Фосфороскоп-фосфориметр

 

Использование: в биологии, медицине при анализе белков или других веществ, содержащих фосфоресцентную метку. Сущность изобретения: в фосфороскопе-фосфориметре, содержащем осветительную часть, объект, регистрирующую часть и элементы фокусировки, между осветительной и регистрирующей частями с одной стороны и объектами с другой стороны расположены осциллирующее зеркало и оптоволокно. 1 ил.

Изобретение относится к технической физике, а именно к фосфороскопии и фосфоресцентному анализу, и может быть использовано для обнаружения и анализа спектров возбуждения и спектров фосфоресценции, а также для определения количества фосфоресцирующих веществ в биологических и других образцах, в том числе для выявления антител, окрашенных фосфоресцирующими красителями.

Известны фосфороскопы и фосфориметры, в которых для возбуждения фосфоресценции используется эпиосвещение объекта, при этом одна и та же линза (система линз или зеркало) используется как для освещения объекта, так и для собирания света его фосфоресценции и проецирования изображения на светочувствительный слой светодетектора (Kuo et. al, 1985, Dechaud et. al. 1986, Diamandis, 1988; Schneckenburger et. al. 1993). Свет от источника света модулируют по амплитуде тем или иным способом (импульсный источник света, механический или электронный обтюратор и т. д.), а перед светодетектором располагают другой модулятор (электронный, механический, оптический или другой), при этом частота второго модулятора синхронизована с частотой первого.

Такая схема пригодна для анализа фосфоресценции растворов и особенно удобна для анализа фосфоресцирующих веществ, находящихся на твердой подложке.

Наиболее близкой к предлагаемой является схема, используемая в приборе, предназначенном для анализа результатов in situ гибридизации и в иммуногистохимии (Seveus et. al. 1992,). Этот прибор собран на базе флуоресцентного микроскопа и содержит импульсный источника света, коллектор, полевую диафрагму, светофильтры, линзы, объект, фотоэлектронный модулятор и регистрирующую часть.

Недостатком указанного прототипа является то, что в нем требуется жесткая синхронизация двух модуляторов, что усложняет конструкцию прибора.

Целью изобретения является упрощение конструкции прибора, а именно упрощение взаимодействия осветительной и регистрирующей частей прибора.

Поставленная цель решается с помощью осциллирующего зеркала и световода, которые вводятся между осветительной и детектирующей частями прибора с одной стороны и объектом с другой стороны и позволяет автоматически разделить во времени освещение объекта и сбор его фосфоресценции.

На чертеже изображен предлагаемый фосфороскоп-фосфориметр.

Фосфороскоп-фосфориметр содержит осветительную часть (источник света 1; коллектор 2; полевую диафрагму 3; светофильтр 4), регистрирующую часть (светофильтр 5; вспомогательное зеркало для визуального наблюдения фосфоресценции 11, фотоприемник 12), элементы фокусировки (линзы 7 и 8), осциллирующее зеркало 6, оптоволокно 9 и объект 10.

Фосфороскоп-фосфориметр работает следующим образом.

Лучи от источника света 1 собираются с помощью коллектора 2, проходят через полевую диафрагму 3, сменный возбуждающий светофильтр 4 и отражаются от осциллирующего зеркала 6 (позиция зеркала "а") на линзу 7, которая фокусирует полевую диафрагму 3 на поверхность "а" оптоволокна 9, которое передает это изображение через линзу 8 на объект 10, возбуждая его фосфоресценцию. Свет фосфоресценции объекта собирается линзой 8 на оптоволокно 9, которое проектирует его с помощью линзы 7 при выведенном осциллирующем зеркале 6 (позиция зеркала "б") через запирающий светофильтр 5, при выведенном вспомогательном зеркале 11 (позиция "б") на фотоприемник 12 (фотокатод фотоумножителя, или ПЗС матрицу) или с помощью введенного вспомогательного зеркала 11 (позиция зеркала "а") для визуального наблюдения.

Фосфороскоп-фосфориметр собран на базе серийного микроскопа типа БИОЛАМ. В качестве линзы использован объектив микроскопа 10 0,4, свет к которому подводится с помощью оптоволокна длиной 60 см и диаметром 2 см соответственно схеме, приведенной на чертеже. Осциллирующее зеркало вибрирует с частотой вибратора, при этом оно попеременно то направляет на оптоволокно свет от источника света (позиция "а"), то выводится из хода лучей фосфоресценции (позиция "б"), при этом свет фосфоресценции направляется на фотоприемник или для визуального наблюдения. Источником света служит ксеноновая лампа ЛКсШ-100, в качестве приемника света использована ПЗС камера, светочувствительный слой которой расположен в плоскости изображения объекта.

Литература: 1. Kuo J.E. Milby K.H. Hinsberg W.D. 1985. Direct measurement of antigens in serum by t ime-resolves fluoroimmunnoassay. Clin. Chem. v. 31, pp. 60-63.

2. Dechaud H. Bador K. Claustrat F. Desuringes C. 1986, Laser excited immunofluorometric assay af prolactin with use of antibodies coupled to lanthanide labeled diethylenetriminepentanucleotide acid. Clin.Chem, v. 32, pp. 1323-1327.

3. Diamandis E. 1988. Immunoassays with time-resolved fluorescence spectroscopy: Principles and applications. Clin.Biochem. v. 21, pp. 139-150.

4. Seveus L. Vaisala M. Syrianen S. 1992. Time-resolved fluorescence imaging of European chelate label in immunohistochemistry and in-situ hybridization. Cytometry, v. 13, pp. 329-338.

5. Schneckenburger H. Konig K. Kuntz-Rapp K. Westpal-Frosch C. Ruck A. 1993. Time resolved in vivo fluorescence of photosynthesizing porphyrins. J. Photochem.Photobiol. v. 21. 143-147.

Формула изобретения

Фосфороскоп-фосфориметр, содержащий осветительную часть, регистрирующую часть, объект, элементы фокусировки, отличающийся тем, что между осветительной и регистрирующей частями с одной стороны и объектом с другой стороны расположены осциллирующее зеркало и оптоволокно.

РИСУНКИ

Рисунок 1

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 13.08.2004

Извещение опубликовано: 20.10.2005        БИ: 29/2005

PC4A - Регистрация договора об уступке патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Прежний патентообладатель:Общество с ограниченной ответственностью "БИОЧИП-ИМБ"

(73) Патентообладатель:Институт молекулярной биологии им.В.А.Энгельгардта РАН

Договор № РД0034855 зарегистрирован 08.04.2008

Извещение опубликовано: 20.05.2008        БИ: 14/2008




 

Похожие патенты:

Изобретение относится к устройствам для оптического спектрального определения элементного состава веществ по спектрам люминесценции кристаллофосфоров и может быть использовано, в частности для определения малых концентраций актинидных элементов в объектах окружающей среды и технологических растворах

Изобретение относится к технике измерения давления газа на поверхность твердого тела, а точнее к технике бесконтактной регистрации давления и концентрации газа по тушению люминесценции индикаторных покрытий и может найти применение для оперативного измерения давления воздуха на исследуемые в аэродинамических трубах модели летательных аппаратов, скоростных автомобилей, винты, лопатки газовых турбин и т.п

Изобретение относится к биофизическим методам выявления и количественного анализа фитотоксических соединений в водных и иных растворах, и может быть использовано в службах охраны природы для оперативного контроля за токсичностью природных и сточных вод, а также в аналитических и контрольно-токсикологических лабораториях для обнаружения и последующего определения содержания химических веществ, обладающих фитотоксической активностью

Изобретение относится к оптическим методам анализа, в частности, к люминесцентным методам

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения полиароматических углеводородов (ПАУ) в природных, питьевых и сточных водах

Изобретение относится к физической химии высокомолекулярных соединений, а именно к определению гидрофобности белков, в том числе растительных соевых, широко используемых в пищевой промышленности, с помощью методов люминесценции

Изобретение относится к области аналитической химии и техники и может быть использовано в медицинской диагностике, клинической медицине, в биотехнологии, пищевой промышленности, ветеринарии, экологических исследованиях

Изобретение относится к экспериментальным методам ядерной физики и может быть использовано при решении различных задач технической физики
Изобретение относится к экспериментальным методам физики и может быть использовано при создании систем маркировки и идентификации контролируемых объектов

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к качественному и количественному определению нитропроизводных полициклических ароматических углеводородов (нитро-ПАУ) в сложных смесях и растворах

Изобретение относится к установке контроля для отбора проб и определения наличия некоторых веществ, например остатков загрязнений в емкостях, например, в стеклянных или пластмассовых бутылках

Изобретение относится к медицине, а точнее к области бесконтактной клинической диагностики злокачественных новообразований и области их локализации in vivo в живом организме на основе флуоресценции эндогенных порфиринов

Изобретение относится к области измерительной техники

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к спектрофотометрическим приборам для контроля (диагностики) состояния биологической ткани

Изобретение относится к биотехнологии

Изобретение относится к аналитической химии
Наверх