Штамм микромицета beauveria bassiana для производства энтомопатогенного препарата

 

Использование: микробиологическая промышленность, производство средств защиты растений от вредных насекомых, получение нового штамма для получения вышеуказанных средств. Сущность - штамм микроскопического гриба Beauveria bassiana получен путем селекционирования штамма Beauveria bassiana 124/1 с последующим отбором клонов по продуктивности, биологической эффективности на тест-насекомых и терморезистентности. Штамм депонирован в Центральной коллекции микроорганизмов государственного концерна "Биопрепарат" под N ЦКМ F-54 Ц. Для получения энтомопатогенного пропарата штамм выращивают на жидкой питательной среде, содержащей 1% технической глюкозы, 3% глицерина и 7% гидролизата белково-витаминного концентрата при 25°С при аэрации в течение 57 ч, полученную культуральную жидкость концентрируют в 10 раз по объему, вводят стабилизатор и смачиватель. Получают жидкий препарат с титром 10·10⁹ спор/мл. Биологическая эффективность препарата против трипса огурца при рабочей концентрации 1% составляет 90%. 4 табл.

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству средств защиты растений от вредных насекомых, и касается нового штамма гриба для производства энтопатогенного препарата.

Известны штаммы грибов вида Beauveria bassiana для производства энтомопатогенных препаратов.

Наиболее близким штаммом к решаемой задаче является штамм Beauveria bassiana 124/1.

Основным недостатком известного штамма является его невысокая эффективность и низкая терморезистентность.

Целью изобретения является исключение вышеуказанных недостатков.

Штамм гриба Beauveria bassiana TC-92 получен путем селекции штамма Beauveria bassiana 124/1 на жидких и твердых питательных средах, содержащих гидролизат белково-витаминного концентрата (БВК) и глицерин с последующим отбором чистых культур по продуктивности, биологической активности на тест-насекомых и терморезистности. Штамм депонирован в Центральной коллекции микроорганизмов государственного концерна "Биопрепарат" (ЦКМК"Б") под N ЦКМ F-54Ц.

Штамм гриба Beauveria bassiana TC-92 характеризуется следующими культурально-морфологическими признаками.

При выращивании штамма на твердой среде Чапека при 26-27^оС в течение 6 сут колонии беловатого цвета с точкой в центре, с ровными краями. Воздушный мицелий разветвленный, септированный, гифы мицелия в диаметре 3,0-5,0 мкм, конидиеносцы бутылевидные формируются одиночно, попарно или мутовками. Размер конидий 2,8-3,5 мкм одноклеточные, одноядерные на среде Сабуро при тех же условиях выращивания колонии с ровными краями белые с кремовым оттенком сверху и снизу, врастающие в агар, на сусло-агаре формирует морщинистые колонии кремового цвета снизу и белые сверху, плоские с приподнятым центром.

Морфологические признаки штамма при культивировании на различных жидких питательных средах при 24-26^оС в течение 72 ч представлены в табл. 1.

Физиолого-биохимические признаки штамма.

Растет при 18-32^оС, оптимально 25-27^о, рН среды 5,35-7,2, оптимально 5,8-6,8.

Отношение к источникам углерода: усваивает сахарозу, глюкозу, лактозу, глицерин.

Отношение к источникам азота: утилизирует пептон, казеин, рыбо-костную муку, мясной бульон, дрожжи и их гидролизаты.

При глубинном культивировании штамма на различных составах сред происходит изменение рН культуральной жидкости различно в зависимости от состава среды. Данные по изменению рН в процессе культивирования представлены в табл. 2.

Продуктивность штаммов ТС-92 и родительского представлена в табл. 3.

Процентное содержание биомассы по сухому остатку после фильтрации культуральной жидкости составляет 17-19% для штамма ТС-92 и 10-12% исходного родительского штамма 124/1, что ниже на 39% по продуктивности.

Исследована терморезистентность предложенного и исходного штаммов при 80^оС в течение 1-2 мин. Полученные результаты представлены в табл. 4.

Как видно из таблицы предложенный штамм устойчивее на 20% Биологическая эффективность штамма ТС-92 на личинках оранжерейной белокрылки и паутинном клеще при опрыскивании растений, обильно заселенных вредителями, суспензией с титром 10⁷ спор/мл составляет 65 и 55% на 5-е сутки, а у известного соответственно 55 и 40% Пример использования штамма для получения энтомопатогенного препарата.

В жидкую питательную среду, содержащую 1% технической глюкозы, 3% глицерина и 7% гидролизата БВК, вносят 5% посевной споровой культуры штамма ТС-92 и культивируют при 25^оС и аэрации в ферментере объемом 50 л в течение 57 ч. Полученную культуральную жидкость концентрируют в 10 раз. В концентрат вводят смачиватель и стабилизатор суспензии и получают препарат в жидком виде с титром 10 ^.10⁹ спор/мл. Биологическая эффективность полученного препарата против трипса огурца при рабочей концентрации 1% составляет 90% Таким образом, предложенный штамм превосходит родительский штамм по продуктивности и биологической эффективности.

Формула изобретения

Штамм микромицета Beauveria bassiana ЦК МК "Б" N ЦКМ F-54Ц для получения энтомопатогенного препарата.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2