Стабилизированный раствор -интерферона

 

Изобретение может быть использовано для стабилизации лейкоцитарного интерферона. Цель - сохранение антивирусной активности в течение более длительного времени. Сущность изобретения: для стабилизации раствора a -интерферона используют дисахариды, которыми могут быть лактоза или сахароза. Для хранения в стеклянной таре в состав дополнительно вводят желчную кислоту или ее производное. При помощи дисахаридов удается достичь хорошей стабилизации на продолжительный срок. 3 з. п. ф-лы.

Изобретение относится к стабилизации лейкоцитарного интерферона (IFN- α), особенно в форме лиофилизатов.

Оказалось, что IFN-α в чистом виде не является вполне устойчивым и его биологическая активность теряется во время хранения.

Поэтому для стабилизации IFN-α уже применяли различные вспомогательные вещества. Определенную стабилизацию IFN- α достигали добавкой глицина, причем однако предпочтительно одновременно добавляют альбумин.

В стремлении достигнуть хорошей стабилизации IFN-α по возможности на продолжительный срок, избегая применения высокомолекулярных соединений, как сывороточный альбумин, желатина, декстран или производные крахмала, было найдено, что это удается при помощи дисахаридов или при необходимости желочной кислоты или производного желчной кислоты.

Поэтому изобретение относится к составам, особенно в форме лиофилизатов, которые содержат дисахарид и при необходимости желчную кислоту или производные желчной кислоты.

Составы по изобретению можно применять для получения фармацевтического препарата для терапии или профилактики вирусных инфекций и иммунорегулирующих аномалий, особенно новообразований.

Стабилизацию можно применять к природному или рекомбинантному IFN-α (r-IFN- α). Особенно предпочтительным IFN-α в связи с изобретением является рекомбинантный IFA. Область концентрации охватывает несколько десятичных степеней и вверх ограничивается, в основном, только растворимостью IFN- α причем предпочтительная область составляет от 0,1 х 10⁶ до 1 х 10⁸ 1. Е. /мл, особенно от 1 х 10⁶ до 5 х 10⁷ 1. Е. /мл.

Дисахарид, предпочтительно лактозу или сахарозу, добавляют в раствор IFN-α при концентрации от 0,5% до 15% (мас. /объем) предпочтительно 5% (мас. /объем).

Желчной кислотой или производным желчной кислоты может быть, например, холевая кислота, деоксихолевая кислота, гликодеоксихолевая кислота, тауродеоксихолевая кислота, хенодеоксихолевая кислота, гликохенодеоксихолевая кислота, таурохенодеоксихолевая кислота, гликохолевая кислота или таурохолевая кислота, причем особенно предпочтительная гликохолевая кислота. Ее добавляют в раствор IFN-α при концентрации от 0,01 до 3% (мас. /объем), предпочтительно 0,5% (мас. /объем).

Можно добавлять также другие вспомогательные вещества для регулирования рН, например, NaOH, для регулирования рН, например, фосфат-цитрат-буферный раствор, для изотонизирования, например, хлористый натрий и консервации препарата, например, сложный метиловый и пропиловый эфир р-оксибензойной кислоты, а также для упрочнения каркаса лиофилизата, например, глицин.

П р и м е р 1. 3 млн. 1. Е. r-IFN- αA вводили в содержащий 1 мл воды сывороточный альбумин, глицин или лактозу и при необходимости другие вспомогательные средства (см. табл. 1). Полученные растворы стерильно фильтровали (мембранный фильтр, размер пор 0,2 мм) и в стеклянных флаконах объемом 10 мл и загружали в стерилизованную паром сублимационную сушилку. После замерзания растворов при -40^оС в течение 4 ч проводили первичное обезвоживание процесса лиофилизации при температуре около -30^оС при давлении 0,1 мбар в течение 14 ч. Затем проводили вторичное обезвоживание при полном вакууме при 20^оС в течение приблизительно 4 ч. Стеклянные флаконы закрывали в атмосфере N₂ соответствующими алюминиевыми колпачками. Затем их подвергали различным тестам на стабилизацию, результаты которых обобщены в табл. 1.

Лучшие результаты достигнуты с содержащим лактозу лиофилизатом. Этот препарат показывал отличную стойкость также после долгосрочного хранения при почти запрещенной для IFN-α температуре хранения 45^оС.

П р и м е р 2. Аналогичным примеру 1 способом исследовали стойкость лиофилизатов, содержащих r-IFN- α A и сахарозу. Было установлено, что достигнутую с лактозой стабилизацию r-IFN- αA можно достигнуть также с сахарной (см. табл. 2).

П р и м е р 3. Аналогично примеру 1 исследовали стойкость лиофилизатов, содержащих r-IFN-α A при высоких концентрациях лактозы или сахарозы. Было установлено, что достигнутую стабилизацию IFN-α посредством дисахаридов можно достигать также при высоких концентрациях r-IFN- αA (см. табл. 3).

(56) Заявка ЕР 86/00531, кл. A 61 K 37/26, 1985.

Формула изобретения

1. СТАБИЛИЗИРОВАННЫЙ РАСТВОР α-ИНТЕРФЕРОНА, содержащий вспомогательные вещества, отличающийся тем, что, с целью сохранения антивирусной активности в течение длительного времени, в качестве вспомогательного вещества используют дисахарид при следующем соотношении компонентов в 1 мл: Раствор α - интерферона 0,1 · 10⁶ - 1 · 10⁸ LE.

Дисахарид 5 - 150 мг 2. Раствор по п. 1, отличающийся тем, что дисахарид представляет собой лактозу или сахарозу.

3. Раствор по п. 1, отличающийся тем, что, с целью сохранения активности препарата при хранении в стеклянной таре, дополнительно содержит 0,1 - 30 мг желчной кислоты или производное желчной кислоты.

4. Раствор по п. 3, отличающийся тем, что желчная кислота или производное желчной кислоты представляет собой гликохолевую кислоту.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2