Способы получения 9-аминокамптотецина, промежуточные продукты и способ их получения

 

9-амино-камптотецин формулы I получают взаимодействием с диазотирующим агентом восстановленного соединения формулы II с образованием соединения формулы IV, которое последовательно нитруют и восстанавливают нитрогруппу с одновременным удалением галогена в соединении формулы V. Способ позволяет рециклизовать 12-нитропроизводное в процесс через конверсию 9-амино- простыми и мягкими условиями, обеспечивая высокие выходы и чистоту продуктов реакции. 4 с. и 6 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к новому способу получения 9-амино-20/S/-камптотецина формулы /I/ который является хорошо известным противораковым агентом: Wani и др. J. Med. Chem, 1987, 30, 1774-1779; Hsiang и др. Cancer Res., 49, 4385-4389, Август 15, 1989; Cancer Res., 49, 1465-1469 15 Марта, 1989.

Полностью синтетические методы получения 9-амино- камптотецина широко описаны /США-A 4894456 и США-A-5053512/. Полный синтез продукта, однако, нежелателен и непригоден для крупномасштабного производства, потому что он включает слишком много стадий процесса, которые делают синтез слишком продолжительным и, что особенно, слишком дорогим.

Полусинтетический метод получения 9-амино-камптотецина описан, например в патенте JP-A-59-51289, опубликованном в 1984, исходя из известного натурального продукта камптотецина: Cancer Chemothetapy Report часть I, том 54, N 6, Дек. 1970, 461-470, J.Med. Chem., 1980, 23, 554-560, Science, том, 246, Ноябрь 1989, 1046-1048. Указанный полусинтетический подход включает нитрование камптотецина натурального происхождения с последующим восстановлением 9-нитропроизводного. Это нитрование, однако, первоначально дает 70/30 смесь нежелательного 12-нитропроизводного камптотецина /70%/ и желаемого 9-нитропроизводного камптотецина /30%/. Поэтому 9-нитропроизводное получают только в минимальном количестве.

После разделения двух продуктов нитрования 12-нитропроизводное, которое само по себе является биологически неактивным /см. например, Wani C., Nicholas A.W., Wall M.E., J. Med. Chem., 1986, 29, 2358/, должно быть затем удалено, приводя к увеличению проблем, связанных с обработкой отходов. Значительный недостаток, касающийся удаления нежелательного побочного продукта 12-нитропроизводного, является особенно принципиальным для крупномасшабного производства, так как собирают большие количества ненужного 12-нитропроизводного и необходимо его удаление.

Более того, следуя этому полусинтетическому подходу, необходимы большие количества натурального камптотецина, который является очень дорогим продуктом, для получения небольших количеств желаемого противоракового агента 9-амино-камптотецина. Общая низкая продуктивность и выходы этого подхода делают трудным получение достаточных количеств желаемого соединения. Поэтому появилась необходимость в способе, позволяющем увеличить производительность и выходы по сравнению с вышеописанным полусинтетическим подходом к 9-амино-камптотецину.

Мы разработали новый способ, который соответствует этой цели и в то же время решает проблемы, связанные с отходами, возникающими при получении соответствующих количеств нежелательного 12-нитропроизводного. Согласно этому изобретению это 12-нитропроизводное рециклизуют в процесс через конверсию в 9-амино-камптотецин простыми и мягкими условиями реакции, обеспечивающими высокие выходы и чистоту продуктов реакции.

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает новый способ получения 9-амино-камптотецина формулы /I/ исходя из 12-нитро-камптотецина формулы /II/ в соответствии со стадиями, проиллюстрированными на схеме 1, представленной ниже: где X представляет группу, которая может быть удалена путем восстановления.

Способ включает восстановительное превращение 12-нитропроизводного формулы /II/ в 12-аминопроизводное формулы /III/. Это промежуточное соединение, в свою очередь, превращают в соответствующее диазопроизводное, которое "in Situ" превращают в соединение формулы /IV/, где X представляет группу, которая может быть удалена путем восстановления, например, галоид.

Нитрование 12-замещенного производного формулы /IV/ протекает с высокой селективностью и дает соответствующее 9-нитро-12-замещенное производное формулы /V/. Последующее восстановление соединения формулы /V/ с получением 9-амино- камптотецинового соединения формулы /I/ может быть выполнено либо в одну стадию, приводя непосредственно к соединению формулы /I/, либо в две стадии, восстанавливая соединение формулы /V/ до соединения формулы /VI/ и далее восстанавливая соединение формулы /VI/ до соединения формулы /I/. Нет необходимости выделять соединение формулы /VI/.

В патенте JP-A-59-51289, отмеченном выше и опубликованном в литературе /смотри, например, Chem. Pharm. Bull. 1991, 39, 3183/, раскрыта большая часть химии о молекуле камптотецина, включая конверсию 12-аминогруппы в соответствующее 12-галоидпроизводное, но оно было использовано только с целью синтеза соединений для биологической оценки. Биологическая непригодность 12-замещенных соединений /смотри, например, Crow R.T., Crothers D.M., J. Med. Chem., 1992, 35, 4160/ и химические трудности предотвращали любую попытку к возможным дальнейшим модификациям 12-замещенных производных камптотецина.

В частности, введение нитрогруппы в 12-замещенное производное этой молекулы неизвестно и выглядит проблематично, так как оно может приводить к увеличению смеси производных: с различным положением систем колец фактически могут протекать в процессе этой реакции.

Кроме того, относительно удаления X группы из соединения /V/ или /VI/ должно быть отмечено, что в то время как восстановительное удаление атомов галоида из хинолинов хорошо известно /смотри, например, Jones G., The Chemistry of Heterocyclic Compouds, 32, 1 стр. 604-611/, где обычно присутствие основания считают полезным для того, чтобы достигнуть мягких условий реакции, напротив, несмотря на многолетние усилия в химии камптотецина, ничего неизвестно об удалении группы /например, удалении галоидных групп/ из производных камптотецина и, более того, известно, что производные камптотецина чрезвычайно чувствительны к основанию, так что прибегать к помощи основания будет считаться проблематичным.

Неожиданно, мы нашли, что возможно, например, удаление атома галоида из камптотецина в присутствии органического или неорганического не-нуклеофильного основания. Настоящее изобретение включает этот аспект, а также основывается на наблюдении об очень слабой основности и нуклеофильной природе 9-аминогруппы в молекуле камптотецина. Действительно, восстановление 9-нитрогруппы в 9-нитро-12-замещенные производные формулы /V/ будет давать 9-аминофункциональность и таким образом приводить к образованию 9-аминогруппы, которая может затем выступать как генерированное in situ слабое не-нуклеофильное основание и, в принципе, ускорять восстановительное удаление группы X, без разложения.

С другой стороны, можно ожидать, что присутствие двух заместителей в п-положении друг к другу в соединении формулы /V/ будет оказывать нежелательное влияние и может препятствовать или делать очень трудной двойную стадию восстановления: можно ожидать низкие выходы или разложение желаемого продукта. В любом случае, общая синтетическая схема, проиллюстрированная выше, объединяющая такую последовательность реакций, никогда не сообщалась и не была потенциально пригодной, и не была признана или осуществлена прежде.

Настоящее изобретение обеспечивает способ получения 9-амино-камптотецина формулы /I/ указанный способ, включающий:
1/ восстановление соединения формулы /II/

получая таким образом соединение формулы /III/

2/ превращение соединения формулы /III/ в соединение формулы /IV/

где X представляет группу, которая может быть удалена путем восстановления,
3/ взаимодействие соединения формулы /IV/ с нитрующим агентом, получая таким образом соединение формулы /V/

где X имеет значение, как определено выше, и
4/ восстановление в одну стадию соединения формулы /V/, получая таким образом 9-амино-камптотецин формулы /I/ или наоборот,
5/ восстановление соединения формулы /V/, получая таким образом соединение формулы /VI/

где X имеет значение, как определено выше, и
6/ восстановительное удаление группы X из соединения формулы /VI/, получая таким образом 9-амино-камптотецин формулы /I/.

Предпочтительно, группа X представляет галоид, такой как, например, Cl, I, Br или F, более предпочтительно Cl или Br.

Восстановление соединения формулы /II/ в соединение формулы /III/ может быть проведено, например, с соответствующими восстанавливающими агентами или каталитическим восстановлением с соответствующими катализаторами в присутствии соответствующих восстанавливающих агентов. Например, это может быть выполнено, как описано в J. March, Advanced Organic Chemistry, Third Edition, 1103. Например, восстановление может быть выполнено с восстанавливающими агентами, такими как, например, SnCl₂, или другими металлами, или солями металлов, такими как, например, Zn, или Fe, или их солями, в соответствующем растворителе, таком как, например, разбавленный или концентрированный водный раствор HCl, разбавленные водные растворы протонных кислот, вода, этанол, метанол или их смеси, при температуре от около -20^oC до около 60^oC, в течение периода, который может меняться от нескольких минут до нескольких дней, такого как от около 5 минут до около 3 дней, например от 4 часов до 24 часов; или путем использования каталитических количеств металлов, которые проводят восстановление нитрогруппы, таких как, например, палладий, оксид платины, родий или рутений, в присутствии молекулярного водорода или источников водорода, таких как, например, триэтиламмонийформат, муравьиная кислота, гидрид трибутил олова, циклогексадиен, и т.д. в соответствующем растворителе, таком как, например, диметилформамид /ДМФА/, MeOH, уксусная кислота, CHCl₃, диоксан или их смеси при температуре от около 0^oC до около 100^oC, в течение времени от нескольких минут, как, например, от 5 минут, до тех пор, пока не прекратится потребление H₂, например, около 3 дней и при давлении от около 1 атмосферы до около 100 атмосфер.

Превращение соединения формулы /III/ в соединение формулы /IV/ может быть проведено с соответствующим реагентом, таким как, например, галоид меди /I/, через образование диазопроизводного, которое нет необходимости выделять из реакционной смеси. Реакция диазотирования может быть выполнена путем использования соответствующих диазотирующих агентов, таких как, например, NaNO₂ или органических нитритов в водных разбавленных растворах протонных кислот, таких как, например, HCl, HBr или H₂SO₄, или в органических растворителях при температуре от около -20^oC до около 100^oC, в течение периода времени, который может меняться от нескольких минут до нескольких часов, как, например, от около 5 минут до около 24 часов. Полученный раствор может затем подвергаться взаимодействию с галоидом меди /I/ в количестве от около стехиометрического до большого избытка, например, вплоть до 10-кратного молярного избытка, таким как, например, CuCl или CuBr, или с иодид ионами, необязательно в присутствии водного раствора соответствующей галоидводородной кислоты, которая может быть использована как растворитель, при температуре от около 0^oC до около 100^oC, в течение времени, которое может меняться от нескольких минут до одного дня, как, например, от около 5 минут до около 1 дня.

Нитрование соединения формулы /IV/ с получением соединения формулы /V/ может быть выполнено с нитрующим агентом, таким как, например, азотная кислота, смесь азотной и серной кислот, или других нитрующих агентов, таких как, например, нитрат калия или азотная кислота и трифторид бора, такой как моногидрат бортрифторида /смотри, например, Olah, G.A. и др. Synthesis 1085, 1992/, или азотная кислота/ трифторметансульфоновый ангидрид /там же, 1087, 1992/, при температуре от около -20^oC до около 100^oC, в течение времени, которое может меняться от нескольких минут до нескольких дней, как, например, от около 5 минут до около 3 дней, например от около 4 часов до около 24 часов.

Одностадийное восстановление соединения формулы /V/ в соединение формулы /I/ может быть выполнено с соответствующими восстанавливающими агентами, такими как, например, молекулярным водородом или триэтиламмонийформатом, муравьиной кислотой, гидридом трибутилолова, циклогексадиеном и т.д., в присутствии соответствующих катализаторов либо в гомогенном состоянии, например, в присутствии солей палладия или платины и соответствующего фосфорного или азотного лигандов, или в гетерогенном состоянии, например, в присутствии палладия, оксида платины, платины, родия или рутения самих по себе, или нанесенных на соответствующую подложку, такую как, например, на уголь, CaCO₃ на BaSO₄, на алюминий и т.д., в соответствующем растворителя, таком как, например, ДМФА, MeOH, уксусная кислота, CHCl₃, диоксан или их смеси, при температуре от около 0^oC до около 100^oC, в течение времени, которое может меняться от около 1 часа до около 3 дней, и при давлении от около 1 атмосферы до около 100 атм, необязательно в присутствии неорганического или органического основания.

Наоборот, если восстановление соединения формулы /V/ в соединение формулы /I/ проводят в две раздельные стадии, первая стадия может быть выполнена с соответствующими восстанавливающими агентами, такими как, например, те, которые описаны выше для одностадийного восстановления соединения формулы /V/, в течение более короткого времени, например в течение времени от около нескольких минут до нескольких часов, такого как от около 5 минут до около 24 часов, если желательно, выделяя промежуточное производное формулы /VI/ и затем проводя дальнейшую стадию восстановления соединения формулы /VI/, следуя той же процедуре восстановления, описанной выше, для восстановления соединения формулы /V/ в одну стадию, или с помощью реагентов, которые дают радикал для удаления галоидов, таких как, например, н-Bu₃Sn H в присутствии радикального инициатора, такого как, например, 2,2'-азобисизобутиронитрила /АИБН/ или тристриметилсилана, и т.д. в соответствующих растворителях, таких как, например, бензол, толуол, CHCl₃, ацетонитрил, ДМФА или их смесях, при температуре, которая может меняться от комнатной температуры до температуры флегмы растворителя, в течение периода времени от нескольких минут до нескольких часов, как, например, от около 5 минут до около 24 часов.

Предпочтительные восстанавливающие агенты для восстановления соединения формулы /II/ до соединения формулы /III/ представляют, например, SnCl₂, в разбавленном или концентрированном водном растворе HCl, при температуре от около 0^oC до около 60^oC в течение периода времени от около 1 часа до около 2 дней или с помощью каталитического восстановления, 5 или 10% Pd/C и молекулярного водорода в ДМФА или PtO₂ и молекулярного водорода при температуре от около комнатной до около 60^oC в течение периода времени от около 1 часа до около 24 часов и давления водорода от около 1 атм до около 10 атм.

Предпочтительные реагенты для превращения соединения формулы /III/ в соединение формулы /IV/ представляют, например, NaNO₂, амилнитрит, трет-бутилнитрит или органические нитриты, в водных или органических растворителях, таких как, например, концентрированная HCl или HBr, разбавленная HCl или HBr, ДМФА, диоксан или CH₂Cl₂, при температуре от около -20^oC до около 60^oC в течение периода времени от около 10 минут до около 12 часов. Получающийся раствор может затем взаимодействовать с галоидом меди в количестве от стехиометрического до 10 эквивалентов, таким как, например, CuCl или CuBr, или с иодид ионами, необязательно в присутствии водных растворов соответствующих галоидводородных кислот, которые могут быть использованы как растворители, при температуре от около комнатной температуры от около комнатной температуры до около 80^oC, в течение времени, которое может меняться от нескольких минут до нескольких часов, как, например, от около 5 минут до около 12 часов.

Предпочтительными реагентами для превращения соединения формулы /IV/ в соединение формулы /V/ являются азотная кислота или смеси азотной и серной кислот, или нитрат калия, или азотная кислота и моногидрат бортрифторида, или азотная кислота /трифторметансульфоновый ангидрид при температуре от около -20^oC до около 60^oC, в течение времени от нескольких минут до нескольких часов, как, например, от около 5 минут до около 24 часов.

Предпочтительными восстанавливающими агентами для восстановления соединения формулы /V/ в соединение формулы /I/ в одну стадию являются молекулярный водород, триэтиламмонийформат, муравьиная кислота или циклогексадиен в присутствии соответствующих катализаторов, таких как, например, палладий, оксид платины, и родий как таковых или на подложке на угле, CaCO₃, BaSO₄ кремний или алюминий, в соответствующем растворителе, таком как, например, ДМФА, MeOH, уксусная кислота, CHCl₃, диоксан, или их смеси, необязательно в присутствии соответствующего органического основания, такого как, например, пиридин или 2,6-алкилдизамещенные пиридины, такие как, например, 2,6-лутидин и т.д., или неорганического основания, такого как, например, карбонат натрия или кальция и т.д., при температуре от около комнатной температуры до около 80^oC, в течение времени от около 1 часа до около 2 дней, при давлении от около 1 атм до около 50 атм и более предпочтительно от около 1 до около 10 атм.

Наоборот, если восстановление соединения формулы /V/ проводят в две стадии, предпочтительными реагентами для первой стадии являются те же реагенты, которые описаны выше, для восстановления соединения формулы /V/ в одну стадию, в течение более короткого промежутка времени, например в течение времени от около нескольких минут, как, например, 5 минут, до около 6 часов, если желательно, выделяя промежуточное производное формулы /VI/ и затем выполняя вторую стадию восстановления соединения формулы /VI/, следуя той же процедуре восстановления, которая описана выше, для восстановления соединения формулы /V/ в одну стадию.

Предпочтительными реагентами для удаления радикалов галоидов являются н-Bu₃SnH в присутствии радикальных инициаторов, таких как АИБН или тристриметилсилан и т. д. , в соответствующих растворителях, таких как бензол, толуол, CHCl₃, ацетонитрил, ДМФА или их смеси, при температуре от около комнатной температуры до температуры флегмы растворителя, в течение времени от около нескольких минут до нескольких часов, как, например, от 5 минут до 24 часов.

Мягкие условия реакции, характеризующие способ настоящего изобретения, позволяют сохранить /S/ конфигурацию при C₂₀ соединения формулы /II/ в конечном соединении 9-амино-камптотецина формулы /I/.

Исходное соединение формулы /II/ является известным соединением и может быть получено известными способами.

Настоящее изобретение включает в свой объем также способ получения 9-амино-камптотецина формулы /I/ реакцией
a/ нитрования камптотецина формулы /VII/

с получением смеси 9-нитро-20 /S/-камптотецина 12-нитро-20 /S/-камптотецина,
b/ отделения 9-нитро-20 /S/- камптотецина от 12-нитро-20 /S/-камптотецина,
c/ восстановления выделенного 9-нитро-20 /S/-камптотецина с получением тем самым 9-амино-20 /S/-камптотецина,
d/ рецикла выделенного 12-нитро-20 /S/-камптотецина через указанные стадии способа /1/-/4/ или стадии способа с /1/ по /3/, /5/ и /6/ также с получением тем самым 9-амино-камптотецина.

Дальнейшей целью настоящего изобретения является способ получения камптотецина приведенной выше формулы /VII/, включающий восстановительное удаление группы X из соединения приведенной выше формулы /IV/.

Восстановительное удаление группы X из соединения формулы /IV/ с получением камптотецина формулы /VII/ может быть выполнено с использованием соответствующих восстанавливающих агентов, выбранных из, например, молекулярного водорода или, например, триэтиламмонийформата, муравьиной кислоты, циклогексадиена и т. д. , в присутствии соответствующих катализаторов, таких как, например, палладий, оксид платины, платина, родий или рутений как таковых или на подложке на соответствующем материале, таком как на угле, на CaCO₃, на BaSO₄, на алюминии и т.д., в соответствующем растворителе, таком как ДМФА, MeOH, уксусная кислота, CHCl₃, диоксан или их смеси, в присутствии соответствующего органического основания, такого как, например, пиридин или 2,6-алкилдизамещенные пиридины, такие как, например, 2,6-лутидин и т.д., при температуре от около 0^oC до около 100^oC, в течение времени от около 1 часа до около 3 дней и при давлении от около 1 атм до около 100 атм.

Предпочтительными восстанавливающими агентами, если в соединении формулы /IV/ X представляет галоид, являются молекулярный водород, триэтиламмонийформат, муравьиная кислота или циклогексадиен, в присутствии соответствующих катализаторов, таких как, например, палладий, оксид платины, платина и родий как таковые или на подложке, на угле, CaCO₃, BaSO₄, кремний или алюминий, в ДМФА, MeOH, уксусной кислоте, CHCl₃, диоксане или их смеси, при температуре от около комнатной температуры до около 80^oC, в течение периода времени от около 1 часа до около 24 часов, в присутствии органического основания, предпочтительными являются пиридин и 2,6-лутидин, и при давлении от около 1 атм и до около 50 атм и более предпочтительно от около 1 атм до около 10 атм.

9-амино-камптотецин формулы /I/ и камптотецин формулы /VII/ являются полезными в качестве ингибиторов топоизомеразы 1. Они являются полезными при лечении раковых заболеваний, в частности лейкемии, опухолей толстой кишки и ректальных опухолей. Поэтому соединения могут быть использованы для улучшения состояния пациента, страдающего от такого ракового заболевания. Они могут быть также полезны для облегчения таких раковых заболеваний.

Эффективное количество 9-амино-камптотецина или камптотецина может быть таким образом введено хозяину, нуждающемуся в нем, обычно человеку. Активное соединение может быть введено соответствующим путем, например, орально или парентерально, таким как, например, внутривенно. Доза в количестве от 0,1 до 60 мг активного соединения может быть введена этим путем человеку на кг веса тела. Предпочтительная доза находится от 1 до 40 мг на кг веса тела.

9-амино-камптотецин формулы /I/ или камптотецин формулы /VII/ могут быть включены для введения в фармацевтическую композицию с фармацевтическим носителем или разбавителем. Может быть применен любой соответствующий носитель или разбавитель в зависимости от пути введения. Композиции соответствующего типа описаны в патенте США-A 5106742 и WO 91/05556.

Следующие примеры иллюстрируют получение промежуточных соединений и соединений настоящего изобретения, но не ограничивают объема изобретения.

Пример 1.

12-амино-20 /S/-камптотецин
К перемешиваемому раствору /суспензии 12-нитро-20 /S/- камптотецина /20 г/ в концентрированной HCl /300 мл/ добавляют безводный SnCl₂ /41,9 г/ при 0-5^oC и полученную смесь непрерывно перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывают и промывают небольшими количествами концентрированной HCl. Затем желтое твердое вещество суспендируют в воде и доводят pH до около 2 добавлением твердого бикарбоната натрия порциями. Собирают твердое вещество фильтрованием, промывают водой до нейтральной реакции, затем этанолом и диэтиловым эфиром. После высушивания получают 10,5 г указанного в заглавии соединения.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/ δ, м. д.: 0,88 /3H, т, J=7,2 Гц/, 1,83 /2H, м/, 5,22 /2H, с/, 5,40 /2H, с/, 6,19 /2H, шир.с/, 6,50 /1H, с/, 6,9 - 7,4 /3H, м/, 8,44 /1H, с/.

Пример 2
12-амино-20 /S/-камптотецин
Раствор 12-нитро-20 /S/-камптотецина /1 г/ в ДМФА /100 мл/ гидрируют при атмосферном давлении и комнатной температуре в присутствии 10% Pd /C/0,25 г/ до тех пор, пока не прекратится потребление H₂. Получающуюся суспензию разбавляют равным количеством ДМФА и отфильтровывают. Раствор концентрируют в вакууме до небольшого объема и собирают выпавшее твердое вещество фильтрованием, промывают эталоном и эфиром. Указанный в заглавии продукт получают в виде желтого твердого вещества /0,8 г/.

Он имеет те же физические свойства, как и соединение примера 1.

Пример 3
12-хлор-20 /S/-камптотецин
Нитрат натрия /2,4 г/ в 30 мл воды добавляют к раствору 12-амино-камптотецина в /9 г/ в 18% HCl /650 мл/ при 0-5^oC при перемешивании. Спустя 30 минут реакционную смесь по каплям добавляют в склянку, содержащую CuCl /12,2 г/ и 18% HCl /250 мл/, при температуре 70^oC. Нагревание продолжают в течение 1,5 часов. Затем реакционную смесь выливают в воду со льдом и водную смесь экстрагируют метиленхлоридом. Растворитель удаляют в вакууме и к твердому веществу добавляют /поглощают/ эфир и вновь отфильтровывают с получением 5,5 г указанного в заглавии продукта.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/ δ, м. д.: 0,89 /3H, т, J=7,3 Гц/, 1,86 /2H, м/, 5,29 /2H, с/, 5,42 /2H, с/, 6,57 /1H, с/, 7,36 /1H, с/, 7,66 /1H, т, J=7,9 Гц/, 8,0 - 8,1 /2H, м/, 8,75 /1H, с/.

Пример 4
12-бром-20 /S/-камптотецин
Нитрат натрия /2,4 г/ в 30 мл воды добавляют к 12-амино-20 /S/-камптотецину /9 г/ в 16% HBr /650 мл/ при 0-5^oC при перемешивании. Спустя 30 минут реакционную смесь по каплям добавляют в склянку, содержащую CuBr /21,3 г/ и 16% HBr /250 мл/, при температуре 70^oC. Нагревание продолжают в течение 1,5 часов. Реакционную смесь выливают в воду со льдом и водную смесь экстрагируют этилацетатом. После выпаривания растворителя чистый продукт выделяют осаждением эфиром. Указанный в заглавии продукт получают в виде желтого твердого вещества /6,1 г/.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/, δ, м.д.: 0,88 /3H, т, J=7,3 Гц/, 1,86 /2H, м/, 5,31 - 5,43 /2H, с/, 6,58 /1H, с/, 7,37 /1H, с/, 7,60 /1H, т, J=7,9 Гц/, 8,1 - 8,2 /2H, м/, 8,74 /1H, с/.

Пример 5
9-нитро-12-хлор-20 /S/-камптотецин
12-хлор-20 /S/-камптотецин /5 г/ растворяют/ суспендируют в концентрированной H₂SO₄ /70 мл/ и охлаждают до 0-5^oC с механическим перемешиванием. Добавляют по каплям 70% HNO₃ /2,7 мл/ в реакционную смесь в течение 20 минут и затем реакционную склянку оставляют нагреваться до комнатной температуры. Продолжают перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в воду со льдом и собирают твердое желтое вещество фильтрованием, промывают водой, этанолом и эфиром. После высушивания получают 4 г указанного в заглавии продукта.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/, δ, м.д.: 0,89 /3H, т, J=7,2 Гц/, 1,86 /2H, м/, 5,34 /2H, с/, 5,44 /2H, с/, 6,61 /1H, с/, 7,39 /1H, с/, 8,24 /1H, д, J=8,3 Гц/, 8,48 /1H, д, J=8,3 Гц, 9,22 /1H, с/.

Пример 6
9-нитро-12-бром-20 /S/-камптотецин
12-бром-20 /S/-камптотецин /5,5 г/ растворяют /суспендируют в концентрированной H₂SO₄ /80 мл/ и охлаждают до 0-5^oC с механическим перемешиванием. В реакционную смесь в течение 20 минут по каплям добавляют 70% HNO₃ /3,1 мл/ и затем реакционную склянку оставляют нагреваться до комнатной температуры. Перемешивание продолжают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в воду со льдом и собирают желтое твердое вещество фильтрованием, промывают водой, эталоном и эфиром. После высушивания получают 4,2 г указанного в заглавии продукта.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/, δ, м.д.: 0,88 /3H, т, J=7,3 Гц/, 1,87 /2H, м/, 5,35 /2H, с/, 5,44 /2H, с/, 6,61 /1H, с/, 7,40 /1H, с/, 8,39 /1H, д, J=8,4 Гц/, 8,45 /1H, д, J=8,4 Гц/, 9,2 /1H, с/.

Пример 7
9-амино-12-хлор-20 /S/-камптотецин
Раствор 9-нитро-12-хлор-20 /S/-камптотецина /3 г/ в ДМФА /50 мл/ гидрируют при атмосферном давлении и температуре в присутствии 10% Pd/C//0,1 г/ в течение 2 часов. Реакционную смесь отфильтровывают и раствор концентрируют в вакууме. Остаток подвергают хроматографированию на колонке с силикагелем, получая указанное в заглавии соединение /2,5 г/.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/ δ, м. д.: 0,87 /3H, т, J=7,2 Гц/, 1,86 /2H, м/, 5,28 /2H, с/, 5,42 /2H, с/, 6,30 /2H, шир.с/, 6,56 /1H, с/, 6,75 /1H, д, J=8,4 Гц/, 7,31 /1H, с/, 7,66 /1H, д, J=8,4 Гц/, 8,89 /1H, с/.

Пример 8
9-амино-20 /S/-камптотецин
Раствор 9-нитро-12-хлор-20 /S/-камптотецина /3 г/ в ДМФА /50 мл/ гидрируют при атмосферном давлении и температуре в присутствии 10% Pd/C/0,1 г/ в течение 48 часов. Реакционную смесь отфильтровывают и раствор концентрируют в вакууме. Остаток подвергают хроматографированию на колонке с силикагелем с получением указанного в заглавии соединения /1,5 г/.

¹H-ЯМР /ДМСО-d₆/ δ м.д.: 0,87 /3H, т, J=7,3 Гц/, 1,85 /2H, м/, 5,26 /2H, с/, 5,41 /2H, с/, 6,11 /2H, с/, 6,50 /1H, с/, 6,79 /1H, м/, 7,28 /1H, с/, 7,3 - 7,5 /2H, м/, 8,33 /1H, с/.

Пример 9
9-амино-20 /S/-камптотецин
Раствор 9-нитро-12-бром-20 /S/-камптотецина /3 г/ в ДМФА /50 мл/ гидрируют при атмосферном давлении и температуре в присутствии 10% Pd/C/0,1 г/ в течение 6 часов. Реакционную смесь отфильтровывают и раствор концентрируют в вакууме. Остаток подвергают хроматографированию на колонке с силикагелем с получением указанного в заглавии соединения /2,0 г/. Это соединение имеет характеристики, идентичные соединению, полученному в примере 8.

Пример 10
9-амино-20 /S/-камптотецин из 9-амино-12-хлор-20 /S/-камптотецина
Реакцию проводят аналогично тому, как в примере 8, с получением указанного в заглавии соединения в виде желтого твердого вещества, которое было идентично с подлинным продуктом.

Пример 11
20 /S/-камптотецин из 12-хлор-20 /S/-камптотецина
Реакцию проводят аналогично тому, как в примере 8, за исключением того, что реакцию проводят в присутствии пиридина и реакционную смесь гидрируют в течение 12 часов. Указанный в заглавии продукт выделяют с помощью колоночной хроматографии. Продукт был идентичен образцу подлинного продукта.

Пример 12
20 /S/-камптотецин из 12-бром-20 /S/-камптотецина
Реакцию проводят аналогично тому, как в примере 11, за исключением того, что реакцию проводят в течение 6 часов, с получением указанного в заглавии продукта, который был идентичен образцу подлинного продукта.

Формула изобретения

1. Способ получения 9-амино-камптотецина формулы I

отличающийся тем, что осуществляют: 1) восстановление соединения формулы II

получая, таким образом, соединения формулы III

2) превращают соединение формулы III с помощью диазотирующего агента в соответствующее соединение формулы IV

где X представляет атом галогена;
3) нитруют соединение формулы IV нитрующим агентом с получением соединения формулы V

где X имеет указанное значение,
и 4) восстанавливают нитрогруппу и одновременно с помощью реакции восстановления удаляют атом галогена в соединении формулы V с получением 9-амино-камптотецина формулы I или, альтернативно, 5) восстанавливают соединение формулы V, получая таким образом соединение формулы VI

где X имеет указанное значение,
и 6) восстановительной реакцией удаляют атом галогена из соединения формулы VI, чтобы получить 9-амино-камптотецин формулы I.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что стадию 1 осуществляют с использованием SnCl₂, Zn или Fe в качестве восстанавливающего агента или путем каталитического гидрирования с применением палладия, оксида платины, платины, родия или рутения.

3. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что стадию 2 осуществляют диазотированием соединения формулы III и взаимодействием продукта диазотирования с CuCl или CuBr.

4. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что нитрующий агент в стадии (3) выбран из азотной кислоты; смеси азотной и серной кислот; нитрита калия; азотной кислоты и бортрифторида и азотной кислоты и трифторметансульфонового ангидрида.

5. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что восстанавливающий агент, используемый на стадии 4, или восстанавливающие агенты, используемые на стадии 5 и 6, выбирают из молекулярного водорода, триэтиламмоний формиата, муравьиной кислоты, гидрида трибутилолова и циклогексадиена.

6. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что осуществляют a) нитрирование камптотецина формулы VII

с получением смеси 9-нитро-20(S)-камптотецина и 12-нитро-2-(S)-камптотецина; b) отделяют 9-нитро-20(S)-камптотецин от 12-нитро-20(S)-камптотецина; c) восстанавливают выделенный 9-нитро-20(S)-камптотецин с получением тем самым 9-амино-20(S)-камптотецина и d) проводят рециклизацию выделенного 12-нитро-20(S)-камтотецина через указанные стадии способа (1) - (4) или через указанные стадии способа (1) - (3), (5) и (6) также с получением тем самым 9-амино-20(S)-камптотецина.

7. Способ получения 9-амино-камптотецина формулы I по п.1, отличающийся тем, что осуществляют: i) восстановление соединения формулы V, как определено по п.1, при таких условиях, что 9-аминокаптотецин получают в одну стадию или ii) удаление группы X путем восстановления из соединения формулы VI, как определено по п.1, причем указанное соединение формулы VI необязательно получают восстановлением соединения формулы V при таких условиях, как получают соединение формулы VI.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что соединение формулы V получают взаимодействием соединения формулы IV, как определено по п.1, с нитрующим агентом, причем соединение формулы IV необязательно получают превращением соединения формулы III, как определено по п.1, при этом соединения формулы III необязательно получают восстановлением соединения формулы II, как определено в п.1.

9. Соединение формулы V или VI


где X определен в п.1.

10. Способ получения камптотецина формулы VII

отличающийся тем, что из соединения формулы IV

где X представляет атом галогена,
удаляют группу X восстановлением.