Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано в медицине, экологии, фармацевтике и пищевой промышленности. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата представляет собой водный раствор люциферазы светляков, содержащий люциферин, сульфат магния, трис(оксиметиламинометан), уксусную кислоту, этилендиаминотетраацетат натрия, дитиотреитол, бычий сывороточный альбумин и стабилизатор, выбранный из группы, включающей полибрен, поливинилпирролидон, N-фталилхитозан и сахарозу. Применение изобретения позволяет повысить точность и воспроизводимость определения АТФ. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

 

Изобретение относится к области биохимии, а именно к составу реагента для количественного определения аденозин-5'-трифосфата (АТФ) на основе фермента - люциферазы светляков.

Интенсивность биолюминесценции, которая возникает в реакции люциферина, кислорода и АТФ, катализируемой люциферазой светляков, прямо пропорциональна концентрации АТФ. Данная реакция широко используется в аналитических целях для определения АТФ, а именно в медицине, промышленности и экологии. С использованием реагента для определения аденозин-5'-трифосфата разработаны методики быстрого контроля микробиологической чистоты продуктов питания, пищевого сырья, лекарств, косметических товаров, технологических материалов, воды и напитков. Расчеты показывают, что потребности в определении АТФ для этих целей могут достигать миллионов определений в год, если стоимость реагента будет достаточно низкой, а активность и стабильность реагента будут достаточно высокими.

Наиболее близким к заявляемому является Патент РФ №2164241, 1999, (Дементьева Е.И., Кутузова Г.Д., Лундовских И.А., Угарова Н.Н. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата"), принятый за прототип, в котором предложен реагент для определения аденозин-5'-трифосфата, включающий люциферазу, иммобилизованную на полисахаридном носителе, выделенную из рекомбинантных клеток E.coli, содержащих плазмиду с геном люциферазы светляков, очищенную осаждением 35-75%-ным сульфатом аммония, люциферин, сульфат магния, смесь трис-(оксиметил)-аминометана и уксусной кислоты в качестве буферной смеси, смесь этилендиаминтетраацетата натрия с дитиотреитолом в качестве стабилизатора, дополнительный стабилизатор - смесь бычьего сывороточного альбумина и трегалозы и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза иммобилизованная0,05-0,20
Люциферин0,014-0,056
Сульфат магния0,2-0,3
Трис-(оксиметил)-аминометан0,12-0,60
Уксусная кислота0,01-0,60
Этилендиаминтетраацетат натрия0,04-0,08
Дитиотреитол0,05-0,10
Бычий сывороточный альбумин0,05-0,20
D-(+)-трегалоза5,0-20,0
ВодаОстальное

Недостатком прототипа является невысокая каталитическая активность иммобилизованной люциферазы, поскольку при иммобилизации теряется около 80% активности фермента, что делает необходимым использовать для анализа АТФ относительно высокие количества реагента и тем самым увеличивает расход реагента для определения АТФ. Недостатком прототипа также является неоднородность суспензии иммобилизованной люциферазы, что приводит к довольно высокой погрешности результатов при определении ультрамалых концентраций АТФ. Недостатком прототипа является, кроме того, и то, что иммобилизация усложняет процедуру получения реагента, при этом используют дорогостоящий импортный носитель, а в качестве одного из дополнительных стабилизаторов используют высокие концентрации трегалозы.

Задачей настоящего изобретения является повышение активности реагента для определения АТФ, повышение правильности и воспроизводимости определения АТФ, снижение расхода фермента для получения реагента, упрощение процедуры приготовления реагента, а также использование более доступных и эффективных дополнительных стабилизаторов.

Для решения поставленной задачи предлагаются реагенты для определения АТФ, включающие 0,001-0,01 мас.% растворимой люциферазы, выделенной из рекомбинантных клеток E.coli, содержащих плазмиду с геном люциферазы светляков, 0,014-0,028 мас.% люциферина, 0,5-0,75 мас.% сульфата магния, 2,4-4,8 мас.% трис-(оксиметил)-аминометана, 0,1-0,2 мас.% уксусной кислоты, 0,15-0,22 мас.% этилендиаминтетраацетата натрия, 0,04-0,08 мас.% дитиотреитола, 1,0-5,0 мас.% бычьего сывороточного альбумина, воду, а также дополнительный стабилизатор в количестве, эффективном для стабилизации композиции, в качестве которого используют или полибрен (1,5-диметил-1,5-диазоундекаметилен-полиметобромид) в количестве 0,0002-0,02 мас.%, или поливинилпирролидон в количестве 0,5-1,0 мас.%, или N-фталил-хитозан в количестве 0,02-0,1 мас.%, или сахарозу в количестве 10-20 мас.%.

Преимуществом предлагаемых реагентов является снижение расхода фермента при приготовлении, повышение активности, упрощение процедуры получения реагентов, повышение правильности и воспроизводимости определения АТФ и использование в качестве дополнительных стабилизаторов более доступных по сравнению с трегалозой веществ.

Получение плазмид, штаммов E.coli, содержащих плазмиду с геном люциферазы, наращивание биомассы клеток, выделение и очистку люциферазы проводят по методу, описанному в прототипе. Реагенты получают добавлением к концентрированному раствору люциферазы, содержащему 20-100 Е/мл активного фермента, определенного объема трис-(оксиметил)-аминометанацетатного буферного раствора, рН 7,8, содержащего люциферин, сульфат магния, этилендиаминтетраацетат натрия, дитиотреитол, бычий сывороточный альбумин и воду, и в качестве дополнительного стабилизатора - или полибрен (1,5-диметил-1,5-диазоундекаметилен-полиметобромид) в количестве 0,0002-0,02 мас.%, или поливинилпирролидон в количестве 0,5-1,0 мас.%, или N-фталил-хитозан в количестве 0,02-0,1 мас.%, или сахарозу в количестве 10-20 мас.%. После тщательного перемешивания раствор в стерильных условиях фильтруют через бактериальный фильтр, разливают во флаконы, замораживают, лиофилизуют, герметически закрывают под вакуумом и хранят до использования в холодильнике. Перед использованием в каждый флакон добавляют определенный объем деионизованной стерильной воды, получая реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 0,5-5 Е/мл.

Изобретение поясняется следующими примерами, которые имеют иллюстративный, но не ограничительный характер.

Пример 1. Приготовление реагента для определения АТФ на основе растворимой люциферазы, выделенной из рекомбинантных клеток E.coli, содержащих плазмиду с геном люциферазы святляков

а. К 1 мл раствора люциферазы, полученной, как описано в прототипе, с активностью 20 Е/мл в 0,05 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатном буферном растворе, рН 7,8, содержащем 10 мМ сульфат магния, 2 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 1 мМ дитиотреитол, добавляют 39 мл 0,2 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатного буферного раствора, рН 7,8, содержащего 0,5 мМ люциферин, 20 мМ сульфат магния, 4 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 10 мг/мл бычий сывороточный альбумин и 0,002 мг/мл полибрен, тщательно перемешивают, фильтруют через стерильный фильтр в стерильную колбу, разливают в стерильные флаконы по 1,0 мл, замораживают, лиофилизуют, герметически закрывают под вакуумом и хранят до использования в холодильнике. Перед использованием в каждый флакон с лиофилизованным реагентом добавляют 1,0 мл деионизованной стерильной воды. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 0,5 Е/мл, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,001
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис(оксиметил аминометан)4,8
Уксусная кислота0,2
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин1,0
Полибрен0,0002
ВодаОстальное

б. Все операции проводят, как описано в примере 1а, но используют 0,2 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатный буферный раствор, рН 7,8, содержащий 1 мМ люциферин, 30 мМ сульфат магния, 6 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 50 мг/мл бычий сывороточный альбумин, 0,2 мг/мл полибрен. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 0,5 Е/мл, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,001
Люциферин0,028
Сульфат магния0,75
Трис(оксиметил аминометан)4,8
Уксусная кислота0,2
Этилендиаминтетраацетат натрия0,22
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин5,0
Полибрен0,02
ВодаОстальное

в. Все операции проводят, как описано в примере 1а, но используют 1 мл раствора люциферазы с активностью 100 Е/мл и 19 мл 0,1 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатного буферного раствора, рН 7,8, содержащего 0,5 мМ люциферин, 20 мМ сульфат магния, 4 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 10 мг/мл бычий сывороточный альбумин, 0,2 мг/мл N-фталил-хитозан. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 5 Е/мл, при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,01
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис-(оксиметил аминометан)2,4
Уксусная кислота0,1
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,08
Бычий сывороточный альбумин1,0
N-Фталил-хитозан0,02
ВодаОстальное

г. Все операции проводят, как описано в примере 1в, но для приготовления реагента используют 0,2 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатный буферный раствор, рН 7,8, содержащий 1 мМ люциферин, 30 мМ сульфат магния, 6 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 50 мг/мл бычий сывороточный альбумин и 1 мг/мл N-фталил-хитозан. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 5 Е/мл, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,01
Люциферин0,028
Сульфат магния0,75
Трис(оксиметиламинометан)4,8
Уксусная кислота0,2
Этилендиаминтетраацетат натрия0,22
Дитиотреитол0,08
Бычий сывороточный альбумин5,0
N-Фталил-хитозан0,1
ВодаОстальное

д. Все операции проводят, как описано в примере 1а, но используют 0,1 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатный буферный раствор, рН 7,8, содержащий 0,5 мМ люциферин, 20 мМ сульфат магния, 4 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 10 мг/мл бычий сывороточный альбумин и 5 мг/мл поливинилпирролидон. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 0,5 Е/мл, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,001
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис(оксиметиламинометан)2,4
Уксусная кислота0,1
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин1,0
Поливинилпирролидон0,5
ВодаОстальное

е. Все операции проводят, как описано в примере 1д, но используют 0,1 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатный буферный раствор, рН 7,8, содержащий 0,5 мМ люциферин, 20 мМ сульфат магния, 4 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 50 мг/мл бычий сывороточный альбумин, 10 мг/мл поливинилпирролидон. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью люциферазы 0,5 Е/мл, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Люцифераза растворимая0,001
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис(оксиметиламинометан)2,4
Уксусная кислота0,1
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин5,0
Поливинилпирролидон1,0
ВодаОстальное

ж. Все операции проводят, как описано в примере 1а, но используют люциферазу с активностью 50 Е/мл и 39 мл 0,2 М трис-(оксиметил)-аминометанацетатного буферного раствора, рН 7,8, содержащего 0,5 мМ люциферин, 20 мМ сульфат магния, 4 мМ этилендиаминтетраацетат натрия, 10 мг/мл бычий сывороточный альбумин, 100 мг/мл сахарозу и получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью 1,25 Е/мл, при следующем соотношении компонентов:

Люцифераза растворимая0,005
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис(оксиметиламинометан)4,8
Уксусная кислота0,2
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин1,0
Сахароза10,0
ВодаОстальное

з. Все операции проводят, как описано в примере 1ж, но используют буферный раствор, содержащий 50 мг/мл бычий сывороточный альбумин и 200 мг/мл сахарозы. Получают реагент для измерения концентрации АТФ с активностью 1,25 Е/мл, при следующем соотношении компонентов:

Люцифераза растворимая0,005
Люциферин0,014
Сульфат магния0,5
Трис(оксиметиламинометан)4,8
Уксусная кислота0,2
Этилендиаминтетраацетат натрия0,15
Дитиотреитол0,04
Бычий сывороточный альбумин5,0
Сахароза20,0
ВодаОстальное

Пример 2. Методика измерения концентрации АТФ

0,05 мл реагента, полученного, как описано в примере 1, вводят в цилиндрическую микрокювету объемом 0,2 мл и диаметром 7 мм. Кювету помещают в кюветное отделение люминометра и регистрируют фоновый сигнал, который, как правило, равен 0. Добавляют 0,05 мл раствора АТФ с известной концентрацией. Раствор быстро перемешивают и регистрируют интенсивность биолюминесценции. Операцию повторяют не менее двух раз. Измерения повторяют для растворов АТФ различной концентрации. Результаты измерений с использованием реагентов, полученных по примеру 1, показаны в таблице 1. Прямая пропорциональная зависимость биолюминесценции от концентрации АТФ наблюдается в диапазоне концентраций АТФ от 10-13 до 10-8 М. По полученным данным строят градуировочный график зависимости интенсивности биолюминесценции от концентрации АТФ. Концентрацию АТФ в неизвестном образце определяют по интенсивности биолюминесценции, регистрируемой для неизвестного образца, как описано выше, используя градуировочный график. При работе с концентрациями АТФ от 10-11 Ми выше предпочтительнее использовать реагент, описанный в примерах 1д-1з, с концентрациями АТФ от 10-12 М и выше - реагент, описанный в примерах 1в и 1 г, а с концентрациями АТФ от 10-13 М и выше - реагент, описанный в примерах 1а и 1б.

Пример 3. Испытание стабильности реагента

Раствор реагента, приготовленного, как описано в примере 1, инкубируют при 20°С и через определенные интервалы времени отбирают пробу и определяют интенсивность биолюминесценции, как описано в примере 2, для раствора АТФ с фиксированной концентрацией. Из данных зависимости интенсивности биолюминесценции от длительности инкубации определяют полупериод инактивации реагента в растворе. Результаты приведены в таблице 2.

Таблица 1
Результаты измерения концентрации АТФ с использованием реагента, полученного по примерам 1а-1з
Концент-

рация АТФ в кювете, М
Интенсивность биолюминесценции, усл.ед.
Реагент по примеру 1аРеагент по примеру 1бРеагент по примеру 1вРеагент по примеру 1 гРеагент по примеру 1дРеагент по примеру 1eРеагент по примеру 1жРеагент по примеру 1з
Активность люциферазы, Е/мл →0,50,55,05,00,50,51,251,25
1×10-85800661510986116622405254448905060
5×10-935603570495661561265153823502421
1×10-91373137412901190269401468455
5×10-108941100559659116132256260
1×10-1037041214012729304142
5×10-11280240484915162225
1×10-1112513719184556
5×10-128590661122,1
1×10-12405122
1×10-12910

Таблица 2
Испытание стабильности реагента
Реагент по способуПолупериод инактивации, дни
Прототип2,0
Реагент, предлагаемый по примерам:
1а-1б3,2
1в-1г2,5
1д-1е2,2
1ж-1з3,0

1. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата, включающий 0,001-0,01 мас.% люциферазы светляков, 0,014-0,028 мас.% люциферина, 0,5-0,75 мас.% сульфата магния, 2,4-4,8 мас.% трис (оксиметиламинометана), 0,1-0,2 мас.% уксусной кислоты, 0,15-0,22 мас.% этилендиаминотетраацетата натрия, 0,04-0,08 мас.% дитиотреитола, 1,0-5,0 мас.% бычьего сывороточного альбумина, 0,0002-0,02% полибрена и воду.

2. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата, включающий 0,001-0,01 мас.% люциферазы светляков, 0,014-0,028 мас.% люциферина, 0,5-0,75 мас.% сульфата магния, 2,4-4,8 мас.% трис (оксиметиламинометана), 0,1-0,2 мас.% уксусной кислоты, 0,15-0,22 мас.% этилендиаминотетраацетата натрия, 0,04-0,08 мас.% дитиотреитола, 1,0-5,0 мас.% бычьего сывороточного альбумина, 0,5-1,00 мас.% поливинилпирролидона и воду.

3. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата, включающий 0,001-0,01 мас.% люциферазы светляков, 0,014-0,028 мас.% люциферина, 0,5-0,75 мас.% сульфата магния, 2,4-4,8 мас.% трис (оксиметиламинометана), 0,1-0,2 мас.% уксусной кислоты, 0,15-0,22 мас.% этилендиаминотетраацетата натрия, 0,04-0,08 мас.% дитиотреитола, 1,0-5,0 мас.% бычьего сывороточного альбумина, 0,02-0,1 мас.% N-фталилхитозана и воду.

4. Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата, включающий 0,001-0,01 мас.% люциферазы светляков, 0,014-0,028 мас.% люциферина, 0,5-0,75 мас.% сульфата магния, 2,4-4,8 мас.% трис (оксиметиламинометана), 0,1-0,2 мас.% уксусной кислоты, 0,15-0,22 мас.% этилендиаминотетраацетата натрия, 0,04-0,08 мас.% дитиотреитола, 1,0-5,0 мас.% бычьего сывороточного альбумина, 10-20 мас.% сахарозы и воду.

5. Реагент по пп.1-4, отличающийся тем, что в качестве люциферазы используют люциферазу, выделенную из клеток E.coli, содержащих плазмиду с геном люциферазы светляков.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для дифференцированного определения численности бактерий в смешанных культурах, которые имеют широкое распространение в природе: в воздухе, почве, водоемах, составе естественной микрофлоры высших организмов и среди контаминантов, вызывающих порчу различных объектов.

Изобретение относится к биохимии, в частности к способам получения иммобилизованных ферментов, и может быть использовано в химии, биохимии, медицине, гистологии, микробиологии, экологии и сельском хозяйстве для анализа веществ биолюминесцентным методом.

Изобретение относится к методам анализа токсичных соединений и может быть использовано при экологическом мониторинге. .

Изобретение относится к экологии и генетической токсикологии. .

Изобретение относится к области биохимии. .

Изобретение относится к способам калибровки химических анализов и, в частности, но не исчерпываясь этим, к способу калибровки анализов особоважных веществ в аналитической микробиологии, например, калибровки анализа на аденозин 5'-трифосфат (АТР).

Изобретение относится к санитарии и медицине и может быть использовано при определении общей микробной обсемененности или содержания coli-форм в пищевых продуктах, биологических жидкостях, смывах с технологического оборудования с помощью биолюминесценции.

Изобретение относится к биохимии, в частности к анализу формиатдегидрогеназы в клетках и растворах и может найти применение в микробиологической промышленности, медицине, а также в научных исследованиях.

Изобретение относится к биохимическому анализу и может быть использовано для определения гликогенфосфорилазы в сыворотке крови. .

Изобретение относится к области биохимии

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в различных аналитических системах, основанных на явлении биолюминесценции

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к биокатализаторам на основе иммобилизованных клеток бактерий, и может быть использовано для получения иммобилизованного биокатализатора, предназначенного для определения различных токсикантов

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам получения иммобилизованных ферментов, и может быть использован в химии, биохимии, медицине, микробиологии, экологии и сельском хозяйстве для анализа веществ биолюминесцентным методом

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к реагенту для определения аденозин-5'-трифосфата

Группа изобретений относится к области генной инженерии, в целом к трансгенным конструкциям, трансгенным животным, отличным от человека, способам количественного анализа активации GPCR лигандов неинвазивно в интактных животных, тканевых срезах или в нативных клетках, используя трансгенную модель, содержащую систему биолюминесцентного трансгена-репортера, которая является чувствительной к модуляции путей после связывания лиганда с рецепторами GPCR. Трансгенное животное, отличное от человека, для оценки функции рецептора, сопряженного с G-белком (GPCR), имеющее геном, содержащий индуцируемый циклическим АМФ (цАМФ), трансген, содержащий, в направлении от 5′-конца к 3′-концу, первый инсуляторный элемент, ответный элемент цАМФ, промотор, биолюминесцентный репортер, миниген человеческого гормона роста (hGH) и второй инсуляторный элемент. Использование трансгенной конструкции приводит к повышению мышиных линий, продуцирующих мРНК и белок, а также к увеличению уровня экспрессии репортерного гена. 9 н. и 11 з.п. ф-лы, 41 ил., 10 табл.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен метод выявления люциферазы в биологических образцах с использованием 3-гидроксигиспидина или 3-гидроксибиснориангонина в качестве люциферина. Предложено соединение для реализации указанного метода, представляющее собой 3-гидроксигиспидин. Кроме того, предложен метод выявления люциферазы в присутствии гиспидин-3-гидроксилазы в биологических образцах с использованием гиспидина или биснориангонина в качестве прекурсора люциферина и НАД(Ф)Н. Также предложен набор реактивов для реализации указанного метода, включающий гиспидин или биснориангонин и НАД(Ф)Н. Группа изобретений позволяет выявлять люциферазу грибов в биологических образцах и в дальнейшем может быть использована в широком спектре биолюминесцентных анализов in vivo и in vitro. 4 н.п. ф-лы, 19 ил., 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к способу определения генотоксичности химических веществ. Способ предусматривает добавление рибофлавина до конечной концентрации 1⋅10-7 мг/мл - 1⋅10-5 мг/мл в культуру Escherichia coli К12 MG1655 с плазмидой pColD-lux, в которой lux оперон биолюминесценции морских фотобактерий Photobacterium leiognathi, Vibrio fischeri или Photorabdus luminescens поставлен под контроль промотора pColD. Осуществляют добавление тестируемого вещества и определение интенсивности люминесценции полученной суспензии и контроля. О повреждающем действии тестируемого вещества судят по отклонению интенсивности люминесценции суспензии от контроля. Изобретение обеспечивает увеличение фактора индукции. 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Изобретение относится к способу определения токсичности химических веществ, генерирующих активные формы кислорода. Способ предусматривает добавление рибофлавина до конечной концентрации 1⋅10-5 мг/мл - 1⋅10-3 мг/мл в культуру Escherichia coli К12 MG1655 с плазмидой PkatG-lux, в которой lux оперон биолюминесценции морских фотобактерий Photobacterium leiognathi, Vibrio fischeri или Photorabdus luminescens поставлен под контроль промотора PkatG. Осуществляют добавление тестируемого вещества и определение интенсивности люминесценции полученной суспензии и контроля. О повреждающем действии тестируемого вещества судят по отклонению интенсивности люминесценции суспензии от контроля. Изобретение обеспечивает увеличение фактора индукции. 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и биохимии, конкретно к векторной конструкции. Описанная репортерная система на основе лентивирусных репортерных конструкций позволяет с высокой точностью зарегистрировать взаимодействия исследуемых белков в клетке животного, растения, гриба и бактерии, а также зарегистрировать явление транспортировки белка из одной клетки в другую. Изобретение основано на двух генетических конструкциях в виде плазмидной ДНК, содержащих части гена люциферазы, выделенной из светлячка (род. Photinus) Photinus pyralis. 2 з.п. ф-лы, 4 ил.
Наверх