С-21 модифицированные эпотилоны

Изобретение относится к эпотилонам, в которых модифицирован тиазолильный заместитель, к способам их получения, а также к фармацевтической композиции, обладающей свойством ингибировать рост клеток, которая содержит указанные эпотилоны. Указанные соединения имеют общую формулу I

где P-Q представляет собой C двойную связь или эпоксид; R выбран из группы, включающей Н и С_1-6алкил; G представляет собой

R¹ выбран из группы, состоящей из

G¹ представляет собой Н; G² представляет собой Н; G³ выбран из группы, включающей О, S и NZ¹; G⁴ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, OZ², Z²C=O и Z⁴SO₂; G⁵ выбран из группы, включающей галоген, N₃, CN, NC, гетероарил, содержащий N или О, и гетероцикло; G⁶ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил и OZ⁵, где Z⁵ выбран из группы, включающей Н и C_1-6алкил; G⁹ представляет собой O; Z¹ выбран из такой группы, как Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, ацил и замещенный ацил; Z² выбран из такой группы, как C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, арил; Z⁴ выбран из группы, включающей арил и замещенный арил. 6 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Уровень техники

Эпотилоны представляют собой макроциклические лактоны, обладающие полезными противогрибковыми и цитотоксическими свойствами. Их действие, как и в случае Таксола^R, основывается на стабилизации микроканальцев, в результате чего ингибируются, в особенности, раковые и другие быстро делящиеся клетки. Типичные эпотилоны содержат метилтиазолильную боковую цепь, 12,13-двойную связь (С, D), 12,13-эпоксид (А, В) и протон (А, С) или метальную группу (В, D) на С-12; смотри, например, Review Angew. Chem. 1998, 110, 89-92 и 2120-2153, и Heterocycles 1998, 48, 2485-2488.

Эпотилон A, R=H

В, R=Me

Эпотилон С, R=H

D, R=Me

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу I

где P-Q представляет собой С двойную связь или эпоксид;

G представляет собой

R выбран из группы, включающей Н и C_1-6алкил;

R¹ выбран из группы, состоящей из

G¹ представляет собой Н;

G² представляет собой Н;

G³ выбран из группы, включающей О, S и NZ¹;

G⁴ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, OZ², Z²C=O и Z⁴SO₂;

G⁵ выбран из группы, включающей галоген, N₃, CN, NC, гетероарил, содержащий N или О, и гетероцикло;

G⁶ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил, и OZ⁵, где Z⁵ выбран из группы, включающей Н и C_1-6алкил;

G⁹ представляет собой О;

Z¹ выбран из такой группы, как Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, ацил и замещенный ацил;

Z² выбран из такой группы, как C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, арил;

Z⁴ выбран из группы, включающей арил и замещенный арил;

при условии, что когда R¹ представляет собой

или

G¹, G², G³ и G⁴ не могут одновременно иметь следующие значения:

G¹ и G² - Н, G³ - О и G⁴ - Н или Z²C=O, где Z²=H или алкильная группа, и когда G¹ и G² - H, G⁵ не может быть галогеном;

где замещенный C_1-6алкил представляет собой C_1-6алкил, имеющий от одного до четырех заместителей, выбранных из гидрокси, алкокси, оксо, алканоила, арила, арилокси, алканоилокси, амино, C_1-6алкиламино, дизамещенных аминов (в которых два аминозаместителя выбраны из C_1-6алкила);

замещенный арил представляет собой фенил или нафтил, имеющий от одного до четырех заместителей, выбранных из C_1-6алкила, и

замещенный ацил представляет собой ацильную группу, в которой радикал, полученный из кислоты путем удаления гидроксила, замещен C_1-6алкилом, замещенным С_1-6алкилом.

Кроме того, изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу Iа

где R представляет собой атом Н или метальную группу,

G₁ представляет собой атом Н.

Кроме того, изобретение касается соединения, имеющего общую формулу Ib

где R представляет собой атом Н или метильную группу,

G¹ представляет собой атом Н,

G² представляет собой атом Н.

Кроме того, изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу

Кроме того, изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу IIb

где R представляет собой атом Н или метильную группу;

G⁶ представляет собой атом Н.

Кроме того, изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу IV

где R представляет собой атом Н или метальную группу,

P-Q представляет собой С двойную связь или эпоксид,

G¹¹ представляет собой С_1-6алкил.

Кроме того изобретение относится к фармацевтической композиции, ингибирующей рост клеток, содержащей или состоящей из соединения в соответствии с изобретением, в дополнение к необязательным носителю, разбавителю или добавке.

Детальное описание изобретения

Определения

Далее перечислены значения различных определений, используемых при описании настоящего изобретения. Эти значения применимы к определениям, как их используют на протяжении всего настоящего описания, если не вводятся какие-либо ограничения в специальных требованиях или как индивидуально, или как часть большой группы.

Определение "фармацевтически активный агент" или "фармацевтически активный эпотилон" относится к эпотилону, который является фармакологически активным при лечении раковых или других заболеваний, приведенных в описании.

Определение "алкил" относится к необязательно замещенной прямой или разветвленной цепи насыщенных углеводородных групп, включающих от 1 до 6 атомов углерода. Выражение "низший алкил" относится к необязательно замещенным алкильным группам, включающим от 1 до 4 атомов углерода.

Определение "замещенный алкил" относится к алкильной группе, имеющей, например, от одного до четырех заместителей, таких как галоген, трифторметил, трифторметокси, гидрокси, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоокси, оксо, алканоил, арилокси, алканоилокси, амино, алкиламино, ариламино, аралкиламино, циклоалкиламино, гетероциклоамино, дизамещенные амины, в которых два аминозаместителя выбраны из алкила, арила или аралкила, алканоиламино, ароиламино, аралканоиламино, замещенного алканоиламино, замещенного ариламино, замещенного аралканоиламино, тиола, алкилтио, арилтио, аралкилтио, циклоалкилтио, гетероциклотио, алкилтионо, арилтионо, аралкилтионо, алкилсульфонила, арилсульфонила, аралкилсульфонила, сульфонамидо (например, SO₂NH₂), замещенного сульфонамидо, нитро, циано, карбокси, карбамила (например, CONH₂), замещенного карбамила (например, CONH-алкила, CONH-арила, CONH-аралкила или случаев, где имеются два заместителя на азоте, выбранные из алкила, арила или аралкила), алкоксикарбонила, арила, замещенного арила, гуанидино и гетероциклов, таких как индолил, имидазолил, фурил, тиенил, тиазолил, пирролидил, пиридил, пиримидил и тому подобное. Где, как отмечено выше, если заместитель дополнительно замещен, то с помощью галогена, алкила, алкокси, арила или аралкила.

Определение "ацил" относится к радикалу, образованному обычно из кислоты при удалении гидроксила. Примеры включают ацетил (СН₃СО-), бензоил (С₆Н₅СО-) и фенилсульфонил (С₆Н₅SO₂-).

Определение "замещенный ацил" относится к замещенной ацильной группе, в которой радикал обычно образованный из кислоты путем удаления гидроксила, замещен, например, алкилом, замещенным алкилом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом арилом, замещенным арилом, аралкилом, замещенным аралкилом и гетероциклилом.

Определение "кольцевая система" относится к необязательно замещенной кольцевой системе, содержащей от одного до трех колец и по крайней мере одну углерод-углеродную двойную связь по крайней мере в одном кольце. Примеры кольцевых систем включают, но не ограничиваются такими значениями, как арил или частично, или полностью ненасыщенная гетероциклическая кольцевая система, которая может быть необязательно замещена.

Определение "арил" относится к моноциклическим или бициклическим ароматическим углеводородным группам, имеющим от 6 до 12 атомов углерода в кольце, таким как фенильная, нафтильная, бифенильная и дифенильная группы, каждая из которых может быть необязательно замещена.

Определение "замещенный арил" относится к арильной группе, имеющей, например, от одного до четырех заместителей, таких как алкил, замещенный алкил, галоген, трифторметокси, трифторметил, гидрокси, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоокси, алканоил, алканоилокси, амино, алкиламино, аралкиламино, циклоалкиламино, гетероциклоамино, диалкиламино, алканоиламино, тиол, алкилтио, циклоалкилтио, гетероциклотио, уреидо, нитро, циано, карбокси, карбоксиалкил, карбамил, алкоксикарбонил, алкилтионо, арилтионо, алкилсульфонил, сульфонамидо, арилокси и тому подобное. Заместитель может быть дополнительно замещен с помощью галогена, гидрокси, алкила, алкокси, арила, замещенного арила, замещенного алкила или аралкила.

Определение "аралкил" относится к арильной группе, связанной непосредственно через алкильную группу, к такой как бензил.

Определения "замещенный алкен" и "замещенный алкенил" относятся к остатку, имеющему углерод-углеродную двойную связь, который может быть частью кольцевой системы, с по крайней мере одним заместителем, являющимся низшим алкилом или замещенным низшим алкилом. Другие заместители имеют значения, которые приведены для замещенного алкила.

Определение "циклоалкил" относится к необязательно замещенным, насыщенным циклическим углеводородным кольцевым системам, предпочтительно содержащим от 1 до 3 колец и от 3 до 7 атомов углерода в каждом кольце, которое может быть, кроме того, сконденсировано с ненасыщенным С₃-С₇карбоциклическим кольцом. Примеры таких групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклодецил, циклододецил и адамантил. Примеры заместителей включают одну или более алкильных групп, как описано выше, или одну или более групп, описанных выше как алкильные заместители.

Определения "гетероцикл", "гетероциклический" и "гетероцикло" относятся к необязательно замещенной, ненасыщенной, частично насыщенной или полностью насыщенной, ароматической или неароматической циклической группе, например, которая представляет собой 4-7-членную моноциклическую, 7-11-членную бициклическую или 10-15-членную трициклическую кольцевую систему, которая имеет по крайней мере один гетероатом в по крайней мере одном углеродсодержащем кольце. Каждое кольцо гетероциклической группы, содержащее гетероатом, может иметь 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из атомов азота, атомов кислорода, атомов серы, где гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены и гетероатомы азота могут быть также необязательно кватернизованы,с образованием четвертичного основания.

Гетероциклические группы могут быть присоединены по любому гетероатому или атому углерода.

Примеры моноциклических гетероциклических групп включают пирролидинил, пирролил, индолил, пиразолил, оксетанил, пиразолинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолинил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, фурил, тетрагидрофурил, тиенил, оксадиазолил, пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, 2-оксазепинил, азепинил, 4-пиперидонил, пиридил, N-оксопиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, тетрагидротиопиранил сульфон, морфолинил, тиоморфолинил, тиоморфолинилсульфоксид, тиоморфолинил сульфон, 1,3-диоксолан и тетрагидро-1,1-диоксотиенил, диоксанил, изотиазолидинил, тиетанил, тииранил, триазинил и триазолил, и тому подобное.

Примеры бициклических гетероциклических групп включают бензотиазолил, бензоксазолил, бензотиенил, хинуклидинил, хинолинил, хинолинил-N-оксид, тетрагидроизохинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензопиранил, индолизинил, бензофурил, хромонил, кумаринил, циннолинил, хиноксалинил, индазолил, пирролопиридил, фуропиридинил (такой как фуро[2,3-с]пиридинил, фуро[3,1-b]пиридинил] или фуро[2,3-b]пиридинил), дигидроизоиндолил, дигидрохиназолинил (такой как 3,4-дигидро-4-оксо-хиназолинил), бензизотиазолил, бензизоксазолил, бензодиазинил, бензофуразанил, бензотиопиранил, бензотриазолил, бензопиразолил, дигидробензофурил, дигидробензотиенил, дигидробензотиопиранил, дигидробензотиопиранилсульфон, дигидробензопиранил, индолинил, изохроманил, изоиндолинил, нафтиридинил, фталазинил, пиперонил, пуринил, пиридопиридил, хиназолинил, тетрагидрохинолинил, тиенофурил, тиенопиридил, тиенотиенил и тому подобное.

Примеры заместителей для определений "гетероцикл," "гетероциклический" и "гетероцикло" включают один или более алкил или замещенные алкильные группы, как описано выше, или одну или более групп, описанных выше, как алкил или замещенные алкильные заместители. Также они включают небольшие гетероциклы, такие как эпоксиды и азиридины.

Определение "алканоил" относится к -С(O)-алкилу.

Определение "замещенный алканоил" относится к -С(O)-замещенному алкилу.

Определение "ароил" относится к -С(O)-арилу.

Определение "замещенный ароил" относится к -С(O)-замещенному арилу.

Определение "триалкилсилил" относится к -Si(алкилу)₃.

Определение "арилдиалкилсилил" относится к -Si(алкил)₂ (арилу).

Определение "диарил алкилсилил" относится к -Si(арил)₂ (алкилу).

Определение "гетероатомы" будет включать кислород, серу и азот.

Определение "галоген" или "гало" относится ко фтору, хлору, брому и иоду.

Соединения, имеющие формулы с I по IV, могут образовывать соли со щелочными металлами, такими как натрий, калий, литий, со щелочно-земельными металлами, такими как кальций и магний, с органическими основаниями, такими как дициклогексиламин и трибутиламин, с пиридином и аминокислотами, такими как аргинин, лизин и тому подобное. Такие соли могут быть получены, например, путем замены протонов карбоновых кислот, если они содержат карбоновую кислоту, у соединений, имеющих формулы с I по IV, на желаемый ион в среде, в которой соль выпадает в осадок или в водной среде, с последующим упариванием. Как известно специалисту в этой области, могут быть образованы и другие соли.

Соединения, имеющие формулы с I по IV, образуют соли с различными органическими и неорганическими кислотами. Указанные соли включают такие соли, которые образованы с помощью хлористого водорода, бромистого водорода, метансульфокислоты, гидроксиэтансульфокислоты, серной кислоты, уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, малеиновой кислоты, бензолсульфокислоты, толуолсульфокислоты и различных других кислот (например, нитраты, фосфаты, бораты, тартраты, цитраты, сукцинаты, бензоаты, аскорбаты, салицилаты и тому подобное). Такие соли образуются при взаимодействии соединений, имеющих формулы с I по IV, с эквивалентным количеством кислоты в среде, в которой соль выпадает в осадок или в водной среде, с последующим упариванием.

Кроме того, цвиттерионы ("внутренние соли ") могут быть также образованы и они включаются в определение соли, используемое в описании.

Пролекарства и сольваты соединений, имеющих формулы с I по IV, также включены в изобретение. Определение пролекарство, как оно использовано в описании, подразумевает соединение, которое при введении его пациенту, претерпевает химическое превращение путем метаболических или химических процессов с образованием соединений, имеющих формулы с I по IV, их солей и/или сольватов. Например, соединения формул с I по IV могут образовать молекулу сложного эфира карбоновой кислоты. Сложные эфиры карбоновых кислот обычно образуются путем этерификации любых функциональных групп карбоновой кислоты, находящихся на раскрытой(ых) кольцевой(ых) структуре(ах). Предпочтительными сольватами соединений, имеющих формулы с I по IV, являются гидраты.

Различные формы пролекарств хорошо известны из уровня техники. Примеры таких пролекарственных производных раскрыты в следующих ссылках:

a) Design of Prodrugs, H. Bundgaard (editor), Elsevier (1985);

b) Methods in Enzymology, K. Widder et al. (еДиtors). Academic Press, Vol. 42, 309-396 (1985);

c) A Textbook of Drug Design and Development, Krosgaard-Larsen и H.Bundgaard (eДиtors), Chapter 5, "Design и Application of Prodrugs," 113-191(1991);

d) H.Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

e) H.Bundgaard, J. of Pharm. Sciences, 77, 285 (1988) и

f) N.Kakeya et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984).

Соединения по изобретению могут существовать в виде различных оптических, геометрических и стереоизомеров. Поскольку соединения, представленные в описании, определены для одной оптической ориентации, подразумевается, что все изомеры и их смеси включаются в настоящее изобретение.

Применение и использование

Соединения по изобретению являются стабилизирующими агентами для микроканальцев. Таким образом, они пригодны для лечения разнообразных раковых образований и других, связанных с пролиферацией, заболеваний, включая, но, не ограничиваясь, следующими:

карциному, включая карциному мочевого пузыря, груди, толстой кишки, почки, печени, легкого, яичника, поджелудочной железы, желудка, шеи, щитовидной железы и кожи; включая сквамозную клеточную карциному;

гемопоэтические опухоли лимфоидного происхождения, включая лейкемию, острую лимфоцитарную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, В-клеточную саркому, Т-клеточную саркому, (Hodgkins) лимфому Ходгкинса, нелимфому Ходгкинса, волосяную лимфому клетки и лимфому Беркитта;

гемопоэтические спинно-мозговые опухоли, включая острые и хронические миелопоэзные лейкемии и промиелоцитную лейкемию;

опухоли мезенхимного происхождения, включая фибросаркому и рабдомиосаркому;

другие опухоли, включая меланому, семиному, тетратокарциному, нейробластому и глиому;

опухоли центральной и периферийной нервной системы, включая астроцитому, нейробластомы, глиомы и невриному;

опухоли мезенхимного происхождения, включая фибросаркому, рабдомиосаркому, и остеогенной саркомы;

другие опухоли, включая меланому, ксенодермальный хроматобласт, кератоакантому, семиному, фолликулярную опухоль щитовидной железы и тератокарциному.

Соединения по настоящему изобретению также ингибируют развитие кровеносных сосудов, таким образом, воздействуя на рост опухолей и обеспечивая лечение опухолей и связанных с опухолями заболеваний. Такие антиангиогензивные свойства соединений, имеющих формулы с I по IV, будут также полезны при лечении других заболеваний, отвечающих на действие антиангиогензивных средств, включая, но не ограничиваясь этим, некоторые формы слепоты, связанной с сетчаточной васкуляризацией, артрит, особенно воспалительный артрит, многократный склероз, рестинозис и псориаз.

Соединения по изобретению стимулируют или ингибируют апоптоз, физиологический процесс смерти клетки, критический для нормального развития и гомеостаза.

Изменение путей апоптоза вносит вклад в патогенез различных заболеваний человека. Соединения, имеющие формулы с I по IV, как модуляторы апоптоза, будут полезны при лечении разнообразных заболеваний человека с отклонениями в апоптозе, включая, но не ограничиваясь, раковые и предраковые повреждения, иммуннозависимые болезни, вирусные инфекции, перерождение скелетно-мускульной системы и почечные заболевания.

Соединения по изобретению могут также использоваться для лечения других болезней, отличных от раковых или пролиферативных. Такие заболевания включают, но не ограничиваются, вирусными инфекциями типа вируса герпеса, покс-вируса, вируса Эпштейн-Барра, вируса Синдбиса и аденовируса; аутоиммунными болезнями типа системной волчанки, эритомитоза, иммунного гломерулонефрита, ревматоидного артрита, псориаза, воспалительных болезней кишки и аутоиммунного сахарного диабета;

нейродегенеративные болезни типа болезни Альцгеймера, ВИЧ-связанной деменции, Болезни Паркинсона, амиотрофического латерального склероза, пигментозного ретинита, спинно-мышечной атрофии и церебрального вырождения; СПИДа;

лейкоцитоз костного мозга; апластическую анемию; ишемическое повреждение, связанное с инфарктом миокарда; реперфузионное повреждение; рестеноз; аритмию;

атеросклероз; вызываемые токсином или спиртом болезни печени; гематологические болезни типа хронической анемии и апластической анемии; дегенеративные болезни скелетно-мышечной системы типа остеопороза и артрита; аспирин-чувствительный риносинусит; муковисцедоз; многократный склероз; почечные болезни; раковая боль.

Настоящее изобретение таким образом предусматривает способ лечения пациента, предпочтительно млекопитающих животных и в особенности людей, нуждающихся в лечении любого из вышеупомянутых заболеваний, особенно раковых или других пролиферативных заболеваний, включающий стадию введения пациенту, нуждающемуся в этом, по крайней мере одного соединения, имеющего формулу с I по IV, взятого в количестве, эффективном для лечения. Другие терапевтические средства, такие как те, что описаны ниже, могут использоваться вместе с предлагаемыми соединениями в предлагаемом способе. В способе по настоящему изобретению такое другое терапевтическое средство(а) может вводиться до, одновременно с или после введения соединения(й) по изобретению.

Эффективное количество соединения по изобретению может быть определено специалистом в данной области и включает примерные дозировочные количества для человека, составляющие приблизительно от 0,05 до 200 мг/кг/день, которые могут вводиться в виде одноразовой дозы или в виде отдельных раздельных доз, количество которых составляет от 1 до 4 раз в день. Предпочтительно соединения вводят в дозировке менее чем 100 мг/кг/день, одной дозой или в виде разделенных доз, от 2 до 4. Понятно, что определенный дозировочный уровень и частота дозировок для любого конкретного пациента может быть изменена и будет зависеть от разнообразных факторов, включая активность конкретного соединения, метаболическую стабильность и продолжительность действия этого соединения, рода, возраста, веса тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента, способа и времени введения, степени выделения, комбинации лекарственных средств и серьезности конкретного заболевания. Предпочтительными пациентами для лечения являются животные, наиболее предпочтителен род млекопитающих, таких как человек и домашние животные типа собак, кошек и т.п., подверженные вышеупомянутым болезням.

Существующее изобретение также предусматривает фармацевтическую композицию, включающую по крайней мере одно из соединений, имеющих формулы с I по IV, способное к лечению раковых и других пролиферативных заболеваний, взятое в эффективном для этого количестве, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Композиции по настоящему изобретению могут содержать другие терапевтические агенты, как описано ниже, и могут быть составлены, например, с использованием обычных твердых или жидких растворителей или разбавителей, также как фармацевтических добавок такого типа, который соответствует способу желательного введения (например, наполнителей, связующих, консервантов, стабилизаторов, отдушек и т.д.) согласно технологии, известной специалистам в этой области или принятой для фармацевтической практики.

Соединения, имеющие формулы с I по IV, могут быть введены любым подходящим способом, например перорально, в форме таблеток, капсул, гранул или порошков; подъязычно; буккально; парентерально, а именно подкожно, внутривенно, внутримышечно, или надчревным введением, или путем вливания (например, в виде стерильно впрыскиваемых водных или неводных растворов или суспензий); назально, а именно путем ингаляционного распыления; местно, в форме кремов или мази; ректально в форме свеч; в виде дозированных форм, содержащих нетоксичные, фармацевтически приемлемые растворители или разбавители. Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут, например, вводиться в форме, подходящей для их немедленного или пролонгированного выделения. Немедленное или пролонгированное выделение может быть достигнуто при помощи подходящих фармацевтических составов, включающих соединения по настоящему изобретению, или, особенно в случае пролонгированного выделения, путем использования устройств, таких как подкожные капиллярные трубки или осмотические насосы. Соединения по настоящему изобретению могут также вводиться липосомально. Например, активное вещество может быть использовано в составе композиции таблетки, капсулы, раствора или суспензии, содержащей приблизительно от 5 до приблизительно 500 мг на единицу дозировки соединения или смеси соединений, имеющих формулы с I по II, или в случае местного применения (от 0,01 до 5% по массе соединения, имеющего формулу с I по II, при применении от одного до пяти раз в день). Соединения могут быть скомпонованы обычным способом с физиологически приемлемым растворителем или носителем, наполнителем, связующим, консервантом, стабилизатором, отдушкой и т.д., или с носителем для местного нанесения. Соединения, имеющие формулы с I по IV, могут также быть включены в такие композиции, как стерильные растворы или суспензии для парентерального введения. Приблизительно от 0,1 до 500 мг соединения, имеющего формулу с I по IV, может быть скомпоновано с физиологически приемлемым переносчиком-растворителем, носителем, наполнителем, консервантом, связующим, стабилизатором и т.д. в единичной дозе в соответствии с принятой фармацевтической практикой. Количество активного вещества в этих композициях или составах предпочтительно такое, что при этом получается подходящая дозировка в обозначенном диапазоне.

Примеры композиций для перорального приема включают суспензии, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу для придания объема, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспензирующего агента, метилцеллюлозу для придания вязкости и подсластители или отдушки, известные в этой области; немедленно разлагающиеся таблетки, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу, дикальцийфосфат, крахмал, стеарат магния, и/или лактозу, и/или другие наполнители, связующие, загустители, разрыхлители, разбавители и смазки, известные в этой области. Отлитые таблетки, прессованные таблетки или высушенные замораживанием таблетки, представляют собой примеры форм, которые могут быть использованы. Примеры композиций включают те составы, в которых соединения по настоящему изобретению вводят с быстро растворимыми разбавителями, такими как маннитол, лактоза, сахароза и/или циклодекстрины. Также в такие составы могут быть введены высокомолекулярные эксипиенты типа целлюлоз (avicel) или полиэтиленгликолей (PEG). Такие составы могут также включать эксипиент с целью создания адгезии к слизистой оболочке, такой как гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), натрийкарбоксиметилцеллюлоза (SCMC), сополимер малеинового ангидрида (например, Gantrez), и агенты для контролирования выделения, такие как полиакриловый сополимер (например, Carbopol 934). Смазки, смазочные масла, отдушки, красители и стабилизаторы могут также быть добавлены для простоты изготовления и использования.

Примеры композиций для назального аэрозоля или ингаляции включают физиологические растворы, которые могут содержать, например, бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, поглотительные промоторы для увеличения биоактивности и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие агенты, известные в этой области.

Примеры композиций для парентерального введения включают впрыскиваемые растворы или суспензии, которые могут содержать, например, подходящие нетоксичные, парентерально приемлемые разбавители или растворители типа кремофора, маннитола, 1,3-бутандиола, воды, раствора Рингера, изотонического раствора хлорида натрия или другие подходящие диспергирующие, или смачивающие, или суспедирующие агенты, включая синтетические моно- или диглицериды и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту.

Примеры композиций для ректального введения включают свечи, которые могут содержать, например, подходящий нераздражающий наполнитель типа масла какао, синтетических сложных эфиров глицерина или полиэтиленгликолей, которые являются твердыми при обычной температуре, но жидкими и/или растворяются в ректальной полости, с выделением лекарственного средства.

Примеры композиций для местного нанесения включают носители для местного нанесения такие как Plastibase (минеральное масло в виде геля с полиэтиленом). Например, композиции по изобретению могут наноситься местно при лечении бляшек, связанных с псориазом, и в этом случае они могут быть составлены в форме крема или мази.

Соединения по изобретению могут вводиться как сами по себе, так и в комбинации с другим противоопухолевыми и цитотоксическими агентами и лекарствами, полезными при лечении раковых или других пролиферативных болезней. Особенно полезны комбинации противоопухолевых и цитотоксических лекарственных средств, в которых выбранное второе лекарственное средство действует отличным образом или на другой фазе клеточного цикла, например S-фазе, чем соединения, имеющие формулы с I по IV, которые оказывают свое воздействие на G₂-M-фазе. Примеры классов таких противоопухолевых и цитотоксических средств включают, но не ограничивают алкилирующие агенты типа азотсодержащих ипритов, алкилсульфонаты, нитрозомочевины, этиленимины и триазены; антиметаболиты типа фолитных антагонистов, аналогов пурина и аналогов пиримидина; антибиотики типа антрациклинов, блеомицинов, митомицина, дактиномицина и пликамицина; ферменты типа L-аспарагиназы; ингибиторов фарнезил-белковой трансферазы; гормональные агенты типа глюкокортикоидов, эстрогенов/антиэстрогенов, андрогенов/антиандрогенов, прогестины, и лютеинизирующего гормона- высвобождающих гормон антагонистов, октреотид ацетата; микроканальцевые разрушающие агенты типа эктаинасцидинов или их аналоги и производные; микрокапсулярно-стабилизирующие агенты типа паклитаксола (Taxol®), доцетаксола (Taxotere®), и эпотилонов A-F или их аналогов или производных; продукты, выделенные из растений типа винкаалкалоидов, эпиподофиллотоксинов, таксанов; и ингибиторы топоизомеразы; ингибиторы пренилпротеин трансферазы; и разные агенты типа гидроксимочевина, прокарбазин, митотан, гексаметилмеламин, координационные комплексы платины типа цисплатины или карбоплатины; и другие средства, используемые в качестве противоопухолевых и цитотоксических средств как биологические модификаторы реакций, факторы роста; иммуномодуляторы и моноклональные антитела. Соединения по настоящему изобретению могут также использоваться в комбинации с лучевой терапией.

Характерные примеры таких классов противоопухолевых и цитотоксических средств включают, но не ограничивают, мечлоретамина гидрохлорид, циклофосфамид, хлорамбуцил, мелфалан, ифосфамид, бусулфан, кармустин, ломустин, семустин, стрептозоцин, тиотепа, дакарбозин, метотрексат, тиогуанин, меркаптопурин, флударабин, пентастатин, кладрибин, цитарабин, фторурацил, доксорубицина гидрохлорид, даунорубицин, идарубицин, блеомицин сульфат, митомицин С, актиномицин D, сафрацины, сатрамицины, хинокарцины, дискодермолидины, винкристин, винбластин, винорелбина тартрат, этопозид, тенипозид, паклитаксол, тамоксифен, эстрамустин, эстрамустин фосфат натрия, флутамид, бусерилин, леупролид, птеридины, динезины, левамисол, афлакон, интерферон, интерлейкины, алдеслейкин, филграстим, саграмостин, ритуксимаб, BCG, третиноин, иринотекан гидрохлорид, бэтаметазон, гемситабин гидрохлорид, альтретамин и топотека, а также их любые аналоги и производные.

Предпочтительные члены этих классов включают, не ограничивая, паклитаксол, цисплатину, карбоплатину, доксорубицин, карминомицин, даунорубицин, аминоптерин, метотрексат, метоптерин, митомицин С, эктейнасцидин 743, порфиромицин, 5-фторурацил, 6-меркаптопурин, гемцитабин, цитозин арабинозид, подофиллотоксин или производные подофиллотоксина типа этопозида, этопозида фосфат или тенипозида, мелфалана, винбластина, винкристина, леуорозидина, виндезина и леурозина.

Примеры противоопухолевых и других цитотоксических агентов включают следующие: производные эпотилона, описанные в патенте Германии №4138042.8; WO 97/19086, WO 98/22461, WO 98/25929, WO 98/38192, WO 99/01124, WO 99/02224, WO 99/02514, WO 99/03848, WO 99/07692, WO 99/27890, WO 99/28324, WO 99/43653, WO 99/54330, WO 99/54318, WO 99/54319, WO 99/65913, WO 99/67252, WO 99/67253 и WO 00/00485; ингибиторы циклин-зависимой киназы - в WO 99/24416; ингибиторы пренил-протеиновой трансферты - в WO 97/30992 и WO 98/54966.

Комбинации в соответствии с настоящим изобретением могут также быть составлены или введены совместно с другими терапевтическими средствами, которые отобраны благодаря их исключительной полезности при проведении терапевтического лечения вышеупомянутых заболеваний. Например, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть объединены со средствами, предотвращающими тошноту, аллергию и желудочное раздражение, типа противорвотных средств и H₁ и Н₂ антигистаминных средств.

Вышеупомянутые терапевтические средства, в случае когда их используют в комбинации с соединениями по настоящему изобретению, могут использоваться в тех количествах, которые приведены в Physicians’ Desk Reference (PDR) или могут быть определены специалистом в этой области.

Общие способы получения

(А) Производные эпотилона, имеющие формулы с I по III

Настоящее изобретение направлено на получение производных эпотилона Ia, Ib, IIа, IIb и III, в которых атомы водорода С-21 метильной группы замещены частично или полностью другими группами с G¹ по G¹¹. R может быть водородом или метилом, P-Q является С, С двойной связью или эпоксидом.

Следующая общая формула демонстрирует остаток эпотилона, включающий -СН=группы по 17 положению (С 17 атом углерода), где формулы Iа, Ib, IIа, IIb и III относятся к соединениям, содержащим указанный остаток эпотилона плюс один из заместителей, показанных в комбинации с обозначениями этих соединений Iа, Ib, IIа, IIb и III.

G¹=Н, галоген, CN, алкил, замещенный алкил;

G²=Н, алкил, замещенный алкил;

G³=О, S, NZ¹

G⁴=Н, алкил, замещенный алкил, OZ², NZ²Z³, Z²C=O, Z⁴SO₂, необязательно замещенный гликозил;

G⁵=галоген, N₃, NCS, SH, CN, NC, N(Z¹)₃ ⁺, гетероарил;

G⁶=Н, алкил, замещенный алкил, СF₃, OZ⁵, SZ⁵, NZ⁵Z⁶;

G⁷=CZ⁷, N;

G⁸=Н, галоген, алкил, замещенный алкил, OZ¹⁰, SZ¹⁰, NZ¹⁰Z¹¹;

G⁹=О, S, -NH-NH-, -N=N-;

G¹⁰=N,CZ¹²;

G¹¹=H₂N, замещенный H₂N, алкил, замещенный алкил, арил, замещенный арил;

Z¹=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил;

Z²=Н, алкил, замещенный алкил, арил, замещенный арил, гетероцикл;

Z³=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил, арил, замещенный арил;

Z⁴=алкил, замещенный алкил, арил, замещенный арил, гетероцикл;

Z⁵=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил, арил, замещенный арил;

Z⁶=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил;

Z⁷=Н, галоген, алкил, замещенный алкил, арил, замещенный арил, OZ⁸, SZ⁸, NZ⁸Z⁹;

Z⁸=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил, арил, замещенный арил;

Z⁹=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил;

Z¹⁰=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил, арил, замещенный арил;

Z¹¹=Н, алкил, замещенный алкил, ацил, замещенный ацил;

Z¹²=Н, галоген, алкил, замещенный алкил, арил, замещенный арил.

Соединения по изобретению могут быть получены из тех соединений и в соответствии с теми общими методиками, которые описаны на схемах с 1 по 8. Все заместители имеют значения, определенные на приведенных схемах или приведенные ранее.

Исходя из незащищенного 3,7-гидрокси или, например, TMS-защищенных эпотилонов А-С (1), 21-гидроксиэпотилоны (4) могут быть синтезированы из N-оксидов (2), получение которых описано в WO 98/38192 и включено в данную схему как часть цепочки (схема 1). N-Оксиды (2) взаимодействуют с галогенангидридами кислот и основаниями, предпочтительно галогенангидридами п-толуолсульфокислоты и 2,6-лутидином, с образованием 21-галогенэпотилонов (3). Дезоксигенирование эпоксидов (4) в соответствии с известными методиками приводит к 21-гидроксиэпотилонам С и D (5).

Альтернативно, (4) и (5) могут быть синтезированы путем биотрансформирования (21-гидроксилирование) эпотилонов A-D с помощью, например, Sorangium cellulosum штаммов, как описано в WO 98/22461, или Actinomyces sp. штамма 15847, как описано в PCT/US99/27954, которые включены в виде ссылок как часть цепочки. 3,7-ОН защищенный или незащищенный эпотилон 3, 4, 5 (схема 1) (см, например, WO 97/19086) используют в дальнейшем для получения производных структурных формул типа I-III.

Схема 2

Схема 2 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не была включена в реакционный процесс, в соответствии с иллюстрацией).

a) Соединения 3 и 7 могут быть получены из соединений 4 или 5 путем i) активации, например, с помощью TosHal/пиридина с последующим ii) нуклеофильным замещением галоидными анионами (соединение 3) N₃, N=C=S, CN, NC или SH анионами (соединение 7) на ОН; NaN₃ используют, например, для введения N₃ и AgCN, например, для введения изонитрильной группы.

b) Соединение 6 может быть получено из соединения 4 или 5, соединение 8 из соединения 3 или 7 (X=SH) и соединение 10 из соединения 9 путем взаимодействия исходного соединения с реагентом формулы R¹Hal в присутствии основания, где R¹ может быть необязательно замещенным алкилом, ацилом, необязательно замещенным арилсульфонилом или необязательно замещенным гликозилом в случае получения соединения (6), алкилом или ацилом в случае получения соединения (8) или (10). Если соединение 9 взаимодействует с реагентами формулы R¹Hal и R²Рal (R¹ и R²=алкил или ацил), то получают соединение 11, и если соединение 9 взаимодействует с реагентами формулы R¹Hal, R²Hal и R³Hal (R¹, R² и R³=алкил), то получают соединение 12.

с) Соединение 9 может быть получено из соединения 7 при Х=N₃ путем i) восстановления, например, с помощью H₂ и катализатора Линдлара (Lindlar catalyst)/EtOH или ii) фосфинами, например РМе₃, а затем водным NН₃.

Схема 3

Схема 3 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу в положении 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе).

а) Соединение 2 может быть получено при взаимодействии соединения 1 с агентом оксигенирования, таким как м-хлорпербензойная кислота.

b) и с) Соединение 4 может быть получено при взаимодействии соединения 2 с (b) ацилирующей системой, содержащей, например (b) (СF₃СО)₂O/2,6-лутидин, а затем (с) СН₃ОН/NН₃ (вод).

d) Соединение 7 может быть получено при взаимодействии соединения 4 с дифенилфосфорилазидом (DРРА)/диазабициклоундеценом (DBU).

e) Соединение 9 (P-Q=эпоксид) может быть получено путем восстановления соединения 7 фосфином, например РМЕ₃, а затем NH₃ (вод).

f) Соединение 10 с P-Q=эпоксидом может быть получено взаимодействием соединения 9 с (t-BuOCO)₂О/NEt₃.

g) Соединение 10 с P-Q=С=С двойная связь может быть получено восстановлением соединения 10 с P-Q=эпоксиду с помощью WCl₆/н-BuLi.

h) Соединение 9 (P-Q=двойная связь) может быть получено снятием защиты с соединения 10 с P-Q=С=С двойная связь и R¹=t-BuOCO, используя трифторуксусную кислоту (TFA).

Схема 4

Схема 4 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе):

a) Соединение 6 может быть получено из соединения 4 путем ацилирования в присутствии п-тозилхлорид/основание Ханига (Hunig base).

b) Соединение 7 с неизменным эпоксидом может быть получено из соединения 6 путем замещения с помощью цианида, например KCN/18-краун-6.

c) Соединение 7 с P-Q=С=С двойной связи может быть получено из соединения 7 с P-Q=эпоксидом путем восстановления с использованием WCl₆/н-BuLi.

d) Соединение 7 с неизменным эпоксидом может быть получено из соединения 6 путем замещения с помощью имидазола в присутствии основания, например К₂СО₃.

Схема 5

Схема 5 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе):

a) Соединение 13 может быть получено путем окисления соединения 4 или 5 с помощью, например, МnO₂.

b) Соединение 14 может быть получено путем взаимодействия соединения 13 с CH₂N₂.

c) Соединение 15 может быть получено путем введения соединения 13 в реакцию типа реакции Виттига (Wittig).

d) Соединение 16 может быть получено путем обработки соединения 13 реакционной системой, содержащей СrСl₂ и СННаl₃.

e) Соединение 17 может быть получено путем взаимодействия соединения 16 с BuLi и RHal (R=Н, алкил или ацил).

f) Соединение 18 может быть получено путем взаимодействия соединения 13 с CH₂N₂ для 18 (R=Н на С21 заместителе) или Me₂SOCHR для 18 (R=Н, алкил).

g) Соединение 19 может быть получено путем взаимодействия соединения 13 с R²MgHal или R²Li (R²=алкил).

h) Соединение 20 может быть получено путем окисления соединения 19, например, с помощью МnO₂.

i) Соединение 21 может быть получено путем взаимодействия соединения 20 с R¹MgHal или R¹Li (R¹=алкил).

k) Соединения 22а, 22b или 22с могут быть получены путем взаимодействия соединения 13 с H₂NR, где R=OR¹ и R¹=водород, алкил или арил для соединения (22а); R=N(R²)₂ и R²=водород, алкил или ацил для соединения (22b) и R=алкил или арил для соединения 22с.

l) Соединение 23 может быть получено путем взаимодействия соединения 13 с источником CN, например HCN.

m) Соединения 10 и 11 могут быть получены путем восстановительного аминирования 13 с помощью HNR¹R², например NaBH₃CN, где R¹ и R²=Н, алкил.

Схема 6

Схема 6 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе):

a) Соединение 24 может быть получено путем окисления соединения 13 с помощью, например, Ag₂O в ТГФ/воде (соотношение ТГФ/вода, например, 9:1).

b) Соединение 25 может быть получено путем метилирования соединения 24 с помощью, например, CH₂N₂ в этилацетате.

c) Соединение 26 может быть получено путем взаимодействия соединения 25 с избытком R¹MgHal или R¹Li (R¹=алкил).

d) Соединение 27 может быть получено путем ацилирования соединения 26 с помощью R²Hal (R²=ацил) в присутствии основания, например DMAP.

e) Соединение 28 может быть получено путем первого активирования карбоксильной группы в 24 с помощью, например, этилхлорформиата/NEt₃ и второй реакции с R¹NH₂ (R¹=водород, алкил или арил) в ТГФ.

f) Соединение 29 может быть получено путем дегидрирования соединения 28 (R¹=водород) с помощью, например, POCl₃/NEt₃.

Схема 7

Схема 7 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе):

a) Соединение 31 (R³=ацил) может быть получено путем взаимодействия соединения 19 или 21 с активированным производным карбоновой кислоты, например RCOHal (R³=RCO) в присутствии основания.

b) Соединение 20 может быть получено окислением соединения 19 (R¹=водород, R²=алкил), например, с помощью МnO₂.

c) Соединение 34 может быть получено путем конденсации соединения 20 с H₂NR³ (R³=водород, алкил, арил OR или NRR⁴ с R и R⁴=алкил, арил).

d) Соединение 35 может быть получено путем взаимодействия соединения 34 (R³=алкил, арил) с R¹MgHal или R²Li (R¹ и R²=алкил).

e) Соединение 32 может быть получено путем взаимодействия соединения 20 (R²=СF₃) с i) H₂NOpTos и ii) NH₃ (жид.).

f) Соединение 36 может быть получено путем введения соединения 20 в реакцию восстановительного аминирования.

g) Соединение 38 может быть получено путем алкилирования или ацилирования соединения 35 с помощью R⁵Hal (R⁵=алкил или ацил) в присутствии основания.

h) Соединение 33 может быть получено путем окисления соединения 32 с помощью, например, Ag₂O.

i) Соединение 37 может быть получено путем алкилирования или ацилирования соединения 36 с помощью R³Hal (R³=алкил или ацил) в присутствии основания.

(В) Производное эпотилона IV

Кроме того, изобретение направлено на получение производных эпотилона IV, имеющих следующую формулу IV, где символы имеют следующие обозначения:

P-Q представляет собой С, С двойную связь или эпоксид,

R представляет собой атом Н или метильную группу и

G¹¹ является группой H₂N, замещенной H₂N группой, алкильной группой, замещенной алкильной группой, арильной группой, замещенной арильной группой.

Получение и перегруппировка N-ацилэпотилон-N-оксидов

Получение эпотилон-N-оксидов (2) (P-Q=эпоксид) и их перегруппировка в 21-ацилоксиэпотилон следующей формулы 6 описано в WO 98/38192, полный текст которого входит в описание в качестве ссылки.

6 R¹=алкил, ацил, (замещен) алкил, (замещен) арилсульфонил, (замещен) глюкозил

Схема 8

Схема 8 может быть проиллюстрирована следующим образом (отщепленный остаток эпотилона, включающий -СН=группу по положению 17 означает, что эта часть молекулы не участвует в иллюстрируемом реакционном процессе).

P-Q представляет эпоксид или С, С двойную связь, R является водородом или метильной группой.

a) Соединения 3 и 6 могут быть получены путем взаимодействия соединения 2 с R¹SO₂Cl в присутствии основания (R¹ = необязательно замещенный алкил или необязательно замещенный арил).

b) Соединения 6 и IVa/b могут быть получены путем взаимодействия соединения 2 с производным активированной карбоновой кислоты, например ангидридом карбоновой кислоты.

c) Соединение 4 может быть получено путем взаимодействия соединения IVa/b с нуклеофилом NuH или Nu^-.

Эфиры 6 используют в качестве промежуточных продуктов для получения большого числа эпотилонов, которые в дальнейшем модифицируют по положению С-21.

Например, если 2 реагирует, например, с уксусным ангидридом, через небольшой период времени может образоваться новое неожиданное промежуточное соединение IV, в то время как IV полностью трансформируется в соединение 6 через длительный период времени. Если реакцию прервать в определенной точке времени, соединение IV может быть выделено хроматографически в виде двух диастереоизомеров IVa и IVb.

Соединения типа IV не были ранее описаны. Их структура с очевидностью может быть установлена, исходя из спектроскопических данных и последующих реакций.

Для препаративных целей особенно важной является их реакция с нуклеофилами, приводящая к С-21 замещенным эпотилонам 6; Nu=например углерод-, азот-, кислород-, сера- и галогензаместители.

Следующие не ограничивающие область изобретения примеры служат в качестве иллюстрации.

Пример 1

Превращение эпотилона В в эпотилон F

(i) 1,98 г (3,90 ммоль) эпотилона В помещают в атмосферу аргона и растворяют в 60 мл сухого СН₂Сl₂. К этому раствору добавляют 0,720 г mСРВА (4,17 ммоль, 1,07 эквивалента).

Смесь перемешивают при 25°С 5,5 часов. Затем реакционную массу гасят с помощью 60 мл NaHCO₃ и экстрагируют 3×75 мл СНСl₃. Органическую фазу промывают 100 мл воды, затем 70 мл 5% Na₂SO₃ (вод) и 70 мл рассола. Органическую фазу сушат над Na₂SO₄. Сырой реакционный продукт хроматографируют, используя силикагель и элюирование с помощью 2% МеОН в СНСl₃ с выходом 0,976 г N-оксида (48%) в виде белого пушистого твердого вещества.

(ii) В герметичную трубку, заполненную аргоном, добавляют 0,976 г N-оксида (1,86 ммоль), растворенного в 35 мл сухого CH₂Cl₂, 2,6-лутидин (1,73 мл, 14,88 ммоль, 8 эквивалентов) и (СF₃СO)₂О (1,84 мл, 13,02 ммоль, 7 эквивалентов). Трубку герметизируют и нагревают при 70°С 25 минут. Затем смеси дают охладиться и растворитель удаляют в токе аргона, а затем концентрируют в вакууме до того, как останется несколько миллилитров темно-желтого раствора. Реакцию разбавляют 25 мл СН₃ОН и добавляют 2,9 мл 28% NH₄OH (вод). Смесь нагревают до 45°С 20 мин, затем охлаждают до комнатной температуры. Сырой продукт концентрируют на роторном испарителе и хроматографируют, используя элюирование с силикагеля с помощью 4% СН₃ОН в СНСl₃ с выходом 0,815 г эпотилона F (84%).

Пример 2

Синтез 21-азидо-эпотилонов 7

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Азидометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=СН₃, G¹=G²=Н, G⁵=N₃ в формуле Ib)

К перемешиваемому раствору эпотилона F из приведенного выше примера 1 (957 мг, 1,83 ммоль) в 20,0 мл тетрагидрофурана при 0°С в атмосфере аргона добавляют 0,47 мл дифенилфосфорилазида (604 мг, 2,19 ммоль, 1,2 эквивалента). Смесь перемешивают приблизительно 3 минуты, а затем добавляют 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундек-7-ен (0,27 мл, 278 мг, 1,83 ммоль, 1 эквивалент) и смесь перемешивают при 0°С. Через 2 часа смесь нагревают до 25°С, после чего перемешивают еще 20 часов. Затем реакционную массу разбавляют 150 мл этилацетата и промывают 50 мл Н₂О. Водный слой экстрагируют 35 мл этилацетата. Объединенные органические слои сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой продукт хроматографируют, используя элюирование с силикагеля 50% этилацетатом в гексане с получением 913 мг (91%) 21-азидо-эпотилона В в виде прозрачного, бесцветного масла.

MS (ESI⁺):

549,3 (М+Н)⁺; ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=6,59 (широкий с, 17-Н), 7,04 (с, 19-Н), 4,63 (с, 21-Гц); HRMS (DCI); С₂₇Н₄₀N₄O₆S:[М⁺] вычислено 549,2747, найдено 549,2768.

Пример 3

Синтез 21-амино-эпотилонов 9

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=СН₃, G¹=G²=G⁴=Z¹=H, G³=NZ¹ в формуле Ia)

Катализатор Линдлара в количестве 18,0 мг суспендируют в 500 мкл этанола в Н₂ атмосфере и насыщают ее. Затем добавляют 15,9 мг (29,0 мкмоль) 21-азидо-эпотилона В из примера 2, приведенного выше, растворенного в этанольно-метанольной смеси. После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре суспензию фильтруют через целит и промывают этилацетатом. Растворитель удаляют из органической фазы и сушат ее в высоком вакууме. Очистку сырого продукта осуществляют через PSC (растворитель: СН₂Cl₂/метанол 90:10), при этом получают 12,3 мг (81%) 21-амино-эпотилона В и 1 мг (6%) аддукта educt.

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, СDСl₃): δ=6,58 (широкий с, 17Н), 7,05 (с, 19Н), 4,15 (с, 21 Гц); HRMS (DCI); C₂₇H₄₂N₂O₆S: [М+Н⁺] вычислено 522,2764, найдено 522,2772.

Пример 4

Синтез 21-амино-эпотилонов 9 (альтернативный)

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору 21-азидо-эпотилона В (пример 2) (1,070 г, 1,950 ммоль) в 30,0 мл тетрагидрофурана в атмосфере аргона добавляют 0,22 мл триметилфосфина (0,163 г, 2,145 ммоль, 1,1 эквивалент). Затем добавляют Н₂О (5,5 мл) и смесь перемешивают при 25°С. Через 3 часа азид полностью разлагается и к полученной реакционной массе добавляют 3 мл 28% водного NН₄OН (вод) для завершения процесса превращения фосфорилимина в амин. После перемешивания при 25°С в течение 1 часа реакционной массы растворители удаляют под вакуумом. Сырой материал хроматографируют, используя элюирование с силикагеля с помощью 1% Et₃N, 2,5% СН₃ОН в СНСl₃, с выходом 924 мг (91%) 21-амино-эпотилона В в виде белого твердого вещества. MS (ESI⁺):523,3 (М+H)⁺.

Пример 5

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К раствору 21-амино-эпотилона В (126 мг, 0,24 ммоль) в метаноле (4,0 мл) добавляют триэтиламин (67 мкл, 0,48 ммоль, 2 эквивалента) и ди-t-бутилбикарбонат (65 мг, 0,3 ммоль, 1,25 эквивалента). Реакционную смесь перемешивают 2 часа. TLC показывает отсутствие исходного материала. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и хроматографируют на силикагеле с помощью 5% СН₃ОН в СНСl₃ в качестве элюента, чтобы получить 164 мг (100%) 21-амино-эпотилона В в виде белого твердого вещества.

Пример 6

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион

Безводный тетрагидрофуран (3,0 мл) помещают в высушенную в сушильном шкафу колбу в атмосферу аргона и охлаждают до -78°С. В токе аргона к охлажденному тетрагидрофурану добавляют WCl₆ (206 мг, 0,52 ммоль, 2 эквивалента), а затем n-бутилитий (0,650 мл, 1,6 М раствор в гексане, 1,04 ммоль, 4 эквивалента). Реакционную колбу удаляют из охлаждающей до -78°С бани и перемешивают при температуре окружающей среды 15 минут. Затем полученную реакционную массу помещают в баню при 0°С и дополнительно перемешивают 5 минут, прежде чем добавить раствор 21-амино-эпотилона В (высушенный с помощью азеотропной отгонки с толуолом в вакууме в течение ночи) (164 мг, 0,26 ммоль, 1 эквивалент) в тетрагидрофуране (1,5 мл). Реакцию выдерживают при 0°С 45 минут. TLC показывает, что основная часть исходного материала вступила в реакцию. Реакцию гасят насыщенным водным раствором NaHCO₃ (5 мл) и распределяют между насыщенным водным раствором NaHCO₃ (25 мл) и CH₂Cl₂ (50 мл). Водную фазу экстрагируют три раза с помощью CH₂Cl₂. Объединеные органические слои сушат над Na₂SO₄, концентрируют в вакууме и очищают с помощью хроматографии на силикагеле, сначала с 7% СН₃ОН в СНСl₃, а затем во второй раз элюированием с колонки с помощью 50% этилацетата в гексане с получением 65 мг (41%) 21-N-ВОС-амино-эпотилона D. MS (ESI⁺): 605,3 (М+Н)⁺; MS (ESD): 605,3 (М-Н)^-.

Пример 7

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(E)]]-16-[2-[2-(аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион

При 0°С 21-N-ВОС-амино-эпотилон D (98 мг, 0,16 ммоль) обрабатывают предварительно охлажденным раствором 10% трифторуксусной кислоты в СН₂Сl₂ (4,0 мл). Через 40 минут реакционной массе позволяют нагреться до комнатной температуры и после дополнительных 20 минут добавляют неразбавленной трифторуксусной кислоты (0,6 мл). Еще через 50 минут добавляют дополнительное количество (0,5 мл) трифторуксусной кислоты. Реакция завершается на 50% спустя 1,75 часа, после чего растворители удаляют в вакууме. Остаток переносят в этилацетат (50 мл), насыщенный водный NH₄ОН (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушат над Na₂SO₄ и затем хроматографируют, элюируя с силикагеля вначале чистым этилацетатом, а затем 10% СН₃ОН в этилацетате с 1% трифторуксусной кислоты с получением 16,8 мг (38%) желаемого 21-амино-эпотилона D в виде прозрачной пленки вместе с 45 мг 21-N-ВОС-аминоэпотилона D. MS (ESI⁺): 506,3 (М+Н)⁺; MS (ESI^-):504,3 (М-Н)^-.

Примеры синтеза 21-ацилокси-эпотилонов приведены в примерах с 8 по 10.

Пример 8

Пример:

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(пентаноилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=G¹=G²=Н, G³=O, G⁴=Z²O, Z²=н-Bu в формуле Iа)

К раствору 20 мг (39 ммоль) эпотилона A-N-оксида в 100 мкл СН₂Сl₂ добавляют 83,0 мкл (419 ммоль) ангидрида валериановой кислоты и 20,0 мкл (172 ммоль) 2,6-лутидина. Реакционную массу перемешивают 30 минут при 75°С, растворитель удаляют и сушат в высоком вакууме. Очистку сырого продукта осуществляют, используя препаративную HPLC (Nucleosil 100, растворитель: CH₃CN/H₂O 50:50), получая 9 мг (40%) эпотилон-Е-21-валерата.

 ¹H-ЯМР (300 МГц, CDCI₃); δ=6,60 (с, 17-Н), 7,14 (с, 19-Н), 5,35 (с, 21-Н₂), 3,62 (т, 2’-Н₂), 1,6-1,7 (м, 3’-Гц), 1,3-1,4 (м, 4’-Н₂), 0,91 (т, 5’-Н₃). HRMS (EI);

C₃₁H₄₇NO₈S: вычислено 593,3022, найдено 593,3007.

Пример 9

Пример:[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(нафтоилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион(R=G¹=G²=H, G³=O, G⁴=Z²C=O, Z²=нафтил в формуле Ia)

Эпотилон A-N-оксид, 21 мг (41 мкмоль) растворяют 80 мкл CH₂Cl₂ и 10 мкл (86 мкмоль) 2,6-лутидина и добавляют 82,0 мкл (129 ммоль) раствора 2-нафтилоилхлорида (300 мг/мл СН₂Сl₂). Реакционную смесь перемешивают 10 минут при 75°С. Сырую смесь очищают с помощью препаративной HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир/гексан 1:2 с 1% метанолом). Разделение приводит к 8 мг (29%) эпотилона Е-21 нафтоилата.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, СDСI₃); δ=6,64 (с, 17-Н), 7,19 (с, 19-Н), 5,67 (с, 21-Гц), 8,09 (дд, 3’-Н), 7,96 (д, 4’-Н), 7,89 (дд, 5’-Н), 7,89 (дд, 6’-Н), 7,58 (м, 7’-Н), 7,58 (м, 8’-Н), 8,67 (с, 9’-Н); HRMS (DCI): С₃₇Н₄₅NО₃S: [М⁺] вычислено 663.2866, найдено 663.2877.

Пример 10

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-[[(2-метоксиэтокси)ацетилокси]метил]-1-метил-4-тиазолил]этенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1,0]гептадекан-5,9-дион (R=G¹=G²=H, G³=O, G⁴=Z³C=O, Z³=3’,6’-диоксагексил в формуле Ia)

2-(2-Метоксиэтокси)уксусную кислоту, 100 мкл (880 ммоль), растворяют в 1,6 мл ТГФ. Затем добавляют 137,6 мкл (880,0 ммоль) 2,4,6-трихлорбензоилхлорида и 135 мкл (968 ммоль) триэтиламина. Смесь перемешивают 1 час при комнатной температуре, в течение которого образуется бесцветный осадок. Реакционный раствор центрифугируют и добавляют 120 мкл верхнего слоя к раствору 23 мг (45 мкмоль) эпотилона Е в 400 мкл ТГФ. Затем добавляют 8,4 мг (46 мкмоль) диметиламинопиридина и смесь перемешивают 20 минут при комнатной температуре. Очистку сырого продукта осуществляют препаративной HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир/гексан 1:2+2% метанола). Таким образом выделяют 14,7 мг (52%) 21-(3’,6’-диоксагептаноил)-эпотилона Е.

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, СDCI₃): δ=6,60 (широкий с, 17-Н), 7,16 (S, 19-Н), 5,42 (с, 21-Н₂), 4,52 (с, 2’-Н₂), 3,74 (м, 3’-Н₂), 3,58 (м, 4’-H₂), 3,37 (с, 5’-Н₃); HRMS (DCI): C₃₁H₄₇NO₁₀S: [M+H⁺] вычислено 626,2999, найдено 626,2975.

Пример синтеза 21-ациламиноэпотилонов 10 приведен в следующем примере 11.

Пример 11

Пример: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S-11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(N-пропиониламино)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

(R=Н, G¹=G²=Н, G³=NZ¹, Z¹=Н, G⁴=Z²C=O, Z²=Et в формуле 1а)

Триэтиламин, 70 мкл (500 мкмоль), растворяют в 250 мкл абсолютного ТГФ и затем охлаждают до 0°С с помощью льда с водой. Затем к этому раствору добавляют 53 мкл (400 мкмоль) метилхлорформиата. Приблизительно через 5 минут добавляют по каплям 25 мкл (334 ммоль) пропионовой кислоты и смесь перемешивают дополнительно 10-15 минут. Затем реакционную массу нагревают до комнатной температуры и осадок отделяют центрифугированием. После этого добавляют 47 мкл верхнего слоя к раствору 13 мг (26 мкмоль) 11-амино-эпотилона А в 250 мкл абсолютного ТГФ и 5,4 мкл (39,0 мкмоль) триэтиламина. Через 20 минут сырую реакционную смесь очищают с помощью препаративной TLC (растворитель: СH₂Cl₂/CН₃ОН 90:10). Таким образом получают 11,2 мг (76%) 21-амино-эпотилона А-пропионамида.

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, СDCI₃): δ=6,57 (широкий с, 17-Н), 7,07 (с, 19-Н), 2,28 (кв, 2’-Н₂), 1,18(3-Н₃), 6,29 (т, МН);

IR-MS (El): C₂₉H₄₄N₂O₇S: вычислено 564,2869, найдено 564,2854.

Синтез эпотилонов формулы IV и 21-ацилоксиэпотилонов 6 описан в примерах с 12 по 18, приведенных далее.

Производные 6 описаны в DE 19907588.3 и они могут быть получены, как правило, в несколько стадий из 2, в то время как описанный далее процесс соответствует DE 19930111.5, при этом оба источника информации включены в описание в качестве ссылок.

Пример 12

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(3-ацетил-2,3-дигидро-2-метилен-4-тиазолил)-1-[метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион, N-оксид (формула IVa и IVb: R=Н, G¹¹=СН₃)

102 мг (0,2 ммоль) соединения 2 растворяют в 2 мл уксусного ангидрида и нагревают 5 минут до 75°С. Затем реакционную среду концентрируют при 30°С/1 мбар до образования вязкого масла и разделяют на силикагеле Si 60 (растворитель: гексан/метил-t-бутиловый эфир/метанол 66:33:1); дополнительно к 65 мг (41%), элюируют по 17 мг (11%) каждого из IVa и IVb.

IVa: бесцветное масло; DC:R_f=0,66 (дихлорметан/метанол 95:5); УФ (СН₃ОН): λ_max(ε)=203 (13800), 267 (13200), 315 нм (5000); [α]_D ²¹=185,1 (с=0,94 в СНСl₃/МеОН 1:1); ИК (KBr): ν=3446, 2965, 2936, 2877, 1742, 1691 см^-1; ¹Н-ЯМР (СDСl₃): δ=2,43 (дд, J=L4,8, 3,7 Н-2а); 2,53 (дд, 14,8, 10,2, H-2b); 4,13 (м, 3-1); 3,33 (д, J=6,4, 3-ОН); 1,86 (дт, J=15,0, 7,8, 14-1a); 2,08 (м, 14-Hb); 5,39 (дд, J=7,8, 2,2, 15-Н); 6,23 (с широкий, 17-Н); 6,95 (с, 19-Н); 5,18 (с, 21-На); 5,71 (с широкий, 21-Kb); 2,26 (с широкий, 27-Н₃); 2,12 (с, СН₃СО); ¹³C-ЯMP (CDCl₃); δ=73,4 (C-3); 52,8 (C-4); 151,5 (С-16); 116,0 (С-17); 158,0 (С-18); 88,7 (С-19); 166,9 (С-20); 107,2 (С-21); 20,7 (С-22); 170,2, 21,2 (ацетил); HPLC/ESI-MS (ацетонитрил/0,02 М буфер ацетата аммония, рН 7, pos. ионы): м/е 569 [М+NH₄].

IVb: бесцветное масло; DC:R_f=0,69 (условия приведены выше); [α]_D ²¹=119,6 (с=1,1; СНСl₃/МеОН 1:1); ¹Н-ЯМР (СDСl₃): 1,90 (м, 14-На); 2,09 (м, 14-Hb); 5,42 (дд, J=7,8, 2,2, 15-Н); 6,92 (с, 19-Н); 2,23 (с, 27-Н₃); 2,10 (с, СН₃СО); ¹³С-ЯМР (СDСl₃): 150,8 (С-16); 116,5 (С-17); 17,2 (С-27); 170,3, 21,0 (ацетил).

Пример 13

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (6а, R=Н, Nu=ОСН₃)

14 мг (25 мкл) IVa или IVb (R = из примера 12, приведенного выше), нагревают в 1 мл метанола 30 минут до 75°С, концентрируют под вакуумом и отделяют препаративной HPLC (RP-18, CH₃CN/H₂O 1:1). Получают 2,5 мг (19%).

R_f (CH₂Cl₂/MeOH): 0,33.

 ¹Н-ЯМР (СDСl₃): δ=4,71 (с, 21-СН₂), 3,49 (с, 21-ОСН₃);

 ¹³С-ЯМР (CDCl₃): δ=59,1 (ОСН₃); 71,5 (С-21); 167,8 (C-20); DCI-MS (изобутан: m/z=524,2609 [m+Н⁺], для C₂₇H₄₁NO₇S вычислено 524,2604.

Пример 14

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-(феноксиметил)-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

6,6 мг (11,7 мкмоль) N-ацетил-21-метилен-эпотилон А N-оксида растворяют в 1,5 мл дихлорметана и обрабатывают 11,1 мг (120 мкмоль) фенола, растворенного в 300 мкл дихлорметана. После перемешивания смеси при 75°С в течение двух часов растворители упаривают и сырой продукт очищают препаративной TLC (растворитель: СН₂Сl₂/метанол 95:5) с образованием 1,8 мг (30%) 21-фенокси-эпотилона В.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCI₃) дельта=6,59 (широкий с, 17-Н), 6,99 (с, 19-Н), 4,21 (с, 21-Н2), 6,78 и 7,16 (дд, аромат. Н); HR-MS (DCI): C₂₈H₄₃NO₇S, [M+H]⁺ вычислено 538,2839, найдено 538,2832.

Пример 15

Пример: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-(2-[2-[(Этилтио)метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (8, R=СН₃, R¹=С₂Н₅)

20 мг соединения 2 (R=СН₃) переводят с помощью уксусного ангидрида в смесь 6 (R¹ = ацетил) и IVa и IVb из примера 12, приведенного выше, и концентрируют под вакуумом до образования масла. Указанное масло растворяют в 100 мкл этилмеркаптана и нагревают 1 час до 105°С. После этого смесь подвергают сушке под вакуумом и высушенный остаток отделяют с помощью препаративной DC (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 1:1). Выход 5 мг (25%). R_f (петролейный эфир/этилацетат 1:1): 0,48.

 ¹Н-ЯМР (CDCI₃): δ=3,98 (с, 21-СН₂); 1,24, 2,60 (т, кв, 21-SC₂H₅) (с, 21-ОСН₃); DCI-MS (изобутан): м/e=554.

Пример 16

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Этоксиметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

10 мг (19,7 мкмоль) эпотилона Е растворяют в смеси 100 мкл дихлорметана и 300 мкл диэтилового эфира и обрабатывают 54,6 мг (236 мкмоль) оксида серебра (1) и 47,6 мкл (590 мкмоль) иодэтана. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре смесь фильтруют через целит и упаривают досуха. Очистку сырого продукта проводят с помощью препаративной TLC (растворитель: СН₂Сl₂/метанол 95:5), что дает 8,8 мг (83,4%) 21-этокси-эпотилона А.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): дельта = 6,60 (широкий, 17-Н), 7,11 (с, 19-Н), 4,75 (с, 21-Н₂), 3,65 (q, 1’-Н₂), 1,27 (т, 2’-Н₃); HR-MS (DCI): C₂₈H₄₃NO₇S, [M+H⁺] вычислено 538,2839, найдено 538,2832.

Пример 17

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2,3,4,6-тетраацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2’,3’,4’,6-тетраацетил-бэта-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

Эпотилон Е (50 мг, 98 мкмоль) и тетраметилмочевину (46 мкл, 383 мкмоль), растворенные в 200 мл сухого CH₂Cl₂, добавляют к суспензии трифторметансульфоната серебра (101 мг, 393 мкмоль) и измельченных в порошок молекулярных сит 4Å (500 мг) в 2 мл сухого СН₂Сl₂. Смесь перемешивают в атмосфере N₂ 1 час при комнатной температуре. Добавляют β-D-ацетобромглюкозу (121 мг, 295 мкмоль), растворенную в 200 мкл сухого СН₂Сl₂. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, фильтруют через целит и концентрируют. Очистка с помощью хроматографии с обращенной фазой (СН₃СN/Н₂О 48:52), а затем на силикагеле (СН₂Сl₂/метанол 95:5) приводит к альфа-глюкозиду (4,2 мг, 5%) и β-глюкозиду (5,6 мг, 6%) в виде бесцветных твердых веществ.

альфа-глюкозид:

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): дельта = 6,58 (широкий с, 17-Н), 7,11 (с, 19-Н), 4,82 (с, 21-Гц), 5,74 (д, 1’-Н), 4,38 (ддд, 2’-Н), 5,19 (т, 3’-Н), 4,90 (дд, 4’-Н), 3,94 (дт, 5’-Н), 4,20 (м, 6’-Гц); DCI-MS (120 эВ, NH4⁺): 857 [M+NH₄ ⁺].

бэта-глюкозид:

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): дельта = 6,59 (широкий с, 17-Н), 7,14 (с, 19-Н), 4,92 (д, 21-На), 5,06 (д, 21-Нb), 4,69 (д, 1’-Н), 5,08 (т, 2’-Н), 5,20 (т, 3’-Н), 5,11 (т, 4’-Н), 3,71 (м, 5’-Н), 4,13 (дд, 6’-На), 4,25 (дд, 6’-Нb);

DCI-MS (120 эВ, NH₄ ⁺): 857 [М+NH₄ ⁺].

Пример 18

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*1]-7,11-Дигидpoкcи-8,8,10,12-тeтpaмeтил-3-[1-метил-2-[2-[(6’-ацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион

β-Глюкозид, полученный выше (4,8 мг, 5,8 мкмоль), растворяют 50 мкл DMSO. Добавляют фосфатный буфер (4 мл, 20 мМ, рН=7) и на реакционную смесь воздействуют ультразвуком в течение 5 минут. Добавляют эстеразу печени свиньи (0,3 мл, Boehringer Mannheim) и продолжают перемешивание еще 3 часа. Смесь экстрагируют этилацетатом и объединенные органические экстракты концентрируют. Очистка с помощью хроматографии с обращенной фазой (CH₃CN/H₂O 38:62) дает 1 мг (24%) глюкозида.

 ¹Н-ЯМР (600 МГц, CDCl₃): дельта = 6,62 (широкий с, 17-Н), 7,15 (с, 19-Н), 4,95 (д, 21-На), 5,14 (д, 21-Нb), 4,53 (д, 1’-Н), 3,45 (дд, 2’-Н), 3,57 (т, 3’-Н), 3,42 (т, 4’-Н), 3,50 (м, 5’-Н), 4,30 (дд, 6’-На), 4,48 (дд, 6’-Нb), 2,12 (с, ацетил-Hs).

Синтез 21-сульфонилокси-эпотилонов 6 приведен в примерах 19 и 20 далее.

Пример 19

Пример: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(п-толуолсульфонилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=Me, G¹=G²=H, G³=O, G4=Z⁴SO₂, Z⁴=п-тoлyил в формуле Ia)

К перемешиваемому раствору 104 мг эпотилона F (199 мкмоль, 1 эквивалент) в 5 мл СН₂Сl₂ при 0°С в атмосфере аргона добавляют 0,17 мл N,N-диизопропилэтиламина (993 мкмоль, 5 эквивалентов), а затем 45 мг п-толуолсульфонилхлорида (238 мкмоль, 1,2 эквивалент). Смесь перемешивают при 25°С 47 часов, чтобы позволить исходному материалу полностью вступить в реакцию. Реакционную смесь выливают в 40 мл насыщенного водного раствора NaHCO₃. Водный слой экстрагируют с помощью СН₂Сl₂ (3×50 мл). Объединенные органические слои сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой материал хроматографируют, используя 50% этилацетат в гексане, с выходом 18 мг (16%) 21-хлор-эпотилона В и 85 мг (63%) 21-тозилокси-эпотилона В, в виде прозрачного масла. MS (ЕSI⁺): 678,4 (M+H)⁺.

Реакция эпотилона А с п-толуолсульфонилхлоридом приводит по аналогии к образованию 21-тозилокси-эпотилона А. Реакция эпотилона A-N-оксида с п-толуолсульфонилхлоридом приводит к образованию смеси 21-тозилокси-эпотилона А и 21-хлор-эпотилона А, которые разделяют хроматографически.

21-Тозилокси-эпотилон А

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCI₃): δ=6,54 (широкий с, 17-Н), 7,15 (с, 19-Н), 5,29 (с, 21-Гц), 7,82 (д, 2’,6’-Н), 7,34 (дм, 3’,5-Н), 2,44 (с, 7’-Н₃).

21-Хлор-эпотилон А

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCI₃): δ=6,59 (широкий с, 17-Н), 7,16 (с, 19-Н), 4,81 (с, 21-Гц); HRMS (DCI): С₂₆Н₃₈NО₆S: [М+Н*] вычислено 528,2187, найдено 528,2154.

Пример 20

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Бромметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(5-Бром-2-метил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

45 мг (91 мкмоль) эпотилона А растворяют в 8 мл абсолютного ТГФ в атмосфере N₂ и охлаждают до минус 90°С. Затем добавляют 61 мкл (406 мкмоль) тетраметилэтилендиамина и 270 мкл (406 мкмоль) t-бутиллития в гексане. Через десять минут перемешивания при минус 90°С добавляют 21 мкл (406 мкмоль) брома. Через 5 минут перемешивания реакцию гасят с помощью 10 мл насыщенного раствора хлорида аммония при минус 90°С. Затем смесь нагревают до комнатной температуры при продолжающемся перемешивании и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Разделение с помощью преперативной HPLC дает 2,6 мг (5%) 21-бром-эпотилона А и 2,1 мг (4,0%) 19-бром-эпотилона А.

 ¹Н-ЯМР (600 МГц, СDСCl₃): дельта = 6,58 (с, 17-Н), 7,17 (с, 19-Н), 4,70 (с, 21-H₂). HR-MS (DCI): С₂₆Н₃₈NO₆SBr, [M+NH₄ ⁺] выч. 589,1916 ⁷⁹Br, найдено 591,1903 ⁷⁹Br.

Пример 21

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

(i) С помощью реакции Катада (Katada) эпотилон B-N-оксид переводят в эпотилон F. К перемешиваемому раствору 104 мг эпотилона F (199 мкмоль, 5 эквивалентов) d 5,0 мл СН₂СН₂ при 0°С в атмосфере аргона добавляют 0,17 мл н,н-диизопропилэтиламина (0,993 ммоль, 5 эквивалентов), а затем дополнительно 0,045 г п-толуолсульфонилхлорида (238 мкмоль, 1,2 эквивалента). Смесь перемешивают при 25°С 47 часов, чтобы позволить исходному материалу (SM) полностью вступить в реакцию. Затем смесь выливают в 40 мл насыщенного водного раствора NаНСО₃. Водный слой экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (3×50 мл). Объединенные органические слои сушат над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Сырой материал хроматографируют, используя 50% этилацетат в гексане с выходом 18 мг С21 хлорида (16%) и 85 мг желаемого тозилата (63%) в виде прозрачного масла.

(ii) К перемешиваемому раствору 84 мг SM из предыдущего опыта (124 мкмоль, 1 эквивалент) в 3,50 мл CH₂Cl₂ в атмосфере аргона при 25°С добавляют 40 мг KCN (620 мкмоль, 5 эквивалентов) и 33 мг 18-краун-6 (124 мкмоль, 1 эквивалент). Смеси дают перемешиваться при 25°С 15 часов, за которые исходный материал полностью вступает в реакцию. Затем смесь непосредственно загружают в колонку с силикагелем и хроматографируют, используя 2:1 этилацетат : гексан в качестве элюента, что позволяет получить 41 мг желаемого нитрила (61%) в виде бесцветного твердого вещества.

Пример 22

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13 (Z)-циклогексадецен-2,6-дион

Безводный тетрагидрофуран (5,0 мл) помещают в тщательно высушенную колбу в атмосферу аргона и охлаждают до -78°С. Добавляют к охлажденному тетрагидрофурану в токе аргона WCl₆ (300 мг, 0,756 ммоль, 2 эквивалента), а затем н-бутиллитий (0,946 мл, 1,6 М раствор в гексане, 1,51 ммоль, 4 эквивалента). Реакционную колбу удаляют из охлаждающей до -78°С бани и перемешивают при комнатной температуре 15 минут. Затем реакционную колбу помещают на баню при 0°С и перемешивают дополнительно 5 минут. В отдельной колбе 21-циано-эпотилон В (72 мг, 0,135 ммоль), предварительно высушенный с помощью азеотропной отгонки в вакууме с толуолом, охлаждают с помощью льда до 0°С и добавляют ярко-зеленый раствор вольфрамового реагента (2,12 мл). Реакцию поддерживают при 0°С 20 минут. TLC показывает исчезновение исходного материала. После этого реакцию гасят с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ (10 мл) и распределяют между насыщенным водным раствором NаНСО₃ (20 мл) и этилацетатом (50 мл). Водную фазу экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают водой (25 мл) и рассолом (15 мл), а затем сушат над Na₂SO₄ перед концентрированием в вакууме. Сырой материал очищают с помощью хроматографии на силикагеле с 40% этилацетатом в гексане с получением 43 мг (61%) 21-циано-эпотилона D. MS (ESI⁺): 516,3 (М+Н)⁺.

Пример 23

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(1Н-имидазол-1-илметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору 6 мг 21-тозилокси-эпотилона В (8,9 мкмоль, 1 эквивалент) в 1,0 мл диметилформамида в атмосфере аргона добавляют имидазол (4,8 мг, 71 мкмоль, 8 эквивалентов) и К₂СО₃ (12,3 мг, 0,0890 ммоль, 10 эквивалентов). Смеси дают перемешиваться при 25°С 5 часов. Растворитель удаляют в вакууме и реакционную смесь хроматографируют на силикагеле, используя 1% Еt₃N, 3% СН₃ОН в СНСl₃ в качестве элюента, что позволяет получить 1,4 мг (27%) 21-имидазолинэпотилона В в виде прозрачного масла. MS (ESI⁺): 574,4 (М+Н)⁺.

Пример синтеза эпотилон-20-карбальдегидов 13 приведен в следующих примерах 24 и 25.

Пример 24

Пример: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (G⁶=Н, G⁹=O в формуле IIb)

Эпотилон Е 58 мг (114 мкмоль) растворяют в 1 мл СН₂Сl₂. С интервалами в 10 минут три раза добавляют 295 мг (3,4 ммоль) диоксида марганца и смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 40 минут диоксид марганца отфильтровывают и промывают метанолом. Объединенные органические фазы упаривают досуха и сырой продукт очищают, используя препаративную HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир/гексан с 3% метанола. Таким образом получают 36 мг (62%) эпотилон А-20-карбальдегида.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, СDCI₃): дельта = 6,67 (с, 17-Н), 7,53 (с, 19-Н), 9,98 (д, 21-Н); HRMS (DCI): C₂₆H₃₇NO₇S: [М+Н⁺] вычислено 508,2369, найдено 508,2367.

Пример 25

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

Эпотилон F (180 мг, 344 мкмоль, 1 эквивалент) растворяют в СН₂Сl₂ в атмосфере аргона. Добавляют диоксид марганца (900 мг, 10,3 ммоль, 30 эквивалентов) и реакцию перемешивают при 25°С 2 часа. Вводят дополнительное количество диоксида марганца (400 мг, 4,60 ммоль, 13,4 эквивалента) и реакцию перемешивают еще 2 часа. Смесь фильтруют через Целит, промывают СН₂Сl₂ и затем концентрируют в вакууме. Сырой материал хроматографируют, элюируя с силикагеля с помощью 50% этилацетата в гексане, что обеспечивает получение 92 мг (51%) 21-формил-эпотилона В в виде бесцветного твердого вещества. ESI-MS: 522,3 (М+Н)⁺.

Синтез 21-алкилиденэпотилонов 15 приведен в примере 26, который следует далее.

Пример 26

Пример: [1S[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этенил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=H, G⁶=G⁸=Z⁷=H, G⁷=CZ⁷ в формуле IIа)

Метил-инстандилид (instand-ylid) (Fluka), 50 мг, обрабатывают 17 мг метилфосфонийбромидом и суспендируют в 500 мкл абсолютного ТГФ. Смесь помещают на ультразвуковую баню на 2-3 минуты и затем перемешивают при комнатной температуре. Когда реакционный раствор приобретает ярко-желтый цвет, суспензию по каплям добавляют к раствору 15,2 мг (30 мкмоль) А-альдегида в 100 мкл абсолютного ТГФ. Через 1 час смесь разбавляют водой и экстрагируют три раза дихлорметаном. Органическую фазу упаривают и сушат в высоком вакууме. Разделение сырой смеси проводят с помощью препаративной HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир/гексан 1:2+1% метанол). Таким образом выделяют 1,7 мг (11%) 20-винил-эпотилона А.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ=6,59 (широкий с, 17-Н), (7,04) (с, 19-Н), 6,86 (дд, 21-Н), 6,05 (д, I’-Нb), 5,55 (д, 1’-На); HRMS (DCI): C₂₇H₃₉NO₆S: [М+Н⁺] вычислено 506,2576, найдено 506,2589.

Синтез 21-имино-эпотилонов 22 приведен в следующем примере.

Пример 27

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиимино)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (R=G⁶=Н, G⁷=N, G⁸=OZ¹⁰, Z¹⁰=Me в формуле IIа)

Пиридин, 10 мкл (124 мкмоль), и 113 мкл (54 мкмоль) раствора O-метилгидроксиаммонийхлорида (40 мг/мл) добавляют к раствору 25 мг (49 мкмоль) эпотилон А-21-альдегида в 200 мкл метанола. После перемешивания реакционной массы в течение 1 часа при комнатной температуре растворитель удаляют и остаток переносят в этилацетат. Органическую фазу экстрагируют один раз водой и сушат с помощью Na₂SO₄. Очистку сырого продукта осуществляют с помощью препаративной HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир этеp/гексан 1:2 с 1% метанола). Таким образом получают 9 мг (36%) (21Е)- и 7 мг (27%) (21Z)-21-(N-метоксиимино)-эпотилона А.

(21Е)-изомер

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=6,61 (широкий с, 17-Н), 7,12 (с, 19-Н), 8,22 (с, 21-Н), 4,01 (с, I’-Нs).

(21Z)-изомер

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=6,65 (широкий с, 17-Н), 7,36 (широкий с, 19-Н), 7,86 (д, 21-Н), 4,15 (с, 1’-Н₃). HRMS (DCI): C₂₇H₄₀N₂O₇S: [М+Н⁺] вычислено 537,2634, найдено 537,2637.

Пример 28

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[[(фенилметил)имино]метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

Эпотилон А-21-альдегид (19 мг, 38 мкмоль) растворяют в 1 мл сухого СН₂Сl₂. Добавляют размельченные молекулярные сита 4 Å и бензиламин (4,5 мг, 41 мкмоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 45 минут, фильтруют через Целит и концентрируют. Очистка на силикагеле (СН₂Сl₂/метанол 95:5) дает 21-бензилимино-эпотилон А (10 мг, 45%).

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, СDСI₃): дельта = 6,62 (широкий с, 17-Н), 7,21 (с, 19-Н), 8,46 (с, 21-Н), 4,87 (д, I’-Н₂).

Пример 29

Пример: [1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Ацетил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион (G⁶=Me, G⁹=О в формуле IIb) и 20-(21,22-эпоксиэтил)-эпотилон А (G₁=H; G², G⁵=CH₂-О в формуле Ib)

Эпотилон А-21-альдегид (пример 28), 10 мг (20 мкмоль), растворяют в 200 мкл СН₂Сl₂ и добавляют избыток диазометана, затем смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 15 минут реакционную массу упаривают и разделяют, используя препаративную TLC (силикагель 60, растворитель: СН₂Сl₂/метанол 95:5). Таким образом получают 4,5 мг (44%) 21-ацетил-эпотилона А и 1,9 мг (19%) 20-эпоксиэтил-эпотилона А.

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Ацетил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCI₃): δ=6,62 (широкий с, 17-Н), 7,45 (с, 19-Н), 2,71 (с, I’-Hs).

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-(2-оксиранил-4-тиазолил)этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

 ¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=6,58 (широкий с, 17-Н), 7,09 (с, 19-Н), 4,22 (т, 21-Н), 3,00 (м, I’-На), 3,23 (дд, I’-Нb).

Пример 30

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(2-иодэтенил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

26 мг (49 мкмоль) иодметилтрифенилфосфонийиодида суспендируют в 1 мл абсолютного ТГФ, добавляют 49 мкл (49 мкмоль) раствора гексаметилдисилазана натрия в ТГФ. После перемешивания в течение одной минуты при комнатной температуре смесь охлаждают до минус 78°С и добавляют 14 мкл (80 мкмоль) НМРА, а затем раствор 20 мг (40 мкмоль) эпотилон А 21-альдегида в 0,2 мл абсолютного ТГФ. При той же температуре реакционную смесь перемешивают 30 минут и затем гасят с помощью 1 мл насыщенного раствора хлорида аммония. После нагревания до комнатной температуры реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, органический слой разделяют, сушат с сульфатом натрия и упаривают досуха. Разделение достигают с помощью препаративной HPLC, что дает 8,4 мг (34%) (20Z)-иодвинила и 2 мг (8%) (20Е)-иодвинилового аналога.

Е-Изомер

 ¹H-ЯМР (600 МГц, CDCl₃): дельта = 6,56 (с, 17-Н), 7,07 (с, 19-Н), 7,53 (д, 21-Н), 7,39 (д, I’-Н).

Z-Изомер

 ¹Н-ЯМР (300 МГц, СDСI₃): дельта = 6,63 (широкий с, 17-Н), 7,21 (с, 19-Н), 7,82 (дд, 21-Н), 7,03 (д, I’-Н₂); HR-MS (DCI): С₂₇Н₃₈NО₆SI, [М+Н⁺] вычислено 632,1543, найдено 632,1593.

Пример 31

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этинил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

18,5 мкл (131 мкмоль) диизопропиламина, растворенного в 0,4 мл абсолютного ТГФ, обрабатывают при минус 10°С 70 мкл (105 мкмоль) н-бутиллития в гексане. Через один час при 0°С к раствору добавляют 17 мг (27 мкмоль) (20Z)-иодвинильного производного в 0,5 мл абсолютного ТГФ. Через один час перемешивания при 0°С реакцию гасят с помощью 2 мл насыщенного раствора хлорида аммония. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, органическую фазу упаривают досуха и разделяют препаративной HPLC. Выход 2,4 мг (36%).

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCI₃): дельта = 6,60 (широкий с, 17-Н), 7,15 (с, 19-Н), 3,46 (с, 21-Н); HR-MS (DCI): C₂₇H₃₇NO₆S, [М+NH₄ ⁺] выч. 521,2685, найдено 521,2696.

Примеры синтезов 21-алкиламино-эпотилонов 10 и 11 приведены в примерах с 32 по 36 далее.

Пример 32

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(метиламино)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору эпотилон В-21-альдегида (17 мг, 0,033 ммоль) в 2,0 мл СН₃СН в атмосфере аргона при 0°С добавляют 2,0 М раствор метиламина (0,16 мл, 0,326 ммоль, 10 эквивалентов). Через 15 мин добавляют 6 мг NaBH₃CN (0,098 ммоль, 3 эквивалента), смеси дают перемешиваться при 0°С 30 минут. Затем по каплям добавляют уксусную кислоту, пока значение рН раствора не достигнет величины приблизительно 7. Затем смесь перемешивают дополнительно еще 2 часа и добавляют 20 мл 28% водного раствора NH₄OH(вод.), смесь перемешивают 5 минут и затем экстрагируют 75 мл этилацетата. Органический слой сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой материал затем хроматографируют, используя силикагель, элюируя 1% Et₃N, 2% МеОН в СНСl₃ с выходом 8 мг (47%) 21-N-метиламино-эпотилона В в виде непрозрачного масла. MS (ESI⁺): 537,4 (М+Н)*.

Пример 33

[1S-[1R*,3R* (E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[2-(Диметиламино)этил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору эпотилона В-21-альдегида (15 мг, 0,029 ммоль) в 2,0 мл CH₃CN в атмосфере аргона при 25°С добавляют N,N-диметилэтилендиамин (31 мкл, 0,288 ммоль, 10 эквивалентов). Через 10 мин добавляют 5 мг NаВН₃СN (0,086 ммоль, 3 эквивалента) и смеси дают перемешиваться при 25°С 30 минут. Затем по каплям добавляют АсОН, пока значение рН не достигнет приблизительно 7. После этого смесь перемешивают дополнительно еще 2 часа, добавляют 20 мл 28% водного раствора NН₄OН(вод.). Смесь перемешивают 5 минут и затем экстрагируют 75 мл этилацетата. Органический слой сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой материал затем хроматографируют, используя силикагель и элюирование 1% Et₃N, 5% МеОН в СНСI₃, выход 5,8 мг (34%) 21-(2-N,N-диметиламиноэтил)аминоэпотилона В в виде прозрачного масла. MS (ESI⁺): 594,5 (М+Н)⁺.

Пример 34

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[(Димeтилaминo)мeтил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору амина (19 мг, 0,0363 ммоль) в 1,0 мл СН₃СN в атмосфере аргона добавляют водный раствор формальдегида (0,04 мл 37%-ного водного раствора, 0,1817 ммоль, 5 эквивалентов) и 7 мг NaBH₃CN (0,1089 ммоль, 3 эквивалента). Смеси дают перемешиваться 20 минут. Добавляют уксусную кислоту (1 каплю), после чего ее перемешивают дополнительно еще 40 минут. Сырую реакционную смесь наносят непосредственно на колонку с силикагелем и элюирутот 1% Еt₃N, 1% СН₃ОН в СНСl₃ с выходом 2,5 мг (12%) 21-N,N-диметиламино-эпотилона В. MS (ESI⁺): 551,4 (М+Н)⁺.

Пример 35

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[Бис(2-метоксиэтил)амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору альдегида (6,8 мг, 0,013 ммоль) в 2,0 мл СН₃СН в атмосфере аргона при 0°С добавляют бис(2-метоксиэтил)амин (19 мкл, 0,130 ммоль, 10 эквивалентов). Через 15 минут добавляют 2,5 мг NaBH₃CN (0,039 ммоль, 3 эквивалента) и смеси дают перемешиваться при 0°С 30 минут. Затем по каплям добавляют уксусную кислоту, пока значение рН раствора не достигнет приблизительно 7. Затем смесь перемешивают дополнительно еще 2 часа, добавляют 10 мл 28% водного раствора NН₄OН(вод.). Смесь перемешивают 5 минут и затем экстрагируют 75 мл этилацетата. Органический слой сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой материал затем хроматографируют, используя силикагель и элюируя 1% Еt₃N, 1% СН₃ОН в СНСI₃, выход 5,6 мг (67%) 21-(бис-2-метоксиэтил)амино-эпотилона В в виде масла. MS (ESI*): 639,5 (М+Н)⁺.

Пример 36

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион

К перемешиваемому раствору альдегида (11 мг, 0,0211 ммоль) в 1,0 мл СН₃СN в атмосфере аргона добавляют 1-метилпиперазин (21 мг, 0,2109 ммоль, 10 эквивалентов) и NaВН₃СН (4 мг, 0,0633 ммоль, 3 эквивалента). Смеси дают перемешиваться 20 минут. Затем по каплям добавляют уксусную кислоту, пока значение рН раствора не будет равно приблизительно 7. Затем смесь перемешивают дополнительно еще 2 часа, добавляют 10 мл 28%-ного водного NH₄ОH(вод.). Смесь экстрагируют CH₂Cl₂ (2×75 мл). Органический слой сушат над Na₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. Сырой материал хроматографируют, используя силикагель и элюирование с помощью 1% Et₃N, 5% МеОН в СНСI₃, выход 10,7 мг (84%) 21-(N-метилпиперазин)амино-эпотилона В в виде белого пенистого масла. MS (ЕSI⁺): 606,4 (М+Н)⁺.

Пример 37

Пример: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновая кислота (G⁶=OZ⁵, Z⁵=H, G⁹=O в формуле IIb)

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновая кислота метиловый эфир (G⁶=OZ⁵, Z⁵=Me, G⁹=O в формуле IIb)

Эпотилон А-21-альдегид, 8,0 мг (16 мкмоль) растворяют в 300 мкл смеси ТГФ/вода (9:1) и добавляют 24,0 мг (194 мкмоль) оксида серебра (I). Реакционную смесь перемешивают 12 часов при комнатной температуре. Затем растворитель удаляют и остаток переносят в этилацетат. Упаривание растворителя дает нестабильную карбоновую кислоту, которая была охарактеризована с помощью HPLC/ESI-MS: время задержки 13,8 мин; м/z = 522 (М-Н)^- (RP-18 силикагель, СН₃СН (10 мМ NH₄OAc, буферный градиент с 10:90 по 45:55). Предпочтительно органическую фазу не упаривают, а промывают дважды 0,1% соляной кислотой, один раз водой и затем обрабатывают избытком диазометана. Смесь перемешивают 10 минут при комнатной температуре. После удаления растворителя сырой продукт очищают с помощью препаративной HPLC (Nucleosil 100, растворитель: t-бутилметиловый эфир/гексан 1:2 с 1% метанола), при этом получают 2,5 мг (30%) эпотилон А-21-карбоновой кислоты метилового эфира.

 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCI₃): δ=6,73 (широкий с, 17-Н), 7,42 (с, 19-Н), 4,00 (с, I’-Hs); HRMS (DCI): C₂₇H₃₉NO₈S: [М+Н*] вычислено 537,2396, найдено 537,2408.

Пример 38

Биологическая характеристика производных эпотилона

Цитостатическая активность

Производные эпотилона ингибируют рост клеточных культур млекопитающих, а также клеточных линий, которые устойчивы по отношению к другим циклостатикам.

Ингибирование роста трансформированных клеток карциномы мыши и человека и лейкемийных клеточных линий.

Ингибирование роста следующих клеточных линий измеряют в микротитровальных планшетах: L929 (DSM АСС 2), фибробласты соединительной ткани мыши; КВ-3.1 (DSM АСС 158), карциномы шеи человека; KB-V1 (DSM АСС 149), цервикальной карциномы человека, устойчивой ко многим лекарствам; PC-3 (ATCC CRL 1435), аденокарциномы простаты человека; SK-OV-3 (ATCC HTB-77), аденокарциномы яичников человека; А-549 (DSM АСС 107), карциномы легкого человека; К-562 (ATCC CCL-243), хронической миелогенной лейкемии человека; U-937 (DSM АСС 5), гистотической лимфомы человека. Линии клеток получают из DSM (Коллекция микрооргнизмов и линий клеточных культур Германии), Braunschweig, Germany, или ATCC (Коллекция культур американского типа), Rockville, MD, USA.

Аликвоты суспендированных клеток (50000/мл) подвергают воздействию серийно разбавленного ингибитора. В качестве параметра роста измеряют восстановление МТТ бромид 3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия или, в случае клеток лейкемии, WST-1 (Boehringer Mannheim, Germany) после инкубационного периода в 5 дней. Полученные величины сравнивают с контрольными клетками, к которым добавляли только растворитель - метанол. Эти значения были приняты за 100%. IC₅₀ (концентрация, которая вызывает 50% подавление роста) была выведена из кривых ингибирования (процент восстановления МТТ в зависимости от концентрации ингибитора).

Пример 39

Характеристика токсичности производных эпотилона

Были проведены предклинические испытания соединения

в 1 фазе испытаний (на 29 пациентах) было установлено, что лекарственное вещество переносимо в дозах вплоть до 50 мг/м².

1. Соединение, имеющее общую формулу I

где P-Q представляет собой C-двойную связь или эпоксид;

G представляет собой

R выбран из группы, включающей Н и С_1-6алкил;

R¹ выбран из группы, состоящей из

G¹ представляет собой Н;

G² представляет собой Н;

G³ выбран из группы, включающей О, S и NZ¹;

G⁴ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, OZ², Z²C=O и Z⁴SO₂;

G⁵ выбран из группы, включающей галоген, N₃, CN, NC, гетероарил, содержащий N или О, и гетероцикло;

G⁶ выбран из группы, включающей Н, C_1-6алкил и OZ⁵, где Z⁵ выбран из группы, включающей Н и C_1-6алкил;

G⁹ представляет собой O;

Z¹ выбран из такой группы, как Н, C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, ацил и замещенный ацил;

Z² выбран из такой группы, как C_1-6алкил, замещенный C_1-6алкил, арил;

Z⁴ выбран из группы, включающей арил и замещенный арил,

при условии, что когда R¹ представляет собой

G¹, G², G³ и G⁴ не могут одновременно иметь следующие значения: G¹ и G² -Н, G³ -О и G⁴ -Н или Z²C=O, где Z²=H или алкильная группа и, когда G¹ и G² - Н, G⁵ не может быть галогеном;

где замещенный C_1-6алкил представляет собой C_1-6алкил, имеющий от одного до четырех заместителей, выбранных из гидрокси, алкокси, оксо, алканоила, арила, арилокси, алканоилокси, амино, C_1-6алкиламино, дизамещенных аминов, (в которых два аминозаместителя выбраны из C_1-6алкила);

замещенный арил представляет собой фенил или нафтил, имеющий от одного до четырех заместителей, выбранных из C_1-6алкила; и

замещенный ацил представляет собой ацильную группу, в которой радикал, полученный из кислоты путем удаления гидроксила, замещен C_1-6алкилом, замещенным C_1-6алкилом.

2. Соединение по п.1, имеющее общую формулу Iа

где R представляет собой атом Н или метильную группу,

G¹ представляет собой атом Н.

3. Соединение по п.2, в котором G³ является атомом О.

4. Соединение по п.2, в котором G³ является атомом S.

5. Соединение по п.2, в котором G³ представляет собой NZ¹.

6. Соединение по п.1, имеющее общую формулу Ib

где R представляет собой атом Н или метильную группу,

G¹ представляет собой атом Н,

G² представляет собой атом Н.

7. Соединение по п.6, в котором G⁵ является N₃-группой.

8. Соединение по п.6, в котором G⁵ является CN-группой.

9. Соединение по п.6, в котором G⁵ является NC-группой.

10. Соединение по п.6, в котором G⁵ представляет собой гетероциклическую группу.

11. Соединение, имеющее формулу

12. Соединение по п.1, имеющее общую формулу IIb

где R представляет собой атом Н или метильную группу;

G⁶ представляет собой атом Н.

13. Соединение, имеющее общую формулу IV

где R представляет собой атом Н или метильную группу,

P-Q представляет собой С-двойную связь или эпоксид;

G¹¹ представляет собой C_1-6алкил.

14. Соединение, выбранное из группы, состоящей из

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Азидометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5, 9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5, 9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(E)]]-16-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метил-этенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион;

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(E)]]-16-[2-[2-(Аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-Дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(пентаноилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(нафтоилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-[[(2-метоксиэтокси)ацетилокси]метил]-1-метил-4-тиазолил]этенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-8,8,10,12-тeтpaмeтил-3-[1-метил-2-[2-[(N-пропиониламино)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(3-Ацетил-2,3-дигидро-2-метилен-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион,N-оксид;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-(феноксиметил)-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[(Этилтио)метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Этоксиметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2,3,4,6-тетраацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2’,3’,4’,6’-тетраацетил-бэта-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(6’-ацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(п-толуолсульфонилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Бромметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1,0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(5-бром-2-метил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[4S-[4R*,7R*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-3-[2-[2-(IH-имидaзoл-1-илметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этенил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиимино)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[[(фенилметил)имино]метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Ацетил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-8,8,10,12-тeтpaмeтил-3-[1-метил-2-(2-оксиранил-4-тиазолил)этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-3-[2-[2-(2-иoдэтeнил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*.12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этинил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(метиламино)метил]-4-тиазолил] этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[2-(Диметаламино)этил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

(1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[(Диметиламино)метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

(1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[Бис(2-метоксиэтил)амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновая кислота;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновой кислоты метиловый эфир,

и их фармацевтически приемлемых солей, сольватов и гидратов.

15. Способ получения соединения, имеющего формулу 9

где Р-Q – эпоксид и R - метил,

заключающийся в том, что соединение, имеющее формулу 4

вначале активируют, а затем подвергают нуклеофильному замещению с получением соединения, имеющего формулу 7,

после чего полученное соединение, имеющее формулу 7, подвергают восстановлению с образованием соединения, имеющего формулу 9.

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что активацию проводят с помощью TosHal (Tos - толуолсульфонил, Hal - Cl, Br или I) и пиридина и нуклеофильное замещение с помощью NaNa₃ или активацию и нуклеофильное замещение проводят с помощью диазабициклоундецена и дифенилфосфорил азида.

17. Способ по п.15, отличающийся тем, что восстановление проводят путем гидрогенизации в присутствии катализатора Линдлара или с помощью фосфина.

18. Фармацевтическая композиция, обладающая свойством ингибировать рост клеток и содержащая в качестве активного ингредиента, по крайней мере, одно соединение по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемую соль, и один или более фармацевтически приемлемый носитель, эксипиент или разбавитель.

19. Фармацевтическая композиция по п.18, в которой активный ингредиент выбран из группы, состоящей из

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Азидометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-[[[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метил-этенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион;

[4S-[4R*,7S*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-(Аминометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(Z)-циклогексадецен-2,6-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(пентаноилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(нафтоилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-[[(2-метоксиэтокси)ацетилокси]метил]-1-метил-4-тиазолил]этенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*^:,16S*]]-7,11-Дигидpoкcи-8,8,10,12-тeтpaмeтил-3-[1-метил-2-[2-[(N-пропиониламино)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(3-Ацетил-2,3-дигидро-2-метилен-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион, N-оксид;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-(феноксиметил)-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[(Этилтио)метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Этoкcимeтил)-4-тиaзoлил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2,3,4,6-тетраацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(2’,3’,4’,6’-тетраацетил-бэта-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[(6’-ацетил-альфа-глюкозилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(п-толуолсульфонилокси)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Бромметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(5-бром-2-метил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0] гептадекан-5,9-дион;

[4S-[4R*,7R*,8R*,9R*,15R*(Е)]]-16-[2-[2-(Цианометил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-4,8-дигидрокси-5,5,7,9,13-пентаметил-1-окса-13(2)-циклогексадецен-2,6-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(1H-имидазол-1-илметил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

(1S-[1R*,3R*(Е),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Формил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этенил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(метоксиимино)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-[2-[[(фенилметил)имино]метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Ацетил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-3-[1-метил-2-(2-оксиранил-4-тиазолил)этенил]-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-3-[2-[2-(2-иодэтенил)-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-(2-Этинил-4-тиазолил)-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(метиламино)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[[2-(Диметиламино)этил]амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

(1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[(Диметиламино)метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-3-[2-[2-[[Бис(2-метоксиэтил)амино]метил]-4-тиазолил]-1-метилэтенил]-7,11-дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-Дигидрокси-8,8,10,12,16-пентаметил-3-[1-метил-2-[2-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]-4-тиазолил]этенил]-4,17-диоксабицикло [14.1.0]гептадекан-5,9-дион;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновая кислота;

[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-4-[2-(7,11-Дигидрокси-8,8,10,12-тетраметил-5,9-диоксо-4,17-диоксабицикло[14.1.0]гептадекан-3-ил)-1-пропенил]-2-тиазолкарбоновой кислоты метиловый эфир,

и их фармацевтически приемлемых солей, сольватов и гидратов.

Приоритет по всем пунктам формулы изобретения, за исключением п. 15, установлен от 22.02.1999 и по п. 15 - от 01.07.1999 согласно корреспонденции заявителя от 13.05.2004.