Способ приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает сбор личинок трутней, который производят в преимагинальной фазе в стерильную емкость. Затем их заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении 1 ч. спирта и 9 ч. личинок трутней и замораживают в течение 23,5-24 часов, а затем размораживают в течение 5-10 минут при температуре (+38; +40)°С и гомогенизируют. Гомогенизат обрабатывают ультразвуком при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А и частоте 35 кГц с экспозицией 5 мин и добавляют к нему стабилизирующую среду в соотношении 1 ч. суспензии гомогенизата и 9 ч. 5%-ного раствора глюкозы и рифампицина в соотношении 30 мг на 1 л суспензии гомогенизата. Затем полученный препарат фасуют в стерильные флаконы и лиофильно высушивают. При этом лиофильную сушку осуществляют с предварительным замораживанием при температуре (-40; -45)°С в течение 12-14 часов и последующей сублимацией с созданием вакуума не менее 5-8 мV и включением подогрева до (+44; +45)°С. Досушивание производят при температуре препарата (+22; +24)°С. Способ позволяет получить высокоэффективный препарат, который не обладает аллергическим действием и имеет длительный срок хранения. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней, и может быть использовано для повышения общей и специфической резистентности организма животных.

Уровень техники

Известен способ приготовления биостимулятора для кормления птицы, предусматривающий введение в основной рацион биостимулятора, приготовленного путем охлаждения при температуре 2-4°С в течение 4-5 суток, разведения водой в пятикратном объеме и остывания в течение суток с последующим автоклавированием полученной массы, при этом в качестве биостимулятора используют яичную массу и после обработки ее вводят в рацион в количестве 0,2-0,3 мл на 1 кг живой массы с интервалом в 6-7 дней (см. авт. св. СССР № 1530163, Кл. А23К 1/16).

Недостатком данного способа является недостаточно высокий эффект повышения общей и специфической резистентности организма.

Известен способ приготовления препарата для стимуляции организма человека из личинок трутней, включающий сбор личинок трутней, их гомогенизацию с добавлением стабилизирующей среды (см. «Заготовка личинок трутней» В.И.Лебедев, М.А.Легович, НИИ пчеловодства, ж. Пчеловодство, №3, 2003, с.52-54).

Недостатком данного способа является непродолжительное время хранения препарата.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятый авторами за прототип является способ приготовления препарата для стимуляции организма животных из личинок трутней, включающий сбор личинок трутней, их гомогенизацию с добавлением стабилизирующей среды, при этом перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при температуре (-4; -5)°С в течение 12-14 ч, затем размораживают в течение 3-5 мин до +18°С, при этом в качестве стабилизирующей среды используют 5%-ный раствор глюкозы в соотношении 1:10 с добавлением 5%-ного раствора хлороформа или 2%-ной салициловой кислоты с последующей сублимацией, причем сублимацию проводят в вакуумной камере при температуре подогрева полок до (+30-45)°С, при этом достижении температуры препарата (+20-22)°С температуру полок снижают до +25°С и проводят досушивание в течение 22-24 ч (см. пат. РФ №2258522, кл. А61К 35/64, А61Р 37/04, опубл. 20.08.2005).

Недостатком данного способа является то, что препарат, полученный данным способом, не стерилен, вызывает местную реакцию организма и обладает невысокими стимулирующими свойствами.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней, с помощью которого приготовленный препарат обладает стерильностью, высоким эффектом тканевой терапии, повышением общей и специфической резистентности организма, более дешев в изготовлении, исключением аллергических реакций.

Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к повышению эффекта тканевой терапии, общей и специфической резистентности организма, удешевлению в изготовлении, исключению аллергических реакций.

Технический результат достигается с помощью способа приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней, включающего сбор личинок трутней, их гомогенизацию с добавлением стабилизирующей среды, причем перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при температуре (-4; -5)°С, затем размораживают, в качестве стабилизирующей среды используют 5%-ный раствор глюкозы с последующей сублимацией и досушиванием в течение 22-24 часов, при этом сбор личинок трутней производят в преимагинальной фазе в стерильную емкость, затем их заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении 1 ч. спирта и 9 ч. личинок трутней, причем замораживание производят в течение 23,5-24 часов, а размораживание - в течение 5-10 минут при температуре (+38; +40)°С, при этом гомогенизат обрабатывают ультразвуком при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А и частоте 35 кГц с экспозицией 5 мин, а стабилизирующую среду берут в соотношении 1 ч. суспензии гомогенизата и 9 ч. 5%-ного раствора глюкозы и рифампицина в соотношении 30 мг на 1 л суспензии гомогенизата с последующим фасованием в стерильные флаконы и их лиофильной сушкой, которую осуществляют с предварительным замораживанием при температуре (-40; -45)°С в течение 12-14 часов и последующей сублимацией с созданием вакуума не менее 5-8 мV и включением подогрева до (+44; +45)°С, а досушивание производят при температуре препарата (+22; +24)°С.

В способе стерилизацию емкостей производят водным раствором KMnO₄ в соотношении 1:1000 в течение 15 мин.

Сущность способа приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней заключается в следующем.

Предварительно стерилизуют противни, емкости, кюветы в водном растворе KMnO₄ в соотношении 1:1000 в течение 15 мин, затем с ячеек с трутневым расплодом срезают выпуклые крышечки с помощью ножа для распечатки сотов, легким постукиванием о край противня выбивают преимагинальные фазы трутней вместе с молочком для питания и собирают их в простерилизованную емкость, полученный сбор заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении 1 ч. спирта и 9 ч. полученного сбора. Затем замораживают при температуре -4°С в течение 23,5-24 ч и размораживают при температуре +40°С в течение 5-10 мин, и гомогенизируют на гомогенизаторе T1PW309 1 минуту при 3 тыс. оборотов. Подготовленную суспензию обрабатывают на УЗДН-1 при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А, частоте 35 кГц с экспозицией 5 мин, добавляют 5%-ный раствор глюкозы из расчета 1 ч. суспензии и 9 ч. глюкозы. Для подавления микрофлоры добавляют рифампицин из расчета 30 мг на 1 л материала. Разливают по 10 мл в пенициллиновые стерильные флаконы и подвергают лиофильной сушке, которая состоит из двух этапов: замораживания и сублимации, причем замораживание осуществляют в холодильнике НС 700/50 при температуре от -40 до -45°С в течение 12-14 часов, а сублимацию проводят в сублимационной камере LZ 4,5 с созданием вакуума не менее 5-8 мV с включением подогрева до +45°С, а досушивание препарата проводят в течение 22-24 часов при температуре в препарате (+22-24)°С.

Осуществление изобретения

Примеры конкретного выполнения опытов проведения способа приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней

Пример 1. Производят сбор личинок трутней в преимагинальной фазе на противень, предварительно обработанный кипящей водой, перекладывают в емкость и замораживают при температуре -20°С в течение 15 часов, затем размораживают при температуре +18°С в течение 12 часов и гомогенизируют, добавляют 5%-ный раствор глюкозы в соотношении 1:10 с последующей лиофильной сушкой, которая состоит из двух этапов:

- замораживание при температуре -30°С в течение 72 часов;

- сублимирование при температуре +60°С при достижении температуры препарата +40°С с последующим досушиванием в течение 24 часов.

Полученный препарат имел вид спекшейся таблетки, не растворялся в жидкостях, применять его было нельзя.

Пример 2. Проводят аналогично примеру №1, но после гомогенизации гомогенизат обрабатывают ультразвуком на УЗДН-1, при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А, частоте 20 кГц с экспозицией 5 минут, добавляют 5%-ный раствор глюкозы в соотношении 1:10, производят лиофильную сушку, состоящую из двух этапов, причем замораживание проводят при температуре -60°С в течение 6 часов, а сублимацию проводят в сублимационной камере LZ 4,5 с созданием вакуума 5 мV с включением подогрева до +30°С, а досушивание препарата проводят в течение 48 часов.

Полученный при данных параметрах препарат получился слишком рассыпчатым, установленного срока хранения не выдерживал, при скармливании животным не дал высокого эффекта повышения общей и специфической резистентности организма.

Пример 3. Проводят аналогично примерам №1, 2, но сбор личинок в преимагинальной фазе производят на противень с последующим перекладыванием в емкости, предварительно простерилизованные в водном растворе KMnO₄ в соотношении 1:1000 в течение 15 минут, затем сбор личинок заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении 1 ч. спирта и 9 ч. сбора, замораживание проводят в течение 5 мин при температуре -4°С в течение 23,5 часов, а размораживание проводят в течение 5 мин при температуре +38°С и гомогенизируют на гомогенизаторе T1PW309 в течение 1 мин при 3 тыс. оборотов, затем суспензию гомогенизата обрабатывают ультразвуком на УЗДН-1 при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А, частоте 35 кГц с экспозицией 5 мин, добавляют 5%-ный раствор глюкозы в соотношении 1:9 и для подавления микрофлоры добавляют антибиотик, например, рифампицин из расчета 30 мг на 1 л суспензии, разливают по 10 мл в пенициллиновые стерильные флаконы и подвергают лиофильной сушке, которая состоит из двух этапов: замораживания и сублимации, причем замораживание осуществляют в холодильнике НС 700/50 при температуре -40°С в течение 12 часов, а сублимацию проводят в сублимационной камере LZ 4,5 с созданием вакуума 5 мV с включением подогрева до +44°С, а досушивание препарата проводят в течение 22 часов при температуре в препарате +22°С.

Высушенный препарат проверяют на стерильность и воздействие на организм животных.

Препарат обеспечил повышение общей и специфической резистентности организма, увеличил количество эритроцитов и гемоглобина у ослабленных животных.

Пример 4. Проводят аналогично примеру 3, но замораживание проводят при температуре -5°С в течение 24 часов, а размораживание - при температуре +40°С в течение 10 мин, лиофильную сушку осуществляют с предварительным замораживанием при температуре -45°С в течение 14 часов, а сублимацию - с созданием вакуума не менее 8 мV и включением подогрева до +45°С, а досушивание производят при температуре в препарате +24°С в течение 24 часов.

Полученный при таких параметрах препарат также показал при применении повышение общей и специфической резистентности организма животных, увеличение количества эритроцитов и гемоглобина у ослабленных животных.

Пример 5. Проводят аналогично примеру 3, 4, но замораживание производят в течение 30 часов при температуре -8°С, а размораживание в течение 15 мин при температуре +45°С в течение 16 часов, а сублимацию - с созданием вакуума не менее 10 мV и включением подогрева до +50°С, а досушивание производят при температуре в препарате +30° С в течение 30 часов.

Полученный препарат при данных параметрах получился слишком рассыпчатым, не фасовался в таблетки и не выдерживал установленного срока хранения (2 года).

Таким образом, наиболее оптимальными оказались примеры 3 и 4. Препарат, полученный по способу примеров 3 и 4, представляет собой рыхлую светло-коричневого цвета массу в виде таблетки, которая легко растворяется в дистиллированной воде; животным его вводят внутримышечно или дают внутрь; сохраняется 2 года. При испытании повысил привесы у свиней, увеличил потенцию у самцов животных и количество приплода у нутрий.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:

- препарат обладает высоким эффектом тканевой терапии;

- повышает общую и специфическую резистентность организма животных;

- стерилен и безвреден;

- не обладает аллергическим действием;

- более дешевый в изготовлении;

- препарат можно вводить подкожно, внутримышечно и внутрь;

- имеет срок хранения 2 года.

1. Способ приготовления биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней, включающий сбор личинок трутней, их гомогенизацию с добавлением стабилизирующей среды, при этом перед гомогенизацией личинки трутней замораживают, а в качестве стабилизирующей среды используют 5%-ный раствор глюкозы с последующей сублимацией и досушиванием в течение 22-24 ч, отличающийся тем, что сбор личинок трутней производят в преимагинальной фазе в стерильную емкость, затем их заливают 40%-ным этиловым спиртом в соотношении 1 ч спирта и 9 ч личинок трутней, причем замораживание проводят в течение 23,5-24 ч, а размораживание - в течение 5-10 мин при температуре (+38; +40)°С, при этом гомогенизат обрабатывают ультразвуком при максимальной мощности 400 Вт, токе 0,7 А и частоте 35 кГц с экспозицией 5 мин, а стабилизирующую среду берут в соотношении 1 ч суспензии гомогенизата и 9 ч 5%-ного раствора глюкозы и рифампицина в соотношении 30 мг на 1 л суспензии гомогенизата с последующим фасованием в стерильные флаконы и их лиофильной сушкой, которую осуществляют с предварительным замораживанием при температуре (-40; -45)°С в течение 12-14 ч и последующей сублимацией с созданием вакуума не менее 5-8 мV и включением подогрева до (+44; +45)°С, а досушивание производят при температуре препарата (+22; +24)°С.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что стерилизацию флаконов производят водным раствором KMnO₄ в соотношении 1:1000 в течение 15 мин.