Дициклогексиламиды n-замещенных -аминокарбоновых кислот, обладающие антиаритмической и антифибрилляторной активностью

 

Изобретение относится к области химии биологически активных веществ, которые могут иметь применение в медицине. Предлагаемые биологически активные соединения относятся к новой группе биологических соединений, а именно к дициклогексиламидам N-замещенных α-аминокарбоновых кислот общей формулы, приведенной в описании. Заявляемые соединения обладают выраженной антиаритмической и антифибрилляторной активностью и отличаются от известных антиаритмических препаратов тем, что сочетают в себе свойства антиаритмиков класса I и класса III. 3 табл., 2 ил.

Изобретение относится к новой группе биологически активных химических соединений, а именно к дициклогексиламидам N-замещенных α -аминокарбоновых кислот общей формулы I где R¹ водород или низший алкил, R² и R³ - одинаковые или различные, водород, низший алкил, оксиалкил, аминоэтил, циклогексил, либо R² и R³ вместе с несущим их атомом азота составляют насыщенный гетероцикл, имеющий один или два гетероатома и их фармацевтически приемлемые соли кислотного присоединения, а также четвертичные соли.

Известен ряд лекарственных препаратов, обладающих антиаритмической активностью, которые относятся по химической структуре к ариламидам N-замещенных α -аминокарбоновых кислот, например лидокаин, новокаинамид, пиромекаин и др. Эти препараты, относящиеся по современной классификации препаратов для лечения нарушений сердечного ритма [1], относятся к I классу. Препараты этого класса обладают небольшой терапевтической широтой вследствие довольно высокой токсичности, объясняемой основным механизмом действия этих препаратов - блокадой натриевых каналов.

Наибольший интерес для клиницистов в настоящее время представляют препараты III класса антиаритмического действия.

Эти препараты удлиняют потенциал действия миокардиальных клеток, в основе их эффекта лежит влияние на калиевые каналы. К настоящему времени нет достаточно хороших антиаритмиков этого класса. Наиболее известные представители III класса амиодарон [2] и соталол [3] обладают многочисленными побочными эффектами, исключающими их длительное применение [4]. Созданный недавно препарат сематилид (N-(2-диэтиламиноэтил)-4-(метилсульфониламино)бензамид HCl [3] наиболее близок к заявляемым веществам по антиаритмическому действию. Однако он не обладает достаточно высокой эффективностью и терапевтической широтой. В связи с тем, что препараты класса III могут иметь широкое применение в терапии угрожающей жизни аритмии и фибрилляции, в настоящее время идет интенсивный поиск препаратов этой группы как в нашей стране, так и в ряде зарубежных стран.

Таким образом, несмотря на обилие антиаритмических средств клиника по прежнему нуждается в новых, более эффективных и универсальных препаратах, которые при хороших фармакокинетических свойствах не вызывали бы побочных отрицательных эффектов.

Целью настоящего изобретения является получение нового ряда веществ, имеющих наиболее высокую антиаритмическую и антифибрилляторную активность, обладающих большой терапевтической широтой и сочетающих в себе свойства антиаритмиков класса I - класса III.

В соответствии с изобретением предлагается новая химическая группа веществ - дициклогексиламиды N-замещенных-α-аминокарбоновых кислот общей формулы I, где R¹ до R³ имеют названные ранее значения, их физиологически приемлемые соли кислотного присоединения и их четвертичные соли, обладающие свойствами антиаритмиков класса I и класса III.

Соединения общей формулы I в специальной и патентной литературе до настоящего времени не описаны.

В качестве примеров для соединений формулы I настоящего изобретения следует назвать: 1 - дициклогексиламид диэтиламиноуксусной кислоты гидрохлорид; 2 - дициклогексиламид диэтиламиноуксусной кислоты иодметилат; 3 - дициклогексиламид диэтиламиноуксусной кислоты бром-пропен-2-илат; 4 - дициклогексиламид α -(диэтиламино) пропионовой кислоты гидрохлорид; 5 - дициклогексиламид бис-(2-гидроксиэтил) аминоуксусной кислоты; 6 - дициклогексиламид бис-(2-гидроксиэтил) аминоуксусной кислоты гидрохлорид; 7 - дициклогексиламид бис-(2-гидроксиэтил)-α-аминопропионовой кислоты гидрохлорид;
8 - дициклогексиламид морфолиноуксусной кислоты;
9 - дициклогексиламид морфолиноуксусной кислоты гидрохлорид;
10 - дициклогексиламид гексаметилениминоуксусной кислоты гидрохлорид;
11 - дициклогексиламид октагидропирроло(1,2-а)- пиразиноуксусной кислоты дигидрохлорид;
12 - дициклогексиламид бутиламиноуксусной кислоты гидрохлорид;
13 - дициклогексиламид изо-бутиламиноуксусной кислоты гидрохлорид;
14 - дициклогексиламид α-(N-бутиламино) пропионовой кислоты гидрохлорид;
15 - дициклогексиламид циклогексиламиноуксусной кислоты гидрохлорид;
16 - дициклогексиламид аминоуксусной кислоты гидрохлорид гидрат;
17 - дициклогексиламид (2-аминоэтил) аминоуксусной кислоты дигидрохлорид.

Таким образом, у заявляемой группы веществ общей формулы I прототипов по химическому строению не описано.

В качестве препаратов сравнения по антиаритмической активности выбран препарат лидокаин, который относится к антиаритмикам I класса и препарат сематилид, который относится к антиаритмикам класса III. Выбор этих препаратов связан с тем, что соединения заявляемой группы сочетают в себе свойства антиаритмиков класса I и III.

Синтез заявляемых соединений I и IV осуществляется взаимодействием дициклогексиламида α -галогенкарбоновых кислот II с первичными, вторичными, гетероциклическими аминами III с последующим превращением полученных оснований I в соответствующие соли кислотного присоединения или четвертичные соли (IV) по следующей схеме:

где
Hal = Cl или Br
IV.1 R¹=H, R²=R³=C₂H₅, R⁴=H, x = Cl
IV.2 R¹=H, R²=R³=C₂H₅, R⁴=CH₃, x = J
IV.3 R¹=H, R²=R³=C₂H₅, R⁴=CH₂CH=CH₂, x = Br
IV.4 R¹=CH₃, R²=R³=C₂H₅, R⁴=H, x = Cl
IV.5 R¹=H, R²=R³=CH₂CH₂OH, R⁴=H, x = Cl
IV.6 R¹=CH₃, R²=R³=CH₂CH₂OH, R⁴=H, x = Cl
IV.7 R¹=H, , R⁴=H, x = Cl
IV.8 R¹=H, , R⁴=H, x = Cl
IV.9 R¹=H, , R⁴=H, x = Cl
IV.10 R¹=R²=H, R³=H-C₄H₉, R⁴=H, x = Cl
IV.11 R¹=R²=H, R³=CH₂CH(CH₃)₂, R⁴=H, x = Cl
IV.12 R¹=CH₃, R²=H, R³=H-C₄H₉, R⁴=H, x = Cl
IV.13 R¹=R²=H, R³=C₆H₁₁, R⁴=H, x = Cl
IV.14 R¹=R²=H, R³=CH₂CH₂NH₂, R⁴=H, x = Cl
IV.15 R¹=R²=R³=R⁴=H, x = Cl
Дициклогексиламиды N-замещенных α- аминокарбоновых кислот I получены при кипячении амидов I с избытком соответствующего амина III без растворителя или в среде органического растворителя с выходом 50-60% от теории. В качестве растворителей могут быть использованы спирт, бензол, толуол и др. Условия проведения реакций зависят от строения исходных аминов и температуры кипения растворителя. Амиды I представляют собой кристаллические или маслообразные вещества основного характера. Чистота их контролировалась методом тонкослойной хроматографии на ДС Alufolien Kieselgel 60 F 254 в системе бензол: спирт: водный аммиак (8:2:0,1). Значение Rf 0,24-0,58.

При действии неорганических кислот, например соляной кислоты, амиды I дают соли кислотного присоединения (IV.1, IV.4-IV.15), при действии иодистого метила или бромистого аллила дают четвертичные соли (IV.2, IV.3). Строение солей IV доказано данными элементного анализа и спектральными данными. В ИК-спектрах, снятых в пластинках KBr, имеются интенсивные полосы поглощения в области 1640-1660 см^-1, соответствующие валентным колебаниям карбонильной группы, полосы в области 3300 см^-1; характерные для гидроксигруппы (IV.5, IV.6), а также полоса поглощения 3496 см^-1, характерная для аминогруппы первичных аминов (IV.10).

Соли IV представляют собой белые кристаллические вещества ограниченно растворимые в воде, хорошо растворимые в спирте, не растворимые в эфире, бензоле.

Ниже приводятся примеры получения, иллюстрирующие заявляемую группу соединений. Пример 1. Гидрохлорид дициклогексиламида диэтиламиноуксусной кислоты (IV.1).

Смесь 10,32 г (0,04 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 29,24 г (0,4 моль) диэтиламина кипятят 6 ч. Избыток диэтиламина отгоняют, остаток промывают водой и экстрагируют бензолом. Бензольный раствор дважды промывают водой и упаривают досуха. Остаток (масло) растворяют в 70 мл ацетона, прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH 1-2 и оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают, промывают ацетоном. Выход 6,6 г (50%). Т. пл. 221-222^oC (разл.) (из смеси абсолютного спирта с ацетоном).

Найдено,%: C 65,32; H 10,66, N 8,49; Cl 10,72. C₁₈H₃₅ClN₂O.

Вычислено,%: C 65,33, H 10,66, N 8,46; Cl 10,71.

Пример 2. Иодметилат дициклогексиламида диэтиламиноуксусной кислоты, (IV.2).

К раствору 2 г дициклогексиламида диэтиламиноуксусной кислоты (получение см. в примере 1) в 10 мл эфира прибавляют раствор 1,5 мл иодистого метила в эфире. Оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают. Выход 3,1 г (90%). Т. пл. 195-196^oC (из ацетона).

Найдено,%: I 29,09, C₁₉H₃₇IN₂O.

Вычислено,%: I 29,08.

Пример 3. Бромпропен-2-илат дициклогексиламида диэтиламиноуксусной кислоты (IV.3).

К раствору 2,94 г (0,01 моль) дициклогексиламида диэтиламиноуксусной кислоты (получение см. в примере 1) в 25 мл бензола прибавляют 9 мл бромистого аллила и реакционную смесь кипятят 5 ч. Осадок отфильтровывают. Выход 2,1 (50,6%). Т.пл. 162-163^oC (из смеси спирта с эфиром).

Найдено,%: C 60,46; H 9,43; N 6,48; Br 19,13. C₂₁H₃₉BrN₂O.

Вычислено,%; C 60,71; H 9,46; N 6,74; Br 19,24.

Пример 4. Гидрохлорид дициклогексиламида диэтиламинопропионовой кислоты (IV.4).

3,2 г (0,01 моль) дициклогексиламида α -бромпропионовой кислоты кипятят в 10 мл диэтиламина 7 ч. Реакционную массу охлаждают, выливают в 100 мл воды. Водный раствор экстрагируют бензолом, бензольный раствор упаривают досуха. Масло (2,4 г) растворяют в 25 мл ацетона, прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом до pH 1, оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают. Выход 1,92 г (51,31%). Т. пл. 222-223^oC (разл.) (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 66,18; H 10,76, N 8,19; Cl 10,27. C₁₉H₃₇ClN₂O.

Вычислено,%: C 66,15; H 10,82; N 8,12; Cl 10,28.

Пример 5. Гидрохлорид дициклогексиламида бис(2-гидроксиэтил) аминоуксусной кислоты (IV.5).

Смесь 10,3 г (0,04 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 10,5 г (0,1 моль) диэтаноламина в 30 мл абсолютного спирта кипятят 8 ч. Реакционную массу охлаждают, выливают в 350 мл ледяной воды и оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 13,7 г (94,5%) Т. пл. 101-102^oC.

Найдено,%: C 66,34; H 10,52; N 8,65. C₁₈H₃₄N₂O₃
Вычислено, %: C 66,22; H 10,5; N 8,58. 3 г основания растворяют в 30 мл ацетона, прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH 1, оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат на воздухе. Выход гидрохлорида IV.5 2,6 г (77,8%). Т. пл. 219-220^oC (разл.) (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 59,46; H 9,68; N 7,74; Cl 9,86. C₁₈H₃₅ClN₂O₃.

Вычислено,%: C 59,57; H 9,72, N 7,72; Cl 9,77.

Пример 6. Гидрохлорид дициклогексиламида бис-(2-гидроксиэтил)- α -аминопропионовой кислоты (IV.6).

Смесь 6,08 г (0,02 моль) дициклогексиламида α -бромпропионовой кислоты и 5,25 г (0,05 моль) диэтаноламина в 30 мл абсолютного спирта кипятят 8 ч. После охлаждения реакционную массу выливают в воду, экстрагируют бензолом. Бензол упаривают досуха. В остатке 5,75 г масла, которое растворяют в 50 мл ацетона, прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH 1-2 и оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают. Выход 5 г (66,3%). Т. пл. 168-169^oC (из смеси абсолютного спирта с эфиром).

Найдено,%: C 60,44; H 9,84; N 7,60; Cl 9,29. C₁₉H₃₇ClN₂O₃.

Вычислено,%: C 60,54; H 9,89; N 7,43. Cl 9,40.

Пример 7. Гидрохлорид дициклогексиламида морфолиноуксусной кислоты (IV. 7).

Смесь 2,58 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 4,36 г (0,05 моль) морфолина в 25 мл толуола кипятят 5 ч. Реакционную массу промывают водой; упаривают досуха. Выход 2,85 г (92,5%) Т. пл. 117-118^oC (из 60%-ного спирта)
Найдено,%: C 70,4; 10,48; N 9,11. C₁₈H₃₂N₂O₂.

Вычислено,%: C 70,09; H 10,46; N 9,08.

К раствору 1,5 г основания в эфире прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом. Осадок отфильтровывают. Выход гидрохлорида IV.7 1,3 г (71,4%). Т. пл. 260-261^oC (разл.) (из смеси ацетона с абсолютным спиртом) (3:1).

Найдено,%: Cl 10,30, C₁₈H₃₂ClN₂O₂.

Вычислено: Cl 10,28.

Пример 8. Гидрохлорид дициклогексиламида гексаметилениминоуксусной кислоты (IV.8).

Смесь 2,6 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 4 г (0,04 моль) гексаметиленимина в 25 мл толуола кипятят 3,5 ч. Реакционную массу охлаждают, промывают водой и упаривают досуха. В остатке - масло (3,2 г) растворяют в 32 мл ацетона и прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом до pH 1. Осадок отфильтровывают, промывают ацетоном. Выход 2 г (55,8%). Т. пл. 246-247^oC (разл.) (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 67,33, H 10,44; N 7,83; Cl 9,84. C₂₀H₃₇ClN₂O
Вычислено,%: C 67,30; H 10,45; N 7,85; Cl 9,93.

Пример 9. Дигидрохлорид дициклогексиламида октагидропирроло(1,2-а) пиразиноуксусной кислоты (IV.9).

Смесь 2,6 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 2,52 г (0,02 моль) октагидропирроло(1,2-а)пиразина в 25 мл толуола кипятят 3 ч. Реакционную массу охлаждают, промывают водой и упаривают досуха. В остатке - масло (2,8 г) растворяют в 20 г ацетона и прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом до pH 1. Осадок отфильтровывают, выход 2,3 г (54,7%). Т. пл. 239-240^oC (разл.) (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 59,91; H 9,45; N 10,11; Cl 16,80. C₂₁H₃₉Cl₂N₃O.

Вычислено,%: C 59,99; H 9,35; N 9,99; Cl 16,86.

Пример 10. Гидрохлорид дициклогексиламида н-бутиламиноуксусной кислоты (IV.10).

Смесь 5,16 (0,02 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 14,6 г (0,2 моль) н-бутиламина кипятят 6 ч. Избыток бутиламина отгоняют, остаток промывают дважды водой и экстрагируют бензолом. Бензольный раствор промывают водой и упаривают досуха. Остаток (масло) растворяют в 30 мл ацетона и прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH 1. Осадок отфильтровывают, промывают эфиром. Выход 4,3 г (65%). Т. пл. 210-211^oC (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 65,24; H 10,54; N 8,51; Cl 10,66. C₁₈H₃₅ClN₂O.

Вычислено,%: C 65,33; H 10,66; N 8,46; Cl 10,77.

Пример 11. Гидрохлорид дициклогексиламида изо-бутиламиноуксусной кислоты (IV.11).

Смесь 5,16 г (0,02 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 14,6 г (0,2 моль) изобутиламина кипятят 6 ч. Реакционную массу упаривают досуха. Толуольный раствор испаряют до половины объема и к остатку прибавляют этилацетат, насыщенный хлористым водородом. Выпавший кристаллический осадок оставляют на сутки в холодильнике, затем отфильтровывают, промывают эфиром и высушивают в вакууме при 70^oC. Выход 5,6 г (84,7%). Т. пл. 240-241^oC (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 65,36; H 10,72; N 8,33, Cl 10,91. C₁₈H₃₅ClN₂O.

Вычислено,%: C 65,33; H 10,66; N 8,46; Cl 10,71.

Пример 12. Гидрохлорид дициклогексиламида α-(н-бутил)аминопропионовой кислоты (IV.12).

Смесь 2,63 г (0,0087 моль) дициклогексиламида α-бромпропионовой кислоты и 6,36 г (0,1 моль) н-бутиламина кипятят 10 ч. Реакционную массу упаривают досуха, остаток промывают водой и экстрагируют бензолом. Бензольный раствор промывают водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в бензоле и прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом. Осадок отфильтровывают, промывают эфиром, сушат. Выход 0,6 г (20%). Т. пл. 265-266^oC из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 66,33; H 11,07; Cl 10,61. C₁₉H₃₇ClN₂O.

Вычислено,%: C 66,15; H 10,81; Cl 10,28.

Пример 13. Гидрохлорид дициклогексиламида циклогексиламиноуксусной кислоты (IV.13).

Смесь 2,57 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 10 мл циклогексиламина кипятят 5 ч. Избыток циклогексиламина упаривают. Остаток растворяют в 25 мл ацетона, прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH 1, оставляют стоять на ночь. Осадок отфильтровывают. Выход, 2,2 г (61,6%). Т. пл. 242-243^oC (разл.) (из изопропилового спирта).

Найдено,%: C 67,19; H 10,50; N 7,90; Cl 9,90. C₂₀H₃₇ClN₂O.

Вычислено,%: C 67,29; H 10,45; N 7,85; Cl 9,93.

Пример 14. Дигидрохлорид дициклогексиламида β -аминоэтил)аминоуксусной кислоты, гидрат (IV.15).

Смесь 2,58 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты и 3 г (0,5 моль) 88%-ного этилендиамина в 25 мл спирта кипятят 11 ч. Реакционную массу упаривают досуха. Остаток подщелачивают концентрированным водным раствором аммиака и извлекают бензолом. Бензольный раствор промывают водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в эфире и прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом до pH 1. Осадок отфильтровывают, промывают эфиром. Выход 1,8 г (48,4%). Т. пл. 243-244^oC (из смеси спирта с эфиром).

Найдено,%: C 51,61; H 9,39; N 11,42; Cl 18,86. C₁₆H₃₅Cl₂N₃O₂.

Вычислено,%: C 51,60; H 9,47; N 11,28; Cl 19,04.

Пример 15. Гидрохлорид дициклогексиламида аминоуксусной кислоты гидрат (IV.4).

К раствору 2,58 г (0,01 моль) дициклогексиламида хлоруксусной кислоты в 25 мл спирта прибавляют насыщенный водный раствор аммиака до pH 10-12 (10 мл) и оставляют стоять при 20^oC на 2-3 недели. В реакционную массу прибавляют воду, небольшое количество 25%-ного водного раствора аммиака и смесь экстрагируют эфиром. Эфирный раствор промывают водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в эфире и прибавляют эфир, насыщенный хлористым водородом до pH 1. Осадок отфильтровывают, промывают эфиром. Выход 1,7 г (58%). Т.пл. 229-230^oC (из смеси спирта с эфиром).

Найдено,%: C 57,24; H 9,83; N 9,48; Cl 11,95; C₁₄H₂₉ClN₂O₂.

Вычислено,%: C 57,42; H 9,98; N 9,57; Cl 12,11.

Фармакологические результаты, полученные при изучении дициклогексиламидов N-замещенных α- аминокислот.

Были проведены фармакологические исследования соединений общей формулы IV, которые растворимы в воде, физиологическом растворе и поэтому удобны для внутривенного и внутрибрюшинного введения. Для исследования могут быть использованы также водные растворы соединений формулы I при pH 3-5. При этом эквимолярные количества соединений общей формулы I и IV проявляли одинаковый фармакологический эффект, поэтому в таблицах приводят результаты исследований соединений общей формулы IV, которые более удобны для экспериментальной работы.

Фармакологическое исследование заявляемых соединений общей формулы IV вначале осуществляли с помощью комплекса методов, применяемых для первичной оценки антиаритмического эффекта, учитывая корреляцию между химическим строением новых соединений и их антиаритмической активностью. С этой целью использовали аконитиновую и хлоридкальциевую модели аритмий.

Эффективную дозу (ЭД₅₀) и летальную дозу (ЛД₅₀) и их доверительные границы вычисляли по методу Миллера и Тейнтера (10) при уровне вероятности p= 0,05. Опыты проводили на беспородных белых крысах массой 180-200 г при внутривенном введении заявляемых соединений. В качестве критерия терапевтической широты заявляемых соединений использовали отношение летальной дозы (ЛД₅₀) к средней эффективной дозе (ЭД₅₀)-ЛД₅₀ ЭД₅₀, которое обозначали как антиаритмический индекс [5]. Спектр антиаритмической активности наиболее перспективных соединений исследовали в дальнейшем на модели ритма сердцем с определением порога электрической фибрилляции желудочком у кошек [6 и 7] для выявления антифибрилляторных средств, на хлоридбариевой модели для выявления свойств III класса [8], а также модели двухстепенной перевязки коронарной артерии у собак по методу Харриса [9] для выявления свойств, характерных для антиаритмиков I класса.

Таким образом, для исследования использовали комплекс методов экспериментального воспроизведения у бодрствующих и анестезированных животных, позволяющих выявить антиаритмические свойства заявляемых соединений.

В таблице 1 представлены результаты изучения антиаритмических свойств заявляемых соединений на хлоридкальциевой модели аритмии. Опыты проводили на бодрствующих беспородных крысах массой 180-200 г. Хлорид кальция вводили в виде 10%-ного раствора в дозе 200-250 мг/кг. В начале подбирали для каждого веса животного дозу хлорида кальция, вызывающую летальный исход от возникающей в течение 1-1,5 мин фибрилляции желудочков, затем исследуемые соединения вводили за 1-3 мин до введения хлорида кальция. ЭКГ регистрировали во II стандартном отведении на приборе ЭЛКАР-2. Антиаритмический эффект оценивали по уменьшению количества случаев летальной фибрилляции желудочков. Полученные данные обрабатывали по методу Литчфильда [10].

Изученные соединения по антиаритмической активности на модели хлоридкальциевой аритмии можно расположить в следующей последовательности:
IV.11>IV.10>IV.12>IV.14>IV.6>6=IV.9>IV.7>IV.4>IV.8
Аконитиновую аритмию вызывали у бодрствующих крыс массой 180-200 г, вводя в хвостовую вену раствор аконитина в дозе 30-40 мкг/кг. При этом возникали нарушения ритма смешанного предсердно-желудочкового характера, представляющие собой обычно политопную экстрасистолию. Заявляемые соединения вводили внутривенно за 1-3 мин до введения аконитина.

Как видно из таблицы 2, большинство заявляемых соединений оказались весьма эффективны в предотвращении аритмий на этой модели, значительно превосходя препараты I класса антиаритмического действия лидокаин, ханидин и новокаинамид, взятые для сравнения как эталонные препараты. В соответствии со средней эффективной дозой соединения можно расположить в следующей последовательности по убыванию антиаритмической активности:
IV.10>IV.11>IV.5>IV.6>IV.2=IV.1>IV.14
Для выявления антифибрилляторной активности соединений IV.1; IV.10 изучали их влияние на порог электрической фибрилляции желудочков, вызванной электрическим раздражением.

Этот метод дает возможность сравнивать антифибрилляторные свойства соединений, имеющие важное значение в связи с необходимостью предупреждать возникновения фибрилляции желудочков вследствие электрической нестабильности миокарда и решать таким образом возрастающую в последние годы проблему внезапной смерти.

Опыты проводили на кошках массой 2-3 кг, анестезированных нембуталом (35 мг/кг) при искусственном дыхании. После вскрытия грудной клетки и перикарда на миокард левого желудочка накладывали платиновые электроды. Электрическим раздражением от 3-канального электронного стимулятора SEN-7201 (Nihon Kohden, Япония) создавали "эктопический очаг возбуждения". Нарушения сердечного ритма (фибрилляцию желудочков) вызывали серией прямоугольных импульсов повышающейся интенсивности (20 импульсов в пачке), длительностью каждого 4 мс и частотой следования 50 Гц. За порог фибрилляции желудочков принимали минимальное количество мА раздражающего тока, вызывавшее фибрилляцию. Момент возникновения фиксировали по данным ЭКГ и падению артериального давления. Артериальное давление в бедренной артерии регистрировали с помощью электромонометра Elema (Швеция). ЭКГ регистрировали во II стандартном отведении на электрокардиографе ЭЛКАР-2 и координатном самописце анализатора Атаск-350 (Nihon Kohden, Япония), одновременно с записью пульсового давления.

Исследуемые препараты вводили в бедренную вену в 10 мл физиологического раствора в течение 3 мин. Использовали дозы 4,5 и 8 мг/кг для лидокаина и 2 и 5 мг/кг для хинидина.

Дефибрилляцию производили с помощью конденсаторного разряда заданной интенсивности, подаваемого непосредственно на миокард от дефибриллятора ДИ-03.

Как видно из результатов, представленных в таблице 3, изученные соединения IV. 1; IV.10 обладают выраженными антифибрилляторными свойствами. Они повышают порог более интенсивно и длительно, чем препарат сравнения лидокаин, практически единственный препарат, широко используемый в клинике для лечения угрожающих жизни аритмий у постинфарктных больных и для предупреждения внезапной смерти.

Желудочковые нарушения ритма, вызванные окклюзией нисходящей ветви левой коронарной артерии, получают у бодрствующих собак, оперированных по методу Harris (1950). Опыт многих фармакологических лабораторий мира показывает, что соединения, демонстрирующие активность на этой модели, оказываются высокоэффективными в клинике и выявляют антиаритмические свойства I класса подавляющих фракцию постоянного уровня натриевых токов в деполяризованных ишемией миокардиальных клетках.

Опыты ставили на собаках массой 8-15 кг. Животных анестезировали нембуталом (35 мг/кг внутривенно), после интубации переводили на искусственное дыхание, фиксировали на операционном столе в положении на правом боку. В асептических условиях вскрывали грудную клетку в четвертом межреберье слева. Перикард надрезали, выделяли нисходящую ветвь левой коронарной артерии на 2-3 см ниже левого края ушка. Параллельно оси артерии накладывали инъекционную иглу N20. Первую лигатуру завязывали на игле, что создавало после изъятия иглы уменьшение циркуляции крови в нижележащем участке миокарда. Вторую лигатуру завязывали наглухо через 30 мин после первой. Рану послойно зашивали, вводили антибиотики. Во время операции производили запись ЭКГ во II стандартном отведении, производили постоянное мониторное наблюдение. В яремную вену вживляли полиэтиленовые катетеры, заполненные гепарином, катетеры подкожно выводили на шею в области затылка. Через 24 ч в опыт брали только животных, находящихся в удовлетворительном состоянии и имевших устойчивые желудочковые нарушения ритма. Исследуемые вещества вводились медленно в яремную вену в 10 мл физиологического раствора.

Эффективность веществ оценивали по их способности восстанавливать нормальный синусовый ритм, а также по степени уменьшения частоты эктопических возбуждений желудочков. При статистической обработке результатов использовали t-тест Стьюдента.

Исследовали влияние наиболее активных из выявленных ранее соединений IV. 1 в дозах 3,3 и 8 мг/кг и IV.10 в дозах 3,3; 5,0 и 6,6 мг/кг при внутривенном введении в 10 мл физиологического раствора. Эффективность соединений на этой модели сравнивали с эффективностью лидокаина, действовавшего в дозах 5 и 8 мг/кг. За положительный антиаритмический эффект принимали снижение эктопических сокращений на 50% и более.

Всего было проведено 27 опытов в этой серии. При внутривенном введении соединения IV. 10 в дозе 5 мг/кг уже на 1-й минуте действия эктопические сокращения устраняются полностью, а общее число сокращений сердца снижается на 30%. Как видно на фиг. 1, стойкий антиаритмический эффект поддерживается в течение более 30 мин (нижние графики). На 45 минуте процент эктопических сокращений возвращается к исходному. Лидокаин в эквимолярной дозе значительно уступает по активности соединению IV.10. В этой дозе это соединение уменьшает общее число сердечных сокращений в среднем на 6% и продолжительность подавления эктопических сокращений составляет более 30 мин. Продолжительность эффекта лидокаина была не более 15 мин.

Соединение IV.1 в дозе 3,3 мг/кг через 5 мин после внутривенного введения снижало общее число сердечных сокращений на 13% и число эктопических сокращений на 30-8%. В большей дозе 8 мг/кг и это соединение уменьшает общее число сердечных сокращений на 13%, а, эктопических возбуждений желудочков на 42-100%, в то время как лидокаин в этой дозе уменьшает общее число сердечных сокращений на 8%, а эктопических - на 70%. Продолжительность антиаритмического эффекта - 30 мин. Как видно на фиг. 2, соединение IV.1 (нижние графики - сплошные линии) значительно превосходит по антиаритмической активности лидокаин (верхние графики - пунктир).

Таким образом, наиболее активные соединения IV.1 и IV.10 обладают выраженными антиаритмическими свойствами I "В" класса.

Как известно, аритмогенный эффект BaCl связан с уменьшением калиевой проводимости, поэтому хлоридбариевая модель аритмии рассматривается адекватной для появления свойств III класса антиаритмического действия.

Опыты проводили на бодрствующих кроликах обоего пола весом 2-4 кг по методу, описанному L. Szektres and Gy.J. Papp (1971). Кроликам вводили 4 мг/кг BaCl в краевую ушную вену в виде 2%-ного раствора в течение 1 мин. В ответ на внутривенное введение раствора BaCl после латентного периода длительностью несколько секунд возникают нарушения сердечного ритма в виде политеопной желудочковой экстрасистолии, которые продолжаются до 30 мин.

ЭКГ регистрировали во II стандартном отведении каждую минуту в течение 15 минут. Запись ЭКГ производили каждую минуту в течение 12 с. В последующие опыты брали тех кроликов, у которых на каждой минуте в течение 15 мин была хотя бы одна экстрасистола.

Так как BaCl является очень токсичным веществом и выводится из организма медленно, то отобранных в контрольных опытах кроликов выдерживали перед экспериментом в течение 3-4 дней. Затем им вводили 4 мг/кг BaCl в течение 1 мин. Регистрировали аритмию на ЭКГ после введения раствора BaCl в течение 1-й и 2-й минуты, а затем вводили исследуемое вещество в виде 1%-ного раствора в течение 30 с. Регистрировали ЭКГ на каждой минуте в течение 15 мин.

Эффект соединения оценивали по способности восстанавливать нормальный синусовый ритм в течение 1-й или более минут. На каждом кролике, подобранном в контроле, смотрели 3-5 доз соединения с интервалом 3-4 дня.

Антиаритмик III класса сематилид, взятых нами в качестве эталона, в дозе 2,5-5,0 мг/кг устранял аритмию, вызванную внутривенным введением хлорида бария. Наиболее активный из заявляемых соединений IV.10 оказался эффективным в диапазоне доз 0,125-0,25 мг/кг, что свидетельствует о его значительно более высокой эффективности на этой модели.

Формула изобретения

Дициклогексиламиды N-замещенных α-аминокарбоновых кислот общей формулы

где R¹ - водород или низший алкил;
R² и R³ - одинаковые или различные и означают водород, низший алкил, окси(низший алкил), аминоэтил, циклогексил, либо R² и R³ вместе с несущим их атомом азота составляют насыщенный 6- или 7-членный гетероцикл, который может содержать дополнительно атом азота или кислорода, либо означают пиперазин, в котором атом азота в 4-ом положении и соседний атом углерода соединены пропиленовой группой,
или их фармацевтически приемлемые соли кислотного присоединения, или их четвертичные соли.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4