Антитела с уменьшенным суммарным положительным зарядом

 

Изобретение относится к медицине и касается антител с уменьшенным суммарным положительным зарядом. Сущность изобретения включает композицию, содержащую моноклональное антитело, конъюгированное с биотином, по меньшей мере одной из множества свободных аминогрупп, имеющихся в антителе, с получением модифицированного антитела, имеющего меньший по сравнению с интактным антителом суммарный положительный заряд, повышенную антигенсвязывающую специфичность, также изобретение касается способа получения этой композиции, а также способа локализации антигена в млекопитающем. Преимущество изобретения заключается в повышении специфичности антител и улучшении фармакокинетических характеристик. 3 с. и 13 з.п. ф-лы, 3 табл., 19 ил.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Формула изобретения

1. Композиция, содержащая моноклональное антитело, конъюгированное с биотином по меньшей мере одной из множества свободных аминогрупп, имеющихся в антителе, с получением модифицированного антитела, имеющего меньший по сравнению с интактным антителом суммарный положительный заряд, повышенную антигенсвязывающую специфичность, пониженное неспецифическое связывание и характеризующегося скоростью клиренса in vivo, промежуточной между скоростями клиренса F(abʹ)₂-фрагментов и интактного антитела того же типа, и химический остаток, присоединенный к модифицированному антителу.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что химический остаток является меткой.

3. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что метка является радиоактивным изотопом.

4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что к модифицированному антителу присоединен радиоактивный изотоп галогена или технеций.

5. Композиция по п.4, отличающаяся тем, что указанный радиоактивный изотоп выбран из группы, состоящей из ¹²⁵I и ¹³¹I.

6. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что указанную метку регистрируют с помощью магнитно-резонансной томографии.

7. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что химическим остатком является биологически активная молекула.

8. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что указанная биологически активная молекула выбрана из группы, состоящей из токсина, лекарства и хелата.

9. Композиция по п.8, отличающаяся тем, что указанное лекарство выбрано из группы, состоящей из метотрексата, 5-фторурацила, цис-платины и адриамицина.

10. Способ получения композиции по любому из пп.1-9, включающий получение моноклонального антитела, являющегося интактным; проведение реакции по меньшей мере одной из свободных аминогрупп указанного антитела с биотином с образованием модифицированного антитела, имеющего меньший по сравнению с интактным антителом суммарный положительный заряд, повышенную антигенсвязывающую специфичность, пониженное неспецифическое связывание и характеризующегося скоростью клиренса in vivo, промежуточной между скоростями клиренса F(abʹ)₂-фрагментов и интактного антитела того же типа; и мечение модифицированного антитела радиоактивным изотопом, токсином, лекарством или хелатом с образованием меченого модифицированного антитела.

11. Способ локализации антигена в млекопитающем с использованием композиции, полученной способом по п.10, включающий в себя получение меченого модифицированного моноклонального антитела, имеющего меньший по сравнению с интактным антителом суммарный положительный заряд, повышенную антигенсвязывающую специфичность, пониженное неспецифическое связывание, характеризующегося скоростью клиренса in vivo, промежуточной между скоростями клиренса F(abʹ)₂-фрагментов и интактного антитела того же типа, и содержащего в себе регистрируемую метку; введение меченого модифицированного антитела млекопитающему для связывания in vivo антигена с модифицированным меченым антителом и обнаружение меченого модифицированного антитела, связанного с антигеном, для локализации антигена.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что меченое модифицированное моноклональное антитело помечено радиоактивным изотопом.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что радиоактивный изотоп выбран из группы, состоящей из радиоактивного изотопа галогена и технеция.

14. Способ по п.11, отличающийся тем, что этап обнаружения включает иммуносцинтографию.

15. Способ по п.14, отличающийся тем, что иммуносцинтография включает применение гамма-камеры.

16. Способ по п.11, отличающийся тем, что интактное антитело химически конъюгировано с гетеробифункциональным реагентом.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74, Рисунок 75, Рисунок 76, Рисунок 77, Рисунок 78, Рисунок 79, Рисунок 80, Рисунок 81