Стабильная фармацевтическая суспензия азитромицина и способ ее получения
Владельцы патента RU 2255730:
Федеральное государственное унитарное предприятие "Всероссийкий научный центр по безопасности биологически активных веществ" (ФГУП "ВНЦ БАВ") (RU)
Изобретение относится к области фармацевтики, конкретно, к антимикробному препарату азитромицин. Изобретение заключается в том, что стабильная фармацевтическая суспензия азитромицина включает терапевтически эффективное количество азитромицина и целевые добавки, в качестве которых используют сорбит, натрия бензоат, ароматизаторы, глицерин, кислоту глутаминовую, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон и пропиленгликоль. Предложен способ получения стабильной суспензии азитромицина, заключающийся в прибавлении смеси азитромицина с глутаминовой кислотой в виде раствора в глицерине или в сухом виде к раствору метилцеллюлозы в воде, содержащей пропиленгликоль и глицерин или пропиленгликоль и последовательно растворенные натрия бензоат, поливинилпирролидон, сорбит с последующим разбавлением водой до необходимой к употреблению концентрации азитромицина. Изобретение обеспечивает создание новой стабильной суспензии, устойчивой в течение не менее 1 года и пригодной для лечения детей, в том числе, страдающих диабетом. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 1 ил.
Изобретение относится к области медицины, конкретно, к антимикробному препарату азитромицин и пригодно для лечения различных инфекционных заболеваний, вызванных чувствительными к азитромицину микроорганизмами: пневмония, бронхит, скарлатина, ангина, уретриты и др.
Азитромицин применяют в различных лекарственных формах: таблетки, капсулы, порошки для приготовления суспензий.
Значительный интерес представляют детские лекарственные формы азитромицина в виде суспензий и сиропов.
Порошок азитромицина для приготовления суспензии описан в Европейском патенте ЕР 0679400 А, 1995 г., приведено несколько составов (в граммах):
| - Азитромицин дигидрат | - 838,57 |
| - Сахароза | - 15487,74 |
| - Натрия фосфат трехзамещенный безводный | - 70,01 |
| - Гидроксипропилцеллюлоза (Клуцел EF) | - 26,62 |
| - Растительная смола (камедь) | - 26,62 |
| - Краситель красный | -0,67 |
| - Ароматизаторы: | |
| вишневый | - 59,94 |
| ванилиновый | - 133,28 |
| банановый | - 99,96 |
| Сумма | 16743,41 |
В других пяти описанных в этом патенте составах дополнительно к указанным компонентам приведены: сорбит, глицин, коллоидальная двуокись кремния, титана двуокись, бензоат натрия, карбонат натрия безводный.
Недостатками указанного состава являются:
- содержание сахара от 46 до 92%, что затрудняет применение препарата у больных диабетом;
- приготовленная из порошка суспензия хранится не более 5 дней.
Целью изобретения является создание новой стабильной суспензии, содержащей азитромицин, устойчивой в течение не менее 1 года и пригодной для лечения детей, в том числе, страдающих диабетом.
Путем теоретического и экспериментального выбора целевых добавок в заявляемом изобретении создана стабильная фармацевтическая суспензия азитромицина, отвечающая поставленной цели.
В качестве корригатора горького вкуса азитромицина предложен сорбит и глицерин вместо сахара и сорбита. Для стабилизации суспензии введены метилцеллюлоза и поливинилпирролидон. Кроме того, для повышения стабильности азитромицина, который подвергается гидролитической и окислительной деструкции в водных средах, введена глутаминовая кислота. Глутаминовая кислота способствует также улучшению медикобиологических свойств препарата.
Предлагается стабильная фармацевтическая суспензия азитромицина, включающая терапевтически эффективное количество азитромицина и целевые добавки, в качестве которых используют глицерин, глутаминовую кислоту, метилцеллюлозу, натрия бензоат, поливинилпирролидон, пропиленгликоль, сорбит, ароматизатор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Азитромицин - терапевтически эффективное количество
Глицерин - 15,0-25,0
Кислота глутаминовая - 0,1-1,0
Метилцеллюлоза - 1,0-3,0
Натрия бензоат - 1,0-3,0
Поливинилпирролидон - 0,5-3,0
Пропиленгликоль - 5,0-10,0
Сорбит - 5,0-10,0
Ароматизатор - 0,05-0,2
Вода - до 100,0
В качестве метилцеллюлозы используют преимущественно метилцеллюлозу МЦ-16, поливинилпирролидон, преимущественно, низкомолекулярный.
Содержание азитромицина в фармацевтической суспензии составляет 2,0±15%.
Заявляемое соотношение компонентов найдено экспериментальным путем, является оптимальным и позволяет получить технический результат, соответствующий поставленной задаче: суспензия азитромицина имеет срок годности не менее 1 года, может применяться для лечения детей, в том числе страдающих диабетом. Кроме того, стабильная суспензия азитромицина пригодна к употреблению без разбавления.
Одним из способов получения суспензий является способ, заключающийся в смешении активных и вспомогательных веществ и разбавлении их водой ("Технология лекарственных форм", т.2 под редакцией Ивановой Л., М., Медицина, 1991 г., с.491-492).
Способ получения стабильной фармацевтической суспензии азитромицина по изобретению заключается в следующем: раствор метилцеллюлозы в воде разбавляют глицерином и пропиленгликолем, к полученному раствору добавляют последовательно натрия бензоат, поливинилпирролидон, сорбит, после растворения этих компонентов добавляют глутаминовую кислоту, азитромицин и ароматизатор, полученный раствор разбавляют водой до необходимой к употреблению концентрации азитромицина; или раствор метилцеллюлозы в воде разбавляют пропиленгликолем, к полученному раствору добавляют предварительно приготовленный раствор в воде натрия бензоата, поливинилпирролидона, сорбита, затем к полученному раствору добавляют раствор азитромицина и глутаминовой кислоты в глицерине и разбавляют “водой до необходимой к употреблению концентрации азитромицина.
Все это в совокупности дает возможность получить стабильную суспензию азитромицина, соответствующую всем требованиям Госфармакопеи XI издания, нормативным документам на азитромицин, суспензия упортебляется без разбавления, срок годности не менее 1 года (таблица 1).
Следующие примеры иллюстрируют изобретение.
Пример 1. К 12,0 г метилцеллюлозы приливают 350 мл дистиллированной воды. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4-5 часов до получения густой однородной массы. Отдельно готовят раствор глицерина из 200 г глицерина и 100 мл дистиллированной воды. Полученный раствор приливают к водному раствору метилцеллюлозы, смесь перемешивают и добавляют к ней 80,0 г пропиленгликоля, массу перемешивают в течение 30-40 минут и фильтруют. К полученному раствору при комнатной температуре и перемешивании прибавляют последовательно 12,0 г натрия бензоата; 8,0 г поливинилпирролидона; 54,65 г сорбита; 1,97 г кислоты глутаминовой, 20,0 г азитромицина (100%-ного) и 1,0 г ароматизатора.
Каждый следующий компонент прибавляют после получения однородной смеси предыдущих реагентов.
Полученную суспензию разбавляют водой очищенной до объема 1 л и перемешивают в течение 1 часа.
Выход суспензии Азитромицина составляет 97,42%, считая на исходный азитромицин.
Полученная суспензия соответствует нормативным требованиям Госфармакопеи XI издания и нормативным документам на суспензию азитромицина (детская лекарственная форма). Содержание азитромицина 0,02 г в 1 мл. Срок хранения при 10°С 1 год. Суспензия пригодна к упортеблению без дополнительного разбавления.
Пример 2. К 350 мл дистиллированной воды прибавляют 12,0 г метилцеллюлозы, перемешивают при комнатной температуре до получения однородной массы. Затем прибавляют 80 г пропиленгликоля, перемешивают. К полученному раствору постепенно прибавляют предварительно приготовленный раствор, содержащий 150 мл дистиллированной воды, 54,65 г сорбита, 12,0 г бензоата натрия и 8 г поливинилпирролидона. Массу перемешивают, затем к ней постепенно добавляют раствор, содержащий в 200 г глицерина 20 г азитромицина и 1,97 г глутаминовой кислоты. Массу тщательно перемешивают, к ней добавляют 1 г ароматизатора, разбавляют дистиллированной водой до 1 л. После тщательного перемешивания получают суспензию азитромицина, содержащую 0,02 г азитромицина в 1 мл.
Выход на исходный азитромицин 98,2%.
Полученная суспензия соответствует нормативным требованиям Госфармакопеи XI издания и нормативным документам на суспензию азитромицина (детская лекарственная форма). Содержание азитромицина 0,02 г в 1 мл. Срок хранения при 10°С 1 год. Суспензия пригодна к упортеблению без разбавления.
Пример 3. Аналогично примеру 1 загружают 10 г метилцеллюлозы и 350 мл дистиллированной воды, 150 г глицерина и 110 г дистиллированной воды, 10,0 г натрия бензоата; 4,0 г поливинилпирролидона; 50,0 г сорбита; 1,0 г кислоты глутаминовой, 20,0 г азитромицина и 0,5 г ароматизатора.
Полученная суспензия соответствует нормативным требованиям Госфармакопеи XI издания и нормативным документам на суспензию азитромицина (детская лекарственная форма). Содержание азитромицина 0,02 г в 1 мл. Срок хранения при 10°С 1 год. Суспензия пригодна к употреблению без дополнительного разбавления.
Пример 4. Аналогично примеру 2 загружают: 350 мл дистиллированной воды, 30,0 г метилцеллюлозы, 100 г пропиленгликоля, добавляют в 250 мл дистиллированной воды 100,0 г сорбита, 30,0 г бензоата натрия и 30,0 г поливинилпирролидона, добавляют раствор, содержащий в 250 г глицерина 20 г азитромицина и 10,0 г глутаминовой кислоты. Массу тщательно перемешивают, к ней добавляют 1 г ароматизатора, разбавляют дистиллированной водой до 1 л. После тщательного перемешивания получают стабильную суспензию азитромицина.
Полученная суспензия соответствует нормативным требованиям Госфармакопеи XI издания и нормативным документам на суспензию азитромицина (детская лекарственная форма). Содержание азитромицина 0,02 г в 1 мл. Срок хранения при 10°С 1 год. Суспензия пригодна к употреблению без дополнительного разбавления.
Биологические исследования стабильной фармацевтической суспензии азитромицина выполнены в сравнении с известным составом (по Европейскому патенту ЕР 0679400 А).
Исследования проводили на кроликах-самцах породы Шиншилла с массой тела 3,0-3,2 кг. Животные содержались в стандартных клетках при 12-часовом режиме освещения и свободном доступе к корму и воде.
Фармакокинетику и биодоступность препаратов по предлагаемому изобретению (А) и известному (по Европейскому патенту ЕР 0679400 А) (В) изучали на протяжении 8 ч после однократного введения суспензии per os в дозе 160 мг/кг (Lukehart A., Fohn M.J. // J. Antimicrob. Chemother - 1990. - Vol.25. - Р.91-99.//).
После перорального введения препаратов кровь отбирали из краевой вены уха кролика через дискретные интервалы времени (0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 5; 6 и 8 часов после введения препарата) (таблица 2).
Пробы крови выдерживали при комнатной температуре до образования сгустка, после чего образцы центрифугировали в течение 10 мин при n=2500 об/мин и отбирали по 0,5 мл сыворотки.
Анализ содержания азитромицина в сыворотке крови проводили микробиологическим методом диффузии в агар с тест-микробом Micrococcus lutea. Предел обнаружения - 0,2 мкг/мл. При этом использовали среду следующего состава: гидролизата казеина - 4 г, дрожжевого экстракта - 3 г, глюкозы безводной - 1 г, агара - 15 г, мясопептонного бульона до 1000 мл. рН среды после стерилизации 7,7-8,0.
Посевная доза тест-микроба составила 200 млн. микробных тел на 1 мл среды. В каждую чашку Петри разливали по 15 мл засеянной среды (1 слой). После закапывания сыворотки в лунки чашки Петри инкубировали при температуре 36°С в течение 18-20 часов (Marzo А. - Pharmacol.Res. - 1995. Vol.32, No.2 - P.237-240; Laub P.B, Gallo J.M. // J. Pharmaceut. Sci. - 1996. - Vol.85, No.4. - P.393-395).
Анализ фармакокинетических данных проводили с использованием внемодельного метода интегральных моментов по компьютерной программе ASKID.
При этом рассчитывались следующие фармакокинетические параметры:
AUCt - площадь под фармакокинетической кривой (0-8 ч), мкг·ч/мл;
Tmax - время достижения Сmах, ч;
MRT - среднее время пребывания препарата в организме, ч;
T1/2β - время полувыведения.
Относительную биодоступность суспензии по предлагаемому патенту (А) по сравнению с суспензией по известному патенту ЕР 0679400 (В) фирмы определяли, используя уравнение:
f=[AUC(A)·D(B)]/[AUC(B)·D(A)],
где AUC - площадь под кривой зависимости “концентрация - время”, мкг·ч/мл;
D - введенная доза, мг/кг.
Профили фармакокинетических кривых усредненных концентраций в крови после введения новой суспензии и известной изображены на чертеже в декартовых координатах.
Установлено, что препарат быстро всасывается в системный кровоток при приеме обеих изучаемых форм, в течение непродолжительного времени находится в субмаксимальных концентрациях и выводится с периодом полуэлиминации в β-фазе порядка 3,16-3,18 ч.
Табл.2 содержит индивидуальные и средние значения основных фармакокинетических параметров, характеризующих относительную биодоступность изученных лекарственных форм азитромицина. Установлено, что значения AUC, MRT, Cmax, Тmах и T1/2β у исследованных лекарственных форм азитромицина статистически значимо не различались между собой. Статистический анализ включал в себя расчеты средних значений, стандартного несмещенного отклонения. Сравнение средних двух совокупностей проводили на основе t-критерия распределения Стьюдента (табл.3).
Поскольку обе лекарственные формы вводили в одной и той же средней дозе, относительная биодоступность препаратов А и В определялась отношением площадей под фармакокинетической кривой AUC, которые вычисляли методом трапеций.
Следовательно, по степени биодоступности и отсутствию существенных различий по другим параметрам, определяющим относительную биодоступность сравниваемых лекарственных форм азитромицина, оба препарата являются терапевтически эквивалентными.
Таким образом, заявляемая суспензия азитромицина, не уступая ни по качеству, ни по фармакологическим свойствам известному образцу, имеет срок годности не менее 1 года и может быть использована в лечении детей, в том числе страдающих диабетом. Кроме того, она готова к употреблению и не требует дополнительного разбавления.
| Таблица 1 | |||||
| Наименование показателей качества | Нормы требований качества | Фактические показатели качества | |||
| пример 1 | пример 2 | пример 3 | пример 4 | ||
| Описание | Белая или слегка окрашенная суспензия горьковатого вкуса с фруктовым запахом | Белая суспензия с фруктовым запахом | Белая суспензия с фруктовым запахом | Белая суспензия с фруктовым запахом | Белая суспензия с фруктовым запахом |
| Время седиментационной устойчивости | В течение 1 часа расслоение суспензии не происходит | Суспензия устойчива в течение более 24 часов | Суспензия устойчива в течение более 24 часов | Суспензия устойчива в течение более 24 часов | Суспензия устойчива в течение более 24 часов |
| рН | От 7,0 до 9,0 | 8,0 | 7,5 | 8,5 | 8,5 |
| Количественное содержание | В 1 мл: - азитромицина от 0,018 до 0,022 г; - натрия бензоата от 0,0113 до 0,0127 г | азитромицина 0,02 г натрия бензоата0,117 | азитромицина 0,02 г натрия бензоата0,117 | азитромицина 0,02 г натрия бензоата 0,117 | азитромицина 0,02 г натрия бензоата 0,117 |
| Биодоступность, % | 75-125 | 110 | 115 | 98 | 98,5 |
| Срок годности | Не менее 1 года | 1 год | 1 год | 1 год | 1 год |
| Таблица 2 Значения концентраций азитромицина (мкг/мл) после однократного перорального введения кроликам в дозе 100 мг/кг | ||||||||
| ПРЕДЛАГАЕМАЯ СУСПЕНЗИЯ | ||||||||
| Время, ч | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | М | m |
| 0,5 | 0,8 | 1,3 | 1,4 | 0,9 | 1,1 | 0,9 | 1,07 | 0,10 |
| 1 | 1,4 | 1,9 | 3,3 | 1,8 | 1,7 | 2,5 | 2,10 | 0,28 |
| 1,5 | 1,1 | 2,7 | 2,8 | 1,3 | 2,7 | 2,3 | 2,15 | 0,31 |
| 2 | 1 | 2,8 | 2,3 | 1,2 | 2,4 | 2,1 | 1,97 | 0,29 |
| 3 | 0,8 | 2,2 | 2 | 0,5 | 1,5 | 0,8 | 1,31 | 0,29 |
| 4 | 0,5 | 1,8 | 1,1 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,91 | 0,19 |
| 6 | 0,4 | 0,8 | 0,9 | 0,5 | 0,7 | 0,5 | 0,64 | 0,08 |
| 8 | 0,4 | 0,5 | 0,7 | 0,3 | 0,5 | 0,3 | 0,45 | 0,06 |
| ИЗВЕСТНАЯ СУСПЕНЗИЯ | ||||||||
| Время, ч | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | M | m |
| 0,5 | 1,4 | 0,9 | 0,8 | 1,5 | 1,9 | 0,8 | 1,22 | 0,19 |
| 1 | 1,9 | 1,5 | 1,9 | 2,9 | 2,5 | 3,2 | 2,32 | 0,27 |
| 1,5 | 3,3 | 1,2 | 1,5 | 2,5 | 2,8 | 2,8 | 2,35 | 0,34 |
| 2 | 2,9 | 1,1 | 1,5 | 2,4 | 2,3 | 2,2 | 2,07 | 0,27 |
| 3 | 2,2 | 0,8 | 0,8 | 1,6 | 0,9 | 0,6 | 1,15 | 0,25 |
| 4 | 1,6 | 0,7 | 0,7 | 1,2 | 0,8 | 0,8 | 0,97 | 0,15 |
| 6 | 1,1 | 0,5 | 0,6 | 0,8 | 0,7 | 0,5 | 0,70 | 0,09 |
| 8 | 0,5 | 0,3 | 0,4 | 0,3 | 0,5 | 0,3 | 0,38 | 0,04 |
| Таблица 3 Значения фармакокинетических параметров азитромицина после однократного перорального введения заявляемой суспензии (А) и известной суспензии (В) кроликам в дозе 100 мг/кг. | |||||
| Заявляемый препарат (А) | |||||
| № | T1/2 | Cmах | Тmах | MRT | AUC |
| 1 | 3,9 | 1,4 | 1 | 5,93 | 6,81 |
| 2 | 2,23 | 2,8 | 2 | 4,16 | 13,4 |
| 3 | 3,19 | 3,3 | 1 | 5,02 | 14,2 |
| 4 | 3,92 | 1,8 | 1 | 5,7 | 7,04 |
| 5 | 3,32 | 2,7 | 1,5 | 5,11 | 10,3 |
| 6 | 2,53 | 2,5 | 1 | 4,01 | 7,63 |
| М | 3,18 | 2,42 | 1,25 | 4,99 | 9,90 |
| m | 0,283 | 0,285 | 0,171 | 0,319 | |
| Препарат сравнения (В) | |||||
| № | T1/2 | Cmax | Тmax | MRT | AUC |
| 1 | 2,44 | 3,3 | 1,5 | 4,32 | 14,3 |
| 2 | 3,36 | 1,5 | 1 | 5,22 | 7,2 |
| 3 | 3,65 | 1,9 | 1 | 5,62 | 8,47 |
| 4 | 2,16 | 2,9 | 1 | 3,67 | 11,2 |
| 5 | 4,35 | 2,5 | 1,5 | 5,89 | 11,7 |
| 6 | 3,02 | 3,2 | 1 | 4,46 | 7,82 |
| M | 3,16 | 2,55 | 1,17 | 4,86 | 10,12 |
| m | 0,33 | 0,30 | 0,08 | 0,35 | 1,12 |
| Таблица 4 Результаты стандартного сравнения усредненных данных показателей фармакокинетики азитромицина после однократного перорального введения препаратов А и В | |||||
| T1/2 | Cmax | Тmах | MRT | AUC | |
| А/В | 100,6% | 94,9% | 106,8% | 102,7% | 97,8% |
| t | 0,05 | 0,31 | 0,42 | 0,27 | 0,13 |
| p | >0,05 | >0,05 | >0,05 | >0,05 | >0,05 |
где t - значения критерия Стьюдента; р - значения вероятности, величина р>0,05 указывает на отсутствие достоверной разницы между средними значениями сравниваемых выборок.
1. Фармацевтическая суспензия азитромицина, обладающая антимикробным действием, включающая азитромицин, целевые добавки - производные целлюлозы, ароматизатор, воду, отличающаяся тем, что содержит метилцеллюлозу и дополнительно содержит глицерин, кислоту глутаминовую, натрия бензоат, поливинилпирролидон, пропиленгликоль, сорбит при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Азитромицин 1,7-2,3
Глицерин 15,0-25,0
Кислота глутаминовая 0,1-1,0
Метилцеллюлоза 1,0-3,0
Натрия бензоат 1,0-3,0
Поливинилпирролидон 0,5-3,0
Пропиленгликоль 5,0-10,0
Сорбит 5,0-10,0
Ароматизатор 0,05-0,2
Вода До 100
2. Суспензия по п.1, отличающаяся тем, что в качестве метилцеллюлозы она содержит преимущественно метилцеллюлозу МЦ-16, поливинилпирролидон, преимущественно низкомолекулярный.
3. Суспензия по пп.1 и 2, отличающаяся тем, что она пригодна к употреблению без дополнительного разбавления.
4. Способ получения фармацевтической композиции азитромицина, обладающей антимикробным действием, отличающийся тем, что азитромицин с глутаминовой кислотой в виде раствора в глицерине или в сухом виде добавляют к раствору метилцеллюлозы в воде, содержащему пропиленгликоль и глицерин или пропиленгликоль и последовательно растворенные натрия бензоат, поливинилпирролидон, сорбит, с последующим разбавлением водой.
