Способ получения 1ба-оксистероидов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ, 231767

Сокгз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Заявлено 11 V111.1966 (№ 1096883/31-16) с присоединением заявки Л"

Приоритет

Опубликовано 28.Х1.1968. Бюллетень ¹ 36

Дата опубликования описания 6Х.1969

Кл. 30h, 2/04

30h, 2/10

МПК А 61k

А 611<

УДК 577.17:577.151:663.. 1 (088.8) Комитет AO делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

Авторы изобретения

Заявители

Л. М. Коган, И. М. Волкова, И. В. Торгов и Г. К. Скрябин

Институт химии природных соединений АН СССР и

Институт микробиологии АН СССР

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 16а-ОКСИСТЕРОИДОВ

Известны способы получения 16-а-оксистеро идов путем ферментации с акт иногяицетахги.

Предлагаемый способ позволяет расширить ассортимент микроорганизмов, используемых для получения lба-оксистероидов. В качестве таких микроорганизмов рекомендуются, в частности штаммы Act. caprae 206 J.A, W., Act. streptomycini (Krainsky emmend %К$)

krass., Act. flavus 3369, Act. venezuelae 3624, Act. fulvoviridis 607, Act. griseus var. purpurescens, Act. gedaniensis 4880 АТСС.

Стероид ферментируют с указанными культурами, выращенными на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли. По окончании ферментации продукты реакции извлекают несмешивающимися с водой растворителями и выделяют стероид хроматографированием на окиси алюмин ия.

Пример 1. В две колбы, содержащие по

100 мл питательной среды (2% глюкозы, 1% кукурузного экстракта, 0,5% поваренной соли и 0,5% карбоната кальция в водопроводной воде;рН 7, вносят,по 10 мл 72-час, культуры

Act. gedaniensis 4880 АТСС, выращенной на гитательной среде, содержащей 0,2% сульфата аммония, 0,1% сульфата магния, 0,1% поваренной соли, О,1 % карбоната кальция, О,l % фосфата калия и 1% крахмала. Культуру выращивают 24 час на круговой качалке (200 об, мин) при 28=C, затем вносят в каждую колбу раствор 15 мг прогестерона .в 0,5лгл этилового спирта и фергментируют,при тех же условиях 66 час. По окончании ферментации мицелий отфильтровывают, промывают водой и экстрагируют фильтрат 4 раза по 50 м.i хлороформа. Экстракт упаривают в вакууме до

50 лг.г, сушат над безводным сульфатом магния и выпаривают в вакууме досуха. Остаток

1О растворяют в 0,5 лгл хлористого метилена и тонкослойным препаративным хроматографированием .на нейтральной окиси алюминия (пластинка 13>18, толщина слоя 1 лгм) выделяют 19 мг lба-оксипрогестерона, который

15 очищают двукратной перекристаллизацией из ацетона.

Пример 2. Так же, как это описано в примере 1, осуществляют ферментацию 30 мг прогестерона с культурами Act. caprae J.À. Ю.

20 206, Act. з(гер1огпус1пг (Krainsky emmend

WKS) krass, Act. flavus 3369 и Act. venezuelae 3624 и после хроматографирования на окиси алюминия получают соответственно 15, 22, 16 и 10 мг 16а-оксипрогестерона.

25 Пр имер 3. В 10 колб, содержащих по

50 мл питательной среды с кукурузным экстрактом, как это описано в примере 1, вносят по

5 лгл 48-час культуры Act. fulvoviridis 607, выращенной на той же питательной среде.

30 Культуру выращивают 24 час на круговой ка231717

Составитель В. А, Таратута

Редактор Г. Г. Гуськова Техред Л. К, Малова Корректор Л. В. Юшина

Заказ 341/11 Тираж 530 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр, Сапунова, 2

3 чалке при 28 С, затем вносят в каждую колбу раствор 10 мг,прогестерона в 0,5 мл этилового спирта и ферментируют в тех же условиях 72 час. По окончании ферментации культуральную жидкость экстрагируют 4,раза по

100 мл хлороформа. Экстракт концентрируют в вакууме до 50 мл, сушат над безводным сульфатом магния и выпаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют,в 1 мл хлористого метилена и препаративным хроматогра фированием в тонко|м слое окиси алюминия (пластинка 20)(20, толщина слоя 1,2 мм) выделяют 31 мг lба-оксипрогестерона с т. пл. 220—

224 С.

Пр и,мер 4. Ферментацию 100 мг прогестерона с культурой Act. griscus var, purpurescens проводят, как это описано в примере

3, и после хроматографирования на окиси алюминия получают 18 мг lба-,оксипрогестерона.

Предмет изобретения

Способ получения 16а-оксистероидов путем ферментации с актиномицетами, отличающийся тем, что с целью расширения ассортимента

10 микроорганизмов, осуществляющих 16а-гидроксилирование, используют штаммы Act. caprae 206 J.À.W., Act. streptomycini 3369 (Krainsky emmend WKS) kr ass., Act. f1avus 3369, Act. venezuelae 3624, Act, fulvoviri15 dis 607, Act. grisens var. purpurescens, Act, gedaniensis 4880 АТСС.