Способ морфометрической идентификации фенотипа тучных клеток мезометриальной брыжейки на этапах секреторного цикла

 

Изобретение относится к гистологии, касается морфометрической оценки тучных клеток мезометриальной брыжейки крыс. Способ морфометрической идентификации тучных клеток маточной брыжейки крыс с помощью компьютерной системы количественного анализа изображений позволяет при участии светового микроскопа вывести изображение тучных клеток пленочного аппарата маточной брыжейки на экран персонального компьютера и приоритетно произвести его комплексный количественный анализ по разнообразным линейным и площадным параметрам и получить путем интерактивной обработки абсолютные линейные и площадные (периметр, площадь, длина, ширина, размеры Х- и Y-проекций) и относительные (элонгация, эквивалентный радиус, ориентация, округлость, компактность) величины мезометриальных тучных клеток на разных стадиях секреторного цикла. Это позволяет с высокой точностью судить о динамике секреторной активности тучных клеток мезометрия.

Изобретение относится к гистологии, касается морфометрической оценки тучных клеток мезометриальной брыжейки крыс.

Известен способ морфометрической идентификации диаметра тучных клеток окуляр-микрометром в дерме кожи (4), висцеральной плевре (2).

Его недостатком является низкая информативность планиметрической оценки тучных клеток, отсутствие комплекса линейных и площадных абсолютных (периметр, площадь, длина, ширина) и относительных величин, которые могли бы оценить расположение тучных клеток в микрорегионе на этапах секреторного цикла. Известным способом оценки, имеющим отмеченные недостатки, не изучались тучные клетки маточной брыжейки лабораторных животных (крыс).

Предложен способ морфометрической идентификации тучных клеток маточной брыжейки крыс с помощью компьютерной системы количественного анализа изображений (1, 3), принципиально отличающийся от известного тем, что впервые объектом морфометрического исследования явились тучные клетки мезометриальной брыжейки крыс. Указанный способ позволил при участии светового микроскопа вывести изображение тучных клеток пленочного аппарата маточной брыжейки на экран персонального компьютера и приоритетно произвести его комплексный количественный анализ по разнообразным линейным и площадным параметрам.

Предлагаемый способ позволяет получить путем интерактивной обработки абсолютные линейные и площадные (периметр, площадь, длина, ширина, размеры X- и Y-проекций) и относительные (элонгация, эквивалентный радиус, ориентация, округлость, компактность) величины мезо-метриальных тучных клеток на разных стадиях секреторного цикла.

Способ осуществляется следующим образом. С пленочного препарата микрорегиона маточной брыжейки, окрашенного альциановым- синим-кармином, изготовлено изображение контуров тучных клеток (до 500 клеток одного случая). Полуавтоматическим программно- аппаратным комплексом анализа изображения структур, состоящего из телекамеры черно-белого воспроизведения с компьютерным интерфейсом, светового микроскопа с рисовально-проекционным аппаратом РА-7, компьютерного манипулятора "мышь", оборудованного световым маркером, персонального компьютера со специально созданными программами (1, 3) для морфометрических вычислений и многомерной статистической обработки значений, получены абсолютные (мкм, мкм²) и относительные (ЕД) величины плоскостных значений тучных клеток мезометрия, включая периметр клеток, их площадь, длину, ширину и форм-факторы: X- проекцию, Y-проекцию, элонгацию, эквивалентный радиус, ориентацию, округлость, компактность.

Внедрение способа. На материале мезометриальной брыжейки беспородной крысы в репродуктивном возрасте (4 месяца) получены описанным способом следующие величины тучных клеток мезометриальной брыжейки, сопровождающих кровеносные сосуды микрорегиона: периметр 29,83±4,01 мкм, площадь 58,01±15,63 мкм², длина 9,61±0,65 мкм, ширина 5,33±0,41 мкм. Значения форм- факторов: Х-проекция 8,15+1,00 ЕД, У-проекция 10,12±1,17 ЕД, эквивалентный радиус 3,82±0,57 ЕД, ориентация 103,55±48,44 ЕД, округлость 0,9±0,03 ЕД, элонгация 1,89±0,4 ЕД, компактность 1,55±0,15 ЕД. Установленные величины принадлежат тучным клеткам, находящимся на стадии синтеза и накопления секрета (компактные мастоциты). Размеры дегранулирующих тучных клеток составили: периметр 48,14±9,17 мкм, площадь 150,74±55,8 мкм², длина 12,78±0,93 мкм, ширина 8,59±0,26 мкм. Параметры форм-факторов: X-проекция 15,82±4,58 ЕД, У-проекция 13,89±3,03 ЕД, эквивалентный радиус 6,06±1,09 ЕД, ориентация 64,6±17,59 ЕД, округлость 0,79±0,03 ЕД, элонгация 2,13±0,86ЕД, компактность 1,49±0,18 ЕД.

Настоящий способ морфометрического анализа тучных клеток мезометриальной брыжейки впервые позволил объективно оценить плоскостные параметры в абсолютных единицах линейных величин, их относительные проекции. Данный способ позволил идентифицировать достоверные отличия размеров в зависимости от стадии секреторного цикла тучных клеток мезометрия по величинам периметра, площади, длины, ширины (р<0,01), эквивалентного радиуса, ориентации, элонгации (р<0,05), доминирующим на этапе экструзии секрета (дегрануляции).

Преимуществом способа морфометрической оценки плоскостного изображения (фенотипа) тучных клеток мезометриальной брыжейки крыс является возможность впервые получить их объективные цитологические характеристики в наименее изученном органе репродуктивного системокомплекса - мезометриальной брыжейке. Применение совокупности планиметрических параметров позволяет достоверно судить о динамике секреторной активности тучных клеток мезометрия и, следовательно, использовать способ в качестве важнейшего объективного критерия оценки локальной или дистантной ролевой характеристики в едином репродуктивном системокомплексе.

Источники информации: 1. Генкин В.Л., Ерош И.Л., Москалев Э.С. Системы распознавания автоматизированных производств // Ленинград. - Машиностроение. -1988.

2. Пирогова Н.А. Гистологическая характеристика плевры в норме и при общем охлаждении организма // Новосибирск. - 1988. - Автореферат дисс. к.м.н. -С.-18.

3. Ульянычев Н.В., Безрукова Т.В., Целуйко С.С. Автоматизированная система для научных исследований в физиологии и патологии дыхания / Благовещенск. - 1988. - С. 54.

4. Юрина Н. А. , Радостина А.И. Морфофункциональная гетерогенность и взаимодействие клеток соединительной ткани / Издательство УДН. - 1990, - С. - 322 .

Формула изобретения

Способ морфометрической идентификации фенотипа тучных клеток соединительной ткани млекопитающего, включающий получение их изображения с гистологического препарата с помощью светового микроскопа и определение их планиметрических характеристик, отличающийся тем, что в качестве тучных клеток используют тучные клетки пленочного препарата мазометриальной брыжейки, полученное изображение подвергают интерактивной компьютерной обработке для получения планиметрических характеристик тучных клеток и устанавливают их абсолютные (периметр, площадь, длина, ширина) и относительные (элонгация, эквивалентный радиус, ориентация, округлость, компактность) плоскостные величины, характеризующиеся стадии секреторного цикла.