-илкарбонил)4=глутаминовую кислоту, т,пл. 204-230 С (са вспениванием), AMP (ДМСО-d6, 300 МГц) д: 9,80 (с, шир, 1Н), 8,27 (д, J 9 Гц, 1Н). 7,03 (д, J 4

Гц; 1Н}, 6;30 (с, 1H), 6,25(д, J -4 Гц, 1Н), 6,04 (с, 2Н), 4,03 (м, 1H), 3,15 (м, 1Н), 2,65 (м, ЗН), 2,42 (м, 1Н), 2,16 (т, J 7 Гц, 2Н), 2,01 (м, 1Н), 1,84 (м, 2H), 1,57 (м. ЗН).

N-(5-(2-(2-а мино-4-гидро кси-5,6,7,8-тетрагидропиридо(2;3-d) пиримидин-6ил)этил)тиенил-3-илкарбонил)-L-глутаминовую кислоту можно получить аналогичным способом из диметил-(Ч-(5-(2-(2-пивалоиламино-.4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо N- (2,3-б)пиримидин-б-ил)этил) тиен-3карбонил)-1=глутамата. оо2747 вания

2Î0

4/10

3/10

О/9.вания

20.

2,5

О /10

0/10

1 / 1 О

О/10

100

94 1/10 вания

О /10

78 токсичность б,гб

a,n о,тв ю/ 1о

6/10 о / о ойдо и р и м е р 8, Икбо для линии клеток лейкемии человека ССЯ FCEM N-Щ2-(2амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропири. до(2,3-d) пиримидин-6-ил)атил)тиен-2-илкарбонил}-Е-глутаминовой кислоты составляет 0,0015 мкг/мл.

ИКщ И-15-(2-(2-,амино-4-гидрокаи5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-б) пиримидй н-6-ил)этил)фур-2-илкарбонил}-1:глутаминовой кислоты составляет 0010 мкг/мл

ИКбо N-4-(2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тет. ра гидро и и ридо(2,3-d) пи римидин-6.ил)атил)тиен-2-илка рбон ил}-L-глутаминовой кислоты составляет 0,0756 мкг/мл.

И KM для линии клеток лейкемии человека СС F GEM для других соединений изобретения следующие:! и чиччо оценка против различных неоплазм дает следующие значения: (a) И-Я2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d).пиримидин-бил)этил)тиен-2-илкарбонил}+глутаминовая кислота

603 Н ЕД лимфосаркома у мышей. (Внутрибрюшинно, раз в день, один день) Доза, /мг/ $ ингибиро- токсичность кг/ вания

400 100 6/10

200 99 2/ 10

50 88 0 /10 (б) М-Щ2-(2-амино-4-гидроксй-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6ил)этил)тиен-8-ил карбонил)- =глутаминовая кислота

603НЕД лимфосаркома у мышей: (Внутрибрюшинно, раз в день, 10 дней) Доза, /мГ/ «r/ $ ингибироаания токсично

1оо

93 (в) N-(5-(2-(2-амина -4-гидрокси5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3- б) пиримидин-6-ил)атил)тиен-2-ил карбонил}-1

-глутаминовая кислота

8-16 мелаиома у мышей: (Внутрибрюшинно, ежедневно, на 1 и 7 дни)

Доза, мг/кг g ингибиро- Токсичность

2о. (r) N-Я2(2-амино4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2;З-d) пиримидин-6ил)зтил)тиен+илкарбонил)-(:глутами новая . т кислота

СЗВ аденокарцинома молочной железы у мышей, (Внутрибрешинно, раз в день, на 1,4.7 зо -и10день) Доза, мг/кг ф ингибиро. Токсичность

48 (@ И-Я2-(2-амино.-4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6, ил)атил)тиен-2-илкарбонил)-)=глутаминовая бо кислота

СА-755 аденокарцинома у мышей (Внутрибрюшинно. раз в-день, на 1,4,7 и 10 день) бб Доза, мг/кг $ ингибиро- токсичность (е) N-{5-(2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-д) пиримидин-6ил)этил)тиен-2-ил карбонил)-L-глутами новая кислота

СХ-1 Ксенография позвоночника у мышей (Внутрибрюшинно, раз в день, на 1,4.7 и 10 день) 2002747 (к) N-(5(2(2-амино-4-гидрокси-5.6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6ил)этил)фур-2-ил карбон ил}-L-глута ми нова я

5 кислота

6СЗНЕД лимфосаркочовые опухоли у мышей: (Виутрибрюшинно, раз в дечь, на 1,4,7

1О ДЕНЬ) Доза, мг/кг $ ингибиро- токсичность вания токсично 10/10

91 .. 9/10

6/10

3/10

Доза. мг/кг $ ингибиро- токсичность (ж) N-{5-((2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8тетра гидропиридо(2,3 вЂ”.б) пиримидин-6ил)этил)тиен-2-ил карбонил}-1:глутаминовая кислота

LX Ксенография легких у мышей; (Внутрибрюшинно, раз в день, на 1,4,7 и 10 день)

20 ЧО

Доза, мг/кг ингибиро- токсичность вания токсично

8/8

4/8

О/8

98 (л) й-(4-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо(2,3-б) пиримидин-6-ил)бутирил)- =глутаминовая кислота

6СЗНЕД лимфосаркома у мышей:

I (3) N-{5-(2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d) пиримидин-6ил)зтил)тиен-2-илкарбонил}-L-глутаминовая з5 кислота

МХ-1 Ксенография молочной железы у мышей: (Внутрибрюшинно, раз в день, на 1,4.7 4о и 10 день) Доза, мг/кг $" ингибиро- токсичность вания

11 токсичность

45 вания токсично токсично (м) й-{4(2 (2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8тетрагидропиридо(2,3-d) .пиримидин-6ил)этил)циклогексилкарбонил}-L-глутаминовая кислота

6СЗНЕД лимфосаркома у мышей: (Внутрибрюшинно, раз в день, восемь дней) е, Доза. мг/кг Токсичность

84 (и) N-{5-(2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,2,8- 55 тетрагидропиридо(2,3 вЂ” б) пиримидин-6ил)этил)фур-2-ил карбонил}-L-глутаминовая кислота

6СЗНЕД лимфосаркома у мышей: (Внутрибрюшинно. раз в день, воСемь дней) 100

50.

12,5 о/9 о/ю о/ю

o/ю

Доза. мг/кг ингибиро- токсичность вания

О/10

100

25 (56) Taytor et al. - J, 0rg. Chem., ч.48 . р.4853 (1983).

Доза, мг/кг ингибиро40

1О/1О

9/9

5/10

3/10

2,5

1,25

0.625

5О

12.5

6,25

312 вания

29 1

$ ингибирова22

4. 1а.О/10

О/10

Î/1О

О/10

1/10

О/10

Î/ 1 0

О! 10

О/10

2002747

Формула изобретения или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что проводят гидролиз соединения общей формулы

Способ получения производных глута миновой кислоты общей формулы

20 где R > - ОН или - N Н ; йз - углерод-углеродная связь. Ci -.С4алкилен, циклогексилен или группа общей формулы.1 и.,Ж

Ф где R>, Йз и * имеют указанные значения, 82 .- водород или карбоксизащитная группа;

R4 - водород или аминозащитная группа и, по краййей мере один из и и R4 отличен от водорода, с последующим выделением целевого про40 дукта в свободном виде или в виде соли. где G- S-или-O-;

R5" водород, хлор или фтор конфигурация около атома, обозначен. ная *, является Я-конфигурацией, Составитель А,Орлов

Редактор M.Самерханов Техред М.Моргентал - Корректор М.Керецман

Тираж - Подписное

НПО "Поиск Роспатента

113035, Москва, Ж-36, Раушская наб., 4/5

Заказ 3213

Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Я Я

u-u ж о

Ф."

1 ж о ж"

8 о