Способ получения интактной козьей зиготы, способ получения трансгенной по hg-csf козьей зиготы, предусматривающий использование указанной интактной зиготы, способ получения трансгенной по hg-csf козы, предусматривающий использование указанной трансгенной по hg-csf козьей зиготы, способ продуцирования hg-csf, предусматривающий использование указанной трансгенной по hg-csf козы, и молочная композиция, содержащая указанный hg-csf.

 

Изобретение относится к биотехнологии, а в частности к способам получения трансгенных животных. Предложены способы получения интактной козьей зиготы, трансгенной по hG-CSF козьей зиготы и трансгенной по hG-CSF козы. Получение интактной козьей зиготы предусматривает синхронизацию козы-самки, ее суперовуляцию, спаривание козы с производителем и выделение интактной зиготы из козы. Получение трансгенной по hG-CSF козьей зиготы предусматривает микроинъекцию конструкции нуклеиновой кислоты, содержащей промотор β-казеина и последовательность, кодирующую hG-CSF, в интактную козью зиготу. Получение трансгенной по hG-CSF козы предусматривает пересадку трансгенной по hG-CSF козьей зиготы козе самки и обеспечение развития в ней зиготы до родов. Также предложены способ продуцирования hG-CSF, предусматривающий продуцирование молока у трансгенной по hG-CSF козы, и молочная композиция, содержащая hG-CSF, продуцированная этим способом. Изобретение может быть использовано для получения большого количества hG-CSF более экономичным методом. 5 с. и 1 з. п. ф-лы, 5 ил., 3 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)и

Формула изобретения

1. Способ получения интактной козьей зиготы, предусматривающий синхронизацию козы-самки, суперовуляцию указанной козы, спаривание указанной суперовулированной козы с козлом-производителем и выделение зиготы от козы, подвергнутой спариванию, характеризующийся тем, что в нем стадию синхронизации осуществляют посредством введения указанной козе норгестомета и эстрадиола, введения указанной козе имплантата, содержащего норгестомет, и удаления указанного имплантата; а стадию суперовуляции осуществляют путем последовательного введения указанной козе через заранее определенные промежутки времени комбинированной дозы гонадотропина сыворотки жеребой кобылы (ГСЖК) и фолликуллостимулирующего гормона (ФСГ), дробных доз ФСГ и комбинированной дозы ФСГ и человеческого хорионического ганадотропина (hCG).

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанной козой является Capra hircus aegagrus, а в стадии синхронизации введение ГСЖК и ФСГ осуществляют за 60 ч до удаления трансплантата, введение ФСГ осуществляют шесть раз через каждые 12 ч после введения ГСЖК и ФСГ, а после этого через 12 ч осуществляют введение ФСГ вместе с hCG.

3. Способ получения трансгенной по hG-CSF козьей зиготы, предусматривающий микроинъекцию конструкции нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность козьего промотора β-казеина и нуклеотидную последовательность, кодирующую человеческий гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (hG-CSF), в интактную козью зиготу, полученную способом по п.1.

4. Способ получения трансгенной по hG-CSF козы, предусматривающий пересадку трансгенной по hG-CSF козьей зиготы, полученной способом по п.3, козе-самке и обеспечение развития в ней указанной козьей зиготы вплоть до родов.

5. Способ продуцирования hG-CSF, предусматривающий продуцирование молока у трансгенной козы, полученной по п.4, и выделение указанного hG-CSF из указанного молока.

6. Молочная композиция, содержащая hG-CSF и продуцированная от трансгенной козы, полученной способом по п.4.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33