5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролы), проявляющие противомикробную активность в отношении грамположительной микрофлоры и способ их получения

Изобретение относится к новым 5-Метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролам) формулы IIIa, б

Х означает Оме, Y означает Me (IIIa); X означает Br, Y означает Cl (IIIб), которые проявляют противомикробную активность в отношении грамположительной микрофлоры. Описан способ их получения. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым индивидуальным соединениям класса пиррол-3-спиро-2-пирролов, обладающих противомикробной активностью, и к способу их получения, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем.

Известны структурные аналоги заявленных соединений, получаемые взаимодействием 1-арил-4-ароил-5-метоксикарбонил-2,3-дигидро-2,3-пирролдионов с 3-алкиламино-5,5-диметилциклогексен-2-онами-1 (Химия Гетероциклических Соединений, 2004, Вып.4. С 563). Синтез структурных аналогов осуществляется по следующей схеме:

R=СН₂С₆Н₅ (I), С₆Н₁₁-с (II); Ar=р-NO₂С₆Н₄ (I), С₆Н₅ (II); Ar'=С₆Н₅ (I), р-ClC₆Н₄ (II)

К недостаткам данного способа относится невозможность получения 5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2.3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролов).

Задачей изобретения является разработка простого способа синтеза неописанных в литературе 5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролов), проявляющих противомикробную активность и которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем.

Поставленная задача осуществляется путем кипячения 3-ароил-2,4-дигидро-1Н-пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-трионов с этил 3-ариламино-2-бутеноатами (этиловыми эфирами 3-ариламино-2-бутеновых кислот), взятыми в соотношении 1:1, в инертном апротонном растворителе по схеме:

I, X=OMe (a), Br (б); II, Y=Me (a), Cl (б); III, X=OMe, Y=Me (a); X=Br, Y=Cl (б).

Процесс ведут при температуре 79-80°С, а в качестве растворителя используют абсолютный бензол.

Из патентной и технической литературы не были выявлены способы получения 5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролов), имеющие сходные признаки с заявляемым способом, а именно, не использовались исходные продукты, растворители, в которых проходит реакция, и интервал температур, на основании чего можно сделать вывод о соответствии заявленного технического решения критерию «новизна» и «изобретательский уровень».

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. 5-Метил-2-оксо-1-п-толил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-3-п-метоксибензоил-5-оксо-2,5-дигидропиррол) (III а).

К раствору 1 ммоль 2,4-дигидро-3-п-метоксибензоил-1Н-пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-триона в 2 мл абсолютного бензола добавили 1 ммоль этил 3-п-толиламино-2-бутеноата (этилового эфира 3-п-толиламино-2-бутеновой кислоты), кипятили при температуре 79°С в течение 4 минут, охлаждали, выпавший осадок отфильтровывали. Выход 96%, т.пл. 198-199°С (из этилацетата).

Соединение (IIIa) С₃₂Н₂₈N₂O₈.

Найдено, %: С 67.63, Н 5.00, N 4.95

Вычислено, %: С 67.60, Н 4.96, N 4.93.

Пример 2. 1-п-Бромфенил-5-метил-2-оксо-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-3-п-хлорбензоил-2,5-дигидропиррол) (III б).

К раствору 1 ммоль 3-п-бромфенил-2,4-дигидро-1Н-пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-триона в 2 мл абсолютного бензола добавили 1 ммоль этил 3-п-хлорбензоиламино-2-бутеноата (этилового эфира 3-п-хлорбензоиламино-2-бутеновой кислоты), кипятили при температуре 80°С в течение 4 минут, охлаждали, выпавший осадок отфильтровывали. Выход 95%, т.пл. 262-264°С (из этилацетата).

Соединение (III б) С₃₀H₂₂BrClN₂O₇.

Найдено, %: С 56.50, Н 3.44, N 4.38.

Вычислено, %: С 56.49, Н 3.48, N 4.39.

Соединения (III а, б) - светло-желтые кристаллические вещества с высокими температурами плавления, легкорастворимые в ДМСО и ДМФА, труднорастворимые в обычных органических растворителях, нерастворимые в воде и алканах, дающие положительную пробу (вишневое окрашивание) на наличие енольного гидроксила со спиртовым раствором хлорида железа (III). Устойчивы при хранении в обычных условиях.

В ИК-спектрах соединений (III а, б), снятых в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний групп ОН в виде широкой полосы в области 3180-3200 см^-1, двух лактамных и одной сложноэфирной карбонильных групп в виде полос в области 1710-1750 см^-1, еноновой карбонильной группы в области 1660-1620 см^-1.

В спектрах ПМР соединений (III а, б), снятых в растворе в ДМСО-d₆, кроме сигналов протонов ароматических колец и связанных с ними групп, присутствуют триплет и квадруплет соответственно трех и двух протонов этоксигруппы в области 1,21-1,23 м.д. и в области 3,86-4,05 м.д., синглет трех протонов метильной группы в положении 5 пиррольного цикла в области 2,03-2,05 м.д., синглет фенольного протона в области 9,82-9,84 м.д., уширенный синглет енольного протона в области 12,20-12,40 м.д.

Предлагаемый способ достаточно прост в осуществлении, одностадиен и позволяет получить неописанные в литературе 5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролы), практически с количественным выходом, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем.

Пример 3.

Исследование противомикробного действия заявленных соединений проводили на грамположительных микроорганизмах Staphylococcus aureus, штаммы 906, 6538Р методом двукратных серийных разведений в соответствии с методикой изучения противомикробного действия препаратов [Г.Н.Першин. Методы экспериментальной химиотерапии. - М., 1971 г. с.100, 109-117].

Для культивирования бактерий использовали мясопентонный агар и бульон (рН 7,2-7,4). Готовили исходные разведения микробных тел по оптическому стандарту мутности из суточной агаровой культуры. Для определения противомикробного действия, микробная нагрузка соответствовала 2,5*105 микробных тел в 1 мл среды. Микробную взвесь вносили в приготовленные разведенные препараты в питательной среде. Результаты опытов учитывали после 20-ти часового (ингибирующее действие) и 7-ми суточного (бактерицидное действие) термостатирования при 37°С. Противомикробную активность оценивали по минимально действующей концентрации. Максимально испытанная концентрация соединений составляла 1000,0 мкг/мл. Эталоном сравнения служил известный в медицинской практике фенилсалицилат. (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, М., Медицина, 1993, т.2, стр.472.)

Проведенные исследования показали (см. Таблицу 1), что заявляемые соединения обладают ингибирующим действием относительно культуры золотистого стафилококка в концентрациях 125,0-500,0 мкг/мл, что превышает этот вид активности у эталона фенилсалицилата в 1,5-6,0 раз.

Бактерицидное действие отмечено у соединения (III б) и составляет 250,0 мкг/мл, что превосходит среднюю концентрацию эталона фенилсалицилата в 8 раз.

В связи с тем, что заявляемые соединения обладают выраженным противомикробным действием на грамположительную микрофлору, они могут найти применение в практической медицине.

Таблица 1. Изучение противомикробного действия соединений.

Номер соединения	МИК, мкг/мл
Минимальная бактериостатическая концентрация	Минимальная бактерицидная концентрация
IIIa	500,0	-
IIIб	125,0	250,0
Эталон сравнения - фенилсалицилат	750,0	2000,0

1. 5-Метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидро-пирролы) общей формулы IIIa, б

где Х означает Оме, Y означает Me (IIIa), Х означает Br, Y означает Cl (IIIб).

2. Способ получения 5-метил-2-оксо-1-фенил-4-этоксикарбонил-2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-спиро-2-(3-бензоил-4-гидрокси-1-о-гидроксифенил-5-оксо-2,5-дигидропирролы) формулы IIIa, б

где Х означает ОМе, Y означает Me (IIIa); X означает Br, Y означает Cl (IIIб), отличающийся тем, что 3-ароил-2,4-дигидро-1Н-пирроло/2,1-с//1,4/ бензоксазин-1,2,4-трионы формулы Ia, б

где X означает ОМе (Ia); X означает Br (Iб),

подвергают взаимодействию с этил 3-ариламино-2-бутеноатами формулы IIa, б

где Y означает Me (IIa); Y означает Cl (IIб),

в среде инертного апротонного растворителя при температуре 79-80°С, с последующим выделением целевых продуктов.

3. Способ по п.2 отличающийся тем, что в качестве инертного растворителя используют абсолютный бензол.