Способ сушки кристаллов протеинов


C07K1 - Пептиды (пептиды в пищевых составах A23, например получение белковых композиций для пищевых составов A23J, препараты для медицинских целей A61K; пептиды, содержащие бета-лактамовые кольца, C07D; циклические дипептиды, не содержащие в молекуле любого другого пептидного звена, кроме образующего их кольцо, например пиперазин-2,5-дионы, C07D; алкалоиды спорыньи циклического пептидного типа C07D519/02; высокомолекулярные соединения, содержащие статистически распределенные аминокислотные единицы в молекулах, т.е. при получении предусматривается не специфическая, а случайная последовательность аминокислотных единиц, гомополиамиды и блоксополиамиды, полученные из аминокислот, C08G 69/00; высокомолекулярные продукты, полученные из протеинов, C08H 1/00; получение

 

Описан способ сушки кристаллов протеинов исходя из водной суспензии кристаллов протеинов, отличающийся тем, что суспензию кристаллов протеинов сушат в центробежной сушилке сушильным газом, причем сушильный газ перед процессом сушки увлажняют водой, и причем кристаллы протеинов после их отфильтровывания из суспензии кристаллов протеинов помещают в сушильную среду, состоящую из смеси воды и неводного, смешиваемого с водой в любом соотношении растворителя, который обладает более низким давлением пара, чем вода. При этом предпочтительно используют сушильный газ, увлажненный водой. Суспензию кристаллов протеинов для сушки предпочтительно переводят в псевдоожиженный слой. Технический результат: получение кристаллов протеинов с определенным содержанием воды. 10 з.п. ф-лы.

Протеины содержатся во многих коммерческих готовых формах. В особенности протеины содержатся в качестве биологически активных веществ в некоторых фармацевтических лекарственных средствах. Для получения этих готовых форм целесообразно использовать протеины в кристаллической форме. Наряду с лучшей возможностью использования, в частности, протеины стабильнее в форме сухих кристаллизатов, чем, например, в растворенной форме.

Так, например, для получения фармацевтических готовых форм с гормоном инсулином в качестве биологически активного вещества используют протеин инсулин в кристаллической форме. Кристаллический инсулин, например, стабилен в течение нескольких лет при температуре -20С.

Известны кристаллические формы протеинов с молекулярным весом в несколько сотен тысяч дальтон, а также пептиды с более низким молекулярным весом. Последовательность аминокислот в протеине может быть либо идентичной последовательности, встречающейся в природе, либо может быть изменена по сравнению с природной формой. Кроме цепей аминокислот протеины могут содержать также остатки сахаров или другие лиганды в качестве боковых цепей. Протеины могут быть выделены из натуральных источников, или могут быть получены методами генной инженерии или синтетически, или они могут быть получены с помощью комбинации этих способов.

Протеины имеют в водном растворе более или менее сложную трехмерную структуру, которая основана на специфической пространственной складчатости аминокислотных цепей. Неповрежденная структура протеина существенна для его биологического действия. При кристаллизации протеинов из водных растворов эта структура сохраняется в значительной мере. Кристаллическая структура протеина главным образом определяется его аминокислотной последовательностью, но наряду с этим также посредством включений низкомолекулярных веществ, как, например, ионов солей металлов и молекул воды. В особенности необходимо присутствие определенного количества внутрикристаллических молекул воды (кристаллизационная вода) для стабильности кристаллической структуры протеинов.

Так, например, кристаллы инсулина нуждаются в оптимальном остаточном содержании воды (приблизительно от 1 до 7%). Если посредством пересушивания кристаллов достигалось меньшее содержание влаги, то из кристалла удалялась уже кристаллизационная вода. Вследствие этого химическая стабильность инсулина нарушается, что, например, приводит к образованию высокомолекулярных соединений. Предполагается, что высокомолекулярная часть в инсулине ответственна за иммунологически несовместимые реакции. В экстремальном случае инсулин может настолько денатурироваться, что кристаллы в водной среде более не растворяются. Если, напротив, при высушивании получали кристаллизат с высоким содержанием влаги, то между отдельными кристаллами присутствовало много воды. В этой внутрикристаллической воде инсулин частично растворяется. Но стабильность растворенного инсулина явно меньше, чем стабильность твердых форм.

Известно, что кристаллы протеинов, в особенности кристаллы инсулина, можно сушить, выделяя кристаллы из суспензии кристаллов с помощью фильтрации и высушивая фильтровальный осадок при температуре выше 0С в вакууме. Также известно, что процесс сушки можно ускорить, заменяя перед высушиванием внутрикристаллическую воду этанолом. Во время высушивания кристаллизаты распределяются на сушильных листах тонким слоем или перемещаются на фильтре.

При других способах кристаллы протеинов, например кристаллы инсулина, замораживаются в виде водной суспензии при температуре ниже 0С на сушильных листах и затем сублимационно сушатся в вакууме.

При обоих названных способах не гарантируется достижение ни определенного, ни оптимального остатка влаги в высушиваемых кристаллах в достаточной степени. При обоих способах процесс сушки вплоть до окончания кинетически контролируется и должен быть своевременно прекращен, для того чтобы избежать пересушивания. Опыт показывает, что определить правильный момент прекращения сушки трудно. Окончательное содержание влаги в кристаллах зависит не только от плотности слоя на сушильных листах, но и от величины кристаллов (или, соответственно, их поверхности). Так как процесс кристаллизации приводит к образованию кристаллов инсулина с более или менее широким распределением по размерам, кристаллизат, высушенный в кинетически контролируемом процессе, состоит из смеси сухих маленьких и влажных больших кристаллов.

Другой недостаток этого способа состоит в том, что очень сложно автоматизировать загрузку и опорожнение устройств, применяемых для сушки. Так, для процесса загрузки и опорожнения еще значительно необходим ручной труд, который несет с собой риск загрязнения микробами и чужеродными частицами. Так, в соответствии с законами современной фармакопеи требуют, чтобы кристаллический инсулин для получения фармацевтических препаратов был обедненным микробами, но не свободным от микробов.

Далее описываются методы сушки, при которых все критические стадии процесса следуют друг за другом в одной машине (центробежной сушилке):

1. Отфильтровывание кристаллов из водной суспензии.

2. Промывание фильтровального осадка.

3. Замена промывной жидкости на сушильную среду.

4. Сушильное центрифугирование фильтровального осадка.

5. Отделение фильтровального осадка от фильтра и преобразование в псевдоожиженный слой.

6. Сушка кристаллов в псевдоожиженном слое с увлажненным током азота.

7. Выгрузка высушенных кристаллов скачком давления азота в контейнер с фланцами.

Итак, данное изобретение касается способа сушки кристаллов протеинов исходя из водной суспензии кристаллов протеинов, который отличается тем, что суспензию кристаллов протеинов сушат в центробежной сушилке.

Описанные далее опыты проводили на стандартной центробежной сушилке.

Для описанного процесса сушки особенно предпочтительно, если отделенный фильтровальный осадок может быть переведен в псевдоожиженный слой. Опыты показали, что без замены внутрикристаллической воды на одну из ниже описанных сушильных сред псевдоожиженный слой не может быть создан, а возникает смесь из более или менее больших кристаллических агрегатов, так что равномерная сушка невозможна.

Другие опыты показали, что после замены внутрикристаллической воды чистой неводной сушильной средой, например 100%-ным этанолом или 100%-ным пропанолом, в кристаллах протеина остается только внутрикристаллическая вода (кристаллизационная вода), создание псевдоожиженного слоя возможно. Тем не менее, в течение заключительной фазы сушки, а также после длительного времени сушки сушильная среда не могла удаляться в достаточной степени. Высушенные продукты имели остаточное содержание сушильной среды более чем 5%. С другой стороны, за время сушки кристаллизационная вода уже частично удалялась.

Неожиданно было установлено, что после замены внутрикристаллической воды на сушильную среду, состоящую из смеси воды и одного неводного вещества, упомянутых недостатков можно избежать. После замены внутрикристаллической воды на одну из нижеописанных сушильных сред удалось из отделенного фильтровального осадка создать псевдоожиженный слой и удовлетворительно высушить кристаллизат. При использовании увлажненного сушильного газа после времени сушки от около 1 до 4 часов получали продукты, которые были свободны от кристаллических агрегатов и характеризовались остаточным содержанием неводных субстанций менее чем 0,1%.

Таким образом, данное изобретение касается способа сушки кристаллов протеинов исходя из водной суспензии кристаллов протеинов, который, в частности, отличается тем, что кристаллы протеинов после их отфильтровывания из суспензии кристаллов протеинов помещают в сушильную среду, состоящую из смеси воды и неводного, смешиваемого с водой в любом соотношении растворителя, обладающего более низким давлением пара, чем вода. Предпочтительно проводят способ сушки суспензии кристаллов протеинов согласно изобретению в центробежной сушилке.

Неводные субстанции в качестве компонента пригодных сушильных сред характеризуются тем, что они при температуре около 40С обладают низким давлением пара (то есть характеризуются более низким давлением пара, чем вода), смешиваются с водой в любом соотношении и при указанных условиях химически неактивны по отношению к протеинам. Спирты, как, например, метанол, этанол, н-пропанол и изопропанол наиболее соответствуют этим условиям. Пригодны также смеси спиртов.

Доля неводных субстанций в пригодных смесях с водой в сушильной среде составляет от включительно около 10% до включительно около 80%, предпочтительно от включительно 15% до включительно около 60%, далее предпочтительно от включительно около 20% до включительно около 80%.

В описанных способах сушки при применении осушенного азота в качестве сушильного газа процесс сушки до конца является кинетически контролируемым, так что могут проявляться вышеописанные недостатки.

Собственные опыты при применении влажного азота в качестве сушильного газа показали, что удаление воды из кристаллов в течение фазы сушки происходит до состояния равновесия, и достигаемое остаточное содержание воды в высушенных кристаллах определяется содержанием воды в сушильном газе. То есть, в конце фазы сушки устанавливается термодинамическое равновесие между содержанием воды в сушильном газе и содержанием воды в кристаллах. Поэтому остаточное содержание воды в высушенных кристаллах не зависит от их размера (или величины поверхности).

Кроме того, опыты по применению сухого азота в качестве сушильного газа показали, что неводный компонент сушильной среды также после длительного времени сушки не может быть удален в достаточной степени. Высушенные продукты показывают остаточное содержание неводного компонента более чем 1%.

Неожиданно было установлено, что при способе сушки кристаллов протеинов с использованием сушильного газа остаточное содержание неводного компонента сушильной среды может быть удалено до менее чем 0,1%, если используется водосодержащий сушильный газ. Способ сушки проводят предпочтительно в центробежной сушилке. Особенно предпочтительным является способ сушки кристаллов протеинов, если кристаллы протеинов после их отфильтровывания из суспензии кристаллов протеинов помещают в сушильную среду, состоящую из смеси воды и неводного, смешиваемого с водой в любом соотношении растворителя, обладающего более низким давлением пара, чем вода. При этом особенно предпочтительно, если кристаллы протеинов после их отфильтровывания из суспензии кристаллов протеинов с целью сушки переводятся в псевдоожиженный слой.

Собственные опыты с описанным способом сушки показали, что при использовании стерильной и свободной от чужеродных частиц суспензии кристаллов и фильтрации в стерильных условиях промывной воды, сушильной среды и сушильного газа, а также после собственной очистки и стерилизации центробежной сушилки получался высушенный продукт, который был свободен от микробов, а также свободен от чужеродных частиц.

Способ согласно данному изобретению особенно пригоден для сушки кристаллов животного инсулина, человеческого инсулина или их аналогов.

В качестве аналогов инсулина здесь называются производные инсулинов, встречающихся в природе, а именно человеческого инсулина или животных инсулинов, которые отличаются замещением, по меньшей мере, одного встречающегося в природе аминокислотного остатка и/или присоединением, по меньшей мере, одного аминокислотного остатка и/или органического остатка от соответствующего, в остальном такого же, встречающегося в природе инсулина.

В дальнейшем способ согласно изобретению поясняется подробнее, в частности с привлечением примеров.

Конструкция и принцип действия центробежной сушилки.

Центробежная сушилка состоит из горизонтально расположенного центробежного барабана с плотной оболочкой. В барабане находится цилиндрическая ситчатая корзина, прочно соединенная с барабаном. Пространство между пористой поверхностью оболочки ситчатой корзины и плотной поверхностью оболочки барабана радиально разделено на множество камер. В заднем торце барабана находятся отверстия, так что во время вращения барабана снаружи в камеры может направляться газ (например, сушильный газ), или из камер наружу может отводиться жидкость (например, маточный раствор суспензии кристаллов). Впереди барабан закрывается плунжером, который вращается с барабаном. В состоянии покоя плунжер может быть передвинут в аксиальном направлении. Если плунжер возвращается обратно, освобождается стационарное кругообразное разгрузочное полотно, которое становится доступным из внутренней полости барабана центрифуги. После того как барабан открыт, он может опять медленно вращаться (для того чтобы выгрузить сухой продукт).

У центробежной сушилки, которую использовали в опытах, барабан центрифуги имел диаметр 400 мм и длину оболочки 200 мм, ситчатая корзина имела фильтрующую поверхность 0,25 м2 и размер пор 10 мкм.

Центрифуга загружается продуктом при вращающемся барабане (475 об/мин) аксиально через полый приводной вал, причем фильтровальный осадок (кристаллизат) образуется в виде слоя на ситчатой оболочке, и фильтрат через ситчатую оболочку продавливается в камеры и оттуда, через дно барабана, в стационарное наружное пространство. Фильтрат (маточный раствор кристаллизации) покидает центрифугу через разгрузочный штуцер и выгружается. Затем фильтровальный осадок таким же путем промывается водой. После этого промывная вода тем же путем заменяется на одну из сушильных сред, названных в примерах. После сушки фильтровального осадка при высоком числе оборотов (1200 об/мин) центрифугированием, при низком числе оборотов (6 об/мин) с помощью продувания азотом фильтровальный осадок отделяется от ситчатой оболочки, отделенный продукт переводится в псевдоожиженный слой и сушится. Для этого снаружи направляется пульсирующий поток азота (через отверстия в дне барабана) через нижние камеры барабана и через нижнюю часть ситчатой оболочки во внутреннюю полость барабана. Сушильный газ проходит через вращающийся псевдоожиженный слой продукта и покидает барабан через верхнюю часть ситчатой оболочки и верхнюю камеру барабана. После окончания фазы сушки плунжер возвращается обратно, так что кругообразное разгрузочное полотно освобождается. При низком числе оборотов и пульсирующих скачках давления азот сбрасывает высушенный продукт на разгрузочное полотно. В конце разгрузочного пути азот отделяется в циклоне, и сухой продукт улавливается в сборнике.

Сушильный газ (азот) перед подачей в центробежную сушилку увлажняется стерильным водяным паром в сепараторном аппарате и нагревается до температуры сушки. Температура и содержание воды в потоке азота регулируются.

Пример 1.

В кристаллизационном котле с мешалкой кристаллизовали 1000 г свиного инсулина из водного раствора при рН 5,5 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 100 л) содержала ромбоэдрические кристаллы со средним размером частиц 25 мкм. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 30 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 70%-ным водным этанолом (сушильной средой). После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, кристаллизат сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки сушильный газ был нагрет до температуры 40С, и устанавливалось содержание воды: 4 г воды на 1 кг азота. Через 120 минут сушка была закончена, и продукт выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 5% и остаточное содержание этанола менее 0,1%.

Пример 2.

В кристаллизационном котле с мешалкой в стерильных условиях кристаллизовалось 1500 г человеческого инсулина из водного раствора при рН 5,5 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 150 л) содержала ромбоэдрические кристаллы со средним размером частиц 20 мкм. Центробежная сушилка перед использованием была промыта последовательно 10%-ной натриевой щелочью, свободной от частиц водой, 10%-ной уксусной кислотой и вновь свободной от частиц водой. Затем центробежная сушилка стерилизовалась свободным от частиц паром. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 45 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 50%-ным водным этанолом (сушильной средой). Обе жидкости были перед этим профильтрованы в стерильных условиях. После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, кристаллизат сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки профильтрованный в стерильных условиях сушильный газ был нагрет до температуры 40С, и устанавливалось содержание воды: 3 г воды на 1 кг азота. Через 150 минут сушка была закончена, и продукт, как описывалось выше, выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 4% и остаточное содержание этанола менее 0,1%. Продукт был свободен от микробов и чужеродных частиц.

Пример 3.

В кристаллизационном котле с мешалкой кристаллизовалось 1000 г человеческого инсулина из водного раствора при рН 5,5 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 100 л) содержала ромбоэдрические кристаллы со средним размером частиц 25 мкм. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 30 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 30%-ным водным этанолом (сушильной средой). После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, продукт сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки сушильный газ был нагрет до температуры 40С, и устанавливалось содержание воды: 5 г воды на 1 кг азота. Через 120 минут сушка была закончена, и продукт выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 6% и остаточное содержание этанола менее 0,1%.

Пример 4.

В кристаллизационном котле с мешалкой кристаллизовалось 1000 г свиного инсулина из водного раствора при рН 5,5 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 100 л) содержала ромбоэдрические кристаллы со средним размером частиц 30 мкм. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 30 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 72%-ным водным пропанолом (сушильной средой). После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, продукт сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки сушильный газ был нагрет до температуры 40С, и устанавливалось содержание воды: 4 г воды на 1 кг азота. Через 140 минут сушка была закончена, и продукт выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 5% и остаточное содержание пропанола менее 0,1%.

Пример 5.

В кристаллизационном котле с мешалкой кристаллизовалось 1500 г ди-арг-инсулина из водного раствора при рН 6,3 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 100 л) содержала кристаллы со средним размером частиц 20 мкм. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 30 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 25%-ным водным пропанолом (сушильной средой). После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, продукт сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки сушильный газ был нагрет до температуры 40С, и устанавливалось содержание воды: 3 г воды на 1 кг азота. Через 160 минут сушка была закончена, и продукт выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 6% и остаточное содержание пропанола менее 0,1%.

Пример 6.

В кристаллизационном котле с мешалкой кристаллизовалось 1000 г человеческого инсулина из водного раствора при рН 5,5 с добавлением ионов цинка. После окончания кристаллизации суспензия (около 100 л) содержала ромбоэдрические кристаллы со средним размером частиц 25 мкм. Как описывалось в общей части, перемешиваемая суспензия кристаллов подавалась в центробежную сушилку в течение около 30 минут. Фильтровальный осадок промывался водой в количестве около 50 л, и затем промывная вода заменялась 15%-ным водным н-пропанолом (сушильной средой). После того как фильтровальный осадок был отделен от ситчатой оболочки, продукт сушился в псевдоожиженном слое. В течение периода сушки сушильный газ был нагрет до температуры 40С. Содержание воды в сушильном газе к началу сушки составляло 15% и в течение периода сушки снижалось до 8%. Через 120 минут сушка была закончена, и продукт выгружен в сборник. Анализ сухого кристаллизата показал остаточное содержание воды 6% и остаточное содержание пропанола менее 0,1%.

Формула изобретения

1. Способ сушки кристаллов протеинов исходя из водной суспензии кристаллов протеинов, отличающийся тем, что суспензию кристаллов протеинов сушат в центробежной сушилке сушильным газом, причем сушильный газ перед процессом сушки увлажняют водой и причем кристаллы протеинов после их отфильтровывания из суспензии кристаллов протеинов помещают в сушильную среду, состоящую из смеси воды и неводного смешиваемого с водой в любом соотношении растворителя, который обладает более низким давлением пара, чем вода.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что доля растворителя в сушильной среде составляет от включительно 10 до включительно 80%.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что доля растворителя в сушильной среде составляет от включительно 15 до включительно 60%.

4. Способ по одному из пп.1-3, отличающийся тем, что растворителем является спирт или смесь спиртов.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что растворителем является метанол.

6. Способ по п.4 или 5, отличающийся тем, что растворителем является этанол.

7. Способ по одному из пп.4-6, отличающийся тем, что растворителем является н-пропанол.

8. Способ по одному из пп.4-7, отличающийся тем, что растворителем является изопропанол.

9. Способ по одному из пп.1-8, отличающийся тем, что сушильным газом является азот.

10. Способ по одному из пп.1-9, отличающийся тем, что кристаллы протеинов после отфильтровывания их из суспензии кристаллов протеинов для сушки переводят в псевдоожиженный слой.

11. Способ по одному из пп.1-10, отличающийся тем, что кристаллами протеинов являются кристаллы животного инсулина, человеческого инсулина или один из их аналогов.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к водорастворимому агрегату производных инсулина, в котором остатки В24-В30 В-цепи производного инсулина являются последовательностью Phe-Х-Х-Х-Х-Х-Х, где каждый Х независимо представляет любую аминокислоту или делецию, по меньшей мере один Х является N-замещенным остатком лизина, в котором заместителем является 5--литохолевая кислота или 5--литохолевая кислота, связанная через -глутамил, -глутамил или - или -аспартил в качестве линкера, где агрегат имеет размер, определенный в гель-фильтрационной системе, больше, чем у альдолазы, и агрегат включает по меньшей мере 2 иона цинка на 6 молекул производного инсулина

Изобретение относится к медицинской промышленности и касается производного инсулина или его физиологически приемлемой соли с ускоренным по сравнению с человеческим инсулином наступлением действия, в котором аспарагин (Asn) в положении В3 цепи В заменен на природный основной аминокислотный остаток и по меньшей мере один аминокислотный остаток в положениях В27, В28 или В29 цепи В замещен на другой природный нейтральный или кислый аминокислотный остаток, причем аспарагин (Asn) в положении А21 цепи А может быть заменен на Asp, Gly, Ser, Thr или Ala, а фенилаланин (Phe) в положении В1 цепи В и аминокислотный остаток в положении В30 цепи В могут отсутствовать

Изобретение относится к области медицины и касается фрагментов С-пептида человеческого проинсулина

Изобретение относится к способу получения предшественника инсулинов или инсулиновых производных с правильно соединенными цистиновыми мостиками в присутствии цистеина или цистеингидрохлорида и хаотропного вспомогательного вещества, отличающемуся тем, что следующие стадии проводят друг за другом: (а) смешивание водной суспензии предшественника инсулинов или инсулиновых производных с количеством цистеина или цистеингидрохлорида, которое дает до 15 SH-остатков цистеина или цистеингидрохлорида на один цистеиновый остаток предшественника, (б) внесение цистеин- или цистеингидрохлоридсодержащей суспензии предшественника в 4-9-молярный раствор хаотропного вспомогательного вещества при значении рН 8 - 11,5 и температуре 15 - 55oС, выдерживание полученной смеси в течение 10-60 мин при этой температуре и (в) внесение смеси при значении рН 8 - 11,5 и температуре 5 - 30oС в количество воды, которое дает разбавление концентрации цистеина или цистеингидрохлорида в смеси на 1-5 мМ и хаотропного вспомогательного вещества на 0,2-1,0 М

Изобретение относится к способу получения затравочных микрокристаллов для производства пептида или протеина, отличающемуся тем, что он включает в себя получение суспензии пептида или протеина без затравки и по меньшей мере двухкратную гомогенизацию указанной суспензии под давлением 50000-150000 кПа для получения микрокристаллов пептида или протеина, имеющих размер 0,5-4 мкм, пригодных для использования в качестве затравочных микрокристаллов в процессе производства указанного пептида или протеина

Изобретение относится к не содержащим цинк кристаллам инсулина, имеющим диаметр меньше 10 мкм, пригодным для введения через легкие

Изобретение относится к инсулину и его производным с повышенной способностью связывать цинк

Изобретение относится к области медицины, в частности касается лечения диабета

Изобретение относится к полипептиду (I), представляющему собой мутантный белок IL-2 человека с нумерацией согласно IL-2 дикого типа, где человеческий IL-2 замещен по крайней мере по одному положению, 20, 88 или 126, благодаря чему указанный мутантный белок активирует Т-клетки предпочтительно перед естественными киллерными (NK) клетками; фармацевтической композиции, обладающей иммуностимулирующей активностью, включающей полипептид I; полинуклеотиду, представляющему собой последовательность ДНК, кодирующую мутантный белок IL-2 человека; вектору pBC1IL 2SA для экспрессии мутантного белка IL-2 человека; линии клеток яичников китайских хомячков; линии клеток африканской зеленой мартышки, штамму E.coli, линии клеток Spodoptera fugiperda, трансформинированных вектором pBC1IL 2SA, которые продуцируют мутантный белок IL-2 человека; способу лечения млекопитающих, страдающих онкологическими заболеваниями, а также к способу отбора мутантных белков IL-2 по оценке их в исследованиях с применением IL-2R в сравнении с IL-2R, где активность мутантного белка IL-2 повышается по отношению к IL-2 дикого типа в одном из исследований предпочтительно перед другим

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения мутеинов человеческого IL-4, обладающих активирующей Т-клетки активностью и пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и касается растворимых мутантных молекул CTLA4, которые связываются с антигеном CD86 с большей авидностью, чем CTLA4 дикого типа

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, а именно, к новым последовательностям нуклеотидов ДНК и последовательностям аминокислот моноклональных антител (MAT), вырабатываемых против лимфобластоидных клеток, и к пептидам, с которыми связываются МАТ

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой очищенную и выделенную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок бактерии Moraxella catarrhalis или иммуногенный фрагмент рецептора трансферрина, а также способ получения рекомбинантного белка рецептора трансферрина

Изобретение относится к пептиду, выбранному из группы, имеющей формулу: X-R1-R2-Asp-Ala-R5-R6-Thr-R8-R9-R10-Arg-R12-R13-R14-R15-R16-Leu-R18-R19-Arg-R21-R22-Leu-Gln-Asp-Ile-R27-R28-R29-NH2, где X означает PhAc, IndAc или Nac, R1 означает Tyr или His, R2 означает D-Arg, R5 означает Ile или Val, R6 означает Phe или Phe(Cl), R8 означает Asn, Gln, Ala или D-Asn, R9 означает Arg, Har, Lys, Orn, D-Arg, D-Har, D-Lys, D-Orn, Cit, Nle, Tyr(Me), Ser, Ala или Aib, R10 означает Tyr или Tyr(Me), R12 означает Lys, R13 означает Val или Nle, R14 означает Leu или Nle, R15 означает Gly, Ala, Abu, Nle или Gln, R16 означает Gln или Arg, R18 означает Ser или Nle, R19 означает Ala, R21 означает Lys, R22 означает Leu, Ala или Aib, R27 означает Met, Leu, Nle, Abu или D-Arg, R28 означает Arg, D-Arg или Ser, R29 означает Arg, D-Arg, Har или D-Har, при условии, что когда 9 и R28 означают Ser, R29 не является Arg или Har, и его фармацевтически приемлемым солям
Изобретение относится к способу получения ингибитора HMG-CoA- редуктазы вытеснительной хроматографией

Изобретение относится к медицине и касается пептидов, которые могут быть использованы для клеточной адгезии и заживления ран

Изобретение относится к области биотехнологии и касается получения новой поликетид-синтазы, необходимой для биосинтеза эпотилонов А и В

Изобретение относится к генной инженерии, конкретно к технологии фагового дисплея, и может быть использовано для отбора бактериофагов, экспрессирующих пептиды и белки, которые связываются с рецепторами клеточной поверхности и интернализуются

Изобретение относится к генной инженерии и может быть использовано для создания микробиологического дрожжевого продуцента, обеспечивающего высокий выход рекомбинантного антигена вируса гепатита В серотипа adw
Наверх