Препарат для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота
Владельцы патента RU 2278668:
Государственное научное учреждение (ГНУ) Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии (ВНИВИПФиТ) (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии, касается препарата для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота. Изобретение заключается в том, что предложенный препарат включает левомицетин, диоксидин, 1,2-пропиленгликоль, воду дистиллированную, полиэтиленоксид при определенном соотношении компонентов. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения респираторных заболеваний молодняка крупного рогатого скота, а также при применении препарата не установлено противопоказаний, побочных явлений и осложнений. 4 табл.
Изобретение относится к области ветеринарии, касается композиционного препарата, предназначенного для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота.
Известен аналог - препарат для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии /1/, включающий антибиотик левомицетинового ряда - левомицитина сукцинат и тетрациклин, сульфаниламидный препарат - сульфоэтидол, аскорбиновую кислоту, новокаин, растворитель и пролонгатор - 1,2-пропиленгликоль и дополнительно в качестве стабилизатора - Твин-80 при следующем соотношении компонентов, г/100 мл:
Левомицетин сукцинат АДВ (левомицетиновая группа) - 3,0-5,0;
Тетрациклин АДВ (окситетрациклин) (тетрациклиновая группа) - 3,0-5,0;
Сульфаэтидол АДВ (этазол) - 1,5-2,5;
Новокаин - 0,8-1,2;
Аскорбиновая кислота - 0,08-0,12;
Твин-80 (официнальный) - 18,0-22,0;
1,2-Пропиленгликоль - до 100 мл.
Аналог недостаточно эффективен из-за того, что при совместном применении аскорбиновой кислоты и тетрациклинов повышается содержание последних в крови. Данный эффект, по-видимому, связан с изменением реакции мочи в кислую сторону. При этом снижается диссоциация тетрациклинов, что в свою очередь способствует реабсорбции препарата в почечных канальцах. Аскорбиновая кислота, изменяя рН мочи в кислую сторону, может стать причиной кристаллурии, а также может уменьшиться выведение сульфаниламидов с мочой.
Известен аналог - препарат "Эридин" для лечения бронхопневмонии телят /2/, содержащий, мас.%:
Эритромицин - 5,0-10,0;
Крахмал - 7,5-12,5;
Кальция стеарат - 1,0-2,0;
Диоксидин - 4,0-8,0;
Лактоза - остальное.
Назначают его по 1 брикету 1-2 раза в сутки в течение 3-5 дней.
Препарат «Эридин» недостаточно эффективен из-за того, что время снижения концентрации эритромицина в крови наполовину составляет 1-1,2 часа. Для поддержания терапевтического уровня в крови препарат необходимо применять 2-4 раза в сутки.
Наиболее близким аналогом является антибактериальный препарат /3/, включающий аскорбиновую кислоту, левомицетин и пропиленгликоль, с целью повышения биологической активности, дополнительно содержащий сульфадимезин, окситетрациклина гидрохлорид, новокаин и полиэтиленгликоль-400 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Аскорбиновая кислота - 0,05-0,15;
Левомицетин - 2-6
Сульфадимезин - 1-3;
Окситетрациклина гидрохлорид - 2-6;
Полиэтиленгликоль-400 - 10-30;
Новокаин - 0,5-1,5;
Пропиленгликоль - до 100.
Недостаток данного аналога связан со следующими причинами. Механизм действия сульфаниламидов основан на их конкурентном антагонизме с парааминобензойной кислотой (ПАБК), необходимой микроорганизмам как «фактор роста» для синтеза дигидрофалиевой кислоты. Противомикробный эффект осуществляется только при значительном превышении концентрации сульфаниламидов над ПАБК в окружающей микробов среде. Поскольку при гидролизе новокаина в организме образуется ПАБК, ее концентрация в тканях повышается и сульфаниламиды теряют свою «конкурентоспособность».
Технический результат изобретения - повышение эффективности лечения респираторных заболеваний крупного рогатого скота, а также снижение побочных эффектов.
Для реализации предлагается композиционный препарат, состоящий из следующих компонентов на 100 мл:
Левомицетин - 2,0 г;
Диоксидин - 1,0 г;
1,2-пропиленгликоль - 55,0 мл;
Вода дистиллированная - 20,0 мл;
Полиэтиленоксид 400 - до 100,0 мл.
Действующими веществами препарата являются левомицетин и диоксидин.
Левомицетин эффективен в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов: сальмонелл, пастерелл, эшерихий, стафилококков, стрептококков, диплококков, протея и других. Действует на штаммы бактерий, устойчивых к пенициллинам, стрептомицину, сульфаниламидам. Активен против грамотрицательных анаэробов.
Диоксидин эффективен в отношении грамотрицательных, грамположительных патогенных и условно патогенных аэробных и анаэробных микроорганизмов спорообразующих и неспорообразующих видов. Препарат активен в отношении микроорганизмов, обладающих малой чувствительностью и резистентностью к антибиотикам и другим химиотерапевтическим средствам.
Левомицетин и диоксидин, входящие в состав препарата, хорошо диффундируют в различные ткани и жидкости организма, удерживаясь на терапевтическом уровне в сыворотке крови в течение 24 часов. Применяют препарат следующим образом. Перед применением подогревают до 37-38°С. Препарат применяют внутримышечно двукратно с интервалом 24 часа: молодняку крупного рогатого скота - в дозе 0,15 мл/кг массы тела. При тяжелом течении болезни вводят трехкратно с интервалом между введениями 24 часа. Препарат в рекомендуемых дозах не оказывает отрицательного влияния на организм животных. Противопоказаний, побочных явлений и осложнений после применения препарата не установлено. Убой животных на мясо разрешается не ранее, чем через 10 суток после последнего введения препарата. Мясо животных, вынужденно убитых до истечения указанного срока, может быть использовано для кормления плотоядных животных или для производства мясокостной муки. Сущность заявляемого технического решения поясняется примерами.
Пример 1. Обоснование эффективности.
Опыт по изучению эффективности применения заявляемого препарата для лечения бронхопневмонии проведен на телятах 2,0-2,5 месячного возраста. Диагноз на заболеваемость телят бронхопневмонией ставился комплексно на основании клинических наблюдений, данных патологоанатомического вскрытия и результатов бактериологического исследования.
Животные по принципу парных аналогов были разделены с учетом общего состояния и тяжести заболевания на две группы.
Для лечения телят первой группы (88 голов) использовали базовый вариант - тетрахлорид /4/ внутримышечно в дозе 10 мг/кг массы тела один раз в день до и в течение 2-3 дней после исчезновения клинических признаков заболевания. Для лечения телят второй группы (89 голов) применяли заявляемый препарат внутримышечно в дозе 0,15 мл/кг живой массы один раз в сутки с интервалом между введениями 24 часа. При тяжелом течении болезни препарат вводили трехкратно с интервалом между введениями 24 часа.
За животными контрольной и опытной групп вели ежедневное клиническое наблюдение, при этом учитывали общее состояние, поведение, аппетит, течение болезни, сроки выздоровления.
Результаты опыта по изучению эффективности применения для лечения бронхопневмонии у телят представлены в таблице 1.
| Таблица 1 Эффективность применения базового и заявляемого препарата для лечения бронхопневмонии у телят | ||
| Показатели | Группа животных | |
| Контрольная (тетрахлорид) | Опытная (заявляемый препарат) | |
| Количество животных, голов | 88 | 89 |
| Сроки выздоровления, дней | 6,4±0,6 | 3,8±0.8 |
| Выздоровело, голов | 75 | 84 |
| % | 85,2 | 94,4 |
| Вынужденно убито, голов | 10 | 4 |
| % | 11,4 | 4,5 |
| Пало, голов | 3 | 1 |
| % | 3,4 | 1,1 |
В результате проведенных исследований было установлено, что применение заявляемого препарата для лечения бронхопневмонии у телят является эффективным. Количество выздоровевших животных в опытной группе выше на 9,2% по сравнению с контролем, снижается падеж животных на 2,3%. Каких-либо побочных явлений, свидетельствующих о токсическом влиянии заявляемого препарата на телят не отмечалось.
Пример 2.
Изучение общего действия заявляемого препарата.
Изучение общего действия на организм сельскохозяйственных животных проведено на 16 телятах одномесячного возраста.
Общее действие препарата при его внутримышечном применении оценивали по клиническому состоянию, морфологическим, биохимическим и иммунологическим показателям крови.
Кровь для исследования брали у телят из яремной вены в утреннее время до кормления.
Заявляемый препарат применяли телятам внутримышечно в дозах 0,15; 0,30; 0,60 мл/кг массы тела в течение 15 дней.
Установлено, что применение предложенного препарата в изучаемых дозах не оказывает существенного влияния на клинический статус, поведение и аппетит телят. В период всего опыта телята контрольной и опытных групп были подвижны, аппетит выражен, рефлексы сохранены. Нарушений функций пищеварения и мочеотделения не установлено. Препарат в различных дозах не снижал скорости роста телят.
При многократном применении в дозе 0,60 мл/кг массы тела морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови также существенно не отличались от показателей у телят контрольной группы (табл.2).
Исключение составляют показатели, характеризующие функциональное состояние печени и почек. Повышение до верхних границ норм в сыворотке крови мочевины, креатинина, а также количества билирубина и активности АлАТ свидетельствуют о возросшей нагрузке на эти органы.
| Таблица 2 Показатели крови клинически здоровых телят при применении заявляемого препарата. | ||||
| Показатели | Контроль | Дозы, мл/кг | ||
| 0,15 | 0,30 | 0,60 | ||
| Эритроциты, 1012/л | 7,5±0,32 | 7,6±0,23 | 7,7±0,32 | 7,8±0,31 |
| Лейкоциты, 109/л | 12,6±1,12 | 12,7±1,37 | 13,2±1,86 | 12,9±1,15 |
| Гемоглобин, г/л | 116,3±3,15 | 118,5±2,40 | 116,3±2,24 | 119,2±2,58 |
| Гематокрит, % | 39,5±0,27 | 38,2±0,53 | 41,3±1,14 | 38,2±1,16 |
| СОЭ, мм/час | 4,8±0,40 | 4,6±0,59 | 4,8±0,50 | 4,7±0,32 |
| Общий белок, г/л | 67,1±3,14 | б5,3±2,15 | 67,8±2,15 | 72,8±2,12 |
| Мочевина, мМ/л | 3,8±0,21 | 3,8±0,26 | 4,2±0,26 | 6,4±0,45 |
| Глюкоза, мМ/л | 4,8±0,32 | 4,8±0,36 | 4,6±0,26 | 4,8±0,38 |
| Общие липиды, г/л | 2,9±0,25 | 3,0±0,36 | 3,1±0,23 | 2,9±0,24 |
| АсАТ, мккат/л | 0,25±0,02 | 0,28±0,03 | 0,33±0,04 | 0,39±0,05 |
| АлАТ, мккат/л | 0,26±0,02 | 0,31±0,05 | 0,36±0,04 | 0,51±0,06 |
| Креатинин, мкМ/л | 105,3±3,58 | 108,5±3,82 | 114,6±2,69 | 135,7±6,82 |
| Билирубин, мкМ/л | 0,60±0,18 | 0,68±0,21 | 0,78±0,29 | 1,31±0,45 |
| Нейтрофилы, % палочкоядерные | 2,8±0,43 | 2,8±0,25 | 2,7±0,37 | 2,9±0,36 |
| сегментоядерные | 26,6±1,57 | 28,7±1,05 | 29,1±1,88 | 28,4±1,67 |
| Эозинофилы, % | 6,3±0,24 | 6,3±0,32 | 5,8±0,53 | 6,4±0,81 |
| Базофилы, % | 0,7±0,18 | 0,8±0,25 | 0,8±0,12 | 0,8±0,14 |
| Моноциты,% | 2,6±0,28 | 2,6±0,50 | 2,3±0,25 | 1,8±0,21 |
| Лимфоциты, % | 58,9±1,67 | 57,8±2,18 | 56,4±2,74 | 55,9±2,10 |
| Лизоцим, мкг/мл | 1,37±0,34 | 1,51±0,32 | 1,47±0,38 | 1,38±0,43 |
| Бак. Активность, % | 67,2±2,15 | 67,7±2,89 | 68,9±3,13 | 68,1±3,12 |
| Фагоцитарн. активность, % | 65,3±3,14 | 65,3±3,21 | 66,3±2,14 | 65,8±3,01 |
| ФИ | 10,3±0,85 | 11,2±0,67 | 10,7±0,55 | 11,4±0,68 |
| ФЧ | 7,1±0,77 | 6,9±0,52 | 7,0±0,62 | 7,0±0,54 |
Пример 3.
Изучение оптимального соотношения компонентов препарата для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота.
3.1 Изучение оптимального соотношения левомицетина и диоксидина в опытах in vitro.
Изучение оптимального соотношения левомицетина и диоксидина в препарате для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота проводилось in vitro методом серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ) с определением минимальной бактериостатической концентрации (МБсК) и сравнение антимикробной активности левомицетина и диоксидина и комбинаций левомицетина и диоксидина в соотношениях (г)1:2; 2:1; 1,5:1,5 в отношении стрептококка Streptococcus pneumoniae (n), пастереллы - Pasterella multocida, типированных по морфологическим, биохимическим, культуральным и серологическим свойствам.
Установлено (табл.3), что наиболее выраженным антимикробным действием в отношении изученных штаммов микроорганизмов обладала комбинация левомицетина и диоксидина в соотношении (г)2:1.
| Таблица 3 Антимикробная активность комбинации левомицетина и диоксидина (мкг/мл) | |||||
| Вид микроорганизмов | Минимальная бактериостатическая концентрация, (МБсК), мкг/мл | ||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
| Streptococcus pneumoniae (n) | 7,8 | 15,6 | 3,75 | 1,88 | 3,75 |
| Pasterella multocida | 3,9 | 7,8 | 0,94 | 0,47 | 1,88 |
| Обозначения в таблице: 1 - левомицетин 2 - диоксидин 3 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношении (г) 1:2. 4 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношении (г) 2:1. 5 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношении (г) 1,5:1,5. |
МБсК данной комбинации в отношении Streptococcus pneumoniae (n) составила 1,88 мкг/мл, а в отношении Pasterella multocida - 0,47 мкг/мл и превосходила МБсК как составных частей комбинации так и комбинации левомицетина и диоксидина в соотношении (г) 1:2 и 1,5:1,5.
Фракциональная ингибирующая концентрация (ФИК) левомицетина в комбинации левомицетина и диоксидина в соотношении (г) 2:1 в опыте с культурой Streptococcus pneumoniae (n) составила 0,160; диоксидина 0,040.
ФИК-индекс (сумма фракциональных ингибирующих концентраций компонентов) комбинации левомицетина с диоксидином в оптимальном соотношении (г) 2:1 в опыте с культурой Streptococcus pneumoniae (n) равнялся 0,200.
ФИК левомицетина в комбинации с оптимальным соотношением левомицетина с диоксидином (г) 2:1 в опыте с культурой Pasterella multocida составила 0,079, диоксидина - 0,021.
ФИК-индекс комбинации левомицетина с диоксидином в оптимальном соотношении (г) 2:1 в опыте с культурой Pasterella multocida равнялся 0,100.
3.2 Изучение оптимального соотношения левомицетина и диоксидина в опытах in vivo.
Изучение оптимального соотношения левомицетина и диоксидина в леводиоксиде проведено в опытах по лечению бронхопневмонии у телят.
Диагноз на заболевание бронхопневмонией устанавливали на основании данных клинического обследования животных, патологоанатомического вскрытия, лабораторных исследований с учетом эпизоотической ситуации в хозяйстве.
Результаты исследований представлены в таблице 4.
| Таблица 4. Эффективность применения препарата для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота с различным соотношением левомицетина и диоксидина при лечении бронхопневмонии у телят. | |||
| Показатели | Соотношение левомицетина и диоксидина | ||
| 1 | 2 | 3 | |
| Количество животных, гол. | 46 | 48 | 49 |
| Продолжительность лечения, дни | 4,7±0,3 | 3,8±0,4 | 3,9±0,25 |
| Выздоровело, гол % | 41 89,1 | 44 91,7 | 44 89,8 |
| Осталось больными, гол % | 3 6,52 | 3 6,25 | 3 6,12 |
| Пало, гол % | 2 4,3 | 1 2,1 | 2 4,1 |
| Лечебная эффективность, % | 89,1 | 91,7 | 89,8 |
| Обозначения в таблице: 1 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношениях (г) 1:2. 2 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношениях (г) 2:1. 3 - комбинация левомицетина и диоксидина в соотношениях (г) 1,5:1,5 |
В опыте на телятах при лечении бронхопневмонии подтверждена более высокая эффективность комбинации левомицетина и диоксидина в леводиоксиде в соотношении (г) 2:1.
Проведенные исследования показали, что разработан комплексный антимикробный препарат, содержащий левомицетин, диоксидин, 1,2-пропиленгликоль, полиэтиленоксид 400 и воду дистиллированную.
В экспериментах на лабораторных и сельскохозяйственных животных установлено, что препарат обладает широким спектром антимикробной активности в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов - основных возбудителей респираторных болезней у молодняка сельскохозяйственных животных. Бактериостатическая концентрация препарата в отношении изученных штаммов микроорганизмов составляет от 7,8 до 62,5 мкг/мл, а бактерицидная проявлялась в концентрациях, превосходящих МБсК в 2 раза.
Изучение параметров токсичности показало, что препарат относится к малотоксичным веществам (IV класс токсичности). Он обладает слабовыраженным кожно-раздражающим действием; у препарата не выявлено кожно-резорбтивного действия, у него отсутствуют кумулятивные и аллергенные свойства.
При изучении влияния препарата на организм клинически здоровых животных не установлено его отрицательного влияния на морфологический состав крови, иммунный статус и основные виды обмена веществ.
При длительном применении препарат не оказывает отрицательного влияния на качество мяса и мясопродуктов.
Препарат стабилен при хранении в течение 1 года при температуре от 5 до 10°С.
Проведенные испытания его для лечения желудочно-кишечных и респираторных болезней бактериальной этиологии у поросят и телят показали его высокую эффективность.
Таким образом, на основании результатов проведенных исследований установлено, что заявляемый препарат обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием при респираторных болезнях бактериальной этиологии у телят.
Источники информации
1. RU, 2214821 С2, 27.10.2003 г.
2. RU, 1424170 C, 20.12.1995 г.
3. RU, 1341765 С, 10. 06.2001 г.
4. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник / В.Ф.Ковалев, И.Б.Волков, Б.В.Виолин и др. - М.: Агропромиздат, 1998. - С.23; Наставление по применению тетрациклина гидрохлорида для инъекций в ветеринарии / Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 11 января 1996 г.
Препарат для лечения респираторных заболеваний бактериальной этиологии молодняка крупного рогатого скота, включающий левомицетин и 1,2 пропиленгликоль, отличающийся тем, что он дополнительно содержит диоксидин, полиэтиленоксид 400 и воду дистиллированную при следующем соотношении компонентов на 100 мл препарата:
| Левомицетин | 2,0 г |
| Диоксидин | 1,0 г |
| 1,2-пропиленгликоль | 55,0 мл |
| Вода дистиллированная | 20,0 мл |
| Полиэтиленоксид 400 | До 100,0 мл |
