Кристаллическая соль энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил- 2- /4- фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо(b)фурана, способ ее получения, фармацевтическая композиция и способ ингибирования образования липидпероксида

 

Кристаллические соли энантиомеров 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3-дигидробензо[b] -фурана стабильны и обладают повышенной растворимостью в воде. Они пригодны для использования в качестве прекрасных ингибиторов образования липидпероксида. Получают их взаимодействием 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,4-дигидробензо[b] -фурана с оптически активной органической кислотой или взаимодействием энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,4-дигидробензо[b] -фурана с кислотой. Фармацевтическая композиция на их основе ингибирует образование липидпероксида. 6 с. и 9 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к кристаллической соли оптически активного производного аминокумарина, обладающей фармацевтической эффективность при лечении и предотвращении церебральной дисфункции, связанной с церебральным ударом и черепной травмой.

Поскольку было обнаружено, что образование липидпероксида и родственные радикальные реакции оказывают вредное воздействие на живые организмы за счет мембранных нарушений, энзиматических нарушений и т.д., были предприняты различные попытки в области фармацевтических применений антиоксидантов и ингибиторов образования липидпероксидов.

Основными используемыми в настоящее время в области фармакопеи игибиторами образования липидпероксидов являются производные таких природных антиоксидантов, как витамин C, витамин E и т.п., и фенольные производные [Kenji Fukuzawa, Japanese Journal of clinical Medicine, vol. 46, pp. 2269-2276 /1988/] . Однако ни один из них не оказался удовлетворительным для практического использования из-за слабости действия или побочных эффектов.

Однако авторы настоящего изобретения обнаружили производное аминокумарина, представленное общей формулой /А/, которое великолепно ингибирует образование липидпероксида, и поэтому подали заявку на патент /EP-A-0483772/.

где R¹ и R² одинаковы или различны и представляют атом водорода, ацильную группу, алкоксикарбонильную группу, необязательно замещенную алифатическую или необязательно замещенную ароматическую группу; R³, R⁴ и R⁵ одинаковы или различны и являются необязательно ацилированной гидроксильной группой, необязательно замещенной аминогруппой, необязательно алкоксигруппой или необязательно замещенной алифатической группой, или два из R³, R⁴ и R⁵ могут быть связаны вместе с образованием необязательно замещенной карбоциклической группы; R⁶ и R⁷ одинаковы или различны и представляют необязательно замещенную алифатическую группу при условии, что, по крайней мере, один из R⁶ и R⁷ имеет метилен в альфа-положении; R⁸ и R⁹ одинаковые или различны и представляют атом водорода или необязательно замещенную алифатическую группу или необязательно замещенную ароматическую группу, или их соли.

Из производных аминокумарина, представленных общей формулой /А/, 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фуран, представленный формулой /В/: в вышеуказанной публикации описан как плохо растворимый в свободной форме. Кроме того, благодаря наличию асимметричных атомов углерода в структуре молекулы, такое производное /В/ существует в виде двух оптических изомеров, а именно /R/ и /S/ конфигурациях. Производное /В/ описано как смесь /рацемат/ этих энантиомеров в вышеуказанной публикации. Однако это не подходит для фармацевтических препаратов, так как оно гигроскопично и, следовательно, нестабильно. Далее, не существует пригодных для инъекций ингибиторов образования липидпероксида, которые были бы удовлетворительны с точки зрения действия, растворимости в воде, стабильности /при хранении/ и с других точек зрения. Соответственно, существует необходимость в разработке таких агентов.

Авторы изобретения нашли способ решения всех этих проблем. Конкретно, они предприняли попытку разделить оптические изомеры и получить соли 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинметил/-2,3-дигидробензо [b] фурана, соединения В, выбранного из вышеописанных соединений, представленных общей формулой /А/, которые пригодны для лечения, предотвращения церебральных дисфункций, связанных с церебральным шоком или травмой черепа. Несмотря на общепринятый факт, что любое соединение трудно кристаллизовать в первый раз, изобретателям удалось получить кристаллическую соль энантиомера соединения В; и неожиданно обнаружили, что она стабильна и растворима в воде и, следовательно, чрезвычайно полезна для приготовления препаратов для инъекций. Авторы провели дальнейшее исследование на основании этих открытий, и результатом явилось настоящее изобретение.

Соответственно, в настоящем изобретении предложена кристаллическая соль энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо [b] фурана, в частности, его дигидрохлорид и фумарат, способы их получения и препараты, ингибирующие образование липидпероксида.

Кристаллическая соль настоящего изобретения является кристаллической солью соединения /энантиомера/, представленного формулой /I/ или /II/:
Кристаллическая соль настоящего изобретения представляет кристалл соли энантиомера /I/ или /II/ 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо [b] фурана с фармакологически приемлемой кислотой, например, такой неорганической кислотой, как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота или фосфорная кислота, и такими органическими кислотами, как уксусная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, миндальная кислота, метансульфокислота, бензолсульфокислота или толуолсульфокислота, или такая аминокислота, как аспартиковая или глутаминовая кислота. Кристаллическая соль настоящего изобретения может быть моно- или ди-солью кислоты.

Кристаллическая соль настоящего изобретения, предпочтительно, является дигидрохлоридом, фумаратом или тому подобным, более предпочтительно, дигидрохлоридом /S/-/+/ конфигурации, или тому подобным.

Кристаллическую соль настоящего изобретения получают /1/, осуществляя взаимодействие 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо [b] фурана /Соединение В/ с оптически активной органической кислотой или /2/ осуществляя взаимодействие энантиомера соединения В с кислотой.

В вышеуказанном способе /1/ кристаллическую соль настоящего изобретения можно конкретно получить способом /а/ или /b/:
/а/ способ получения кристаллической соли, который включает перемешивание соединения B и оптически активной органической кислоты в растворителе до получения однородного раствора;
/b/ способ получения кристаллической соли, который включает конденсацию соединения B с оптически активной органической кислотой до получения дистереомерной смеси амидов, разделяя и очищая ее, а затем проводя гидролиз.

В способе /а/ или /b/ типичные оптически активные органические кислоты включают органические карбоновые кислоты, фосфорные кислоты или органические сульфокислоты, содержащие в молекуле асимметричный центр. Предпочтительные примеры оптически активных органических кислот включают замещенные /-/ или /+/- винные кислоты, такие как /-/ или /+/-диацетилвиниловая кислота, /-/ или /+/-дитолуилвинная кислота, /-/ или /+/-дибензоилвинная кислота, то есть /-/ или /+/- винная кислота, /-/ или /+/-яблочная кислота, /-/ или /+/ - молочная кислота, /+/-камфор-10-сульфоновая кислота, /+/ - 3-бромкамфор-10-сульфоновая кислота, МТРА /альфа-метокси-альфа-/трифторметил/фенилуксусная кислота/, ментоксиуксусная кислота и т.д., особенно /-/ или /+/ миндальная кислота и т.д., в способе /а/, и МТРА, ментоксиуксусная кислота и т.п., в способе /b/.

Растворители, которые можно использовать в способе /а/, включают воду, спирты /например, этанол, метанол, пропанол, бутанол, изопропанол/, простые эфиры /например, этиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан/, сложные эфиры /например, этилацетат, метилацетат /, кетоны /например, ацетон/, нитрилы /например, ацетонитрил/, амиды /например, диметилформамид, диметилацетамид и диметилсульфоксид/. Их можно использовать по отдельности или в сочетании. Предпочтительно, использовать смеси растворителей метанола, ацетонитрила, этилацетата и т.д.

В способе /а/ обычной практикой является использование оптически активной органической кислоты в отношении от около 0,5 до 5 эквивалентов, предпочтительно, от около 0,5 до 2 эквивалентов на эквивалент соединения В. Хотя количество растворителя по отношению к соединению B в зависимости от типа растворителя, обычно оно составляет от около 5 до 30 мас. частей соединения B в случае метанол-ацетонитрильного растворителя. Этот способ /а/ ведут при температуре от 0 до 100^oC, предпочтительно, от 20 до 50^oC. Из смеси соединения B и оптически активной органической кислоты кристаллическая соль образуется мгновенно.

В способе /b/ диастереоизомерную смесь амидов можно получить, конденсируя соединение B c оптически активной органической кислотой обычными способами, такими как способ с использованием хлорангидрида и т.д.

В способе /b/ диастереоизомерную смесь амидов модно разделить и очистить такими обычными способами разделения и очистки, как фракционная кристаллизация или хроматография на силикагеле.

В способе /b/ гидролиз может быть кислотным гидролизом / с использованием такой неорганический кислоты, как соляная кислота, серная кислота или фосфорная кислота, такой органической кислоты, как метансульфокислота, или кислотная ионообменная смола /или основным гидролизом/ с использованием таких оснований, как гидроксид натрия или гидроксид калия, только с водой или с сочетанием воды и такого органического основания, как метанол или этанол/.

Кроме того, при желании, к раствору, содержащему кристаллическую соль, полученную способом /1/, можно добавить органический растворитель, в котором соль плохо растворяется /например, эфир, этилацетат и т.д./ в количестве/ массовом/ от около 1 до 50 раз, предпочтительно, от около 3 до 10 раз, превышающем количество раствора; причем смесь можно хранить при температуре от около 0 до 30^oC в течение от около 0,5 до около 24 часов, и полученный осадок /соль оптически активной органической кислоты/ можно собрать фильтрованием.

Кроме того, можно добавить растворитель, в котором соль слабо растворяется, после того, как получен раствор, содержащий кристаллическую соль в способе /1/ концентрируют / при пониженном давлении или в других условиях/ при 20 - 100^oC, до снижения объема до половины или четверти исходного объема.

В способе /2/ энантиомер соединения B подвергают взаимодействию с кислотой, например, вышеуказанной фармакологически приемлемой кислотой. Конкретно, энантиомер соединения B смешивают с кислотой в растворителе до получения однородного раствора.

Растворитель, полученный этим способом, таков же, как и в способе /1/. Температура и время в этом способе такие же, как и в способе /1/.

Кроме того, при желании, целевой продукт можно выделить из раствора, полученного способом /2/, который включает целевую кристаллическую соль, способом, который указан для способа /1/.

Энантиомер соединения B, который используют в качестве исходного материала в способе /2/, можно получить, добавляя водный раствор неорганического основания, такого как карбонат щелочного металла, бикарбонат или такой гидроксид, как карбонат калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия, гидроксид натрия или гидроксид калия, к соли оптически активной органической кислоты, полученной способом /1/ и выделенной, например, фильтрацией или экстракцией растворителем. Количество используемого основания составляет от около 1 до 10 мас. частей на мас. часть соли.

В другом варианте энантиомер соединения B можно получить, подвергая соединение B или его соль /например, соль вышеуказанной фармакологически приемлемой кислоты/ хроматографической обработке, используя колонку или разделения энантиомеров /хиральную колонку/, такую как ENANTIO-OVM /Tosoh Corporation/ или CHIRALCEL Series /Daisel Chemical Industries, Ltd./ и проявляя хроматограмму одним или более из органических растворителей, такими как вода, различные буферы /например, фосфатный буфер/, спирты /например, метанол, этанол/, нитрилы /например, ацетонитрил/ простые эфиры /например, тетрагидрофуран/ и углеводороды /например, гексан/.

Соединение B, используемое в качестве исходного материала для кристаллической соли, получают способом, описанным в примере 67 ЕР-А-0483772.

Кристаллическая соль настоящего изобретения улучшает метаболизм высших ненасыщенных жирных кислот /например, линолевой кислоты, γ- линоленовой кислоты, α- линоленовой кислоты, арахидоновой кислоты, ди-гомо -γ- линоленовой кислоты, эйкозапентаеновой кислоты /и особенно демонстрируют действие, повышающее циркуляторную систему и антиаллергические действия, как, например, действие, ингибирующее образование липидпероксида /антиокислительное действие/, метаболитную систему 5-липоксигеназы /например, лейкотриены: 5-гидропероксиэйкозатетраеновая кислота /HPETE/, 5-гидроксиэйкозатетраеновая кислота /HETE/, липоксины лейкотоксины/, осуществляющую подавляющее действие, ингибиторное действие синтетазы тромбоксан A₂, действие, промотирующее удерживание синтетазы простагландина J₂, антагонистическое действие рецептора LND₂ и действие по исключению активного кислорода.

Из этих эффектов кристаллическая соль настоящего изобретения демонстрирует местное действие по ингибированию образования липидпероксида /антиокислительное действие/.

Кристаллическая соль настоящего изобретения низка по токсичности и предотвращению побочных эффектов.

Поэтому кристаллическая соль настоящего изобретения терапевтически и профилактически эффективна против тромбозов за счет агглютинации тромбоцитов, ишемических заболеваний, связанных со спазмами гладкой мускулатуры артерий или спазмами сосудов сердца, легких, мозга или почек /например, инфаркт миокарда, церебральный удар/, нервных дегенеративных заболеваний /например, паркинсонизм, болезнь Алцмеейра, болезнь Лоу Геринга, мидиострофия /, функциональных заболеваний, связанных с повреждениями центральной нервной системы, такими как травма черепа и позвоночника, расстройства памяти или эмоциональной сферы /заболевания, связанные с некрозом нервных клеток, например, вызванные дефицитом кислорода, повреждениями мозга, (церебральный удар, инфаркт мозга, церебральный тромбоз и т.д.), конвульсий и эпилепсии после церебрального удара, церебрального инфаркта, церебральной хирургии или травм черепа, нефритов, легочной недостаточности, бронхиальной астмы, воспалительных заболеваний, атеросклероза, артериосклероза, гепатитов, острых гепатитов, цирроза печени, гепатитов гиперчувствительности, иммунодефицитов, хронических заболеваний (инфаркта миокарда, церебрального удара, церебрального отека, нефритов и т.д.), которые возникают в результате повреждения энзимов, тканей, клеток и т.д., вызываемых активным кислородом (например, супероксидами, гидроксильными радикалами), фиброзных тканей, раковых и других заболеваний млекопитающих (например, мышей, кроликов, собак, обезьян, человека), и фармацевтически пригодна в качестве антитромботического агента, антиваоспазматического агента, антиаллергического агента, антиасматического агента, агента, улучшающего сердечно-церебральную циркуляцию, средства против гепатитов, нефритов, ингибиторов фиброза тканей, удаления центров активного кислорода, агентов, улучшающих регуляцию вещества арахидонового каскада, а также других типов агентов.

Кристаллическую соль настоящего изобретения можно с успехом вводить орально или не орально, как таковую или в фармацевтических композициях (например, в виде таблеток, капсул, жидкостей, инъекций, суппозиториев (наряду с фармакологически приемлемыми носителями, эксципиентами и другими добавками). Кристаллическая соль настоящего изобретения, растворимая в воде, удобна для введения в виде препаратов для инъекций.

Хотя дозы варьируются в зависимости от пациента, способа введения, симптомов и других факторов, удобно вводить обычно от около 0,01 мг/кг до 20 мг/кг веса тела, предпочтительно, от около 0,1 мг/кг до 10 мг/кг веса тела, и более предпочтительно, от около 0,5 мг/кг до 10 мг/кг веса тела в виде дозы для приема один-три раза в день при не оральном введении взрослым пациентам с циркуляторными заболеваниями.

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно в соответствии со следующими рабочими примерами, аналитическими примерами и тестовым примером, которые не следует рассматривать как лимитирующие.

Пример 1.

/S/-/+/-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо [b]фуран /S/-/+/-манделат.

К раствору 35,4 г /±/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинметил/-2,3- дигидробензо /b/фурана в 500 мл хлороформа добавляют раствор 14,78 г /S/-/+/миндальной кислоты в 300 мл метанола, с последующим концентрированием. К полученному остатку добавляют около 500 мл эфира; образующийся остаток собирают фильтрованием и промывают простым эфиром. Полученные 35,4 г неочищенных кристаллов подвергают следующей процедуре кристаллизации. Конкретно, неочищенные кристаллы растворяют в смеси метанол-ацетонитрил /2 : 1/. После того, как раствор концентрируют до примерно 100 мл по объему, к нему добавляют около 500 мл эфира, полученную смесь выстаивают при 20^oC. Образующийся осадок тонко измельчают, фильтруют и промывают эфиром. Вышеуказанную процедуру повторяют в два цикла (первый выход: 21,96 г) до получения 19,90 г (S) -(+)-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо [b]фуран (S)-(+)-манделата.

Т. плавления 186-190^oC.

(α)²_D⁷: +57,1^o (c=1,230, метанол)
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂N₂O - C₈H₈O₃:
Рассчитано: C 74,39; H 7,80; N 5,42
Найдено: C 74,31; H 7,83; N 5,38
Пример 2
(R)-(-)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо [b]фуран (R)-(-)-манделат
Маточный раствор примера 1 концентрируют досуха. Полученный остаток 28,2 г распределяют в 500 мл этилацетата и 500 мл 0,5 н водного раствора гидроксида натрия. Органический слой промывают последовательными добавлениями 0,5 н водного раствора гидроксида натрия, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором, а затем сушат над безводным карбонатом натрия, а затем концентрируют досуха. Полученные 20 г остатка и 8,35 г (R)-(-)-миндальной кислоты обрабатывают по способу примера 1 до получения 20,41 г (R)-(-)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b]фуран (R)-(-)-манделата.

Т.плавления 186-191^oC.

(α)²_D⁷: -57,0^o (с=1,090, метанол)
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O· C₈H₈O₃:
Рассчитано: 74,39; H 7,80; N 5,42
Найдено: C 74,26; H 7,78; N 5,54.

Пример 3
(S)-(+)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3 -дигидробензо[b]фурана дигидрохлорид.

19,8 г (S)-(+)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b] фуран (S)-(+)-манделат помещают в 500 мл этилацетата и 500 мл 0,5 н водного раствора гидроксида натрия. Органический слой промывают последовательными добавлениями 0,5 г водного раствора гидроксида натрия, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного солевого раствора, а затем сушат над безводным карбонатом натрия, концентрируя затем досуха. Полученный остаток (около 15 г) растворяют в 140 мл метанола и 23,3 мл раствора этилацетата в 4 н соляной кислоте, с последующим концентрированием досуха. Полученный остаток перекристаллизовывают из смеси метанол-этилацетат до получения дигидрохлорида 13,84 г (S)-(+)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b]фурана.

Т. плавления: 226^oC (с разложением)
(α)²_D⁶: +27,8^o (с=1,054, метанол)
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O· H₂Cl₂:
Рассчитано: C 65,90; H 7,83; N 6,40; Cl 16,21
Найдено: C 65,60; H 7,89; N 6,37; Cl 16,01.

Пример 4
(R)-(-)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b]фуран, дигидрохлорид
По способу примера 3 получают 15,55 г (R)-(-)-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b] фурана (дигидрохлорида) из 20,03 г (R)-(-)-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b]фуран-(R)-(-)-манделата.

Т.плавления: 226^oC (с разложением).

(α)²_D⁶: -27,9^oC (с=1,284, метанол)
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O· H₂Cl₂:
Рассчитано: C 65,90; H 7,83; N 6,40; Cl 16,21.

Найдено: C 65,76; H 7,95; N 6,31; Cl 16,04.

Пример 5
(S)-(+)-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b]фурана, диметансульфонат
800 мг (S)-(+)-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3- дигидробензо[b] фуран дигидрохлорида растворяют в 10 мл этилацетата и 0,5 н водном растворе гидроксида натрия (10 мл). Органический слой промывают, последовательно добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и рассол, а затем сушат над безводным карбонатом натрия, с последующим концентрированием досуха. Полученный остаток и 351 мг метансульфокислоты растворяют в метаноле, а затем концентрируют досуха. К полученному кристаллическому остатку добавляют этилацетат: образующийся осадок собирают фильтрованием и промывают эилацетатом до получения 950 мг кристаллического диметансульфоната /S/-/+/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана.

Т.плавления: 202 - 211^oC
(α)²_D⁵: +21,4^o /с = 1,340, метанол/
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O· C₂H₈S₂O₆:
Рассчитано: C 56,09; H 7,24; N 5,03; S 11,52
Найдено: C 55,91; H 7,25; N 4,95; S 11,23.

Пример 6
Фумарат /S/-/+/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана
По способу примера 5 получают 5,543 мг фумарата /S/-/+/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b] фурана и 800 мг /S/-/+/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиридинометил/-2,3- дигидробензо[b]фуран дигидрохлорида и 212 мг фумаровой кислоты.

Т.плавления: 177 - 180^oC.

(α)²_D⁵: +32,3^oC /с = 1,070, метанол/
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O·C₄H₄O₄:
Рассчитано: C 69,98; H 7,55; N 5,83
Найдено: C 69,97; H 7,54; N 6,07.

Пример 7
/R/-/-/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана дигидробромид
860 мг /R/-/-/-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилметил)-2,3-дигидробензо[b] фурана растворяют в метаноле, и к этому раствору добавляют 25% гидробромида в уксусной кислоте (0,5 мл) и концентрируют. Остаток растворяют в метаноле и оставляют. Полученные кристаллы собирают фильтрованием и промывают этанолом до получения 810 мг дигидробромида /R/-/-/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана.

Т.плавления: 220,5^oC (с разложением).

(α)²_D⁰: +23,6^o /с = 0,86, метанол/
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O · 2HBr :
Рассчитано: C 54,77; H 6,51; N 5,32.

Найдено: C 54,77; H 6,60; N 5,17.

Пример 8
L-тартрат /R/-/-/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана
870 мг /R/-/-/-5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана и 354 мг L -винной кислоты растворяют в метаноле, а затем концентрируют. Остаток растворяют в этаноле и оставляют. Полученные кристаллы собирают фильтрованием и промывают этанолом до получения 970 мг /R/-/-/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фуран- L-тертратмоноэтанола.

Т.плавления: 130,5^oC.

(α)²_D⁰: + 35,0^oC /с = 0,755 метанол/
Элементный анализ для C₂₄H₃₂N₂O₆ · C₄H₆O₆ · C₂H₅OH :
Рассчитано: C 64,26; H 7,90; N 5,00
Найдено: C 64,32; H 8,11; N 4,92.

Аналитический пример 1
Соединение примера 67 EP-А-0483772 и соединение примера 1 анализируют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя колонку для разделения оптических изомеров.

Условия работы:
Колонка: Хиральная ячейка ОД /4,6 х 250 мм/
Подвижная фаза: н-гексан-этанол-диэтиламин
/100: 0,5:0,1 объем/объем/
Скорость потока: 1 мл/мин
Детектор: УФ на 254 нм
Результаты анализа представлены на фиг.1 / соединение примера 67 EP-A-0483772/ и фиг. 2/ соединение примера 1/.

По оси абсцисс отложено время удерживания /мин/. Пики 1 и 2 соответствуют /S/-/+/ и /R/-/-/конфигурациям, соответственно.

Аналитический пример 2
На фиг. 3 представлена дифракционная картина рентгеновских лучей /Cuka, 40 кВ, 40 мА/ порошка соединения 3 /характеристические пики для расстояний решетки /d/ 13,89, 7,12, 5,36, 4,26, 4,05, 4,00, 3,31 и 3,21/.

Пример 1
Эффект препарата на изменение поведения мышей, вызванное спинальной тратекальной инъекцией FeCl₂
Используют самцов мышей SIc: IcR /5 недель/ /по 10 мышей в группе/. После инъекции 5 мкл/мышь физиологического раствора, содержащего 50 мМ растворенного хлорида железа, в субарахноидальную полость от ломбарной спинальной хорды VI до сакральной спинальной хорды 1, каждое животное наблюдали на предмет изменения поведения, начиная с 15 минут до 1 часа после инъекции. Для оценки изменения в поведении использовали следующие критерии:
Оценка Изменение в поведении
0: Нормально
1: частные наклоны к нижним конечностям и к низу брюшка
2: наблюдается один из трех симптомов:
a) произвольные наклоны к нижней половине тела, случайные перекаты,
b) гиперчувствительное агрессивное поведение в ответ на внешнее раздражение,
с) тремор,
3: клонические судороги
4: тонические судороги или унилатеральный или биолатеральный паралич конечностей
5: гибель.

Процент ингибирования рассчитывали из полученных оценок /процент ингибирования = [(5-оценка) /5] х 100). Соль рассматриваемого соединения орально вводят за 30 минут, а затем вводят хлорид железа.

В таблице 1 представлены средние оценки и процент ингибирования, полученные после орального введения 25 мг/кг, каждого соединения примеров 3 и 4.

Эти результаты демонстрируют тот факт, что кристаллические соли настоящего изобретения являются прекрасными супрессорными агентами против расстройств центральной нервной системы, связанных с образованием липидпероксида под действием хлорида железа.

В настоящем изобретении предложен ингибитор образования липидпероксида, особенно кристаллическая соль энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3- дигидробензо[b]фурана, который хорошо служит для лечения, облегчения и предотвращения дисфункций, связанных с церебральным ударом или травмой черепа. Кристаллическая соль настоящего изобретения более растворима в воде и более стабильна, нежели свободная форма соединения.

Рецептурный пример 1.

Соединение, полученное в примере 3, растворяют в 2,5% (вес/объем) солевом растворе маннита для приготовления 0,4% раствора соединения. Этот раствор отфильтровывают через бактериальный фильтр и разливают в ампулы по 10 мл на ампулу. Получают раствор для инъекций для внутреннего назначения, содержащий 40 мг соединения примера 3 на каждую ампулу.

Рецептурный пример 2.

1. Соединение примера 3 - 40,0 г
2. Лактоза - 60,0 г
3. Кукурузный крахмал - 35,0 г
4. Желатин - 3,0 г
5. Стеарат магния - 2,0 г
Используя 30 мл 10% (по весу) водного раствора желатина (3,0 г желатина), гранулируют смесь 40,0 г соединения примера 3, 60,0 г лактозы и 35,0 г крахмала, используя сито- 1 мм-меш., сушат при 40^oC и получают готовые гранулы.

Полученные гранулы смешивают с 2,0 стеарата магния и смесь прессуют. Полученное в результате зерно таблетки покрывают суспензией сахарозы, двуокиси титана, талька и гуммиарабика в воде. Покрытые таблетки глазируют пчелиным воском с получением 1000 таблеток с покрытием.

Формула изобретения

1. Кристаллическая соль энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо (b) фурана.

2. Соль по п.1, отличающаяся тем, что энантиомером является /s/-/+/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо (b) фуран.

3. Соль по п.1, отличающаяся тем, что энантиомером является /R/-/-/-5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо (b) фуран.

4. Соль по п.2, отличающаяся тем, что является дигидрохлоридом.

5. Соль по п. 4, отличающаяся тем, что имеет характеристические пики, соответствующие расстояниям решетки (d) : 13,89, 7,12,5,36,4,26,4,05,4,00,3,31,3,21 в дифракционных спектрах рентгеновских лучей порошка.

6. Соль по п.2, отличающаяся тем, что является фумаратом.

7. 5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо (b) фуран, дигидрохлорид.

8. Соединение по п.7, отличающееся тем, что оно является кристаллическим.

9. 5-Амино-2,4,6,7-тетраметил-2-/4-фенилпиперидинометил/-2,3-дигидробензо (b) фуран, фумарат.

10. Соединение по п.9, отличающееся тем, что является кристаллическим.

11. Способ получения кристаллической соли энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3-дигидробензо (b) фурана, отличающийся тем, что: (1) осуществляют взаимодействие 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенил-пиперидинометил)-2,3-дигидробензо (b) фурана с оптически активной органической кислотой или (2) осуществляют взаимодействие энантиомера 5-амино-2,4,6,7-тетраметил-2-(4-фенилпиперидинометил)-2,3-дигидробензо (b) фурана с кислотой.

12. Фармацевтическая композиция, ингибирующая образование липидпероксида, отличающаяся тем, что содержит эффективное количество кристаллической соли по п. 1 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.

13. Композиция по п.12, отличающаяся тем, что ее используют при церебральных дисфункциях, связанных с церебральным ударом и черепной травмой.

14. Способ ингибирования образования липидпероксида у пациентов, страдающих заболеваниями, вызванными соединениями активного кислорода, отличающийся тем, что включает введение пациенту эффективного количества кристаллической соли по п.1 наряду с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом.

15. Соль по п.1, обладающая ингибирующей образование липидпероксида активностью.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4