Способ получения адренокортикотропно-активныхсоединений

 

ИФЮ l "" " 1I eH.

О П

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Оо1оэ Советских

Социалистических

Республик

К ПАТЕ Н з У

Зави. имый от патента Л вЂ”

Заявлено 30. 1/1.1966 (№ 1087565/23-4) Кл. 12q, 6/01

Приоритет 25.III.1966, Ко. 4369/66. Швейцария МПК С 07d

Комитет по делам изобретений и открытий зри Совете Министров

СССР ъ>ДК 547.964.4.07(088.8) Опубликовано 10.III.1969. Бюллетень М 10

Дата опубликования описания ЗОЛ(I I.1969

Авторы изобретения

Иностранцы

Бает Изелин (Швейцария) и

Пео Геллер (Федеративная Республш(а Германш!) Иностранная фирма «ЦИБА Акциенгезельшафт» (Швеи цярия) 3 ".Явитсль

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДРЕНОКОРТИКОТРОПНО-АКТИВНЫХ

СОЕДИНЕНИЙ

Известно, что действие адренокортикотропно-активны (пептидов можно удлинить, если псптиды псрcBO:(HTb в з!Стялличсскис 1(oifnlcf сы, например комплексы с гидроокисью цинка, фосфатом или пирофосфагом цинка. Однако некоторыс из lal(n кортикотропны (препаратов обладают аллсргическим действием.

Найдсн0, что удлинение адренокортикотропно го действия адренокортикотропно-активны?( соединений, а также снижение ик токсичности 10 достигаются, если пептиды переводить в и; комплексы с полимеризатами !кислых а-аминокислот, например глутясииновой или аспарагиновой (левой, правой или рацемической).

Предложен способ .получения адренокорти- 15 котропно-я кт IBHblx соединений взаимодействисм ядрснокортикотропчо-яктивиык пептидов, Ifли и.; солей, или ик производнык с полимеризатами .кислы.(((-аминокислот. АдренокортикстpofIHo-3 ктивн! !ми пспти (ам!! ЯВлЯIОтсЯ, 20

;!япримср, естественный ACTH (pf:» кортикотропин), зl также псп Гиды с более коротко!! цепью аминокислот, чем pf:1 кортикотропин.

1j3B(стн0, iIT0 l(3р00ксиЛьный KoHcll ccTccTBcHного АС И может отщеплять до 16 амино- 25 кислот без полной потери активно ти. Кроме то|го, отдельные аминокислоты могут заменяться другими. Так, например, сериновые остатки — сер IHI и, или серии могут заменяться глициноси или аланином, тирозин- — фенила- 30 л анином, метионин - — иорвалином, лейцином или и-ямииомасляной кислотой, глутаминовая

1:.пелота — глутампном, аргинин1,» — орнитином пли лизином. Первая аминокислота — се1.ин — может заменяться также пролином, треоииисм или другими амииокислотями, или

Отсутстьсвять, или ffcpca ней могут стоять другие аминокислотиыс остатки. Для соединс11 Oл i ч(!elf f>lx Il 0 п Р сд l 0?I(cHH ohfh clio c061, ссобеHHo подкодят пспп!ды, имеющие аминокислотную цепь из 19 — 28 аминокислот, в первую очередь из 20 — 25, считая от аминного

КОН ЦЯ Р-КОРТИКОТРОПИНЯ> И В HCOOX031IIIO. >I СЛУ.3с другого состава, прежде всего pf - (-кортикотроппн.

Соля. tli ядрснокортикот1>опно-31(тиBHbix IlcilТИ 70В ЯВЛЯ10ТСЯ ЯДДИТИВНЫ(СОЛИ ТЕРЯПСВТИЧС(к f применимы.; кислот. Например соляной, c c p H 011, ф 0 (ф О 1? и 01! п с м Г! ь ф О к и с 7 o T.

Концевые карбоксильныс группы полимера мОГТТ ОЬ!ТЬ В Виде СВОбод111>1?; И.111 фу Н!(ПИОиально модифицировянн11?: кярбоксиг!ьн!1.; групп. например B виде сло?кноэфириык If(!è « ьи(дс Hc33iicmcIIIIOff или зямсщси,!Ой, няприlfip, > ГлсводородНЫМ ОСТ l гко !, Пl?(>ж 1(В((ГО алки,lf>Holi ГР > H1101!, ими 10Г11 > ППОЙ.

Структурные единицы полимеров могут иметь

I —, D- u I ) D-H0Hфигмряцию. Молек> л?1риь11! Bi i полимеризата может быть от 1 000 до 100 000 например 5 000 — 50 000, предпочтительно

10 000 — 40 000.

I;IH получения соединений целесообразно применять подорасгворимую физиологичес (n с;-,сносимую соль, например натрисву1о n ln

239153

Составитель А. Акимова

Редактор Л. К. Ушакова Техред А. А. Камышникова Корректор Н. И. Шапошникова

3аказ 104 =3;4 Тираж 480 Подписное

11В1111ПИ 1;(illlcò3 Ilo дс.lci(l ивобрсiclillii и о,крь! II!I ир:! Совете М и!ис!ров ГССР

Москва, 11ситр, ир. Серова, д. 4

Сапунова, 2

1 пиогр(и13((я, Ilp. аммониевую, или соль с органическим основанием, например трпэтаноламином, прокаином, либензиламипом или другими третичными

BçoòèñTûìH основаниями.

Предлои<ен!Иые соединения готовят известным образом смешением соли полимера в вод.ном растворе с агчренокортикотропно-активиьв1 .пептидом, kl;IH его солью, или произвоЛиым, в необходимом случае с другими добавками. Полученные соединения могут применяться внутримышечно или внутривенно.

П.р и м с р 1. 2,0 г поли-I -глутаминовой кислоты со средним молекулярным весом около

11 000 растворя!От в 5,7 мл 10%-ного едкого

HaTpB так, что рН раствора составляет 7,4.

В этот раствор вносят 5,0 ггг p(- 1-кортикотропингексаацетата и 0,2 г мертиолата и объем доводят дистиллированной водой до 10 мя.

Раствор стерильно фильтруют.

В 1 мл такого, раствора содержится 0,5 ма (а! е4-кортикотропинтексаацетата, 200,0 ла поли-L-глутаминовой кисчоты, 0,02 .!гг мсртпо13 r3 1I ДО 1 Л1Л ДИСТпл 7IIpoBBHIHOII ВОДЫ.

Пример 2, 2,0 а поли-I -глутаминовой кислоты с молекулярным весом приблизительно

39600 (с (!мидотруппо1! на конце) суспендпругот в 50 мл дистиллированной воды и рН доводят ло 6,1 1 н. раствором едкого натра. Растьор стерилизуют при 120 С в течение 20 мпн, 33 real В СТОРил 11(3(/II.71>rPOIIBHHI>II! РаствоР ННосят 5,0 мг (Р - 1-ко13тпк(тгропингскс !(!цет(!та и

0,2,1! мсртиолата (2 л» мертиолата В 2 л!л

Листиллиро в(!нно1! волы) и о(31 см довоЛilT л рильной водой до !О м г.

Пример 3. 100 мг поли-I -глутаминовой кислоты с молекулярным весом .приблизительно 39 600 (с амидотруппой на ко!Ице) суспендируют в 0.7 мл Дистиллированной волы и рас3воря!От с 1 н. раствором едкого патра, так что г:олучают рН 6,1, Раствор стерилизуют паром при 120= С в течение 20 k(IIII. К стерильному раствору приливают стерильнофильтрованный раетВОр 0,5 Мг р(в3-КОртИКОтрОПИНГЕКСаацЕтата и 0,2 мл дистиллированной воды и объем доводят до 1 мл.

П р и м с р 4. 5 лгг поли-I -глутаминовой кислоты со сред ним молекулярным весом 39600 растворяют в 0,5 1гл 0,1 н. едкого патра. Раствор фильтруют и добавляют раствор 0,25 лгг р - 4- I<0 p T II I<0 T 17 0 ï è í r C I< c 3 3 цет а т 11, и Од к и с 1 H lo T

y)ccA cII01I II.3kI с0.7HHoÉ кислотой чo рН 4 и QoВодят водой ло 10 мя. При этом выпадает

IIo.7!I-I -r 7K TB 31HHoBBÿ 1<ис 70TB /p( кортикотропин в тонкораспредслснном состоянии. Суспензия содержит в 1 мл 0,5 !43 полиглутаминовой кислоты и 0,25 3!г t)I - (-кортпкотропина в виде комплексного соединения.

Пример 5. 200 мг .поли-1.-глутаминовой кислоты с молекулярным весом приб.чязг!те,чьно 72 000 (со свободной карбоксильной груп5

loll k1 I<(! II!Ic) cуспенд1!ру10!. 13 0,7 !!я Iистиллированпой воды и растворяют с 1 н. растгзоpod(egI

6,8. Раствор стерилизуют паром при 120 С втечение 20 мик. К стерильному раствору приливают стерильнофильтрованный раствор 1,0 ма ацетата НОрЛСй 4-ВаЛев+ - -КОртИКОтрОППНамила и 0,02 мг мертиолата в 0,2 лл дистиллированной воды и объем доводят стерильной

Водой до 1 мл.

Пример 6. 200 1!г поли-D-глутаминовой кислоты с молекулярным весом 45 000 (со свосодной карбоксильной группой на конце) растворяют в 0,7 м,г дистиллированной воды, затем добавляют 1 н. раствор едкого натра ло получения рН 6,5. Раствор стерилизуют .паром при 120 С в течение 20 !гигг. К стерильному раствору приливают стерильнофильтровàíHûé раствор 0,5 мг ацетата f."! - -

I I р и м е р 7. 0,2 ма поли-1.-;!спарагпновой к1;слоты с молекулярным ьесом прпблпзитель:!о 40000 (со свободно(! карбоксильпой группой на конце) суспендиру(01 В 0,5 .Вл дистиллированной воды. Затем добавляют столько

1 н, раствора едкого патра, чтобы получить рН 6,8. Раствор стерплпзуют паром при 120 С и геченп(20 л(!(н. К стерильно»3 раств:!ру и Р 1 л и В а 10 т c T C P l I . 1 ь и О (13 и;! ь Р 013 а н н 1>! ! P; (. !3 0 Р

2 лг 11! !в-кupT»!

Пред..lcT изобретения

1. Способ полу lcíèÿ ачрснокортикотропноактивных соеди!! ;II;kl взаимодействием алреноКОРТИКОТРОПНЫХ ПСПТИДОВ, ИЛИ ИХ СОЛСЙ, И 7l! их производных с комплексообразующей солью, от,г!(ча!Ощиггся тем, что, с полью удлинения адренокортикотропного действия и снижения токсичности полученных препаратов, в ка(сстве комплексообразующей соли используют соли полимера кислых а-аминокислот.

2. Способ по п. I, отли(а!Огчг!йся тем, что используют водорастворимые физиологически

1;среносимые соли полимера.

3. Способ по пп. 1 и 2, Отл!(чаюигггйся тем, что используют полимеры аспарагиновой или глутаминовой;кислот.

4. Способ по и. 3, от.гичаюц((йся тем, что применяюг полимеры с мол. в. 1000 — 100 000.

5, Способ по п. 1, о! г((ча!ощайся тем, что в кB Icc r13c адр оно корти котропно-активных и си.!!лов используют псптиды, имеющие пептплггую цепь в 19 — 28 аминокислот, считая от аминного кон)ца (3-кортикотропина, отчельные аминокислоты которых могут отличаться от состава Р-кортикотропина.