Пролекарства ингибиторов тромбина

 

Описываются новые соединения общей формулы (I) R¹O(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R², где R¹ представляет собой -R³, или -A¹C(O)N(R⁴)R⁵, или -A¹C(O)OR⁴; A¹ представляет собой C_1-5 алкилен; R² (который заменяет один из атомов водорода в амидиновой единице в Pab-H) представляет собой ОН, OC(O)R⁶, C(O)OR⁷ или C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹; R³ представляет собой Н, С_1-10алкил или С_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена C_1-6алкилом); R⁴ и R⁵ независимо представляют собой Н, C_1-6алкил или, когда R¹ представляет собой -A¹C(O)N(R⁴)R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой пирролидинил; R⁶ представляет собой С_1-17алкил или фенил; R⁷ представляет собой фенил, С_1-3алкилфенил (причем последние две группы возможно замещены C_1-6алкилом, C_1-6алкокси или нитрогруппой) или С_1-12алкил (причем последняя группа возможно замещена C_1-6алкокси или галогеном); R⁸ представляет собой Н или С_1-4алкил и R⁹ представляет собой фенил или С_1-8алкил, причем алкильные группы, которыми могут являться R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, циклическими или частично циклическими, насыщенными или ненасыщенными, могут прерываться кислородом; при условии, что, когда R¹ представляет собой R³, R³ представляет собой бензил, метил, этил, н-бутил или н-гексил, R² представляет собой C(O)OR⁷, тогда R⁷ не является бензилом; или его фармацевтически приемлемая соль. Новые соединения относятся к фармацевтически применимым пролекарствам фармацевтически активных соединений, которые являются конкурентными ингибиторами трипсиноподобных сериновых протеаз, особенно тромбина. 2 с. и 56 з.п. ф-лы.

Это изобретение относится к фармацевтически применимым пролекарствам фармацевтически активных соединений, которые являются, в частности, конкурентными ингибиторами трипсиноподобных сериновых протеаз, особенно тромбина, применению пролекарств в качестве лекарственных средств, содержащим их фармацевтическим композициям и путям синтеза для их производства.

Коагуляция крови является ключевым процессом, включенным как в гомеостаз (то есть предотвращение потери крови из поврежденного сосуда), так и в тромбоз (то есть образование кровяного сгустка в кровеносном сосуде, иногда приводящее к закупорке сосуда).

Коагуляция является результатом комплексной серии ферментативных реакций. Одним из заключительных этапов в этой серии реакций является превращение профермента протромбина в активный фермент тромбин.

Известно, что тромбин играет центральную роль в коагуляции. Он активирует тромбоциты, приводя к агрегации тромбоцитов, превращает фибриноген в мономеры фибрина, которые спонтанно полимеризуются в полимеры фибрина, и активирует фактор XIII, который по очереди поперечно сшивает полимеры с образованием нерастворимого фибрина. Более того, тромбин активирует фактор V и фактор VIII, приводя к образованию с "положительной обратной связью" тромбина из протромбина.

Поскольку эффективные ингибиторы тромбина ингибируют агрегацию тромбоцитов, образование и поперечное сшивание фибрина, то ожидается, что они будут проявлять антитромботическую активность. Кроме того, ожидается, что антитромботическая активность может быть увеличена эффективным ингибированием механизма положительной обратной связи.

Эволюция ингибиторов тромбина низкой молекулярной массы описана (Claesson в Blood Coagul. Fibrin. (1994) 5, 411).

Известны (Blomback et al. в J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl. 107, 59 (1969)) ингибиторы тромбина на основе аминокислотной последовательности, находящейся вокруг сайта расщепления для Aα цепи фибриногена. Авторы предположили, что среди обсуждавшихся аминокислотных последовательностей трипептидная последовательность Phe-Val-Arg будет наиболее эффективным ингибитором.

Известны ингибиторы тромбина на основе пептидов низкой молекулярной массы (патент США N 4346078; международные заявки на патент WO 93/11152, WO 94/29336, WO 93/18060 и WO 95/01168; заявки на европейский патент 648780, 468231, 559046, 641779, 185390, 526877, 542525, 195212, 362002, 364344, 530167, 293881, 686642 и 601459).

Позднее были описаны ингибиторы тромбина на основе пептидных производных (заявка на европейский патент 0669317 и заявки на европейский патент WO 95/23609, WO 95/35309, WO 96/25426 и WO 94/29336).

В частности, последняя заявка описывает пептидные производные R^aOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H, где R^a представляет собой H, бензил или C_1-6 алкил.

Хотя известно, что эти активные соединения обладают значительной антитромбиновой активностью, было бы полезно увеличить их фармакокинетические свойства как после перорального, так и парентерального введения. Примеры фармакокинетических свойств, которые желательно улучшить, включают в себя: а) обеспечение улучшенной абсорбции из желудочно-кишечного тракта с целью уменьшения меж- и/или внутрииндивидуальной изменчивости в отношении биологической доступности активных соединений; б) выравнивание временного профиля плазменной концентрации (то есть уменьшение соотношения пик/впадина в плазменной концентрации в течение интервала дозирования) с целью уменьшения риска снижения за пределы терапевтического интервала и побочных эффектов, вызываемых концентрационным пиком, который является слишком высоким (например кровотечение) и побочных эффектов, вызываемых концентрационным пиком, который является слишком низким (например образование тромба); и в) увеличение длительности действия активных соединений.

Более того, пероральное или парентеральное введение активных ингибиторов тромбина может привести к нежелательному локальному кровотечению (например во внутреннюю полость или подкожно) как результату высокой локальной концентрации.

Наконец, перорально введенные активные ингибиторы тромбина, которые также ингибируют трипсин и другие сериновые протеазы в желудочно-кишечном тракте, могут давать другие побочные эффекты, включая диспепсию (например, если трипсин ингибируется в кишечной полости).

Хотя определенные N-бензилоксикарбонильные производные вышеупомянутых активных соединений также описаны как ингибиторы тромбина (заявка на международный патент WO 94/29336), не было упомянуто, что эти производные могут быть применимы как пролекарства. Действительно, WO 94/29336 не содержит упоминаний о подходящих пролекарствах активных соединений.

Таким образом, в задачу настоящего изобретения входило создание соединений, которые позволили бы решить вышеназванные проблемы, а именно соединений, которые, будучи неактивны per se, при введении перорально и/или парентерально метаболизируются в организме с образованием активных ингибиторов тромбина, включая те, что упомянуты выше. В задачу изобретения также входила разработка способов получения соединений по изобретению, создание фармацевтических препаратов на их основе и разработка способов лечения и профилактики заболеваний, при которых требуется ингибирование тромбина, с использованием этих новых соединений.

Поставленная задача решается тем, что предложены соединения формулы I, R¹O(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R² где R¹ представляет собой -R³ или -A¹C(O)N(R⁴)R⁵ или -A¹C(O)OR⁴; A¹ представляет собой C_1-5алкилен; R² (который заменяет один из атомов водорода в амидиновой единице в Pab-H) представляет собой OH, OC(O)R⁶ C(O)OR⁷ или C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹; R³ представляет собой H, C_1-10алкил или C_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена C_1-6алкилом); R⁴ и R⁵ независимо представляют собой H, C_1-6алкил или, когда R¹ представляет собой -A¹C(O)N(R⁴)R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой пирролидинил;
R⁶ представляет собой C_1-17алкил или фенил;
R⁷ представляет собой фенил, C_1-3алкилфенил (причем последние две группы возможно замещены C_1-6алкилом, C_1-6алкокси или нитрогруппой) или C_1-12алкил (причем последняя группа возможно замещена C_1-6алкокси или галогеном);
R⁸ представляет собой H или C_1-4алкил: и
R⁹ представляет собой фенил или C_1-8алкил;
причем алкильные группы, которыми могут являться R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, циклическими или частично циклическими, насыщенными или ненасыщенными, могут прерываться кислородом;
при условии, что когда R¹ представляет собой R³, R³ представляет собой бензил, метил, этил, н-бутил или н-гексил, и R² представляет собой C(O)OR⁷, тогда R⁷ не является бензилом;
или их фармацевтически приемлемая соль (именуемые далее "соединения по изобретению").

Предложены также соединения формулы I, как они определены выше, при условии, что когда R⁷ представляет собой незамещенный C₁алкилфенил, тогда R¹ не является либо
(а) R³, где R³ представляет собой H, C_1-6алкил или незамещенный C₁алкилфенил; либо
(б) A¹C(O)OR⁴, где R⁴ представляет собой H или C_1-4алкил, и A¹ представляет собой C₁алкилен.

Когда R¹ представляет собой -A¹C(O)N(R⁴)R⁵, предпочтительными соединениями по изобретению, как они определены выше, являются соединения, где A¹ представляет собой C_1-3алкилен,
R⁴ представляет собой H или C_1-6алкил,
R⁵ представляет собой C_1-6алкил или C_4-6циклоалкил,
или где R⁴ и R⁵ вместе представляют собой пирролидинил.

Наиболее предпочтительными из указанных соединений являются соединения, где A¹ представляет собой C_1-3алкилен, и R⁴ представляет собой H или C_1-3алкил, а R⁵ представляет собой C_2-6алкил или C_5-6циклоалкил, или R⁴ и R⁵ вместе представляют собой пирролидинил.

Когда R¹ представляет собой -A¹C(O)OR⁴, предпочтительными соединениями формулы I, как они определены выше, являются соединения, где A¹ представляет собой C_1-5алкилен,
R⁴ представляет собой C_1-6алкил, наиболее предпочтительно C_1-4алкил.

Когда R¹ представляет собой R³, предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения, где R³ представляет собой H, C_1-10алкил (причем последняя группа может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной и/или может быть частично циклической или циклической) или C_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена, может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной), более предпочтительны соединения, где R¹ представляет собой H, линейный C_1-10алкил, разветвленный C_3-10алкил, частично циклический C_4-10алкил, C_4-10циклоалкил, возможно замещенный линейный C_1-3алкилфенил, разветвленный C₃алкилфенил, и наиболее предпочтительны те из указанных соединений, где R¹ представляет собой линейный C_1-6алкил, C_6-10циклоалкил или возможно замещенный линейный C_1-3алкилфенил.

Предпочтительные соединения по изобретению включают в себя те соединения, где R² представляет собой OH, а также те соединения, где R² представляет собой группу OC(O)R⁶, в которой R⁶ представляет собой фенил или C_1-17алкил (причем последняя группа является линейной и/или может быть насыщенной или ненасыщенной), из них более предпочтительны те соединения, где R⁶ представляет собой фенил, линейный C_1-4алкил или цисолеил, наиболее предпочтительно - линейный C_1-3алкил.

Когда R² представляет собой C(O)OR⁷, предпочтительными соединениями по изобретению являются те соединения, где R⁷ представляет собой возможно замещенный фенил, C_1-12алкил (причем последняя группа возможно замещена, может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной и/или насыщенной или ненасыщенной) или C_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена, является линейной), предпочтительно где R⁷ представляет собой возможно замещенный и/или возможно ненасыщенный линейный C_1-4алкил или разветвленный C_3-4алкил, возможно замещенный фенил или возможно замещенный линейный C_1-3алкилфенил. Из указанных соединений наиболее предпочтительны те из них, где R⁷ представляет собой возможно замещенный линейный C_1-4алкил или разветвленный C_3-4алкил или возможно замещенный линейный C_1-3алкилфенил.

Когда R² представляет собой C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹, предпочтительными соединениями по изобретению являются те соединения, где R⁸ представляет собой H или метил, а R⁹ представляет собой фенил или C_1-8алкил (причем последняя группа может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной и/или циклической или частично циклической). Из них более предпочтительны те соединения, где R⁸ представляет собой H или метил, и R⁹ представляет собой фенил, C_5-7циклоалкил, линейный C_1-6алкил, разветвленный C_3-6алкил или частично циклический C_7-8алкил, наиболее предпочтительно, когда R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой C_5-7циклоалкил, линейный C_1-6алкил или частично циклический C_7-8алкил.

Из числа соединений, в которых R¹ представляет собой R³, и R³ представляет собой возможно замещенный C_1-3алкилфенил, предпочтительными являются те, в которых возможным заместителем является C_1-6алкил, наиболее предпочтительно - метил.

Из числа соединений по изобретению, в которых R² представляет собой C(O)OR⁷, и R⁷ представляет собой возможно замещенный C_1-12алкил, предпочтительными являются те, в которых возможный заместитель выбран из галогена или C_1-6алкокси, наиболее предпочтительны те, где заместитель выбран из хлора и метокси.

Из числа соединений по изобретению, в которых R² представляет собой C(O)OR⁷, и R⁷ представляет собой возможно замещенный фенил, предпочтительными являются те, в которых возможный заместитель выбран из C_1-6алкила и C_1-6алкокси, наиболее предпочтительны те, где заместитель выбран из метила и метокси.

Из числа соединений по изобретенеию, в которых R² представляет собой C(O)OR⁷, и R⁷ представляет собой возможно замещенный C_1-3алкилфенил, предпочтительными являются те, где возможным заместителем является нитрогруппа.

Наиболее предпочтительные соединения по изобретению включают в себя:
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu;
PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
ChNHC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
(нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab- COOCH₂OOCC(CH₃)₃;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃;
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh;
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
(нPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
ChNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH,
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc;
HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-O-цис-олеил;
циклоктил-OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
третBuCH₂OOСCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
ChCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
ChOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
PhC(Me)₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
(Me)₂CHC(Me)₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);
ChCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me);
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me);
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu;
изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCH₂Ch;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCPh;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;
MeOOC-C(=CHEt)CH₂-OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
Men-OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe); и
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃.

Особенно предпочтительные соединения по изобретению включают в себя:
EtOOCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOнBu;
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
циклооктил-OOСCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh;
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH;
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH; и
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.

Предложены также соединения формулы I, как они определены выше, с дополнительными условиями, что:
а) R¹ не является -A¹C(O)OR⁴,
б) R⁴ и R⁵ не являются независимо H,
в) R⁶ не является C_1-17алкилом, когда R² представляет собой OC(O)R⁶.

Кроме того, предложены соединения формулы I, как они определены выше, где:
а) R¹ представляет собой A¹C(O)OR⁴,
б) R⁴ и R⁵ независимо представляют собой H,
в) R⁶ представляет собой C_1-17алкил, когда R² представляет собой OC(O)R⁶.

Поставленная задача решается также тем, что предложен фармацевтический препарат для ингибирования тромбина, содержащий соединение формулы I, как определено выше, или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Предложено также соединение формулы I, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве фармацевтического средства.

Предложено соединение формулы I, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль для использования в лечении состояния, при котором требуется ингибирование тромбина, в частности для лечения тромбоза или в качестве антикоагулянта.

Для решения поставленной задачи предложено соединение формулы I, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве активного ингредиента в изготовлении лекарства для лечения состояния, при котором требуется ингибирование тромбина, например тромбоза, или антикоагулянта.

Поставленная задача решается также тем, что предложен способ лечения состояния, при котором требуется ингибирование тромбина, при котором вводят терапевтически эффективное количество соединения формулы I, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемой соли человеку, страдающему или подверженному такому состоянию.

Предпочтительно, когда такое состояние представляет собой тромбоз или гиперсвертываемость в крови и тканях.

Предложено также соединение формулы I, как оно определено выше, для использования в качестве пролекарства.

Поставленная задача решается также тем, что предложен способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой OH, при котором:
соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой OC(O)R⁶, и R⁶ такой, как определено выше, подвергают взаимодействию с алкоксидным основанием.

В качестве алкоксидного основания целесообразно использовать, например, алкоксид щелочного металла, а взаимодействие целесообразно проводить при комнатной температуре в присутствии подходящего органического растворителя (например THF).

Предложен также способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой OH, при котором:
соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой C(O)OR⁷, и R⁷ такой, как определено выше, подвергают взаимодействию с гидроксиламином или его солью, полученной присоединением кислоты.

Предпочтительно проводить взаимодействие, например, при комнатной температуре в присутствии подходящего основания (например карбоната калия или триэтиламина) и приемлемого органического растворителя (например THF или EtOH).

Предложен способ получения соединений формулы I, при котором:
соответствующее соединение формулы II
H-(R)Cgl-Aze-Pab-R²,
где R² такой, как определено выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы III
R¹O(O)C-CH₂-L¹,
где L¹ представляет собой уходящую группу, а R¹ такой, как определено выше.

Целесообразно, когда L¹ представляет собой, например, галогенид (например, бромид) или алкилсульфонат (например трифторметилсульфонат), а взаимодействие проводят при температуре от комнатной до повышенной (например 40^oC) в присутствии подходящего основания (например карбоната калия) и приемлемого органического растворителя (например THF, DMF или ацетонитрила).

Поставленная задача решается также тем, что предложен способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой H, и R² представляет собой OH или C(O)OR⁷, при котором:
соответствующее соединение формулы I, где R¹ представляет собой C_1-10 алкил или C_1-3алкилфенил, и R² представляет собой OH или C(O)OR⁷, подвергают взаимодействию с основанием.

Подходящее основание может представлять собой, например, алкоксид щелочного металла или гидроксид, а взаимодействие можно проводить, например, при комнатной температуре в присутствии приемлемого органического растворителя (например воды или MeOH).

В дополнение к указанным выше для решения задачи изобретения предложен также способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой OC(O)R⁶, а R⁶ такой, как определено выше, при котором:
соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой OH, подвергают взаимодействию с соединением формулы IV
R⁶C(O)-O-C(O)R⁶
или с соединением формулы V
R⁶C(O)Гал,
где Гал представляет собой Cl или Br, и в обоих случаях R⁶ такой, как определено выше.

Взаимодействие можно проводить, например, при комнатной температуре в присутствии подходящего основания (например триэтиламина, пиридина или DMAP) и приемлемого органического растворителя (например метиленхлорида или THF).

Предложен еще один способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой H, и R² представляет собой OC(O)R⁶ , а R⁶ такой, как определено выше, при котором:
соответствующее соединение формулы VI
P¹O(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R²,
где P¹ представляет собой защитную группу кислоты в виде лабильного эфира и R² представляет собой OC(O)R⁶, где R⁶ такой, как определено выше, подвергают взаимодействию с кислотой.

Подходящей кислотой может являться, например TFA, а взаимодействие можно проводить, например, при комнатной температуре в присутствии приемлемого органического растворителя (например метиленхлорида).

И наконец, предложен способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой R³, R³ представляет собой C_1-10алкил или C_1-3алкилфенил, и R² представляет собой OH или C(O)OR⁷, а R⁷ такой, как определено выше, при котором:
соответствующее соединение формулы VII
R^1aO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R²,
где R^1a представляет собой C_1-10алкильную или C_1-3алкилфенильную группу, отличную от образованной, или альтернативный лабильный алкильный заместитель, а R² такой, как определено выше, подвергают трансэтерификации.

Условия проведения этой реакции хорошо известны специалисту.

Соединения по изобретению могут обладать таутомерией. Все таутомерные формы и их смеси включены в объем изобретения.

Соединения по изобретению также могут содержать один или более чем один асимметричный атом углерода и, таким образом, могут обладать оптической и/или диастереоизомерией. Все диастереоизомеры могут быть разделены с применением общепринятых методов, например хроматографией или фракционной кристаллизацией. Различные стереоизомеры могут быть выделены путем разделения рацемической или другой смеси соединений с применением общепринятых методов, например фракционной кристаллизации или HPLC. Иначе, желаемые оптические изомеры могут быть получены в результате реакции взаимодействия подходящих оптически активных исходных материалов при условиях, которые не могут вызывать рацемизацию или эпимеризацию, или путем дериватизации, например с гомохиральной кислотой, с последующим разделением диастереомерных производных общепринятыми способами (например HPLC, хроматографией на диоксиде кремния). Все стереоизомеры включены в объем изобретения.

Алкильные группы, которыми могут являться R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, циклическими или частично циклическими, насыщенными или ненасыщенными, могут прерываться кислородом и/или быть замещены или оканчиваться OH, при условии, что OH группа не присоединена к sp² атому углерода или атому углерода, который прилежит к атому кислорода.

Под "частично циклическими алкильными группами" авторы подразумевают такие группы, как CH₂Ch.

Алкильные группы, которыми может являться R⁸ и которыми могут быть замещены R³ и R⁷, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, насыщенными или ненасыщенными, и/или могут прерываться кислородом.

Алкильная часть алкифенильных групп, которыми могут являться R³ и R⁷, может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленной, и/или может быть насыщенной или ненасыщенной.

Алкиленовые группы, которыми может являться A¹, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, и/или могут быть насыщенными или ненасыщенными.

Алкоксигруппы, которыми может быть замещена группа R⁷, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, и/или могут быть насыщенными или ненасыщенными.

Сокращения перечислены в конце этого описания.

Промежуточные соединения, необходимые для реализации способов получения соединений по изобретению, могут быть получены следующим образом.

Соединения формулы II могут быть получены путем снятия защиты с соединения формулы VIII
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-R²,
где R² такой, как определено выше, в условиях, хорошо известных специалисту.

Соединения формулы VI и VII можно получить аналогично способам, описанным выше для получения соединений формулы I, в которой R¹ представляет собой R³, а R³ представляет собой C_1-10алкил или C_1-3алкилфенил.

Соединения формулы VIII можно получить путем реакции взаимодействия соединения формулы IX
H-Pab-R²,
где R² такой, как определено выше, с Boc-Cgl-Aze-OH, например, при комнатной температуре в присутствии подходящей системы для взаимодействия (например EDC), приемлемого основания (например DMAP) и подходящего органического растворителя (например дихлорметан или ацетонитрил).

Соединения формулы VIII, где R² представляет собой OH, могут быть получены путем реакции взаимодействия соответствующего соединения формулы VIII, где R² представляет собой C(O)OR⁷ или C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹, с гидроксиламином или его солью, полученной путем присоединения кислоты, например, при комнатной температуре в присутствии подходящего основания (например карбоната калия или триэтиламина) и приемлемого органического растворителя (например THF или EtOH).

Соединения формулы VIII, где R² представляет собой C(O)OR⁷ или C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹, могут быть получены путем реакции взаимодействия Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H с соединением формулы X
L²C(O)OR^2a,
где L² представляет собой уходящую группу (например галоген или фенолят), и R^2a представляет собой R⁷ или -CH(R⁸)OC(O)R⁹ и R⁷, R⁸ и R⁹ такие, как определено выше, например, при комнатной или ниже комнатной температуры в присутствии подходящего основания (например NaOH) и приемлемого органического растворителя (например THF).

Соединения формулы VIII, где R² представляет собой OC(O)R⁶, могут быть альтернативно получены путем реакции взаимодействия соответствующего соединения формулы VIII, где R² представляет собой OH, с соединением формулы IV, как определено выше, или соединением формулы V, как определено выше, например, при комнатной температуре в присутствии подходящего основания (например триэтиламина, пиридина или DMAP) и приемлемого органического растворителя (например метиленхлорида или THF).

Соединения формулы VIII, где R² представляет собой OC(O)R⁶, могут быть альтернативно получены путем реакции взаимодействия Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H с соединением формулы XI
R⁶C(O)-O-O-C(O)R⁶,
где R⁶ такой, как определено выше, например, при комнатной температуре в присутствии приемлемого органического растворителя (например THF).

Соединения формулы VIII, где R² представляет собой OH, могут быть получены путем реакции взаимодействия соответствующего соединения формулы VIII, где R² представляет собой OC(O)R⁶, и R⁶ такой, как определено выше, с подходящим основанием (например алкоксидом щелочного металла), например, при комнатной температуре в присутствии приемлемого растворителя (например THF).

Соединения формулы IX хорошо известны в литературе или могут быть получены способами, аналогичными тем, что описаны выше. Например, соединения формулы IX, где R² представляет собой C(O)OR⁷ или C(O)OCH(R⁸)OC(O)R⁹, и R⁷, R⁸ и R⁹ такие, как определено выше, могут быть получены путем реакции взаимодействия H-Pab-H или его защищенного производного с соединением формулы X, как определено выше, например, при комнатной или ниже комнатной температуры в присутствии подходящего основания (например NaOH) и приемлемого органического растворителя (например THF).

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H может быть получен путем реакции H-Pab-H или его защищенного производного с Boc-Cgl-Aze-OH, например, как описано выше для соединений формулы VIII.

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H может быть альтернативно получен путем снятия защиты с соединения формулы XII
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-P²,
где P² представляет собой защитную группу, ортогональную к Boc, в условиях, хорошо известных для специалистов.

Соединения формулы III, IV, V, X, XI и XII либо имеются в продаже и являются хорошо известными в литературе соединениями, либо доступны при применении известных технологий (например, тех, что описаны ниже).

Соединения по изобретению могут быть выделены из реакционных смесей с помощью общепринятых способов.

Специалисту следует иметь в виду, что в способах, описанных выше, функциональные группы промежуточных соединений могут нуждаться в защите при помощи защитных групп.

Среди функциональных групп, которые желательно защитить, находятся гидроксил, аминогруппа, амидиногруппа и карбоновая кислота. Подходящие защитные группы для гидроксила включают в себя триалкилсилил и диарилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил) и тетрагидропиранил. Подходящие защитные группы для карбоновой кислоты включают в себя C_1-6алкильный или бензильный эфиры. Подходящие защитные группы для амино- и амидиногрупп включают в себя трет-бутилоксикарбонил или бензоилоксикарбонил. Атомы азота амидиногруппы могут быть либо моно-, либо дизащищенными.

Защитные группы можно удалить в соответствии со способами, хорошо известными специалистам, такими как те, что описаны ниже.

Применение защитных групп полностью описано ("Protective Groups In Organic Chemistry", edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973); "Protective Groups In Organic Synthesis", 2^nd edition, T.W.Greene & P.G.M.Wutz, Wiley-Interscience (1991)).

Соединения по изобретению являются применимыми, поскольку они подвергаются метаболизму в теле с образованием соединений, обладающих фармакологической активностью. Поэтому они показаны в качестве фармацевтических препаратов и особенно в качестве пролекарств.

В частности, соединения по изобретению, хотя и неактивны по отношению к тромбину per se, подвергаются в теле метаболизму с образованием сильных ингибиторов тромбина, например, как показано в тесте, описанном ниже.

Говоря, что "соединения по изобретению неактивны по отношению к тромбину per se", авторы подразумевают, что они имеют значение ИК₅₀ТТ, как определено ниже в Тесте A, равное более чем 1 мкМ.

Соединения по изобретению, таким образом, представляются применимыми при состояниях, где необходимо ингибирование тромбина.

Соединения по изобретению, таким образом, показаны как в терапевтическом, так и/или профилактическом лечении тромбоза и гиперсвертывания в крови и тканях животных, включая человека.

Известно, что гиперсвертывание может приводить к тромбоэмболическим заболеваниям.

Тромбо-эмболические заболевания, которые могут быть упомянуты, включают в себя устойчивость к активированному C-белку, такую как мутацию фактора V (фактор V Leiden), и наследственные или приобретенные дефициты в антитромбине III, белке С, белке S, гепариновом кофакторе II. Другие состояния, ассоциируемые с гиперсвертыванием и тромбоэмболическим зоболеванием, включают в себя циркулирующие антифосфолипидные антитела (антикоагулянтная волчанка), гомоцистеинемию, гепарин-опосредованную тромбоцитопению и дефекты фибринолиза. Соединения по изобретению, таким образом, показаны для как терапевтического, так и/или профилактического лечения этих состояний.

Соединения по изобретению дополнительно показаны при лечении состояний, когда наблюдается нежелательное превышение уровня тромбина при отсутствии симптомов гиперсвертывания, например при нейродегенеративных заболеваниях, таких как болезнь Альцгеймера.

Конкретные болезненные состояния, которые могут быть упомянуты, включают в себя терапевтическое и/или профилактическое лечение венозного тромбоза и эмболии сосудов легких, артериального тромбоза (например, при инфаркте миокарда, нестабильной стенокардии, ударе, опосредованном тромбозом, периферическом артериальном тромбозе) и системной эмболии обычно из предсердия в ходе артериальной фибрилляции или из левого желудочка после трансмурального инфаркта миокарда.

Более того, ожидается, что соединения по изобретению будут применимы в профилактике повторной окклюзии (то есть тромбозе) после тромболиза, при чрескожных транслюминальных операциях на сосудах (РТА) и при операциях по коронарному шунтированию; для предупреждения повторных тромбозов после микрохирургического вмешательства и сосудистой хирургии в общем.

Дополнительные показания включают в себя терапевтическое и/или профилактическое лечение рассеянной внутрисосудистой коагуляции, вызванной бактериями, множественной травмой, интоксикацией или любым другим механизмом; антикоагулянтное лечение в случае, когда кровь находится в контакте с посторонними поверхностями в теле, такими как сосудистые имплантаты, сосудистые стенты, катетеры сосудов, механические и биологические протезные клапаны или любое другое медицинское устройство; и в случае антикоагулянтного лечения, когда кровь находится в контакте с медицинскими устройствами вне тела, как происходит при сердечно-сосудистой хирургии с применением аппарата искусственное сердце-легкое или при гемодиализе.

В дополнение к его воздействиям на процесс коагуляции известно, что тромбин активирует большое число клеток (таких как нейтрофилы, фибробласты, эндотелиальные клетки и гладкомышечные клетки). Поэтому соединения по изобретению также могут быть применимы для терапевтического и/или профилактического лечения идиопатического и респираторного дистресс синдромов у взрослых, легочного фиброза с последующим лечением лучевой или химиотерапией, септического шока, септицемии, воспалительных реакций, которые включают, но не ограничиваются, эдему, острый или хронический атеросклероз, такой как поражение коронарной артерии, поражение церебральной артерии, поражение периферических артерий, угроза повторной перфузии и рестеноз после чрезкожной транслюминальной операции на сосудах (РТА).

Соединения по изобретению, ингибирующие трипсин и/или тромбин, могут быть также применимы в лечении панкреатита.

Обычно соединения по изобретению следует вводить перорально, буккально, ректально, дермально, назально, трахеально, бронхиально, или любым другим парентеральным путем или путем ингаляции, в форме фармацевтических препаратов, содержащих пролекарство либо в форме свободного основания, либо в форме фармацевтически приемлемой нетоксичной соли, полученной присоединением органической или неорганической кислоты, в фармацевтически приемлемой дозированной форме. В зависимости от расстройства и пациента, а также пути введения композиции могут вводиться в различных дозах.

Соединения по изобретению могут также комбинироваться и/или совместно вводиться с антитромбическим агентом с различным механизмом действия, таким как антитромбоцитарные агенты: ацетисалициловой кислотой, тиклопидином, клопидогрелем, тромбоксановым рецептором и/или ингибиторами синтетазы, антагонистами рецепторов фибриногена, простациклиновыми миметиками и ингибирторами фосфодиэстеразы, а также антагонистами АДФ-рецептора (P₂T).

Соединения по изобретению дополнительно могут быть скомбинированы и/или совместно введены с тромболитиками, такими как активатор тканевого плазминогена (природного или рекомбинантного), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, невыделенный комплекс стрептокиназа - активатор плазминогена (ASPAC), активаторы плазминогена из слюнных желез животных и тому подобное, при лечении тромботических заболеваний, особенно при инфаркте миокарда.

Подходящие суточные дозы соединений по изобретению при терапевтическом лечении людей составляют примерно от 0,001 до 100 мг/кг массы тела при пероральном введении и от 0,001 до 50 мг/кг массы тела при парентеральном введении.

Соединения по изобретению обладают тем преимуществом, что они могут обладать улучшенными фармакокинетическими свойствами, такими как те, что указаны выше, как после перорального, так и после парентерального введения, по сравнению с соединениями формулы
R^aO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H,
где R^a такой, как определено выше, и особенно с соединением, где R^a представляет собой H.

Соединения по изобретению неактивны по отношению к тромбину, трипсину и другим сериновым протеазам. Таким образом, соединения остаются неактивны в желудочно-кишечном тракте и, таким образом, исключаются потенциальные осложнения, возникающие при пероральном введении антикоагулянтов, которые активны per se, такие как кровотечение и диспепсия, возникающие в результате ингибирования трипсина.

Более того, при применении соединений по изобретению могут исключаться местные кровотечения, ассоциированные и являющиеся следствием парентерального введения активного ингибитора тромбина.

Соединения по изобретению могут также обладать тем преимуществом, что они являются более эффективными, менее токсичными, обладают более продолжительным действием, обладают более широким диапазоном активности, дают меньше побочных эффектов, легче абсорбируются, а также могут обладают рядом других полезных фармакологических свойств по сравнению с соединениями, известными из уровня техники.

Биологические тесты
Тест А
Определение тромбинового времени свертывания (ТТ)
Человеческий тромбин (Т 6769, Sigma Chem. Со, конечная концентрация 1,4 NIH ед/мл (единиц тромбина Национального института здравоохранения (США))) в буферном растворе, pH 7,4, 100 мкл, и ингибиторный раствор, 100 мкл, инкубируют в течение 1 мин. Затем добавляют объединенную нормальную цитратную человеческую плазму, 100 мкл, и с помощью автоматического устройства замеряют время свертывания (KC 10, Amelung).

Время свертывания в секундах откладывают относительно концентрации ингибитора, и путем интерполяции определяют ИК₅₀ТТ.

ИК₅₀ТТ - это концентрация ингибитора, которая удваивает тромбиновое время свертывания для плазмы человека.

Тест Б
Определение тромбинового времени в плазме ex vivo
Ингибирование тромбина после перорального или парентерального введения соединений по изобретению оценивают на крысах, находящихся в сознании, которых за день или два до начала эксперимента катетеризировали для отбора образца крови из сонной артерии. В день эксперимента вводят соединение, растворенное в смеси этанол : Solutol^TM : вода (5:5:90), и забирают образцы крови через фиксированные промежутки времени в пластмассовые пробирки, содержащие 1 часть раствора цитрата натрия (0,13 моль/л) и 9 частей крови. Пробирки центрифугируют, получая обедненную тромбоцитами плазму. Плазму используют для определения тромбинового времени, как описано ниже.

Цитратную плазму крыс, 100 мкл, разбавляют солевым раствором, 0,9%, 100 мкл, и начинают коагуляцию плазмы, добавляя человеческий тромбин (Т 6769, Sigma Chem. Co. USA) в буферном растворе, pH 7,4, 100 мкл. Время свертывания измеряют при помощи автоматического устройства (КС 10, Amelung, Germany).

Концентрации активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H (международная заявка на патент WO 94/29336) в плазме крыс определяют с помощью стандартных кривых зависимости тромбинового времени в объединенной цитратной плазме крыс от известных концентраций вышеупомянутого активного ингибитора тромбина, растворенного в солевом растворе.

На основании определенных концентраций активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H в плазме крысы (предполагается, что пролонгация тромбинового времени обусловлена вышеупомянутым соединением), подсчитывают площадь под кривой (AUCпл) после перорального и/или парентерального введения пролекарства, используя формулу трапеций и экстраполяцию данных к бесконечности.

Биологическую доступность активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H после перорального или парентерального введения пролекарства рассчитывают как показано ниже:
[(AUCпл/доза)/(AUCактивн., в.в./доза)]•100,
где AUCактивн. , в.в., представляет собой площадь под кривой (AUC), полученную после внутривенного введения HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H крысам, находящимся в сознании, как описано выше.

Тест В
Определение тромбинового времени в моче ex vivo
Количество активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H, экскретированного в мочу после перорального или парентерального введения соединений по изобретению, растворенных в смеси этанол : Solutol^TM : вода (5: 5: 90), оценивают путем определения тромбинового времени в моче ex vivo (предполагается, что пролонгация тромбинового времени обусловлена вышеупомянутым соединением).

Крыс, находящихся в сознании, помещают в метаболические камеры, допускающие раздельный сбор мочи и кала в течение 24 часов после перорального введения соединений по изобретению. Тромбиновое время определяют в собранной моче как описано ниже.

Объединенную нормальную цитратную человеческую плазму (100 мкл) инкубируют с концентрированной крысиной мочой или ее солевыми разведениями в течение одной минуты. Затем введением человеческого тромбина (Т 6769, Sigma Chem. Company) в буферном растворе (pH 7,4; 100 мкл) инициируют коагуляцию плазмы. Время свертывания измеряют на автоматическом устройстве (КС 10; Amelung).

Концентрации активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H в моче крысы рассчитывают с помощью стандартных кривых зависимости тромбинового времени в объединенной нормальной цитратной человеческой плазме от известных концентраций вышеупомянутого ингибитора активного тромбина, растворенного в концентрированной крысиной моче (или ее солевых разведениях). Умножая общее количество крысиной мочи, продуцированной за период 24 часа, на рассчитанную среднюю концентрацию вышеупомянутого активного ингибитора в моче, можно подсчитать количество активного ингибитора, экскретированного в мочу (AMOUNTпл).

Биологическую доступность активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H после перорального или парентерального введения пролекарства подсчитывают по формуле:
[(AMOUNTпл/доза)/(AMOUNTактивн., в.в./доза)]•100,
где AMOUNTактивн., в.в., представляет собой количество, экскретированное в мочу после внутривенного введения HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H крысам, находящимся в сознании, как описано выше.

Тест Г
Определение HO(O)C-CH₂-(R}Cgl-Aze-Pab-H в моче методом ЖХ-МС (жидкостная хроматография - масс-спектрометрия)
Количество активного ингибитора тромбина HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H, экскретированного в мочу после перорального или парентерального введения соединений по изобретению, растворенных в смеси этанол : Sokitol^TM : вода (5:5:90), измеряют с помощью ЖХ-МС анализа, описанного ниже.

Опыты на животных выполнены, как описано выше в Способе В. Перед анализом образцы мочи собирают и замораживают при -20^oC.

Пробы мочи анализируют на содержание HO(O)С-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H в соответствии со следующим способом.

Оттаявшие образцы мочи перемешивают и, если требуется, подвергают центрифугированию. Трубки для твердофазной экстракции (Analytichem Bond Elut. N 1210-2059) активируют 1,0 мл метанола и обрабатывают 1,0 мл смеси ацетонитрил : вода (50: 50), затем 1,0 мл 0,1%-ной муравьиной кислоты. В каждую экстракционную трубку добавляют 50 мкл рабочего внутреннего стандарта (20 мкмоль/л). Для стандартов мочи добавляют 50 мкл стандартного раствора. 200 мкл образца или, в случае стандартов мочи, чистой мочи добавляют в каждую трубку и затем прогоняют посредством силы тяжести или мягкого вакуума. Остаточную мочу отмывают 1,0 мл ацетата аммония (2 ммоль/л) перед элюцией 1,0 мл смеси ацетонитрил : ацетат аммония (2 ммоль/л) (35:65). Собранный элюат переносят в ампулы автоматического пробоотборника. 30 мкл экстракта вводят в колонку для ЖХ (Hypersil BDS-C18; 3 мкм; 75 мм • 4,0 мм (внутренний диаметр); Hewlett-Packard N 79926 03-354), элюируют буфером на основе ацетата аммония (1,3 ммоль/л) с 40% ацетонитрила и 0,1% муравьиной кислоты со скоростью 0,75 мл/мин. Вытекающий поток разделяют таким образом, чтобы 30 мкл/мин попадали в электрорассеивающий источник ионов P-E Sciex API-3 масс-спектрометра. HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H и HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Pro-Pab-H (внутренний стандарт) оба обладают временем удержания около 1,5 минут. Их молекулярные ионы ((M+H)⁺) регистрировали при m/z 430,2 и 444,2 соответственно, при единичном массовом разрешении. Стандарты мочи при двух уровнях, один на пределе квантификации, применяют для калибровки на основе соотношений площадей пиков для HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H над внутренним стандартом. Линейность способа проверяют в диапазоне от 0,050 до 20 мкмоль/л. Коэффициент вариации равен 1-2% при 1-20 мкмоль/л и 7% при 0,50 мкмоль/л. Граница квантификации равна 0,050 мкмоль/л.

Умножая общее количество мочи, продуцированной за период 24 часа, на рассчитанную концентрацию HO(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H в моче, можно подсчитать количество активного ингибитора, экскретированного в мочу (AMOUNTпп). Затем рассчитывают биологическую доступность активного ингибитора тромбина, как описано выше в Способе В.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Примеры
Общие экспериментальные способы.

Масс-спектры снимали на тройном квадрупольном масс-спектрометре FIннIgан MAT TSQ 700, оснащенным интерфейсом электрорассеяния.

¹H ЯМР и ¹³C ЯМР измерения проводили на BRUKER ACP 300 и Varian UNITY plus 400 и 500 спектрометрах, действующих на ¹H частотах 300,13, 399,96 и 499,82 МГц соответственно, и на ¹³C частотах 75,46, 100,58 и 125,69 МГц соответственно. химические сдвиги записаны в δ единицах.

Получение исходных материалов
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H, Boc-(R)Cgl-Aze-Pab • HCl, H-(R)-Aze-Pab-Z, H-(R)-Aze-Pab-Z • HCl, Bn-OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z, Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z, Boc-(R)Cgl-Aze-OH и Pab-Z • HCl были получены в соответствии с известными способами (заявка на международный патент WO 94/29336).

Пример 1
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,1 г; 13 ммоль) в THF (125 мл) и 2 М NaOH (70 мл; 140 ммоль) при 0^oC по каплям добавляют аллилхлороформиат (1,7 г; 14 ммоль). После перемешивания при 0^oC в течение часа реакционную смесь концентририруют, добавляют воду (100 мл) и полученную водную фазу экстрагируют метиленхлоридом (3х100 мл). Объединенные органические фазы концентрируют, получая 6,4 г неочищенного продукта, который очищают путем флэш-хроматографии, применяя смесь EtOAc:THF:Et₃H (68:29:3) в качестве элюента. В результате концентрирования получают 5,8 г (81%) подходящего соединения в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 8,19 (bt, 2H), 7,78 (d, 2H), 7,26 (d, 2H), 6,02-5,92 (m, 1H), 5,32 (d, J=17 Гц, 1H), 5,18 (d, J=10 Гц, 1H), 5,06 (d, J= 7 Гц, 1H), 4,82 (bs, 1H), 4,61 (d, J=6 Гц, 2H), 4,58-4,48 (m, 1H), 4,38-4,27 (m, 2H), 4,14-4,03 (m, 1H), 3,77-3,68 (m, 1H), 2,60-0,90 (m, 24H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,10, 170,74, 168,02, 164,54, 155,98.

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂ • 2TFA
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH= CH₂ (2,03 г; 3,65 ммоль; со стадии (I) выше) в метиленхлориде (15 мл) при 0^oC добавляют TFA (трифторуксусную кислоту) (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды 3 часа и концентрируют, получая 2,8 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, MeOH (d4)): δ 7,80 (d, 2H), 7,57 (d, 2H), 6,02 (m, 1H), 5,45 (d, J= 17 Гц, 1H), 5,33 (d, J=10 Гц, 1H), 5,91-4,80 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 4,38 (bq, J=8 Гц, 1H), 3,71 (d, J=7 Гц, 1H), 2,76-2,60 (m, 1H), 2,35-2,20 (m, 1H), 1,9-1,0 (m, 11H).

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
Смесь H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH= CH₂ • 2TFA (649 мг; 0,95 ммоль; со стадии (II) выше), K₂CO₃ (656 мг, 4,8 ммоль), воды (0,1 мл) и THF (10 мл) перемешивают при 40^oC 2 часа и затем добавляют этилбромацетат (190 мг, 1,14 ммоль) в THF (1 мл). После перемешивания при 40^oC в течение 4 часов при температуре окружающей среды реакционную смесь фильтруют, концентририруют и очищают путем флэш-хроматографии, применяя смесь EtOAc:ТГФ:Et₃H (68:29:3) в качестве элюента, получая 244 мг (47%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 8,46 (bt, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,08-5,94 (m, 1H), 5,35 (d, J=18 Гц, 1H), 5,23 (d, J=11 Гц, 1H), 4,93 (dd, J= 6 и 9 Гц, 1H), 4,66 (d, 2H), 4,62-4,38 (AB часть ABX-спектра), 4,16-4,04 (m, 4H), 3,20 (d, 2H), 2,86 (d, 1H), 2,64-2,45 (m, 2H), 2,0-1,0 (m, 17H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,33, 172,24, 170,72, 168,19, 164,35.

Пример 2
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂ x 2TFA (503 мг; 0,74 ммоль; см. Пример 1 (II) выше) и н-пропилбромацетата (160 мг, 0,88 ммоль), получая 277 мг (68%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, COCl₃); δ 8,48 (bt, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,76 (широкий, 1H), 6,02 (m, 1H), 5,37 (dd, 1H), 5,24 (dd, 1H), 4,94 (t, 1H), 4,67 (dd, 2H), 4,49 (AB часть ABX-спектра, 2H), 4,12 (m, 2H), 3,98 (t, 2H), 3,24 (AB-система, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,52 (m, 2H), 1,99 (bd, 2H), 1,80-1,50 (m, 7H), 1,61 (q, 2H), 1,30-1,10 (m, 2H), 1,00 (qd, 2H), 0,90 (t, 3Н).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,4, 172,3, 170,7, 167,9, 164,5.

Пример 3
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂ x 2TFA (285 мг; 0,42 ммоль; см. Пример 1 (II) выше) и трет-бутилбромацетата (96 мг, 0,50 ммоль), получая 93 мг (39%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, COCl₃); δ 8,50 (bt, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,36 (d, 2H), 6,07-5,97 (m, 1H), 5,36, (d, J=16 Гц, 1H), 5,22 (d, J=10 Гц, 1H), 4,93 (dd, J=9 и 6 Гц, 1H), 4,76 (d, J=6 Гц, 2H), 4,57-4,46 (m, 2H), 4,18-4,04 (m, 2H), 3,19-3,08 (AB-спектр, J_AB = 20 Гц, 2H), 2,86 (d, J=8 Гц, 1H), 2,72-2,53 (m, 2H), 2,0-0,9 (m, 23H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,28, 171,53, 170,76, 167,81, 164,1.

Пример 4
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (600 мг; 1,3 ммоль) и этилхлороформиата (150 мг, 1,4 ммоль), получая 240 мг (34%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,37 (bs, 1H), 8,16 (bs, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,18 (d, 2H), 5,17 (d, 1H), 4,73 (t, 1H), 4,47 (dd, 1H), 4,27 (m, 2H), 4,06 (q, 2H), 3,66 (t, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 1,4-1,8 (m, 7H), 1,22 (s, 9H), 1,3-0,8 (m, 7H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,6, 170,7, 167,9, 164,8, 156,0.

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt • 2HCl
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt (240 мг; 0,44 ммоль; со стадии (I) выше) в EtOAc (20 мл) добавляют соляную кислоту при 0^oC в течение 5 минут. Реакционную смесь перемешивают при 0^oC в течение часа и концентрируют, получая 225 мг (100%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, D₂O); δ 7,85 (d, 2H), 7,61 (d, 2H), 4,98 (dd, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,44 (р, 5H), 3,90 (d, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,0-1,65 (m, 9H), 1,39 (t, 3Н), 1,4-1,1 (m, 7H), 0,98 (m, 1H).

¹³C ЯМР (75 МГц, D₂O) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 169,4, 166,8, 154,3.

(III) EtOOCCH₂-(R)Cql-Aze-Pab-COOEt
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt • 2HCl (160 мг; 0,31 ммоль; со стадии (II) выше) и этилбромацетата (52,5 мг, 0,31 ммоль). Выход: 100 мг (61%) в виде светло-желтого порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 8,48 (bt, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,38 (d, 2H), 4,51 (AB часть ABX-спектра, 2H), 4,21 (q, 2H), 4,15-4,05 (m, 4H), 3,21 (AB-спектр, 2H), 2,86 (d, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,53 (m, 1H), 1,96 (bd, 2H), 1,90-1,70 (m, 12H), 1,35 (t, 3Н), 1,22 (t, 6H), 1,30-0,95 (m, 2H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,5, 172,2, 170,7, 167,6, 164,9.

Пример 5
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (I) выше, используя Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,0 г; 13 ммоль) и н-пропилхлороформиат (1,57 мл, 14 ммоль). Выход 5,4 г (76%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 8,25 (bt, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 5,09 (bd, 1H), 4,87 (dd, 1H), 4,58 (dd, 1H), 4,39 (dd, 2H), 4,14 (q, 1H), 4,10 (t, 2H), 3,79 (t, 1H), 2,54 (dm, 2H), 2,21 (s, 1H), 1,87-1,55 (m, 8H), 1,33 (s, 9H), 1,45-1,0 (m, 4H), 0,99 (t, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 170,6, 167,8, 165,0, 155,9.

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr • 2TFA
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в примере 1 (II) выше, используя 2,1 г (3,7 ммоль) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr (со стадии (I) выше). Выход 3,7 г.

¹H ЯМР (400 МГц, MeOH-d₄); δ 7,77 (d, 2H), 7,60 (d, 1H), 4,86 (dd, 1H), 4,56 (AB часть ABX-спектра, 2H), 4,33 (m, 4H), 3,72 (d, 1H), 3,30 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 1,9-1,7 (m, 9H), 1,4-1,1 (m, 6H), 1,02 (t, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, MeOH-d₄) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 169,3, 168,0, 161,4.

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr • 2TFA (472 мг; 0,69 ммоль; со стадии (II) выше) и этилбромацетата (138 мг, 0,83 ммоль), получая 0,22 мг (58%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 8,46 (bt, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 4,92 (dd, 1H), 4,49 (AB часть ABX-спектра, 2H), 4,10 (m, 6H), 3,23 (AB-спектр, 2H), 2,80 (dm, 2H), 1,98 (bd, 2H), 1,74 (q, 2H), 1,63 (dd, 2H), 1,52 (m, 1H), 1,21 (t, 3H), 1,20-1,10 (m, 2H), 0,98 (t, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,3, 172,2, 170,7, 167,6, 164,8.

Пример 6
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr • 2TFA (365 мг; 0,53 ммоль; см. Пример 5 выше) и метилбромацетата (98 мг, 0,64 ммоль), получая 114 мг (41%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 8,44 (bt, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 7,04 (широкий, 1H), 4,92 (dd, 1H), 4,49 (AB часть ABX-спектра), 4,12 (m, 2H), 4,10 (t, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,24 (s, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,65 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,01 (широкий, 1H), 1,96 (bd, 2H), 1,75 (q, 4H), 1,63 (bdd, 1H), 1,53 (m, 1H), 1,3-1,1 (m, 5H), 0,99 (t, 3H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,3, 172,5, 170,7, 167,7, 165,0.

Пример 7
EtOOCCH₂-(R)Cgl-A2e-Pab-COOCH₂CH₂OMe
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (I) выше, используя Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,0 г; 13 ммоль) и 2-метоксиэтилхлороформиат (1,94 г, 14 ммоль). Выход 3,9 г (52%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,24 (bt, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 5,08 (bd, 1H), 4,87 (dd, 1H), 4,58 (dd, 1H), 4,39 (dd, 2H), 4,30 (t, 2H), 4,15 (m, 1H), 3,79 (bt, 1H), 3,68 (t, 2H), 3,40 (s, 3H), 2,65-2,45 (m, 2H), 2,20 (широкий, 1H), 1,9-1,55 (m, 6H), 1,34 (s, 9H), 1,3-0,95 (m, 6H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 170,7, 167,8, 164,6, 155,9.

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe • 2TFA
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в примере 1 (II) выше, используя 1,71 г Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe (со стадии (I) выше). Выход 1,89 г (88%).

¹H ЯМР (400 МГц, MeOH-d₄); δ 7,77 (d, 2H), 7,59 (d, 1H), 4,85 (dd, 1H), 4,56 (d, 2H), 4,49 (m, 2H), 4,37 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,70 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 2,68 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 1,9-1,7 (m, 7H), 1,4-1,1 (m, 6H).

¹³C ЯМР (100 МГц, MeOH-d₄) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 169,3, 168,0, 154,6.

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe • 2TFA (487 мг; 0,69 ммоль; со стадии (II) выше) и этилбромацетата (138 мг, 0,83 ммоль), получая неочищенный продукт, который очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь THF/метиленхлорид (3:1) в качестве элюента. Выход составляет 0,13 мг (34%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 8,46 (bt, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 7,21 (широкий, 1H), 4,92 (dd, 1H), 4,49 (AB часть ABX-спектра, 2H), 4,30 (t, 2H), 4,12 (q, 2H), 4,07 (q, 2H), 3,68 (t, 1H), 3,40 (s, 3H), 3,24 (s, 2H), 2,62 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,07 (широкий, 1H), 1,97 (bd, 1H), 1,8-1,5 (m, 5H), 1,3-1,1 (m, 6H), 1,05-0,95 (m, 2H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,3, 172,2, 170,7, 167,8, 164,6.

Пример 8
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии со способом, описанным в Примере 1 (III) выше, из H-(R)Cgl-Aze-Pab-CH₂CH₂OMe • 2TFA (490 мг; 0,7 ммоль, см. Пример 7 (II) выше) и метилбромацетат (128 мг, 0,84 ммоль), получая неочищенный продукт, который очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь THF/метиленхлорид (3:1) в качестве элюента. Выход составляет 155 мг (41%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 8,44 (t, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 4,92 (dd, 1H), 4,49 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,30 (t, 2H), 4,13 (m, 2H), 3,68 (t, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,39 (s, 3H), 3,25 (s, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 1,96 (bd, 1H), 1,8-1,5 (m, 6H), 1,3-1,1 (m, 5H), 1,00 (q, 2H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,2, 172,6, 170,7, 167,8, 164,5.

Пример 9
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,01 г; 2,1 ммоль) и н-бутилхороформиата (0,32 г, 2,4 ммоль). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 1,5 часов реакционную смесь концентрируют и экстрагируют тремя порциями метиленхлорида. Объединенную органическую фазу затем промывают водой, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют, получая 1,0 г (83%) соединения, указанного в подзаголовке, в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,81-9,31 (bs, 1H), 8,36-8,20 (m, 1H), 7,35 (d, 2H), 7,84 (d, 2H), 6,78-6,43 (bs, 1H), 5,05-4,82 (m, 2H), 4,69-4,15 (m, 3H), 4,15-4,08 (m, 3H), 3,86-3,70 (m, 1H), 2,68-2,42 (m, 2H), 1,92-0,88 (m, 25H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,5, 170,7, 167,9, 164,9, 156,0.

FAB-MC: (m+1) = 572 (m/z) (FAB - бомбардировка быстрыми атомами).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu • 2HCl
Соединение, указанное в подзаголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 4 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu (2,5 г; 4,4 ммоль: со стадии (I) выше), получая 2,4 г (100%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, Me-OH-d₄); δ 7,78-7,60 (m, 2H), 4,66-4,49 (m, 2H), 0,98 (t, 2H), 4,49-4,35 (m, 3H), 4,35-4,22 (m, 1H), 3,75 (d, 1H), 1,92-1,67 (m, 8H), 1,56-1,07 (m, 8H). Сигнал одного из протонов частично затеняется CD₃OH-сигналом.

¹³C ЯМР (100 МГц, Me-OH-d₄) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 169,3, 167,9, 154,7.

MC (m+1) = 472 (m/z).

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-нBu
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-нВu • 2HCl (400 мг; 0,74 ммоль) и этилбромацетата (147 мг, 0,88 ммоль). Продукт очищают путем флэш-хроматографии, используя градиент метиленхлорида и EtOH 0,1% ---> 12,8% в качестве элюента, получая 290 мг (70%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,70-9,36 (bs, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 7,07-6,73 (bs, 1H), 4,97-4,87 (dd, 1H), 4,62-4,35 (m, 2H), 4,20-3,98 (m, 6H), 3,27-3,12 (m, 2H), 2,84 (s, 1H), 2,70-2,40 (m, 2H), 2,03-0,85 (m, 22H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,3, 172,3, 170,8, 167,9, 165,0.

FAB-MC: (m+1) = 558 (m/z).

Пример 10
PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OH
Смесь γ-бутиролактона (4,0 г, 46,5 ммоль) и пирролидина (6,6 г; 92,8 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 часов. Продукт концентрируют в вакууме, получая 14,5 г (100%) продукта в виде желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, MeOH-d4); δ 3,58 (t, 2H), 3,50 (t, 2H), 3,40 (t, 2H), 2,42 (t, 2H), 2,06-1,75 (m, 6H).

(II) PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂Br
К смеси PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OH (7,2 г; 45,8 ммоль: со стадии (I) выше) и DMAP (5,6 г, 45,8 ммоль) в метиленхлориде при 0^oC по каплям добавляют бромацетилбромид (4,0 мл; 45,8 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1,5 часов добавляют другую порцию бромацетилбромида (1,0 мл; 11,4 ммоль) и DMAP (1,4 г, 11,4 ммоль) и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 часов. Добавляют воду и экстрагируют 3 раза метиленхлоридом. Органическую фазу сушат с Na₂SO₄ и концентрируют, получая 10,3 г (81%) продукта в виде желтого масла.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 4,15 (t, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,40-3,31 (m, 4H), 2,30 (t, 2H), 1,98-1,83 (m, 4H), 1,81-1,73 (m, 2H).

(III) PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Соединение, указанное в заголовке, получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (6 г; 10,4 ммоль) и PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂Br (3,5 г, 12,4 ммоль; со стадии (II) выше). Неочищенный продукт очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь гептан/EtOAc: изопропанол (1: 2:2) в качестве элюента, получая 4,2 г продукта, который очищают, используя препаративную RPLC (жидкостную хроматографию с обращенной фазой) с использованием 44% ацетонитрила в 0,1 М HH₄OAc в качестве элюента, получая 2,64 г (36%) белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 9,80-9,22 (bs, 1H), 8,36 (t, 1H), 7,96-7,58 (m, 3H), 7,45 (d, 2H), 7,37-7,22 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 4,95-4,88 (dd, 1H), 4,72-4,29 (m, 2H), 4,15-4,04 (m, 2H), 4,04-3,88 (m, 2H), 3,40 (t, 2H), 3,34 (t, 2H), 3,28-3,17 (m, 2H), 2,85 (d, 1H), 2,67-2,48 (m, 1H), 2,23 (t, 2H), 2,14-0,93 (m, 18H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,3, 172,4, 170,9, 168,2, 164,6.

FAB-MC: (m+1) = 703 (m/z).

Пример 11
ChNHC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) ChNHC(O)CH₂OH
Смесь циклогексиламина (9,9 г; 99,8 ммоль) и 2,5-диоксо-1,4-диоксана (3,0 г; 25,9 ммоль) перемешивают при 100^oC в течение 2,5 часов. Продукт концентрируют в вакууме, получая 8,1 г (100%) продукта в виде коричневого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, MeOH-d4); δ 3,92 (s, 2H), 3,75-3,65 (m, 1H), 1,90-1,58 (m, 5H), 1,43-1,07 (m, 5H). Сигналы двух протонов затеняются CO₃OH-сигналом.

¹³C ЯМР (125 МГц, MeOH-d4) сигналы карбонила и амидина; δ 174,0, 62,5, 33,7, 26,5, 26,1, 26,0. Сигнал одного из углеродов затеняется CO₃OH-сигналом.

(II) ChHNC(O)CH₂OOCCH₂Br
К смеси ChNHC(O)CH₂OH (8,0 г; 50,9 ммоль; со стадии (I) выше) и DMAP (6,2 г, 50,9 ммоль) в метиленхлориде (80 мл) при 0^oC по каплям добавляют бромацетилбромид (4,0 мл; 45,8 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1,5 часов добавляют следующие порции бромацетилбромида (1,0 мл; 11,4 ммоль) и DMAP (1,4 г, 11,4 ммоль) и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 часов. Добавляют воду и водную фазу экстрагируют 3 порциями метиленхлорида. Органическую фазу промывают водой, сушат с помощью Na₂SO₄ и концентрируют, получая 10,3 г (73%) продукта в виде коричневого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 6,12-6,00 (bs, 1H), 4,62 (s, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,84-3,76 (m, 1H), 1,95-1,86 (m, 2H), 1,75-1,65 (m, 2H), 1,65-1,56 (m, 1H), 1,43-1,29 (m,2H), 1,24-1,10 (m, 3H).

(III) ChNHC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), начиная с H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (6 г; 10,4 ммоль) и ChNHC(O)CH₂OOCCH₂Br (3,5 г, 12,4 ммоль; со стадии (II) выше). Неочищенный продукт очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь гептан/EtOAc:изопропанол (5:2:2) в качестве элюента, концентрирования и препаративной RPLC, используя 50% ацетонитрила в 0,1 М HH₄OAc в качестве элюента. После концентрирования и сушки вымораживанием получают 2,6 г (36%) продукта в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 9,78-9,25 (bs, 1H), 7,90 (t, 1H), 7,78 (d, 2H), 7,44 (d, 2H), 7,38-7,24 (m, 5H), 6,66 (t, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,90-4,83 (dd, 1H), 4,60-4,45 (m, 2H), 4,18-3,93 (m, 4H), 3,73-3,62 (m, 1H), (d, 1H), 3,23, 3,44 (AB, 2H), 2,87, 2,65-2,08 (m, 3H), 1,98-0,93 (m, 22H).

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,1, 171,7, 170,7, 168,8, 166,1, 164,4.

FAB-MC: (m+1) = 703 (m/z).

Пример 12
(нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab- COOCH₂OOCC(CH₃)₃
(I) (нPr)₂NC(O)CH₂OH
Смесь 2,5-диоксо-1,4-диоксана (2,02 г; 17,4 ммоль) и ди-н-пропиламина (5 мл; 36,5 ммоль) нагревают при 50^oC в течение 1 часа и при 90^oC 66 часов. Добавляют толуол и затем удаляют в вакууме с избытком ди-н-пропиламина. Остаток очищают путем флэш-хроматографии, используя 10%-ный метанол в метиленхлориде в качестве элюента, получая 4,18 г (66%) желаемого соединения.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 4,1 (d, 2H), 3,65 (t, 1H), 3,25-3,35 (m, 2H), 2,9-3,0 (m, 2H), 1,45-1,6 (m, 4H), 0,8-0,95 (m, 6H).

(II) (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂Br
Смесь (нPr)₂NC(O)CH₂OH (0,743 г; 4,7 ммоль; со стадии (I) выше), DCC (0,951 г; 4,6 ммоль) и бромуксусной кислоты (0,704 г, 5,1 ммоль) в метиленхлориде (15 мл) перемешивают при комнатной температуре 1,5 часа. Осадок удаляют путем фильтрации и растворитель удаляют из фильтрата в вакууме. Дистилляция остатка по Кугельрору (Kugelrohr) дает 0,66 г (50%) желаемого соединения.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 4,8 (s, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,2-3,3 (m, 2H), 3,05-3,15 (m, 2H), 1,5-1,7 (m, 4H), 0,8-1,0 (dt, 6H).

(III) Пивалоилоксиметил 4-нитрофенил карбонат
Смесь пивалата серебра (7,5 г; 25 ммоль) и йодметил-4-нитрофенил-карбоната (Alexander et al., J. Med. Chem. (1998) 31, 318) (7,99 г, 25 ммоль) кипятят с обратным холодильником в бензоле (50 мл) 2 часа. Бензол удаляют в вакууме и остаток растворяют в толуоле. Фильтрацией через hyflo и очисткой флэш-хроматографией с применением толуола в качестве элюента получают 4,00 г (54%) соединения, указанного в подзаголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 8,25 (d, 2H), 7,40 (d, 2H), 5,85 (s, 2H), 1,2 (s, 2H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 176,77, 155,06.

(IV) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃
Раствор пивалилоксиметил-4-нитрофенилкарбоната (1,18 г; 4 ммоль; со стадии (III) выше) в метиленхлориде (20 мл) при комнатной температуре добавляют к раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,88 г; 4 ммоль) и триэтиламина (0,66 мл; 4,57 ммоль) в метиленхлориде (20 мл). Через 1 час метиленхлорид заменяют на EtOAc и смесь очищают путем флэш-хроматографии, используя EtOAc в качестве элюента, получая 1,27 г (50%) соединения, указанного в подзаголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,5 (bs, 1H), 8,25 (t, 1H), 7,8 (d, 2H), 7,3 (d, 2H), 7,0 (bs, 1H), 5,0-4,8 (m, 2H), 4,65-4,5 (m, 1H), 4,5-4,3 (m, 2H), 4,2-4,05 (m, 1H), 3,75 (t, 1H), 2,7-2,4 (m, 2H), 1,9-1,45 (m, 5H), 1,45-0,8 (m, 24H).

(V) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃ (327 мг; 0,52 ммоль; со стадии (IV) выше) растворяют в смеси метиленхлорида (5 мл) и TFA (1,2 мл). Через 2 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, добавляют ацетонитрил и растворитель снова удаляют в вакууме, получая неочищенный поименованный в подзаголовке продукт, который используют без дополнительной очистки на следующей стадии.

(VI) (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab- COOCH₂OOCC(CH₃)₃
Остаток со стадии (V) выше смешивают с (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂Br (150 мг; 0,53 ммоль; со стадии (II) выше) и K₂CO₃ (480 мг; 3,5 ммоль) в THF (5 мл) и нагревают 3 часа при 40^oC. Реакционную смесь фильтруют и концентрируют до неочищенного продукта, который очищают путем препаративной RPLC, получая 78 мг (21%) соединения, указанного в заголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,3-9,6 (bs, 1H), 8,5 (m, 1H), 7,95-8,15 (bs, 1H), 7,85-7,95 (bs, 1H), 7,2-7,3 (d, 2H), 5,8 (s, 2H), 4,8-4,9 (dd, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 4,0-4,4 (m, 3H), 2,8-3,4 (m, 5H), 2,2-2,7 (m, 3H), 1,75-1,3 (m, 9H), 1,3-1,0 (m, 14H), 1,0-0,7 (m, 7H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 177,24, 175,30, 171,85, 170,79, 168,78, 165,82, 163,14.

Пример 13
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 12 (VI) выше, из неочищенного Boc(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃ (0,41 г; 0,65 ммоль; см. Пример 12 (IV) выше), используя ацетонитрил (10 мл) в качестве растворителя. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре, растворитель удаляют in vacuo и остаток фракционируют между EtOAc и водой. Водную фазу трижды экстрагируют EtOAc, а объединенные органические фазы высушивают (Na₂SO₄) и растворитель удаляют in vacuo. Остаток подвергают флэш-хроматографии с применением метиленхлорида/метанола в качестве элюента. Сушка замораживанием из ледяной уксусной кислоты дает 84 г (21%) соединения, указанного в заголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,9 (bs, 1H), 8,5 (t, 1H), 7,35 (d, 2H), 5,85 (s, 2H), 5,90 (dd, 2H), 4,6-4,35 (m, 2H), 4,15-4,0 (m, 4H), 3,2 (s, 2H), 2,85 (d, 1H), 2,7-2,45 (m, 2H), 2,0-1,9 (m, 2H), 1,8-1,45 (m, 5H), 1,3-0,9 (m, 18H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 177,23, 175,48, 172,29, 170,80, 168,85, 163,14.

Пример 14
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃
Раствор Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,38 г; 13,5 ммоль), 1-ацетоксиэтил-4-нитрофенилкарбоната (Alexander et al, J. Med. Chem. (1998) 31, 318) (3,05 г; 12 ммоль) и триэтиламина (1,95 мл; 14 ммоль) в метиленхлориде (40 мл) перемешивают при комнатной температуре 16 часов, затем добавляют EtOAc. Полученный раствор слегка концентрируют и промывают водным Na₂CO₃ (10%), концентрируют до неочищенного продукта, который очищают путем флэш-хроматографии, используя EtOAc в качестве элюента, получая 5,59 г (77%) соединения, указанного в подзаголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,5 (bs, 1H), 8,25 (t, 1H), 7,85 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,95 (q, 1H), 6,7 (bs, 1H), 5,0-4,85 (m, 2H), 4,65-4,5 (m, 1H), 4,5-4,25 (m, 2H), 4,2-4,05 (m, 1H), 3,75 (t, 1H), 2,65-2,45 (m, 2H), 2,05 (s, 3H), 1,9-1,45 (m, 11H), 1,45-0,8 (m, 12H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,61, 170,80, 169,54, 168,91, 162,50, 156,02.

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃
Неочищенное искомое соединение получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 12 (V) выше, из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃ (2,21 г; 3,68 ммоль; со стадии (I) выше).

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃
Неочищенный Н-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃ со стадии (II) выше растворяют в метиленхлориде (150 мл). Смесь промывают 10%-ным раствором Na₂CO₃, органическую фазу высушивают K₂CO₃ и фильтруют. К полученному раствору добавляют K₂CO₃ (756 мг; 5,5 ммоль) и этил(O-трифторметансульфонил)-гликолят (790 мг; 3,3 ммоль) в метиленхлориде (5 мл). Реакционную смесь перемешивают 5-10 минут при комнатной температуре и затем концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в EtOAc и полученную смесь фильтруют через целит. Фильтрат подвергают флэш-хроматографии с применением EtOAc и затем HPLC, получая 475 мг (22%) соединения, указанного в заголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,5 (bs, 1H), 8,3 (t, 1H), 7,7 (d, 2H), 7,2 (d, 2H), 6,85 (q, 1H), 4,8 (t, 1H), 4,45-4,25 (m, 2H), 4,1-3,85 (m, 4H), 3,1 (s, 2H), 2,75 (s, 1H), 2,5-2,3 (m, 2H), 1,95 (s, 3H), 1,9-1,8 (m, 1H), 1,7-1,25 (m, 8H), 1,25-1,75 (m, 8H).

¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,26, 172,34, 170,81, 169,49, 168,80, 162,43.

Пример 15
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,0 г; 2,1 ммоль) и Na₂HPO₄ (18,7 г; 105 ммоль) в THF (45 мл) при 20^oC по каплям добавляют дибензоилпероксид (556 мг; 2,3 ммоль), растворенный в THF (10 мл), в течение 45 минут. После перемешивания при 20^oC в течение 24 часов реакционную смесь концентрируют и полученный неочищенный продукт подвергают препаративной RPLC. Это дает 124 мг (10%) соединения, указанного в подзаголовке, в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 8,26 (m, 1H), 8,09 (m, 2H), 7,72 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,36 (d, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,87-4,98 (m, 2H), 4,54-4,61 (m, 1H), 4,33-4,47 (m, 2H), 4,13-4,19 (m, 1H), 3,81 (t, 1H), 2,53-2,63 (m, 2H), 1,73-1,86 (m, 3H), 1,66-1,72 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 0,968-1,28 (m, 6H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 172,7, 170,6, 163,9, 157,0, 155,9.

ЖХ-МС: m/z 592 (M+H⁺), m/z 614 (M+Na⁺).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (600 мг; 1,01 ммоль: со стадии (I) выше), в метиленхлориде (18 мл) добавляют TFA (6 мл) при 20^oC. После перемешивания в течение 14 часов реакционную смесь концентрируют и полученный неочищенный продукт фракционируют между EtOAc:0,1 M NaOH. Фазы разделяют и органический слой высушивают (Na₂SO₄) и выпаривают. Выход: 480 мг (96%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, MeOH-d4): δ 8,18 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,64 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,43 (d, 2H), 4,75-4,81 (m, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,18-4,34 (m, 2H), 3,12 (d, 1H), 2,57-2,68 (m, 1H), 2,23-2,33 (m, 1H), 1,88-1,96 (m, 1H), 1,73-1,84 (m, 2H), 1,59-1,71 (m, 2H), 1,45-1,57 (m, 1H), 0,80-1,34 (m, 5H).

ЖХ-МС: m/z 492 (M+H⁺); m/z 514 (M+Na⁺).

(III) MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
К раствору H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (480 мг; 0,97 ммоль; со стадии (II) выше), K₂CO₃ (270 мг; 2 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) при 20^oC добавляют метилбромацетат (177 мг; 1,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 20^oC в течение 14 часов. Реакционную смесь фильтруют и концентрируют, получая неочищенный продукт, который очищают препаративной RPLC, получая 269 мг (49%) соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 8,43 (m, 1H, HH), 8,09 (m, 2H), 7,69 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,34 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 4,93 (dd, 1H), 4,59 (dd, 1H), 4,40 (dd, 1H), 4,12 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 2,87 (d, 1H), 2,72-2,63 (m, 1H), 2,55-2,48 (m, 1H), 1,96 (m, 1H), 1,74 (m, 2H), 1,67 (d, 1H), 1,59 (d, 1H), 1,56-1,50 (m, 1H), 1,29-1,08 (m, 4H), 1,04-0,94 (m, 1H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,1, 172,5, 170,6, 164,0, 157,1.

ЖХ-МС: m/z 564 (M+H⁺).

Пример 16
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
К раствору MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Ph (260 мг; 0,46 ммоль; см. Пример 15 (III) выше) в THF (4,6 мл) добавляют KOMe (1,6 мл; 0,29 M; 0,46 ммоль) при 20^oC. Через 15 минут перемешивания смесь концентрируют и подвергают препаративной RPLC. Это дает 109 мг (52%) соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 7,59 (d, 2H), 7,34 (d, 2H), 4,83 (s, 2H), 4,82-4,76 (m, 1H), 4,48 (d, 1H), 4,33 (d, 1H), 4,15-4,30 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,04 (d, 1H), 2,57 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,75 (m, 2H), 1,58-1,70 (m, 2H), 1,53 (m, 1H), 1,31-1,10 (m, 4H), 1,04 (m, 1H).

¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) сигналы карбонила и амидина; δ 175,9, 174,3, 172,7, 155,2.

ЖХ-МС: m/z 460 (M+H⁺); m/z 482 (M+Na⁺).

Пример 17
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
К раствору EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C(O)OCH(CH₃)OOCCH₃ (184 мг; 0,31 ммоль; см. Пример 14 (III) выше) добавляют гидроксиламина гидрохлорид (120 мг: 1,72 ммоль) и триэтиламин (0,8 мл; 5,7 ммоль) в EtOH (95%; 4,0 мл), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней. Реакционную смесь концентрируют и неочищенный продукт подвергают препаративной RPLC. Это дает 85 мг (58%) соединения, указанного в заголовке.

¹H ЯМР (300 МГц, CD₃OD); δ 7,6 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 4,75-4,85 (m, 1H), 4,4-4,55 (m, 2H), 4,0-4,35 (m, 4H), 3,35 (d, 2H), 3,05 (d, 1H), 2,5-2,65 (m, 1H), 2,2-2,35 (m, 1H), 1,9-2,05 (m, 1H), 1,4-1,85 (m, 5H), 0,85-1,35 (m, 8H).

¹³C ЯМР (75,5 МГц, CD₃OD) сигналы карбонила и амидина; δ 175,97, 173,91, 172,72, 155,23.

ЖХ-МС: (m+1) = 474 (m/z).

Пример 18
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
К раствору гидроксиламина гидрохлорида (320 мг; 4,59 ммоль) и триэтиламина (1,7 мл; 12,24 ммоль) в EtOH добавляют BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,0 г; 1,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 40 часов и затем концентрируют. Неочищенный продукт очищают путем препаративной RPLC, используя 0,1 M NH₄OAc в качестве элюента, получая в результате 0,34 г (42%) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 536 (m/z).

Пример 19
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (700 мг; 1,2 ммоль) и н-пропилбромацетата (268 мг; 1,45 ммоль). Выход 259 мг (35%).

FAB-MC: (m+1) = 606 (m/z).

Пример 20
нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из нPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (182 мг; 0,3 ммоль; см. Пример 19 выше). Неочищенный продукт очищают путем препаративной RPLC, используя 40%-ный ацетонитрил в 0,1 М HH₄OAc в качестве элюента, получая 74 мг (51%) желаемого соединения.

ЖХ-МС: (m+1) = 488 (m/z).

Пример 21
изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (590 мг; 0,7 ммоль; см. Пример 39 ниже). Выход 110 мг (32%).

ЖХ-МС: (m+1) = 488 (m/z).

Пример 22
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (738 мг; 1,2 ммоль; см. Пример 37 ниже). Выход 290 мг (48%).

ЖХ-МС: (m+1) = 502 (m/z).

Пример 23
(нPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab(OH)
(I) HOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc
Раствор HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH (670 мг; 1,5 ммоль; см. Пример 28 ниже), (Boc)₂O (654 мг; 3 ммоль) и DMAP (92 мг; 0,75 ммоль) в смеси ТНР:вода (10:1) перемешивают при комнатной температуре 2 часа. Реакционную смесь концентрируют и очищают путем препаративной RPLC. После сушки замораживанием получают 112 мг (12%) соединения, указанного в подзаголовке, в виде белого твердого вещества.

ЖХ-МС: (m-1) = 643 (m/z).

(II) (нPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc
Раствор HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-O-Boc (100 мг; 0,15 ммоль; со стадии (I) выше), (нPr)₂NCOCH₂OH (27 мг; 0,17 ммоль; см. Пример 12 (I) выше), EDC (дихлорэтан) (40 мг; 0,21 ммоль) и DMAP (10 мг; 0,075 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) перемешивают при комнатной температуре 4 дня. Реакционную смесь концентрируют, очищают путем препаративной RPLC и сушат замораживанием, получая 21 мг (18%) соединения, указанного в подзаголовке.

ЖХ-МС: (m-1) = 787 (m/z).

(III) (нPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Раствор (нPr)₂HCOCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc (20 мг; 0,025 ммоль) в смеси ТРА: метиленхлорид (1:1) перемешивают при комнатной температуре 5 минут. Реакционную смесь концентрируют и сушат замораживанием из ацетонитрила и воды, получая 5 мг (34%) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 587 (m/z).

Пример 24
ChNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из ChNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (118 мг; 0,17 ммоль; см. Пример 11 (III) выше). Выход 1,8 мг.

ЖХ-МС: (m+1) = 585 (m/z).

Пример 25
MeNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из MeNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (81 мг; 0,12 ммоль; см. Пример 36 ниже). Выход 10 мг (16%).

ЖХ-МС: (m+1) = 517 (m/z).

Пример 26
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc
(I) H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично способу, описанному в Примере 27 ниже (стадии (I), (II) и (III)), используя ангидрид уксусной кислоты вместо ангидрида пропановой кислоты.

ЖХ-МС: (m+1) = 430 (m/z).

(II) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III) выше, из H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc (370 мг; 0,6 ммоль) и этилбромацетата (105 мг; 0,63 ммоль). Выход 67 мг (22%).

ЖХ-МС: (m+1) = 516 (m/z).

Пример 27
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
К раствору гидроксиламина гидрохлорида и триэтиламина в EtOH добавляют Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,0 г; 1,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 40 часов и затем концентрируют. Неочищенный продукт очищают препаративной RPLC.

ЖХ-МС: (m+1) = 488 (m/z).

(II) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et
Раствор Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH (500 мг; 0,91 ммоль; со стадии (I) выше) и ангидрида пропановой кислоты (3,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 45 минут и затем концентрируют. Неочищенный продукт очищают путем препаративной RPLC, используя 50%-ный ацетонитрил в 0,1 М NH₄OAc в качестве элюента, получая 266 мг (54%) соединения, указанного в подзаголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 544 (m/z).

(III) H-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et (238 мг; 0,44 ммоль; со стадии (II) выше). Выход 290 мг (100%).

ЖХ-МС: (m+1) = 444 (m/z).

(IV) EtOOCCH₂-(R)Cql-Aze-Pab-OC(O)Et
К раствору H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCEt (300 мг; 0,45 ммоль; со стадии (III) выше) и K₂CO₃ (308 мг; 2,23 ммоль) в метиленхлориде (6 мл) при 0^oC по каплям добавляют EtOOCCH₂OSO₂CF₃ (105 мг; 0,45 ммоль, получен из трифликового ангидрида и этилгликолята). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 1 час, затем промывают водой, лимонной кислотой и водой, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Неочищенный продукт очищают путем препаративной RPLC, используя 45%-ный ацетонитрил в 0,1 М NH₄OAc в качестве элюента, получая 63 мг (27%) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 530 (m/z).

Пример 28
HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
(I) третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (250 мг; 0,5 ммоль; см. Пример 15 (II) выше) и трет-бутилбромацетата (119 мг; 0,6 ммоль). Выход 211 мг (69%).

ЖХ-МС: (m+1) = 606 (m/z).

(II) HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (II), из третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (233 мг; 0,3 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 65 мг (37%).

ЖХ-МС: (m+1) = 550 (m/z).

(III) HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH
Раствор HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (60 мг; 0,1 ммоль; со стадии (II) выше) и KOMe (0,2 М; 0,2 ммоль) в THF (10 мл) и метаноле (1,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 5 минут. Реакционную смесь концентрируют и сушат вымораживанием из воды с ацетонитрилом, получая 28 мг (63%) соединения, указанного в заголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 446 (m/z).

Пример 29
HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-цис-олеил
(I) третBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z
Раствор третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,7 г; 2,8 ммоль; см. Пример 37 ниже), (Boc)₂O (672 мг; 3,08 ммоль) и DMAP (68 мг; 0,56 ммоль) в THF (30 мл) перемешивают при комнатной температуре 24 часа. Добавляют дополнительный (Boc)₂O (305 мг; 1,4 ммоль) при 5^oC. Через следующие 24 часа реакционную смесь концентрируют и очищают путем препаративной RPLC, получая 587 г (30%) желаемого соединения.

ЖХ-МС: (m+1) = 720 (m/z).

(II) третBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 18, из третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (580 мг; 0,8 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 341 мг (71%).

ЖХ- МС: (m+1) = 602 (m/z).

(III) третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-O-цис-олеил
Раствор третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH (340 мг; 0,56 ммоль; со стадии (II) выше), цис-олеилхлорида (170 мг; 0,56 ммоль) и триэтиламина (62 мг; 0,61 ммоль) в метиленхлориде перемешивают 5 минут. Реакционную смесь концентрируют и очищают путем препаративной RPLC, получая 326 мг (67%) соединения, указанного в подзаголовке.

ЖХ-МС: (m+1) = 867 (m/z).

(IV) HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-O-цис-олеил
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (II), из третBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-цис-олеила (233 мг; 0,25 ммоль; со стадии (III) выше).

ЖХ-МС: (m+1) = 710 (m/z).

Пример 30
Циклооктил-OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) Циклооктил-бромацетат
Циклооктанол (1,3 г; 10 ммоль) и DMAP (0,3 г) растворяют в метиленхлориде, затем добавляют бромацетилхлорид (1 мл; 12 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов реакционную смесь промывают водным Na₂CO₃ (2 М) и HCl (1 М), сушат, концентрируют и очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь петролейный эфир: метиленхлорид (50: 50), получая 1,8 г (72%) соединения, указанного в подзаголовке.

(II) Циклооктил-OOCCH₂-(R)Cql-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (703 мг; 1,2 ммоль) и циклооктилбромацетата (363 мг; 1,46 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 379 мг (46%).

FAB-MC: (m+1) = 674 (m/z).

Пример 31
третBuCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (2,5 г; 4,3 ммоль) и третбутилметилбромацетата (1,08 г; 5,2 ммоль). Выход 1,87 г (69%).

FAB-MC: (m+1) = 634 (m/z).

Пример 32
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) Метилбензилбромацетат
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 30 (I), из 2-метилбензилового спирта (5 г; 41 ммоль) и бромацетилхлорида (12,6 г; 80 ммоль). Выход 8,2 г (82%).

(II) (2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (580 мг; 1 ммоль) и 2-метилбензилбромацетата (290 мг; 1,2 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 30 мг (4,5%).

ЖХ-МС: (m+1) = 668 (m/z).

Пример 33
ChCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Раствор BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,41 г; 1,7 ммоль) и циклогексилметилового спирта (6 мл) в триэтиламине (474 мкл) и метиленхлориде (3 мл) кипятят с обратным холодильником 4 дня. Отработанная реакционная смесь дает неочищенный продукт, который очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь метиленхлорид:метанол (95:5) в качестве элюента, получая 801 мг (71%) соединения, указанного в заголовке.

FAB-MC: (m+1) = 660 (m/z).

Пример 34
ChOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) Циклогексилбромацетат
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 32 (I) выше, из циклогексанола (1 г; 10 ммоль) и бромацетилхлорида (1 мл; 12 ммоль)
(II) ChOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (2,5 г; 4,32 ммоль) и циклогексилбромацетата (1,5 г; 5,2 ммоль). Выход 1,7 г (60%).

FAB-MC: (m+1) = 646 (m/z).

Пример 35
PhC(Me)₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) 2-Фенил-2-пропилбромацетат
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 30 (I), из 2-фенил-2-пропанола (3 г; 22 ммоль) и бромацетилхлорида (4,16 г; 26 ммоль). Выход 1,2 г (44%).

(II) PhC(Me)₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (1,2 г; 2,2 ммоль) и 2-фенил-2-пропилбромацетата (640 мг; 2,5 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 1,3 г (86%).

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 9,3 (br s, 1H), 8,35 (t, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,30-7,05 (m, 10H или 11H), 5,15 (s, 2H), 4,78 (t, 1H), 4,40-4,30 (AB часть ABX спектра, 2H), 3,95 (q, 2H), 3,74 (q, 1H), 3,27-3,19 (AB-спектр, 2H), 2,72 (d, 1H), 2,43 (q, 2H), 1,93 (br d, 1H), 1,75-1,60 (m, 9H или 10H), 1,54 (d, 1Н), 1,49-1,40 (m, 1H), 1,25-1,0 (m, 4H), 0,92 (q, 1H).

Пример 36
MeNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (1,0 г; 1,7 ммоль) и MeNHCOCH₂OOCCH₂Br (440 мг; 2 ммоль) получают аналогично процедуре, описанной в Примере 11 выше (стадии (I), (II), (III), используя метиламин вместо циклогексиламина). Выход 380 мг (35%).

FAB-MC: (m+1) = 635 (m/z).

Пример 37
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • 2HCl (500 мг; 1,0 ммоль) и трет-бутилбромацетата (231 мг; 1,2 ммоль). Выход 420 мг (69%).

ЖХ-МС: (m+1) = 620 (m/z).

Пример 38
(Me)₂CHC(Me)₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (787 мг; 1,4 ммоль) и 2,3-диметил-2-бутилбромацетата (364 мг; 1,63 ммоль). Выход 590 мг (67%).

FAB-MC: (m+1) = 648 (m/z).

Пример 39
изоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (700 мг; 1,2 ммоль) и изопропилбромацетата (262 мг; 1,5 ммоль). Выход 225 мг (31%).

FAB-MC: (m+1) = 606 (m/z).

Пример 40
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H и 4-метоксифенилхлорформиата.

FAB-MC: (m+1) = 622 (m/z).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe) • 2HCl
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 4 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe) (со стадии (I) выше).

(III) BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me) • 2HCl (85 мг; 0,16 ммоль; со стадии (III) выше) и бензилбромацетата (90 мг; 0,2 ммоль). Выход 60 мг (56%).

FAB-MC: (m+1) = 670 (m/z).

Пример 41
ChCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me) (554 мг; 0,64 ммоль; см. Пример 40 (II) выше) и циклогексилметилбромацетата (165 мг; 0,7 ммоль). Выход 34 мг (8%).

FAB-MC: (m+1) = 676 (m/z).

Пример 42
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III) из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe) (522 мг; 1 ммоль; см. Пример 40 (II) выше) и 2-(метил)бензилбромацетата (365 мг; 1,5 ммоль). Выход 158 мг (23%).

ЖХ-МС: (m+1) = 684 (m/z).

Пример 43
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab (1,96 г; 4,56 ммоль) и 4-толил-хлороформиата (850 мг; 4,99 ммоль). Выход 1,39 г (55%).

FAB-MC: (m+1) = 606 (m/z).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 4 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me) (388 мг; 0,64 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 293 мг (91%).

FAB-MC: (m+1) = 506 (m/z).

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me) (288 мг; 0,6 ммоль; со стадии (II) выше) и этилбромацетата (114 мг; 0,7 ммоль). Выход 81 мг (24%).

FAB-MC: (m+1) = 592 (m/z).

Пример 44
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe) (272 мг; 0,54 ммоль; см. Пример 43 (II) выше) и бензилбромацетата (147 мг: 0,6 ммоль). Выход 107 мг (31%).

FAB-MC: (m+1) = 654 (m/z).

Пример 45
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нBu • 2HCl (400 мг; 0,74 ммоль; см. Пример 9 (II) выше) и бензилбромацетата (210 мг; 0,88 ммоль). Выход 220 мг (48%).

FAB-MC: (m+1) = 620 (m/z).

Пример 46
ИзоPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂ • 2TFA (456 мг; 0,67 ммоль; см. Пример 1 (II) выше) и изопропилбромацетата (145 мг; 0,8 ммоль). Выход 294 мг (79%).

FAB-MC: (m+1) = 556 (m/z).

Пример 47
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu
(I) Boc-Pab-COO-изоBu
К раствору Boc-Pab-H (500 мг; 2,0 ммоль; получен из Pab-Z и (Boc)₂O (с образованием Boc-Pab-Z) с последующим гидрированием над Pd/C) и триэтиламина (400 мг; 4,0 ммоль) в метиленхлориде (10 мл) добавляют изо-бутилхлороформиат (270 мг; 2,2 ммоль) при 0^oC. После перемешивания в течение 5 часов добавляют воду. Органическую фазу высушивают (Na₂SO₄) и концентрируют, получая 530 мг (76%) соединения, указанное в подзаголовке.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ 9,5 (bs, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 6,6 (bs, 1H), 5,0 (bs, 1H), 4,33 (bd, 2H), 3,93 (d, 2H), 2,04 (m, 1H), 1,45 (s, 9H), 0,97 (d, 6H).

(II) H-Pab-COO-изоBu • 2HCl
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 4 (II), из Boc-Pab-COO-изоBu (520 мг; 1,5 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 430 мг (88%).

¹H ЯМР (500 МГц, MeOD): δ 7,89 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 4,30 (s, 2H), 4,17 (d, 2H), 2,11-2,05 (m, 1H), 1,02 (d, 6H).

(III) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu
К раствору Boc-(R)Cgl-Aze-OH (480 мг; 1,4 ммоль), H-Pab-COO-изоBBu • 2HCl (430 мг; 1,3 ммоль; со стадии (II) выше) и DMAP (650 мг; 5,3 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляют EDC (270 мг; 1,4 ммоль). После перемешивания в течение 3 дней при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют и затем растворяют в воде и EtOAc. Органическую фазу промывают NaHCO₃ (водн.), сушат (Na₂SO₄), концентрируют и очищают путем флэш-хроматографии, используя EtOAc в качестве элюента, получая 510 мг (52%) соединения, указанного в подзаголовке.

(IV) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu • 2HCl
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 4 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu (500 мг; 0,88 ммоль; со стадии (III) выше). Выход 360 мг (87%).

(V) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-изоBu • 2HCl (290 мг; 0,53 ммоль; со стадии (IV) выше) и этилбромацетата (110 мг; 0,64 ммоль). Выход 140 мг (47%).

FAB-MC: (m+1) = 558 (m/z).

Пример 48
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr • 2TFA (902 мг; 1,3 ммоль; см. Пример 5 (II) выше) и бензилбромацетата (362 мг; 1,6 ммоль). Выход 199 мг (25%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,43 (bs, 1H), 7,78 (d, 2H), 7,38-7,27 (m, 7H), 5,05 (s, 2H), 4,90 (dd, 1H), 4,56-4,39 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,12-4,03 (m, 3H), 3,98-3,91 (q, 1H), 3,33-3,22 (AB спектр, 2H), 2,85 (d, 1H), 2,65-0,94 (m, 19H).

Пример 49
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh
(I) EtSCOOCH₂OOCCh
К раствору гидросульфата тетрабутиламмония (15,6 г; 45,6 ммоль) и циклогексанкарбоновой кислоты (5,85 г; 46 ммоль) в метиленхлориде добавляют NaOH (9,1 мл, 10 M; 68 ммоль) при ^oC. После перемешивания в течение 5 минут реакционную смесь фильтруют, промывают метиленхлоридом, растворяют в толуоле, концентрируют и растворяют в THF, получая [Bu₄N]⁺[OOCCh]^-. К раствору [Bu₄N] ⁺[OOCCh] ^- в THF добавляют EtSCOOCH₂Cl (4 г, 25,9 ммоль (см. Folkmann and Lund, J. Synthesis, (1990), 1159)) при комнатной температуре. После перемешивания при комнатной температуре в течение 12 часов реакционную смесь концентрируют и очищают путем флэш-хроматографии, получая 2,57 г (40%) соединения, указанного в подзаголовке.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) диагностические пики δ 5,80 (s, 2H, O-CH₂-O), 2,85 (q, 2H, CH₂-S).

(II) ClCOOCH₂OOCCh
К EtSCOOCH₂OOCCh (2,9 г; 11,8 ммоль; со стадии (I) выше) добавляют по каплям SO₂Cl₂ (3,18 г; 23,6 ммоль) при 0^oC. После перемешивания в течение 30 минут реакционную смесь концентрируют, получая 1,82 г (70%) желаемого соединения.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃): диагностические пики δ 5,82 (s, 2H, O-CH₂-O).

(III) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (750 мг; 1,59 ммоль) и ClCOOCH₂OOCCh (460 мг; 2,1 ммоль; со стадии (II) выше). Неочищенный продукт очищают путем препаративной RPLC. Выход 355 мг (9%).

FAB-MC: (m+1) = 656 (m/z).

(IV) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh • 2TFA
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh (со стадии (III) выше).

(V) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh • 2TFA (193 мг; 0,35 ммоль; со стадии (IV) выше) и этилтрифторацетата (83 мг; 0,35 ммоль). Выход 87 мг (39%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,48 (t br, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,37 (d, 2H), 5,86 (s, 2H), 4,95 (dd, 1H), 4,15-4,39 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,18-4,05 (m, 5H), 3,26-3,17 (AB спектр, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,75-0,95 (m, 29H).

Пример 50
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCH₂Ch
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 49 выше, начиная с циклогексилуксусной кислоты вместо циклогексанкарбоновой кислоты. Выход 74 мг (17%).

FAB-MC: (m+1) = 656 (m/z).

Пример 51
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 49 выше, начиная с EtSCOOCH(CH₃)Cl (полученного из ClCOCH(CH₃)Cl и EtSH, используя известную процедуру (Folkmann et al in J. Synthesis, (1990), 1159) вместо EtSCOOCH₂Cl. Выход 70 мг (23%).

FAB-MC: (m+1) = 650 (m/z).

Пример 52
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCPh
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 49 выше, используя бензойную кислоту вместо циклогексанкарбоновой кислоты. Выход 50 мг (39%).

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,73-9,25 (s br, 1H), 8,45 (t, 1H), 8,05 (d, 2H), 7,83 (d, 2H), 7,60-7,10 (m, 6H), 6,10 (s, 2H), 4,96-4,84 (dd, 1H), 4,62-4,30 (ABX, 2H), 4,20-3,93 (m, 4H), 3,25 (s, 2H), 2,84 (d, 1H), 2,73-2,41 (m, 2H), 2,41-0,87 (m, 15H).

¹³C ЯМР (300 МГц, CDCl₃, углероды амидина и карбонила) δ 163,1, 165,3, 169,0, 170,8, 172,3, 175,5.

Пример 53
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OC(O)CH₃ (108 мг; 0,21 ммоль; см. Пример 14 (II) выше) и бензилбромацетата (36 мкл, 0,23 ммоль). Выход 41 мг (30%).

FAB-MC: (m+1) = 650 (m/z).

Пример 54
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc
(I) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc • 2TFA
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 14 (стадии (I) и (II) выше), используя ацетоксиметил-4-нитрофенилкарбонат (полученный аналогично способу, описанному в Примере 12 (III), используя ацетат серебра вместо пивалата серебра). Получают соединение, указанное в подзаголовке, которое используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

(II) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III) выше, из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc • 2TFA (0,83 ммоль; со стадии (I) выше) и этилбромацетата (2,2 ммоль). Выход 286 мг.

FAB-MC: (m+1) = 574 (m/z).

Пример 55
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III) выше, из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc • 2TFA (0,313 ммоль; см. Пример 54 (I) выше) и трет-бутилбромацетата (73 мг; 0,376 ммоль). Выход 156 мг (83%).

FAB-MC: (m+1) = 602 (m/z).

Пример 56
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOC-третBu
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOC-третBu (379 мг; 0,71 ммоль; см. Пример 12 (V) выше) и бензилбромацетата (135 мкл, 0,85 ммоль). Выход 146 мг (30%).

FAB-MC: (m+1) = 678 (m/z).

Пример 57
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,0 г; 2,12 ммоль), 2 М NaOH (11,7 мл) и трихлорэтилхлороформиата (494 мг; 2,33 ммоль). Выход 1,08 г (79%).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃ (1,04 г; 1,607 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 1,43 г (99%).

¹H ЯМР (500 МГц, CD₃OD); δ 7,79 (d, 2H), 7,61 (d, 2H), 5,10 (s, 2H), 4,87-4,81 (m, 2H), 4,63-4,52 (q, 2H), 4,41-4,34 (m, 1H), 4,30-4,24 (m, 1H), 3,72 (d, 1H), 2,72-2,63 (m, 1H), 2,32-2,25 (m, 1H), 1,88-1,10 (m, 14H).

(III) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂СCl₃ (400 мг; 0,52 ммоль; со стадии (II) выше) и этилбромацетата (95 мг; 0,57 ммоль). Выход 8 мг (23%).

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 8,47 (bt, 1H), 7,83 (bs, 1H), 7,48 (bs, 1H), 7,31 (d, 2H), 4,92 (dd, 1H), 4,85 (s, 2H), 4,58-4,39 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,16-4,06 (m, 4H), 3,24 (s, 2H), 4,87 (d, 1H), 2,65-2,59 (m, 1H), 2,56-2,48 (m, 1H), 2,10-0,95 (m, 16H).

Пример 58
MeOOC-C(=CHEt)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) MeOOC-C(=CH₂)C(OH)Et
К раствору метилакрилата (10 г; 0,116 ммоль) и 1,4-диазобицикло[2,2,2] октана (1,3 г; 0,0116 моль) по каплям добавляют пропиональденид (10,1 г; 0,174 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 14 дней. Добавляют этилацетат (150 мл). Органическую фазу промывают водой и солевым раствором, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая желаемое соединение. Выход 15,5 г (93%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 6,24 (s, 1H), 5,81 (s, 1H), 4,34 (t, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,82 (bs, 1H), 1,69 (m, 2H), 0,95 (t, 3H).

(II) MeOOC-C(=CEt)CH₂Br
К MeOOC-C(=CH₂)C(OH)Et (3 г: 20,8 ммоль; со стадии (I) выше) при 0^oC по каплям добавляют HBr (6,5 мл, ≈48%). Через 5 минут по каплям добавляют H₂SO₄ (конц. ; 6 мл). Реакционную смесь перемешивают 12 часов при комнатной температуре. Две фазы разделяют и верхнюю фазу разводят эфиром. Эфирную фазу промывают водой и водным NaHCO₃, сушат (Na₂SO₄ и уголь) и концентрируют. Остаток очищают путем флэш-хроматографии. Выход 1,7 г (40%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 6,97 (t, 3H), 4,23 (s, 2H), 3,8 (s, 3H), 2,32 (m, 2H), 1,13 (t, 3H).

(III) третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (2,1 г; 3,6 ммоль) и трет-бутилбромацетата (780 мг; 4,0 ммоль). Выход 1,73 г (78%).

(IV) HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Раствор третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (со стадии (III) выше) и TFA в метиленхлориде перемешивают при комнатной температуре 3 часа. Реакционную смесь концентрируют и сушат вымораживанием из воды и HCl (конц.; 10 экв.)
(V) MeOOC-C(=CHEt)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Раствор HOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (263 мг; 0,41 ммоль; со стадии (IV) выше), NaOH (1 М; 1,239 мл; 1,239 ммоль) и воды (4 мл) сушат вымораживанием. Добавляют DMF (5 мл), затем по каплям добавляют Me-OOC-C(=CEt)CH₂Br (103 мг; 0,496 ммоль; со стадии (II) выше) при 0^oC. Реакционную смесь перемешивают 24 часа при комнатной температуре, разводят толуолом (5 мл), промывают водой, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Остаток очищают путем флэш-хроматографии, используя смесь EtOAc:метанол (95:5) в качестве элюента. Выход 95 мг (33%).

FAB-MC: (m+1) = 690 (m/z).

Пример 59
MenOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
(I) MenOOCCH₂Br
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 30 (I) выше, из MenOH (10 мл) и бромацетилхлорида (12 ммоль). Выход 1,5 г (54%).

(II) MenOOCCH₃-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe) (521 мг; 1 ммоль; см. Пример 40 (II) выше) и MenOOCCH₂Br (416 мг; 1,5 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 36 мг (5%).

FAB-MC: (m+1) = 718 (m/z).

Пример 60
третBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOнPr
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-нPr (575 мг; 0,837 ммоль; см. Пример 5 (II) выше) и трет-бутилбромацетата (196 мг; 1,01 ммоль). Выход 110 мг (23%).

ЖХ-МС: (m+1) = 572 (m/z).

Пример 61
MenOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (0,7 г; 1,21 ммоль) и МенOOCCH₂Br (0,4 г; 1,45 ммоль; см. Пример 59 (I) выше). Выход 0,33 г (38%).

FAB-MC: (m+1) = 702 (m/z).

Пример 62
BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
(I) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (I), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,03 г; 2,18 ммоль), 2 М NaOH (24 мл) и 4-NO₂-бензилхлороформиата (518 мг; 2,4 ммоль). Выход 1,32 г (93%).

FAB-MC: (m+1) = 651 (m/z).

(II) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в подзаголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 4 (II), из Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂) (1,32 мг; 2,03 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 1,0 г (79%).

FAB-MC: (m+1) = 551 (m/z).

(III) BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂) (0,5 г; 0,80 ммоль; со стадии (II) выше) и бензилбромацетата (220 мг; 0,90 ммоль).

FAB-MC: (m+1) = 699 (m/z).

Пример 63
EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂) (211 мг; 0,38 ммоль; см. Пример 62 (II) выше) и этилбромацетата (47 мкл; 0,42 ммоль). Выход 44 мг (18%).

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃); δ 9,55 (bs, 1H), 8,50 (bt, 1H), 8,20 (d, 2H), 7,80 (d, 2H), 7,60 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,87 (bs, 1H), 4,95 (dd, 1H), 4,65-4,40 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,18- 4,04 (m, 5H), 3,27-3,15 (AB спектр, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,75-2,60 (m, 1H), 2,57-2,45 (m, 1H), 2,00-0,95 (m, 16H).

Пример 64
PrlC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
(I) PrlC(O)CH₂OH
Смесь 2,5-диоксо-1,4-диоксана (2,0 г, 17 ммоль) и пирролидина (8 мл; 97 ммоль) кипятят с обратным холодильником 1 час. Избыток пирролидина удаляют выпариванием. Выход 4,4 г (99%).

FAB-MC: (m+1) = 130 (m/z).

(II) PrlC(O)CH₂OOCCH₂Br
К раствору PrlC(O)CH₂OH (0,4 г; 3,1 ммоль; со стадии (I) выше) в DMF (15 мл) по каплям добавляют бромацетилбромид (0,63 г; 3,1 ммоль) при 0^oC. Реакционную смесь перемешивают 1,5 часа при 0^oC и 3 часа при комнатной температуре. Добавляют дополнительный бромацетилбромид (0,63 г; 3,1 ммоль) и реакционную смесь нагревают до 80^oC, перемешивают при комнатной температуре 12 часов и концентрируют. Выход 320 мг (41%).

FAB-MC: (m+1) = 252 (m/z).

(III) PrlC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (580 мг; 1 ммоль) и PrlC(O)CH₂OOCCH₂Br (300 мг; 1,2 ммоль; со стадии (II) выше). Выход 400 мг (60%).

FAB-MC: (m+1) = 675 (m/z).

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃); δ 9,66-9,42 (bs, 1H), 8,64-8,56 (m, 1H), 8,03-7,93 (d, 2H), 7,89-7,66 (bs, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,45-7,25 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 4,98-4,92 (dd, 1H), 4,82-4,74 (m, 1H), 4,62, 4,58 (AB спектр, 2H), 4,26-4,05 (m, 3H), 3,47-3,16 (m, 6H), 2,95 (d, 1H), 2,78-2,68 (m, 1H), 2,54-2,42 (m, 1H), 2,03-1,95 (m, 16H).

Пример 65
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂) (500 мг; 0,80 ммоль, см. Пример 62 (II) выше) и 2-(метил)бензилбромацетата (234 мг; 0,96 ммоль; см. Пример 32 (I) выше). Выход 528 мг (92%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 9,34 (bs, 1H), 8,09 (d, 2H), 7,72 (d, 2H), 7,48 (d, 2H), 7,37 (bs, 1H), 7,23 (d, 2H), 7,17-7,05 (m, 4H), 5,18 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 4,81 (dd, 1H), 4,45-4,34 (AB часть ABX спектра, 2H), 4,04-3,97 (q, 1H), 3,93-3,86 (q, 1H), 3,27-3,17 (AB спектр, 2H), 2,79 (d, 1H), 2,54-2,35 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 1,91-1,84 (bd, 1H), 1,71 -1,39 (m, 5H), 1,19-0,84 (m, 4H).

Пример 66
MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt (305 мг; 0,69 ммоль; см. Пример 4 (II)) и метилбромацетата (126 мг; 0,83 ммоль). Выход 188 мг (53%).

ЖХ-МС: (m+1) = 516 (m/z).

Пример 67
(нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
(I) (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂Cl
Смесь (нPr)₂NC(O)CH₂OH (244 мг; 1,53 ммоль; см. Пример 12 (I) выше) и бромацетилхлорида (270 мг; 1,72 ммоль) перемешивают при комнатной температуре 12 часов. Смесь выливают в водный NaHCO₃ и экстрагируют метиленхлоридом. Органическую фазу промывают водным KHSO₄ (0,2 M) и солевым раствором, сушат и концентрируют.

FAB-MC: (m+1) = 237 (m/z).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃); δ 4,82 (s, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,31-3,26 (t, 2H), 3,10-3,15 (t, 2H), 1,68-1,52 (m, 2H), 1,97-0,86 (m, 6H).

(II) (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOBn(4-NO₂) (343 мг; 0,62 ммоль; см. Пример 62 (II) выше) и (нPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂Cl (160 мг; 0,68 ммоль; со стадии (I) выше). Выход 89 мг (19%).

FAB-MC: (m+1) = 750 (m/z).

Пример 68
(2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCтретBu
Соединение, указанное в заголовке, получают аналогично процедуре, описанной в Примере 1 (III), из H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCтретBu (380 мг; 0,71 ммоль; см. Пример 12 (V) выше) и 2-(метил)бензилбромацетата (215 мг; 0,88 ммоль; см. Пример 32 (1) выше). Выход 37 мг (7,5%).

FAB-MC: (m+1)=692 (m/z).

Пример 69
Все соединения Примеров 1-68 были протестированы в вышеописанном Тесте A, и было установлено, что все они имеют значение ИК₅₀ТТ, составляющее более чем 1,0 мкм (то есть они были неактивны по отношению к тромбину per se; для сравнения: активный ингибитор HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H имеет значение ИК₅₀ТТ, равное 0,01 мкм).

Пример 70
Соединения Примеров 1-68 были протестированы в одном или двух тестах Б и/или В, описанных выше, и было установлено, что все они обладают пероральной и/или парентеральной биологической доступностью у крысы в виде активного ингибитора HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H в виде или свободной кислоты, и/или одного или более чем одного ее сложного эфира. Основываясь на допущении, что у крысы образуется HOOC-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H, биологическую доступность вычисляют согласно формуле, описанной в Тесте Б и/или Тесте В соответственно.

Сокращения
Ac = ацетил
водн. = водный
Aze = S-азетидин-2-карбоновая кислота
Boc = трет-бутилоксикарбонил
(Boc₂)O = ди-трет-бутилдикарбонат
Bn = бензил
Bu = бутил
Cgl = циклогексилглицин
Ch = циклогексил
DCC = дициклогексилкарбодиимид
DMAP = N,N-диметиламинопиридин
EDC = 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид
Et = этил
EtOH = этанол
EtOAc = этилацетат
ч = часы
HCl = соляная кислота
H-Pab-H = 1-амидино-4-аминометилбензол
H-Pab-Z = 4-аминометил-1-(N-бензилоксикарбониламидино) бензол
HPLC = жидкостная хроматография высокого разрешения
K₂CO₃ = безводный карбонат калия
Me = метил
Men = (1R,2S,5R)-ментил
Pab-OH = 4-аминометил-бензамидоксим(4-аминометил-1-(амино-гидроксииминометил)бензол
Piv(aloyl) = 2,2-диметилацетил
Pr = пропил
Prl = N-пирролидинил
RPLC = жидкостная хроматография высокого разрешения с обращенной фазой
TFA = трифторуксусная кислота
THF = тетрагидрофуран
Z = бензилоксикарбонил
Префиксы н, s, изо и трет имеют их обычное значение: нормальный, изо, втор- и третичный. Префиксы в ЯМР-спектре s, d, t, q и b обозначают синглет, дублет, триплет, квартет и широкий соответственно. Стереохимия для аминокислот остается по умолчанию (S), если не оговорено иначе.

Формула изобретения

1. Соединение формулы I
R¹О(О)С-СН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-R², I
где R¹ представляет собой -R³, или -А¹С(О)N(R⁴)R⁵, или -А¹С(О)ОR⁴;
А¹ представляет собой С_1-5алкилен;
R² (который заменяет один из атомов водорода в амидиновой единице в Раb-Н) представляет собой ОН, ОС(О)R⁶, С(О)ОR⁷ или С(О)ОСН(R⁸)ОС(О)R⁹;
R³ представляет собой Н, С_1-10алкил или С_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена С_1-6алкилом);
R⁴ и R⁵ независимо представляют собой Н, С_1-6алкил или, когда R¹ представляет собой -А¹С(О)N(R⁴)R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой пирролидинил;
R⁶ представляет собой С_1-17алкил или фенил;
R⁷ представляет собой фенил, С_1-3алкилфенил (причем последние две группы возможно замещены С_1-6алкилом, С_1-6алкокси или нитро-группой) или С_1-12алкил (причем последняя группа возможно замещена С_1-6алкокси или галогеном);
R⁸ представляет собой Н или С_1-4алкил;
R⁹ представляет собой фенил или С_1-8алкил;
причем алкильные группы, которыми могут являться R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹, могут быть линейными или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, разветвленными, циклическими или частично циклическими, насыщенными или ненасыщенными, могут прерываться кислородом; при условии, что когда R¹ представляет собой R³, R³ представляет собой бензил, метил, этил, н-бутил или н-гексил, и R² представляет собой С(О)ОR⁷, тогда R⁷ не является бензилом;
или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение формулы I по п.1, при условии, что, когда R⁷ представляет собой незамещенный С₁алкилфенил, тогда R¹ не является либо (а) R³, где R³ представляет собой Н, С_1-6алкил или незамещенный С₁алкилфенил; либо (б) А¹С(О)ОR⁴, где R⁴ представляет собой Н или С_1-4алкил и А¹ представляет собой С₁алкилен.

3. Соединение формулы I по п.1 или 2, где А¹ представляет собой С_1-3 алкилен, когда R¹ представляет собой -А¹С(О)N(R⁴)R⁵.

4. Соединение формулы I по пп.1,2 или 3, где R⁴ представляет собой Н или С_1-6алкил, когда R¹ представляет собой -А¹С(О)N(R⁴)R⁵.

5. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R⁵ представляет собой С_1-6алкил или С_4-6циклоалкил, когда R¹ представляет собой А¹С(О)N(R⁴)R⁵.

6. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R⁴ и R⁵ вместе представляют собой пирролидинил, когда R¹ представляет собой А¹С(О)N(R⁴)R⁵.

7. Соединение формулы I по любому из пп.3-6, где А¹ представляет собой С_1-3алкилен, и R⁴ представляет собой Н или С_1-3алкил, а R⁵ представляет собой С_2-6алкил или С_5-6циклоалкил, или R⁴ и R⁵ вместе представляют собой пирролидинил.

8. Соединение формулы I по п.1 или 2, где А¹ представляет собой С_1-5 алкилен, когда R¹ представляет собой -А¹С(О)ОR⁴.

9. Соединение формулы I по пп.1,2 или 8, где R⁴ представляет собой С_1-6 алкил, когда R¹ представляет собой -А¹С(О)ОR⁴.

10. Соединение формулы I по п.8 или 9, где А¹ представляет собой С_1-5 алкилен и R⁴ представляет собой С_1-4алкил.

11. Соединение формулы I по п.1 или 2, где R³ представляет собой Н, С_1-10алкил (причем последняя группа может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной и/или может быть частично циклической или циклической) или С_1-3алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена, может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной), когда R¹ представляет собой R³.

12. Соединение по пп.1,2 или 11, где R¹ представляет собой Н, линейный С_1-10алкил, разветвленный С_3-10алкил, частично циклический С_4-10алкил, С_4-10циклоалкил, возможно замещенный линейный С_1-3алкилфенил, разветвленный С₃алкилфенил.

13. Соединение по п.12, где R¹ представляет собой линейный С_1-6 алкил, С_6-10циклоалкил или возможно замещенный линейный С_1-3алкилфенил.

14. Соединение формулы I по любому из пп.1-13, где R² представляет собой ОН.

15. Соединение формулы I по любому из пп.1-13, где R⁶ представляет собой фенил или С_1-17алкил (причем последняя группа является линейной и/или может быть насыщенной или ненасыщенной), когда R² представляет собой ОС(О)R⁶.

16. Соединение по п. 15, где R⁶ представляет собой фенил, линейный С_1-4алкил или цис-олеил.

17. Соединение по п.16, где R⁶ представляет собой линейный С_1-3 алкил.

18. Соединение формулы I по любому из пп.1-13, где R⁷ представляет собой возможно замещенный фенил, С_1-12алкил (причем последняя группа возможна замещена, может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной, и/или насыщенной, или ненасыщенной) или С_1-3 алкилфенил (причем последняя группа возможно замещена, является линейной), когда R² представляет собой С(О)ОR⁷.

19. Соединение по п.18, где R⁷ представляет собой возможно замещенный и/или возможно ненасыщенный линейный С_1-4алкил или разветвленный С_3-4 алкил, возможно замещенный фенил или возможно замещенный линейный С_1-3алкилфенил.

20. Соединение по п.19, где R⁷ представляет собой возможно замещенный линейный С_1-4алкил, или разветвленный С_3-4алкил, или возможно замещенный линейный С_1-3алкилфенил.

21. Соединение формулы I по любому из пп.1-13, где R⁸ представляет собой Н или метил, когда R² представляет собой С(О)ОСН(R⁸)ОС(О)R⁹.

22. Соединение формулы I по любому из пп.1-13 или п.21, где R⁹ представляет собой фенил или С_1-8алкил (причем последняя группа может быть линейной или, когда имеется достаточное количество атомов углерода, может быть разветвленной, и/или циклической, или частично циклической), когда R² представляет собой С(О)ОСН(R⁸)ОС(О)R⁹.

23. Соединение формулы I по п.21 или 22, где R⁸ представляет собой Н или метил и R⁹ представляет собой фенил, С_5-7циклоалкил, линейный С_1-6 алкил, разветвленный С_3-6алкил или частично циклический С_7-8алкил.

24. Соединение по п.23, где R⁸ представляет собой Н и R⁹ представляет собой С_5-7циклоалкил, линейный С_1-6алкил или частично циклический С_7-8алкил.

25. Соединение по любому из пп.1-24, где, когда R¹ представляет собой R³ и R³ представляет собой возможно замещенный С_1-3алкилфенил, то возможным заместителем является С_1-6алкил.

26. Соединение по п.25, где заместителем является метил.

27. Соединение по любому из пп.1-26, когда R² представляет собой С(О)ОR⁷ и R⁷ представляет собой возможно замещенный С_1-12алкил, то возможный заместитель выбран из галогена или С_1-6алкокси.

28. Соединение по п.27, где заместитель выбран из хлора и метокси.

29. Соединение по любому из пп.1-28, где, когда R² представляет собой С(О)OR⁷ и R⁷ представляет собой возможно замещенный фенил, то возможный заместитель выбран из С_1-6алкила и С_1-6алкокси.

30. Соединение по п.29, где заместитель выбран из метила и метокси.

31. Соединение по любому из пп.1-30, где, когда R² представляет собой С(О)ОR⁷ и R⁷ представляет собой возможно замещенный С_1-13алкилфенил, то возможным заместителем является нитрогруппа.

32. Соединение по п.1, которое представляет собой
ЕtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂СН=СН₂;
нРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂СН=СН₂;
третBuООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂СН=СН₂;
ЕtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООЕt;
ЕtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СОО-нBu;
РrlC(О)СН₂СН₂СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
СhNHC(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
(нРr)₂NC(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООСС(СН₃)₃;
ЕtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООСС(СН₃)₃;
ЕtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН(СН₃)ООССН₃;
МеООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОООРh;
МеООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
нРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
нРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
изоРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
третBuООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
(нРr)₂NСОСН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
СhNHСОСН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОАс;
НООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
НООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-О-цис-олеил;
циклооктил-ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
третBuCН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
(2-Ме)BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
СhСН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
СhООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
РhС(Ме)₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
(Ме)₂СНС(Ме)₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
ВnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-ОMе);
СhСН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-ОMе);
(2-Ме)ВnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-ОMе);
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-Ме);
ВnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-Ме);
ВnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СОО-нBu;
изоРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂СН=СН₂;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СОО-изоBu;
BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СОО-nРr;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООССh;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООССН₂Сh;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН(Ме)ООСРh;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООСРh;
BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН(Ме)ОАс;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ОАс;
третBuООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ОАс;
МеООС-С(=СНЕt)СН₂-ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
Меn-ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООРh(4-ОМе);
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ССl₃.

33. Соединение по п.1, которое представляет собой
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ССl₃;
BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООнBu;
нРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-Z;
циклооктил-ООССН₂-(R )Сgl-Aze-Pab-Z;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-СООСН₂ООССh;
МеООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
нРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
изоРrООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
BnООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОН;
EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Pab-ОАс.

34. Соединение формулы 1 по п.1 или 2 с дополнительным условием, что R¹ не является -А¹С(О)ОR⁴.

35. Соединение формулы I по п.1 или 2 с дополнительным условием, что R⁴ и R⁵ не являются независимо Н.

36. Соединение формулы I по п.1 или 2 с дополнительным условием, что R⁶ не является С_1-17алкилом, когда R² представляет собой ОС(О)R⁶.

37. Соединение формулы I по п. 1 или 2, где R¹ представляет собой А¹С(О)ОR⁴.

38. Соединение формулы I по п.1 или 2, где R⁴ и R⁵ независимо представляют собой Н.

39. Соединение формулы I по п.1 или 2, где R⁶ представляет собой С_1-17 алкил, когда R² представляет собой ОС(О)R⁶.

40. Фармацевтический препарат для ингибирования тромбина, содержащий соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

41. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве фармацевтического средства.

42. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в лечении состояния, при котором требуется ингибирование тромбина.

43. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в лечении тромбоза.

44. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве антикоагулянта.

45. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве активного ингредиента в изготовлении лекарства для лечения состояния, при котором требуется ингибирование тромбина.

46. Соединение по п.45, где состояние представляет собой тромбоз.

47. Соединение формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемая соль для использования в качестве активного ингредиента в изготовлении антикоагулянта.

48. Способ лечения состояния, при котором требуется ингибирование тромбина, при котором вводят терапевтически эффективное количество соединения формулы I по любому из пп.1-39 или его фармацевтически приемлемой соли человеку, страдающему или подверженному такому состоянию.

49. Способ по п.48, где состояние представляет собой тромбоз.

50. Способ по п.48, где состояние представляет собой гиперсвертываемость в крови и тканях.

51. Соединение по п.1 или 2 для использования в качестве пролекарства.

52. Способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой ОН, при котором соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой ОС(О)R⁶ и R⁶ - как определено в п.1, подвергают взаимодействию с алкоксидным основанием.

53. Способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой ОН, при котором соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой С(О)OR⁷ и R⁷ - как определено в п.1, подвергают взаимодействию с гидроксиламином или его солью, полученной присоединением кислоты.

54. Способ получения соединений формулы I, при котором соответствующее соединение формулы II,
Н-(R)Сgl-Aze-Рab-R², II
где R² - как определено в п.1, подвергают взаимодействию с соединением формулы III
R¹О(О)С-СН₂-L¹, III
где L¹ представляет собой уходящую группу;
R¹ - как определено в п.1.

55. Способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой Н и R² представляет собой ОН или С(О)OR⁷, при котором соответствующее соединение формулы I, где R¹ представляет собой С_1-10 алкил или С_1-3алкилфенил, и R² представляет собой ОН или С(О)OR⁷, подвергают взаимодействию с основанием.

56. Способ получения соединений формулы I, в которых R² представляет собой ОС(О)R⁶, а R⁶ - как определено в п.1, при котором соответствующее соединение формулы I, где R² представляет собой ОН, подвергают взаимодействию с соединением формулы IV,
R⁶С(О)-О-С(О)R⁶, IV
или соединением формулы V
R⁶С(О)Гал, V
где Гал представляет собой Сl или Вr и в обоих случаях R⁶ - как определено в п.1.

57. Способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой Н и R² представляет собой ОС(О)R⁶, а R⁶ - как определено в п.1, при котором соответствующее соединение формулы VI
Р¹О(О)С-СН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-R², VI
где Р¹ представляет собой защитную группу кислоты в виде лабильного эфира и R² представляет собой ОС(О)R⁶, где R⁶ - как определено в п.1, подвергают взаимодействию с кислотой.

58. Способ получения соединений формулы I, в которых R¹ представляет собой R³, R³ представляет собой С_1-10алкил или С_1-3алкилфенил и R² представляет собой ОН или С(О)ОR⁷, а R⁷ - как определено в п.1, при котором соответствующее соединение формулы VII,
R^1аО(О)С-СН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-R², VII
где R^1а представляет собой С_1-10алкильную или С_1-3алкилфенильную группу, отличную от образованной, или альтернативный лабильный алкильный заместитель, а R² - как определено в п.1, подвергают трансэтерификации.

Приоритет по пунктам:
21.12.1995 - по пп. 1-7, 11-31, 40-58, за исключением признака: "R¹ представляет собой -А¹С(О)ОR⁴, R⁴ и R⁵ независимо представляет собой Н, R⁶ представляет собой С_1-17 алкил"; по пп.32-33, за исключением соединений СhNНС(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-Z, EtООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-ОН, СhNHC(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-ОН, НООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-О-цис-олеил и МеООС-С(=СНЕt)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-Z; по пп.34-36;
15.02.1996 - по пп.32-33 для соединения EtООССН₂-(R )Сgl-Aze-Рab-ОН;
17.12.1996 (согласно дате подачи международной заявки) - по пп.1-7, 11-31 и 40-58 с признаками "R¹ представляет собой -А¹С(О)ОR⁴, R⁴ и R⁵ независимо представляют собой Н, R⁶ представляет собой С_1-17алкил"; по пп.8-10 и 37-39; по пп. 32-33 для соединений СhNНС(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-Z, СhNHC(О)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-ОН, НООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-О-цис-олеил и МеООС-С(=СНЕt)СН₂ООССН₂-(R)Сgl-Aze-Рab-Z.