Гликозидное производное, способ его получения, композиция, средство для коррекции гипергликемии, лекарственное средство, пищевые продукты, способ коррекции гипергликемии

Описывается гликозидное производное 4-метилэргост-7-ен-3-ола формулы I, способ его получения и композиция для коррекции гипергликемии, представляющая экстракт растения семейства Liliaceae, предпочтительно Aloe vera.

Описаны также лекарственное средство для коррекции гипергликемии и пищевые продукты или напитки. 8 н. и 6 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новому гликозиду, имеющему скелет 4-метилэргост-7-ен-3-ола, 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-олу, к содержащим его композиции лекарственному средству или пищевому продукту, или напитку.

Уровень техники

Известно, что 4-метилэргост-7-ен-3-ол является веществом, которое присутствует в растениях (непатентный документ 1). Что касается источников известного уровня техники, относящихся к данному соединению, однако, имеется только ссылочный документ, касающийся биосинтетической системы лофенола (одного из стереоизомеров 4-метилхолест-7-ен-3-ола), имеющего структуру, сходную со структурой упомянутого выше соединения (непатентный документ 2), а использование данных соединений не известно вообще.

Род Aloe в семействе Liliaceae представляет группу растений, включающую Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) и Aloe arborescens (Aloe arborescens Miller var. natalensis Berger) и т.д., и эмпирически известно, что они обладают различным действием. В документах известного уровня техники, касающихся использования растений рода Aloe, описаны иммуномодулирующие полисахариды (патентный документ 1), средства для коррекции иммуносупрессии, содержащие бутанольную фракцию экстракта алоэ или алоин (патентный документ 2), средства, подавляющие синтез белков семейства HSP60, содержащие производные алоина (патентные документы 3-5), белки, обладающие активностью лектина, полученные из кожицы листьев алоэ (патентный документ 6) и так далее.

Что касается источников известного уровня техники, относящихся к коррекции уровней глюкозы в крови при помощи растений рода Aloe, описаны клинические исследования в Соединенных Штатах (непатентный документ 3), гипогликемическое действие, наблюдаемое в исследованиях на животных (непатентные документы 4 и 5) и полисахариды в растениях рода Aloe (патентный документ 7). В данных известных источниках высказано, что гипогликемические ингредиенты растений рода Aloe являются полисахаридами или гликопротеинами. Кроме того, описано, что в прессованном экстракте Aloe vera и гипогликемическом средстве, содержащем данный экстракт в качестве активного ингредиента (патентный документ 8), характеристический пик, уникальный для сложноэфирной группы, наблюдаемый на графике FT-IR, коррелирует с активностью, при этом активным ингредиентом является полисахарид, аминокислота, яблочная кислота или аналогичные, и вышеупомянутый активный ингредиент разлагается в промышленно доступных гелевых порошках, гелевых растворах Aloe vera и гелевых экстрактах Aloe vera. Кроме того, в дополнение к вышесказанному, описаны гипогликемическое действие полисахаридов алоэ (патентный документ 9) и антиокислительное действие 7-гидроксихромона, содержащегося в алоэ (патентный документ 10).

Между тем, из-за того, что кожица листьев Aloe vera содержит барбалоин и алоэ-эмодин, обладающие послабляющим действием, она обычно считалась не вполне пригодной для промышленного использования.

Гемоглобин Alc, продукт связывания глюкозы и гемоглобина, повышается в зависимости от тяжести гипергликемии зависимым от уровня глюкозы образом. Вследствие того что гемоглобин Alc, коль скоро он продуцирован, не ликвидируется до тех пор, пока не истечет продолжительность жизни эритроцитов (120 дней), он отражает предшествующие условия содержания глюкозы в крови на протяжении длительного периода времени (непатентный документ 6). Гемоглобин Alc был принят в качестве избранного тест-пункта основной оценки состояния здоровья в соответствии с Законом об охране здоровья пожилых с 1996 г. и принят в качестве диагностического показателя сахарного диабета по новым критериям диагностики сахарного диабета в 1999 г. Следовательно, считается, что гемоглобин Alc является очень важным показателем в клинических исследованиях (непатентный документ 7).

Если состояние гипергликемии является длительным, наблюдаются глюкозоспецифическая гипосекреция инсулина и инсулинорезистентность, которые служат в качестве факторов, которые дополнительно усугубляют гипергликемию (Непатентный документ 8). Вследствие того что для предотвращения прогрессирования от гипергликемического состояния до наступления сахарного диабета необходим долгосрочный контроль уровня глюкозы в крови, считают, что необходимо подавлять увеличение уровня гемоглобина Alc. Для контроля или регулирования уровня глюкозы в крови у пациентов с преддиабетом (вероятность развития диабета или связанных состояний) рекомендуются методы алиментотерапии (терапии питанием) и упражнения. Хотя в продаже уже имеются разнообразные функциональные пищевые продукты для предотвращения уровней глюкозы в крови после еды или приема пищи (пища для использования в конкретных целях оздоровления), все они оказывают лишь временный эффект подавления увеличения уровня глюкозы в крови. Поэтому нельзя ожидать контроля уровня глюкозы в крови на протяжении длительного периода времени, и желательна разработка такого вещества, оказывающего понижающее действие на уровень гемоглобина Alc, как в настоящем изобретении.

Далее в настоящее время в качестве терапевтических агентов при сахарном диабете используются ингибиторы α-глюкозидазы, препараты сульфонилмочевины в качестве средств, стимулирующих секрецию инсулина, производные тиазолидина в качестве средств для коррекции инсулинорезистентности и так далее. Однако их лекарственная эффективность является неудовлетворительной, и они страдают от многих проблем, таких как побочные эффекты, вплоть до комы, вследствие быстрого падения уровня глюкозы в крови.

В упомянутых выше обстоятельствах весьма желательным является открытие вещества, которое может безопасно потребляться, не вызывая острую гипогликемию, и обладает длительным действием регулирования уровня глюкозы в крови за счет понижения уровня гемоглобина Alc.

Обычно в качестве примеров веществ, оказывающих эффект подавления увеличения уровня глюкозы в крови, источники известного уровня техники описывают средство, подавляющее гипергликемию, которое содержит ингредиент, происходящий из банаба (патентный документ 11), средство подавляющее гипергликемию, которое содержит в качестве активного ингредиента концентрированный продукт ферментации пшеницы или ячменя (патентный документ 12) и так далее.

Кроме того, в качестве методик использования в качестве активного ингредиента тритерпенгликозида раскрыты, например, средство для предотвращения сахарного диабета, содержащее в качестве активного ингредиента гликозид, экстрагированный из Gymnema inodorum (патентный документ 13), способ коррекции метаболизма и композиция для этого, содержащая в качестве активного ингредиента корозоловую кислоту, экстрагированную из банаба (патентный документ 14), ингибитор липазы (патентный документ 15) и тритерпеновое производное, обладающее иммуноподавляющей активностью (патентный документ 16).

Далее описано, что усиливающая действие инсулина активность соединения, имеющего ланостановый скелет или 3,4-секоланостановый скелет (патентный документ 17), усиливает действие инсулина при регуляции дифференцировки адипоцитов, хотя действие его на заболевания поджелудочной железы является неизвестным.

Далее в качестве гипогликемических средств описаны соединения, выбранные из группы, состоящей из 24-алкилхолестен-3-онов и 24-алкилхолестан-3-онов, которые не имеют двойной связи в основном стероидном скелете (патентный документ 18).

Что касается вещества, имеющего аналогичную структуру, гликозида, имеющего 4-метилстигмаст-7-ен-3-ольный скелет, сообщается, что 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилстигмаст-7-ен-3-ол содержится в брионии (Bryonia alba), растении семейства Cucurbitaceae (непатентный документ 9). Однако оно не является растением, которое обычно употребляют в пищу, и ничего не сообщается об общем синтезе данного соединения.

[Патентный документ 1] Не прошедшая экспертизу международная публикация патентной заявки на японском (Kohyo) №2001-520019.

[Патентный документ 2] Выложенный японский патент (Kokai) №08-208495.

[Патентный документ 3] Выложенный японский патент №10-120576.

[Патентный документ 4] Выложенный японский патент №10-045604.

[Патентный документ 5] Выложенный японский патент №10-036271.

[Патентный документ 6] Выложенный японский патент №09-059298.

[Патентный документ 7] Выложенный японский патент №60-214741.

[Патентный документ 8] Выложенный японский патент №2003-286185.

[Патентный документ 9] Патент США №4598069.

[Патентный документ 10] Публикация патентной заявки США №2003/0207818.

[Патентный документ 11] Выложенный японский патент №2003-095941.

[Патентный документ 12] Выложенный японский патент №2002-371003.

[Патентный документ 13] Выложенный японский патент №05-247086.

[Патентный документ 14] Выложенный японский патент №2002-205949.

[Патентный документ 15] Выложенный японский патент №09-040689.

[Патентный документ 16] Публикация не прошедшей экспертизу международной патентной заявки на японском №11-511482.

[Патентный документ 17] Выложенный японский патент №10-330266.

[Патентный документ 18] Выложенный японский патент №2003-048837.

[Непатентный документ 1] Chem. Pharm. Bull., стр.624-626, 1993.

[Непатентный документ 2] Biochemica Biophysica Acta, стр.63-88, 2000.

[Непатентный документ 3] Phytomedicine, Vol.3, стр.245-248, 1996.

[Непатентный документ 4] Phytotherapy Research, Vol.15, стр.157-161, 2001.

[Непатентный документ 5] Phytotherapy Research, Vol.7, стр.37-42, 1993.

[Непатентный документ 6] Nippon Rinsho, No. 748, Vol.1, стр.615-617, 1999.

[Непатентный документ 7] Nippon Rinsho, No. 808, Vol.2, стр.405-409, 2002.

[Непатентный документ 8] Yazaki Y. & Muramatsu M. Ed., "Front Line of Diabetes Mellitus", стр.126-139, Yodosha, 1997.

[Непатентный документ 9] Химия природных соединений, том 3, СССР, 1977.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачей настоящего изобретения является получение нового соединения, которое может безопасно приниматься внутрь, не вызывая острой гипогликемии, и имеет длительное действие по контролю уровня глюкозы в крови для снижения уровня гемоглобина Alc. Еще одной задачей настоящего изобретения является разработка способа получения композиции, которая не содержит ингредиентов, препятствующих промышленному производству, а содержит эффективное количество соединения из сырьевого материала, которое может безопасно потребляться в пищу, что обосновано опытным путем. Также данная композиция должна характеризоваться легкостью процесса получения.

Изобретатели настоящего изобретения провели тщательные исследования для того, чтобы достичь указанных задач. В результате они обнаружили, что 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол, новый гликозид, экстрагированный и очищенный от мезофилла (чистая гелевая часть) Aloe vera (Aloe barbadensis Miller), может безопасно потребляться, не вызывая острой гипогликемии, и обладает длительным эффектом контроля уровня глюкозы в крови, снижая при этом уровень гемоглобина Alc. Настоящее изобретение выполнено на основе указанных выше находок.

В частности, настоящее изобретение относится к соединению, которое имеет структуру, представленную следующей химической формулой (I) (называемое здесь также "соединение по настоящему изобретению").

Настоящее изобретение также включает композицию, содержащую 0,001% в пересчете на сухую массу или более соединения по настоящему изобретению (называемую здесь также "композиция по настоящему изобретению"). Композиция по настоящему изобретению представляет собой предпочтительно экстракт растения семейства Liliaceae или его фракцию, а согласно особенно предпочтительному воплощению растение семейства Liliaceae представляет собой Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

Настоящее изобретение также включает средство для коррекции гипергликемии, содержащее соединение или композицию по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента (называемую здесь также "лекарственное средство по настоящему изобретению").

Настоящее изобретение включает также лекарственное средство или пищевой продукт, или напиток, содержащие упомянутое выше средство для коррекции гипергликемии.

Настоящее изобретение относится также к пищевому продукту или напитку, содержащим в качестве активного ингредиента соединение по настоящему изобретению или композицию по настоящему изобретению, которые проявляют эффект коррекции гипергликемии и снабжены указанием, что пищевой продукт или напиток используется для коррекции состояния гипергликемии.

Далее нижеупомянутые здесь лекарственное средство и пищевой продукт или напиток могут называться в общем как "лекарственное средство, пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению".

Настоящее изобретение далее включает способ получения соединения по настоящему изобретению или композиции по настоящему изобретению, который предусматривает экстрагирование фракции, содержащей соединение из растения семейства Liliaceae, содержащего соединение, его часть или продукт его разрушения, при использовании органического растворителя или горячей воды и концентрирование данной фракции, а согласно особенно предпочтительному воплощению растение семейства Liliaceae представляет собой Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

Настоящее изобретение далее относится к применению соединения по настоящему изобретению или композиции, содержащей данное соединение, при получении лекарственного средства для коррекции состояния гипергликемии. При использовании согласно настоящему изобретению вышеупомянутая композиция представляет предпочтительно экстракт растения семейства Liliaceae или его фракцию, содержащую 0,001% в пересчете на сухую массу или более упомянутого выше соединения, а согласно особенно предпочтительному воплощению растение семейства Liliaceae представляет собой Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

Настоящее изобретение также включает способ коррекции состояния гипергликемии, который предусматривает введение соединения по настоящему изобретению или содержащей его композиции субъекту, у которого следует произвести коррекцию состояния гипергликемии. В способе по настоящему изобретению вышеупомянутая композиция представляет собой предпочтительно экстракт растения семейства Liliaceae или его фракцию, содержащую 0,001% в пересчете на сухую массу или более упомянутого выше соединения, а согласно особенно предпочтительному воплощению растение семейства Liliaceae представляет собой Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 показывает GC-MS (ГХ-МС) спектр ацетилированной агликоновой части гликозида по настоящему изобретению (фотография для замены рисунка: полутональное изображение, показанное на дисплее).

Фиг.2 показывает ¹³C-NMR (¹³С-ЯМР) график ацетилированной агликоновой части гликозида по настоящему изобретению (фотография для замены рисунка: полутональное изображение, показанное на дисплее).

Фиг.3 показывает график, показывающий выбранные случайным образом изменения на протяжении времени в уровнях глюкозы в крови мышей, которым вводили соединение по настоящему изобретению.

Фиг.4 показывает график, представляющий изменения на протяжении времени в уровнях глюкозы в крови у голодающих мышей, которым вводили соединение по настоящему изобретению.

ЛУЧШИЙ ПРИМЕР ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ниже будут пояснены подробно предпочтительные варианты воплощения по настоящему изобретению. Однако настоящее изобретение не ограничивается нижеследующими предпочтительными воплощениями и может свободно модифицироваться в объеме настоящего изобретения.

Соединение по настоящему изобретению представляет соединение, имеющее структуру, представленную вышеупомянутой химической формулой (1), а именно 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол. То есть соединение по настоящему изобретению имеет структуру, образуемую дегидратационной конденсацией гидроксильной группы в 3-положении 4-метилэргост-7-ен-3-ола и гидроксильной группы в 1-положении D-глюкозы.

Кроме того, композиция по настоящему изобретению предпочтительно представляет собой экстракт из растения семейства Liliaceae или его фракцию, содержащую 0,001% в пересчете на сухую массу или более, предпочтительно 0,01% в пересчете на сухую массу или более, более предпочтительно 0,1% в пересчете на сухую массу или более, соединения по настоящему изобретению. Верхний предел содержания соединения по настоящему изобретению, содержащегося в композиции по настоящему изобретению, особо не ограничивается и может составлять, например, 50, 70 или 90% по массе.

Соединение по настоящему изобретению или композиция, содержащая его, может быть получена, например, экстрагированием фракции, содержащей соединение по настоящему изобретению, из растения, принадлежащего к семейству Liliaceae и содержащего соединение по настоящему изобретению, его часть или продукт его разрушения, при использовании органического растворителя или горячей воды и концентрированием фракции.

Примеры упомянутого выше растения, принадлежащего к семейству Liliaceae, включают растения, принадлежащие к роду Aloe или Allium. Примеры растений рода Aloe включают Aloe barbadensis Miller, Aloe ferox Miller, Aloe africana Miller, Aloe arborescen Miller var. natalensis Berger, Aloe spicata Baker и так далее. При получении соединения по настоящему изобретению или содержащей его композиции, хотя и может использоваться все вышеупомянутое растение, предпочтительно использовать его мезофилл (чистая гелевая часть). Такое растение или часть его разрушается предпочтительно с использованием гомогенизатора или аналогичного устройства и тем самым ожижается, и продукт разрушения экстрагируется с использованием органического растворителя или горячей воды. Примеры органических растворителей включают спирты, такие как метанол, этанол и бутанол; сложные эфиры, такие как метилацетат, этилацетат, пропилацетат и бутилацетат; кетоны, такие как ацетон и метилизобутилкетон; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и петролейный эфир; углеводороды, такие как гексан, циклогексан, толуол и бензол; галогенированные углеводороды, такие как тетрахлорид углерода, дихлорметан и хлороформ; гетероциклические соединения, такие как пиридин; гликоли, такие как этиленгликоль; многоатомные спирты, такие как полиэтиленгликоль; нитрильные растворители, такие как ацетонитрил, смеси данных растворителей и так далее. Кроме того, данные растворители могут быть безводными или водными. Среди этих растворителей особенно предпочтительными являются смеси этилацетат/бутанол (3:1) и хлороформ/метанол (2:1).

В качестве метода экстракции может использоваться способ, обычно используемый для обычного экстрагирования компонентов растений. Используемым обычно является, например, метод нагревания с обратным холодильником 1-300 частей по массе органического растворителя с 1 частью по массе свежего растения или высушенного растения, с нагреванием при температуре, равной или ниже точки кипения растворителя, и паровой отгонки или встряхивания, или метод выполнения экстракции обработкой ультразвуком при комнатной температуре. С помощью отделения нерастворимых веществ из экстракционной жидкости с использованием подходящего метода, такого как фильтрование или центрифугирование, можно получить сырой или неочищенный экстракт.

Сырой экстракт может быть очищен с помощью различных типов хроматографии, таких как колоночная хроматография на силикагеле с нормальной или обращенной фазой. Когда при колоночной хроматографии на силикагеле с нормальной фазой в качестве растворителя для элюирования используется градиент смеси хлороформ/метанол, соединение по настоящему изобретению элюируется при соотношении смешения хлороформ:метанол = около 5:1. Далее, когда при колоночной хроматографии на силикагеле с обращенной фазой в качестве растворителя для элюирования используется градиент смеси метанол/вода, соединение по настоящему изобретению элюируется метанолом с концентрацией около 95%.

Полученная фракция может дополнительно очищаться с помощью HPLC (ВЭЖХ) или аналогичных.

Содержит ли действительно соединение или композиция, содержащая его, полученные, как описано выше, соединение по настоящему изобретению, может быть подтверждено, например, методами, показанными в примерах, приведенных ниже. Является ли соединение гликозидом, связанным с глюкозой по агликоновой части, или является ли агликоновая часть 4-метилэргост-7-ен-3-олом, может быть подтверждено, например, с помощью ¹³С-ЯМР или аналогичных методик.

Соединение по настоящему изобретению может быть также получено путем конденсации D-глюкозы и 4-метилэргост-7-ен-3-ола. 4-Метилэргост-7-ен-3-ол может быть получен с помощью экстракции его из растения и очистки. D-Глюкоза и 4-метилэргост-7-ен-3-ол могут конденсироваться, например, с помощью сочетания способов, описанных в Jikken Kagaku Koza (Lecture of Experimental Chemistry), 4-е издание, т.26, 1992 (описано на стр.272, стр.297 и стр.342). А именно D-глюкоза полностью ацетилируется, а затем аномерное положение превращается в α-бромид. Затем 4-метилэргост-7-ен-3-ол подвергается реакции с α-бромидом в диэтиловом эфире для достижения β-гликозилирования, и после этого ацетильная группа гидролизуется в смеси метилат натрия/метанол для получения целевого соединения.

Соединение по настоящему изобретению оказывает действие, понижающее уровень гемоглобина Alc, и в результате оно может регулировать уровень глюкозы в крови на протяжении длительного периода времени. Поэтому оно может использоваться в качестве активного ингредиента активного агента для коррекции состояния гипергликемии.

Кроме того, вследствие того что кожица листьев Aloe vera содержит барбалоин и алоэ-эмодин, оказывающие послабляющее действие, обычно считают, что оно является неблагоприятным в качестве лекарственного средства, пищевого продукта или напитка, от которых не следует ожидать послабляющего действия. С другой стороны, композиция по настоящему изобретению согласно ее предпочтительному воплощению может быть получена с помощью экстракции и фракционирования из мезофилла (чистая гелевая часть) Aloe vera, который может потребляться в пищу, что является обоснованным опытным путем, и, следовательно, не содержит барбалоин или алоэ-эмодин, а содержит эффективное количество соединения по настоящему изобретению. Следовательно, композиция по настоящему изобретению также является предпочтительной в качестве активного ингредиента средства для коррекции гипергликемии.

Соединение или композиция по настоящему изобретению могут использоваться в качестве активного ингредиента лекарственного средства, пищевого продукта или напитка по настоящему изобретению, как они охарактеризованы в данном описании. Следовательно, композиция по настоящему изобретению может быть раствором, а может также храниться и использоваться в виде порошка после того, как оно лиофилизуется или подвергается сушке распылением общепринятым способом.

В качестве лекарственного средства по настоящему изобретению соединение или композиция по настоящему изобретению, или и то и другое в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем могут вводиться млекопитающему, включая человека, перорально или парентерально. В лекарственном средстве по настоящему изобретению соединение по настоящему изобретению может быть фармацевтически приемлемой солью. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают как соли металлов (неорганические соли), так и органические соли, включающие, например, соли, перечисленные в "Remington's Pharmaceutical Sciences", 17th edition, стр.1418, 1985. Конкретные примеры их включают, но не ограничиваются ими, соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, сульфат, фосфат, дифосфат и гидробромат, и соли органических кислот, такие как малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, памоат, салицилат и стеарат. Кроме того, солью может быть соль c металлом, таким как натрий, калий, кальций, магний и алюминий, или соль с аминокислотой, такой как лизин. Кроме того, объемом настоящего изобретения охватываются также сольваты, такие как гидраты вышеупомянутого соединения или его фармацевтически приемлемых солей.

Дозированные формы лекарственного средства по настоящему изобретению особо не ограничиваются и могут выбираться подходящим образом в зависимости от терапевтической задачи. Их конкретные примеры включают таблетки, пилюли, порошки, растворы, суспензии, эмульсии, гранулы, капсулы, сиропы, суппозитории, инъекционные препараты, мази, бляшки, глазные капли, капли в нос и так далее. При получении в качестве фармацевтических носителей могут использоваться добавки, обычно применяемые в обычных лекарственных средствах, улучшающих гипергликемию, такие как эксципиенты, связующие, разрыхляющие средства, смазывающие средства, стабилизаторы, вкусовые или ароматизирующие средства, разбавители, поверхностно-активные вещества и растворители для инъекции. Кроме того, поскольку эффект настоящего изобретения не снижается, соединение или композиция по настоящему изобретению может использоваться в сочетании с другими лекарственными средствами, оказывающими эффект коррекции гипергликемии.

Хотя количество соединения или композиции по настоящему изобретению, содержащееся в лекарственном средстве по настоящему изобретению, особо не ограничивается и может подходящим образом выбираться, это количество может составлять, например, 0,001-10% по массе, предпочтительно 0,01-1% по массе, особенно предпочтительно 0,05-1% по массе в пересчете на количество соединения по настоящему изобретению.

Лекарственное средство по настоящему изобретению является полезным для терапевтического или профилактического лечения заболеваний, являющихся результатом гипергликемических состояний, таких как, например, диабет и связанные с ним симптомы и состояния (вероятность развития диабета или связанных состояний). В частности, он может использоваться для предотвращения наступления сахарного диабета при гипергликемических состояниях.

Лекарственное средство по настоящему изобретению содержит вышеупомянутое средство по настоящему изобретению (средство для коррекции гипергликемии) и является полезным для терапевтического или профилактического лечения заболеваний, являющихся результатом гипергликемических состояний, таких как, например, диабет и связанные с ним симптомы и состояния (вероятность развития диабета или связанных состояний). В частности, он может использоваться для предотвращения наступления сахарного диабета из гипергликемических состояний. Кроме того, при помощи лекарственного средства по настоящему изобретению можно лечить или предотвращать различные заболевания, осложнения и так далее, являющиеся результатом гипергликемических состояний, и снижают риск данных заболеваний, осложнений и так далее.

Примеры таких разнообразных заболеваний и осложнений, являющихся результатом гипергликемических состояний, включают диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию, диабетическую нейропатию, диабетическую гангрену, церебральную апоплексию, являющуюся результатом сахарного диабета, инфаркт миокарда, являющийся результатом сахарного диабета и так далее.

Термин "гипергликемические состояния" относится к состояниям, при которых уровни глюкозы в крови выходят за нормальные пределы, а нормальные пределы обычно определяются как уровень глюкозы в крови в состоянии голода порядка 110 мг/дл или ниже, уровень глюкозы в крови через 1 час после приема 75 г глюкозы - 160 мг/дл или ниже, и уровень глюкозы в крови через 2 часа после приема того же количества глюкозы - 120 мг/дл или ниже (Nihon Rinsho, №806, т.1, стр.28-35, 2002). Кроме того, лекарственное средство по настоящему изобретению предпочтительно используется для лечения пациентов с уровнем гемоглобина Alc выше нормального, например с уровнем гемоглобина Alc порядка 5,8% или выше.

Время введения агента или лекарственного средства по настоящему изобретению особо не ограничивается и может выбираться подходящим образом в соответствии с методом лечения целевой болезни. Далее способ введения предпочтительно определяется в зависимости от дозированной формы, возраста, пола и других факторов пациента, от тяжести симптомов у пациента и так далее.

Доза активного ингредиента в средстве согласно настоящему изобретению выбирается подходящим образом в зависимости от режима дозировки, возраста, пола, тяжести заболевания, других факторов пациентов и так далее. Количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента обычно выбирается из интервала, предпочтительно 0,01-10 мг/кг/день, более предпочтительно 0,1-1 мг/кг/день, в качестве опытной дозы. Далее, когда используется композиция по настоящему изобретению, сухая масса композиции выбирается из интервала, предпочтительно 0,1-1000 мг/кг/день, более предпочтительно 1-100 мг/кг/день, в качестве опытного количества. В любом случае доза может приниматься один раз в день или несколько раз в виде раздельных порций.

Средство или лекарственное средство по настоящему изобретению, или его активный ингредиент, т.е. соединение или композиция по настоящему изобретению, может добавляться к пищевому продукту или напитку. Вид и свойства пищевого продукта или напитка особо не ограничиваются, до тех пор пока эффект активного ингредиента не ухудшается, а пищевой продукт или напиток могут приниматься перорально и могут быть получены общепринятым способом с использованием сырьевых материалов, обычно используемых для пищевых продуктов или напитков, за исключением того, что добавляется вышеупомянутый активный ингредиент.

Количество соединения или композиции по настоящему изобретению, содержащееся в пищевом продукте или напитке по настоящему изобретению, особо не ограничивается и может выбираться подходящим образом. Например, соединение или композиция по настоящему изобретению содержится в пищевом продукте или напитке в количестве 0,0001-1% по массе, предпочтительно 0,001-1% по массе, особенно предпочтительно 0,05-1% по массе, из расчета количества соединения по настоящему изобретению.

Пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению могут использоваться для разнообразных целей, где необходим эффект коррекции гипергликемии. Например, он может использоваться в качестве пищевого продукта или напитка, подходящих для тех, кто беспокоится об уровнях глюкозы в крови, пищевого продукта или напитка, полезных для снижения или устранения факторов риска заболеваний, связанных с образом жизни, таких как сахарный диабет.

В связи с пищевым продуктом или напитком по настоящему изобретению выражение "коррекция гипергликемии" означает коррекция или предотвращение различного вреда здоровью, являющегося результатом гипергликемии, а "предотвращение гипергликемии", "подавление увеличения уровня глюкозы в крови", "коррекция увеличения уровня глюкозы в крови", "предотвращение увеличения уровня глюкозы в крови", "коррекция высокого уровня гемоглобина Alc" и так далее приводятся в настоящем изобретении в качестве терминов, имеющих значение, сходное со значением упомянутой выше "коррекции гипергликемии".

Далее пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению является полезным для профилактического лечения заболеваний, являющихся результатом гипергликемических состояний, таких как сахарный диабет и связанные с ним симптомы и состояния (вероятность развития диабета или связанных состояний). В частности, он может также использоваться для предотвращения наступления сахарного диабета в результате гипергликемических состояний. Кроме того, пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению может использоваться для профилактического лечения различных заболеваний, осложнений и так далее, происходящих в результате гипергликемических состояний, и может снижать риски данных заболеваний, осложнений и так далее.

Примеры различных заболеваний и осложнений, происходящих в результате гипергликемических состояний, включают диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию, диабетическую нейропатию, диабетическую гангрену, церебральную апоплексию, являющуюся результатом сахарного диабета, инфаркт миокарда, являющийся результатом сахарного диабета, и так далее.

Пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению предпочтительно поступает в продажу в виде пищевого продукта или напитка с приложенным к нему указанием, что пищевой продукт или напиток используется для коррекции гипергликемии, например: "пищевой продукт или напиток, содержащий соединение, оказывающее эффект коррекции гипергликемии с отметкой "Для коррекции гипергликемии", "пищевой продукт или напиток, содержащий экстракт растений с отметкой "Для коррекции гипергликемии", "пищевой продукт или напиток, содержащий экстракт Aloe vera с отметкой "Для коррекции гипергликемии" и так далее.

Вследствие того что соединение, композиция и другие средства по настоящему изобретению проявляют эффект коррекции гипергликемии, подразумевается, что указание "коррекция гипергликемии" означает также "подавление увеличения уровня глюкозы в крови". Следовательно, пищевой продукт или напиток по настоящему изобретению может быть показан "Для подавления увеличения уровня глюкозы в крови". То есть упомянутое выше указание "Для коррекции гипергликемии" может быть показанием "Для подавления увеличения уровня глюкозы в крови".

Словесная формулировка, используемая для такого показания, упомянутого выше, необязательно ограничивается выражением "Для коррекции гипергликемии" или "Для подавления увеличения уровня глюкозы в крови", и любая другая формулировка, выражающая эффект коррекции гипергликемии или подавления увеличения уровня глюкозы в крови, конечно, охватывается объемом настоящего изобретения. В качестве такой формулировки возможно, например, показание, основанное на различных применениях, позволяющих потребителям определить эффект коррекции гипергликемии или подавления увеличения уровня глюкозы в крови. Примеры включают, например, указания "Подходящий для тех, кто заботится об уровнях глюкозы в крови", "Полезный для снижения или устранения рисков связанных с образом жизни заболеваний, таких как сахарный диабет".

Упомянутый выше термин "показание или указание" включает все действия для информирования потребителей об упомянутом выше использовании, и любые указания, напоминающие о нем или проводящие аналогию с упомянутым выше использованием, охватываются объемом "показания" настоящего изобретения независимо от задачи, содержания, объективной статьи, среды и др. показаний. Однако указание предпочтительно производится выражением, которое позволяет потребителям непосредственно узнать о вышеупомянутом использовании. Конкретные примеры включают действия, указывающие на упомянутое выше использование, с товарами или упаковками товаров, относящихся к пищевым продуктам или напиткам по настоящему изобретению, действия предписания, поставки, выставления на показ для цели передачи или поставки, или импортирования таких товаров, или упаковок товаров с указанием на упомянутое выше использование, выставление на показ или распространение рекламы, прайс-листов или деловых бумаг, относящихся к товарам, или предоставления информации, включающей информацию, содержащую указание на упомянутое выше использование, электромагнитным способом (Интернет и др.) и так далее.

Указание является предпочтительно указанием или показанием, одобренным административными органами и др. (например, указание в форме, основанной на одобрении, которое делается правомочным на основе любых различных легальных систем, предоставляемом администрацией), и оно особенно предпочтительно представляет указание на рекламных материалах в местах продаж, таких как упаковки, контейнеры, каталоги, брошюры или проспекты и рекламные надписи на популярных продуктах массового потребления, другие документы и так далее.

Примеры указаний далее включают указания, как например: здоровая пища, функциональная пища, пища для энтерального питания, пища для особого диетического использования, пища, претендующая на функцию питательных веществ, квази-лекарства и так далее, а также указания, одобренные Министерством Здравоохранения, Труда и Благосостояния, например, указания, одобренные на основе системы использования пищевых продуктов для конкретных целей здравоохранения. Примеры последних включают указания на пищевые продукты для использования в здравоохранении, указания на пищевые продукты для использования в здравоохранении с требованиями квалифицированной медицинской помощи, указания о влиянии на структуру и функцию организма, указания о снижении риска заболевания и так далее, и более точно, типичные примеры включают указания в качестве пищевых продуктов для конкретного использования в здравоохранении (особенно указания об использовании в здравоохранении), предусмотренные в принудительных предписаниях Закона о содействии Охране Здоровья (Министерство Здравоохранения, Труда и Благосостояния Японии, Указ Министерства №86 от 30 апреля 2003 г.) и аналогичные указания.

ПРИМЕРЫ

Настоящее изобретение будет далее подробно раскрыто со ссылкой на следующие примеры. Однако объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами.

[Пример получения 1]

Примеры получения 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола из Aloe vera будут описаны ниже.

3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол экстрагировали из Aloe vera и очищали, как описано ниже.

Мезофилл (мякоть листьев) растения Aloe vera (чистая гелеобразная фракция) в количестве 100 кг разжижали с использованием гомогенизатора, в эту массу добавляли 100 л смеси этилацетат/бутанола (3:1), и все перемешивали.

Смесь оставляли на ночь для разделения этилацетат/бутанольной смеси и водного слоя, и извлекали этилацетат/бутанольную смесь. Экстракт из данной этилацетат/бутанольной смеси, полученный с помощью концентрирования этилацетат/бутанольной смеси при пониженном давлении, имел массу 13,5 г.

Корректирующее воздействие на гипергликемию оценивали для вышеуказанного водного слоя и экстракта из этилацетат/бутанольной смеси на диабетической модели мышей, описанной ниже, и эффект наблюдался в отношении экстракта из этилацетат/бутанольной смеси. Поэтому осуществлялась попытка выделить и очистить компоненты в экстракт. Сначала упомянутый экстракт исследовали с помощью тонкослойной хроматографии (Merck Ltd., Silica gel 60F254 и RP-18F2543). В результате подходящим оказался способ выделения, основанный на колоночной хроматографии на силикагеле с нормальной фазой с использованием смеси хлороформ/метанол. Соответственно раствор 13 г вышеупомянутого экстракта, растворенный в 1 мл смеси хлороформ/метанол (1:1), помещали на колонку, заполненную 400 г силикагеля 60 (Merck Ltd.), для достижения адсорбции компонентов на колонке, затем компоненты элюировали смесью хлороформ/метанол с помощью ступенчатого градиентного способа, в котором концентрация метанола ступенчато повышалась (соотношения смеси хлороформ: метанол = 100:1, 25:1, 10:1, 5:1 и 1:1), и элюат фракционировали для каждого соотношения смешения вышеупомянутой смеси. Выход сырого продукта очистки, полученного из фракций после удаления растворителя составил 1,44, 3,0, 1,17, 1,28 и 2,27 г соответственно. Способом с использованием вышеупомянутой модели животных было подтверждено, что среди этих фракций активный компонент, находящийся во фракции, элюируется смесью хлороформ/метанол=5:1 (продукт А сырой очистки). Наличие барбалоина или алоэ-эмодина не подтверждалось анализом тонкослойной хроматографии.

Более того, для выделения и очистки активного компонента из вышеупомянутого продукта А сырой очистки данный продукт А сырой очистки исследовали с использованием тонкослойной хроматографии (Merck Ltd., Silica gel 60F254 и RP-18F2543). В результате подходящим оказался способ выделения, основанный на колоночной хроматографии с силикагелем с обращенной фазой при использовании метанола. Соответственно, вышеупомянутый продукт А сырой очистки растворяли в 1 мл смеси хлороформ/метанол (1:1) и помещали на колонку, заполненную 180 г COSMOSIL 140 (Nacalai Tesque, Inc.), для достижения адсорбции компонента на колонке. Затем выполняли элюирование с последовательным использованием 600 мл 85% раствора метанола, 600 мл 95% раствора метанола и 100 мл 100% метанола. 3-О-β-D-Глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол концентрировали и выделяли во фракции, разбавленной 95% метанолом, и масса указанного соединения составляла 370 мг после удаления растворителя. Далее данный продукт упоминается как соединение 1.

Поскольку соединение 1 показало величину Rf, очень близкую к величине β-ситостеролгликозида в исследовании, основанном на тонкослойной хроматографии, было определено, что оно является гликозидом, в котором 1 молекула сахара присоединена к агликоновому фрагменту. Более того, для проверки сахарной композиции соединения 1 соединение 1 подвергали метанолизу, затем превращали в TMS производное и подвергали GC-MS измерению. В результате в измерении TMS производного на сахарную часть соединения 1 оно показало главные пики при времени удерживания 14,28, 14,61 и 16,34 минуты, которое, по существу, согласовывалось с показателями времени удерживания главных пиков образца глюкозы (Nacalai Tesque, Inc.), 14,27, 14,60 и 16,33 минуты. Более того, пики, соответствующие главным пикам образца галактозы (Kishida Chemical Co., Ltd.) и образца ксилозы (Kishida Chemical Co., Ltd.), не наблюдались. Таким образом, подтверждалось, что типом сахара, содержащегося в соединении 1, является глюкоза.

По вышеуказанным результатам было определено, что соединение 1 является гликозидом, в котором 1 молекула глюкозы присоединена к агликоновому фрагменту. Однако, когда соединение 1 измеряли с помощью ¹³С-ЯМР (125 МГц, CDCl₃), подтверждалось наличие загрязняющих веществ. Поэтому предположили, что для определения их структуры требуется дополнительная очистка. Соответственно, соединение 1 подвергалось метанолизу и затем ацетилировалось, а затем подтверждали структуру агликонового фрагмента так же, как и сайт присоединения агликонового фрагмента и сахара. Способ для этого будет описан ниже.

Соединение 1, в количестве 50 мг, растворяли в метаноле (50 мл), содержащем 5% соляную кислоту, нагревали с обратным холодильником в течение 6 часов для метанолиза и сушили, давая остаток (около 30 мг). Данный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (гексан:хлороформ=9:1), давая соединение 2 (10 мг). К данному соединению 2 (5 мг) добавляли уксусный ангидрид и пиридин (2 капли каждого) и все нагревали при 70°С в течение 30 минут для ацетилирования, а затем растворитель реакционной смеси выпаривали, с получением соединения 3. Результаты анализа данного соединения 3 с помощью GC-MS и ¹³С-ЯМР (125 МГц, CDCl₃) показаны на Фиг.1 и 2 соответственно. Условия измерения и результаты являются следующими. 3-Ацетокси-4-метилэргост-7-ен, используемый как ссылочное вещество, приготавливался с помощью экстракции алоэ, очистки экстракта, подтверждения структуры очищенного продукта с помощью ¹³С-ЯМР и его ацетилирования.

[спектр ¹³С-ЯМР (d величины, в CDCl₃)]; С-1:36,8, C-2:27,3, С-3:78,7, С-4:37,0, C-5:46,9, С-6:26,8, C-7:117,4, C-8:139,4, C-9:49,7, C-10:34,9, C-11:21,6, C-12:39,7, C-13:43,6, С-14:55,1, C-15:23,1, C-16:28,2, C-17:56,3, C-18:12,0, С-19:14,2, С-20:36,5, С-21:19,0, С-22:33,9, С-23:30,6, С-24:39,1, С-25:32,6, С-26:20,4, С-27:18,4, С-28:15,6, С-29:15,3

[GC-MS]

Прибор: GC-17A/GCMS5050A (SHIMADZU)

GC Колонка: NEUTRA BOND-5 (GL Scienses)

Температура колонки: 100°C (2 мин)>(10°C/мин)>300°C (28 мин)

Инжекционная температура: 250°С

Газ носитель: Не (1,3 мл/мин)

Температура внутри: 300°C

Режим MS: EI

Энергия ионизации: 70 эВ

[Результаты]

Ссылочное вещество: 3-ацетокси-4-метилэргост-7-ен: tR(время реакции) [мин]=39,4; m/z 456 [M]⁺, 441 [M-CH₃]⁺, 396 [М-АсОН]⁺, 381 [М-СН₃-АсОН]⁺

Соединение 3: tR [мин]=39,2; m/z 456 [M]⁺, 441 [M-CH₃]⁺, 396 [М-АсОН]⁺, 381 [М-СН₃-АсОН]⁺

Результаты ЯМР измерения соединения 3 согласовывались с величинами 3-ацетокси-4-метилэргост-7-ена, показанными в литературе (Yukagaku (Oil Chemistry), т.36, №5, стр.301-319, 1987). Данные результаты показали, что соединением 2 является 4-метилэргост-7-ен-3-ол. Более того, по результатам FAB-MS измерения было обнаружено, что молекулярная масса соединения 1 составляет 576. Когда соединение 2 (агликоновый фрагмент) и глюкоза конденсировались, молекулярная масса полученного соединения составила 414 (соединение 2)+180 (глюкоза) - 18 (вода)=576, что согласовывалось с молекулярной массой соединения 1.

Вышеуказанные результаты показали, что соединение 1 имеет структуру 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола.

Молекулярные формулы, молекулярные массы и химические формулы соединений показаны ниже.

(Соединение 1)

Молекулярная формула: С₃₅Н₆₀О₆

Молекулярная масса: 576

Химическая формула: Следующая химическая формула (1)

(Соединение 2)

Молекулярная формула: С₂₉Н₅₀О

Молекулярная масса: 414

Химическая формула: Следующая химическая формула (2)

(Соединение 3)

Молекулярная формула: С₃₁Н₅₂О₂

Молекулярная масса: 456

Химическая формула: Следующая химическая формула (3)

[Пример получения 2]

Мезофилл Aloe vera (чистая гелеобразная фракция) сушили нагреванием, к 0,3 г размолотого сухого порошка из Aloe vera добавляли 60 мл 60, 80 или 100% этанола, и смесь нагревали с обратным холодильником при 60°С в течение 1 часа. Экстракт центрифугировали при 1500 об/мин в течение 20 минут и супернатант концентрировали при пониженном давлении для полного удаления этанола и получения таким образом сырого (неочищенного) экстракта. Сухая масса неочищенных экстрактов, полученных с помощью экстракции с использованием 60, 80 и 100% этанола составила 65, 42 и 18 мг соответственно. Тонкослойной хроматографией подтверждалось, что данные неочищенные экстракты содержат 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол.

[Пример получения 3]

Мезофилл растения Aloe vera (чистая гелеобразная фракция) сушили нагреванием, к 0,3 г сухого размолотого порошка из Aloe vera добавляли 60 мл воды и смесь нагревали с обратным холодильником при 95°С в течение 5 часов. Экстракт центрифугировали при 1500 об/мин в течение 20 минут и супернатант лиофилизировали, давая 75 мг сырого экстракта. Тонкослойной хроматографией подтверждали, что данный неочищенный экстракт содержит 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол.

[Пример получения 4]

Мезофилл растения Aloe vera (чистая гелеобразная фракция) сушили нагреванием, измельчали и высушивали. К 21 кг приготовленного таким образом порошка Aloe vera добавляли 90 л смеси хлороформ/метанол (2:1), затем все оставляли в смеси в течение ночи при комнатной температуре, а потом собирали фильтрованием, и к полученному фильтрованием остатку снова добавляли 90 л смеси хлороформ/метанол (2:1). Данная процедура повторялась в целом 4 раза. Полученный фильтрат (350 л) концентрировался при 28°С давая наконец 784 г неочищенного экстракта. К 780 г данного неочищенного экстракта добавляли 2 л смеси хлороформ/метанол (2:1), все перемешивали в течение 1 часа и фильтровали для выделения слоя (А) хлороформ/метанольной смеси. К остатку, полученному фильтрованием, последовательно добавляли 2,5 л воды и 2 л этилацетата, смесь перемешивали в течение 1 часа, и этилацетатный слой (В) извлекали. К остающемуся водному слою снова добавляли 5 л хлороформа, смесь перемешивали в течение 1 часа и хлороформный слой (С) извлекали.

Извлеченные экстракты А, В и С в органическом растворителе смешивали, концентрировали при 23°С и загружали на силикагелевую колонку [стеклянная колонка, 52 мм × 350 мм, наполняющий материал: IR-63/210-W (Daiso Co., Ltd.)]. Впоследствии, при мониторинге элюата с помощью тонкослойной хроматографии, через колонку пропускали 10 л смеси гексан/хлороформ (1:1), 10 л хлороформа, 20 л смеси хлороформ/метанол (10:1) и 20 л смеси хлороформ/метанол (5:1) в данном порядке, и фракция 1 (примерно 1 л), фракция 2 (примерно 1,5 л), фракция 3 (примерно 1,5 л) и фракция 4 (примерно 1,5 л) выделялись по порядку из используемых для элюирования растворителей.

С помощью тонкослойной хроматографии подтверждали, что среди них фракция 3 содержит целевой гликозид, и затем растворитель фракции 3 удаляли с получением 131,6 г неочищенного экстракта. В количестве 130 г данный неочищенный экстракт снова загружали на силикагелевую колонку [стеклянная колонка, 70 мм × 500 мм, наполняющий материал: SP-60-40/60 (Daiso Co., Ltd.)] и последовательно элюировали 10 л смеси хлороформ/метанол (30:1), 50 л смеси хлороформ/метанол (20:1), 10 л смеси хлороформ/метанол (10:1) и 10 л смеси хлороформ/метанол (1:1), в качестве растворителей для элюирования, в условиях давления 10 кг^-2, при скорости потока 40 мл/мин. Элюаты фракционировались в виде 100-мл фракций с использованием фракционного коллектора для сбора фракций 1-8.

Собранные фракции исследовали с помощью тонкослойной хроматографии и в результате было обнаружено, что во фракции 7 находится целевой гликозид и примесные (загрязняющие) вещества. Поэтому данную фракцию концентрировали и снова загружали на силикагелевую колонку [стеклянная колонка, 70 мм × 500 мм, наполняющий материал: SP-60-40/60 (Daiso Co., Ltd.)], и последовательно элюировали 10 л смеси хлороформ/метанол (20:1) и 10 л смеси хлороформ/метанол (10:1), в качестве растворителей для элюирования, в условиях давления 10 кг^-2, при скорости потока 40 мл/мин. В результате получалось 25,3 г 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола, который был целевым гликозидом, содержащимся во фракции элюирования смесью хлороформ/метанол (10:1).

[Пример испытания 1]

Данное испытание проводилось для того, чтобы оценить корректирующее воздействие 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола на состояние гипергликемии.

(1) Получение образца

В качестве испытуемого образца использовался 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол, полученный в Примере Получения 1, упомянутом выше.

(2) Способ испытания

В качестве модели мышей с диабетом типа-II использовались самцы мышей 6-недельного возраста db/db (закупаемые у Clea Japan, Inc.).

Эти мыши делились на группы, содержащие по 7 животных каждая. Испытуемый образец растворяли в ДМСО, и с помощью физиологического солевого раствора концентрацию 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола доводили до 15 мкг/мл. Конечную концентрацию ДМСО доводили до 0,2%. Мышиной модели с диабетом типа-II перорально вводили по 1 мл раствора испытуемого образца ежедневно один раз в день с помощью зонда. В качестве отрицательного образца использовали раствор, который не содержал испытуемый образец. В течение времени измеряли уровни глюкозы в крови, натощак и выбранные случайным образом, с использованием Antsense II (Bayer-Sankyo Co., Ltd.). Уровни глюкозы в крови натощак измеряли через 15 часов голодания.

(3) Корректирующее воздействие на гипергликемию

Изменения на протяжении времени уровней глюкозы в крови, измеренных случайным образом и натощак, в течение периода введения испытуемого образца показаны на Фиг.3 и 4. У мышей, которым вводился отрицательный образец, наблюдалось быстрое увеличение уровней глюкозы в крови, как в случаях, выбранных случайным образом, так и натощак, тогда как эффект подавления увеличения уровней глюкозы в крови явно наблюдался у мышей, которым неоднократно вводился испытуемый образец.

[Пример испытания 2]

Данное испытание проводилось для того, чтобы оценить понижающее воздействие 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола на содержание гемоглобина Alc.

(1) Получение образца

В качестве испытуемого образца использовался 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол, полученный в Примере Получения 1, упомянутом выше.

(2) Способ испытания

В качестве модели мышей с диабетом типа-II использовались самцы мышей 6-недельного возраста db/db (закупаемых у Clea Japan, Inc.).

Эти мыши делились на группы, содержащие по 7 животных каждая. Испытуемый образец растворяли в ДМСО, и с помощью физиологического солевого раствора концентрацию 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола доводили до 1, 5 и 15 мкг/мл. Конечную концентрацию ДМСО доводили до 0,2%. Модели мышей с диабетом типа-II орально вводили по 1 мл раствора испытуемого образца ежедневно один раз в день с помощью зонда. В качестве отрицательного образца использовался раствор, который не содержал испытуемый образец. На 35 день от начала введения измеряли уровни гемоглобина Alc с использованием DCA 2000 (Bayer-Sankyo Co., Ltd.).

(3) Понижающее воздействие на содержание гемоглобина Alc

Результаты измерения уровней гемоглобина Alc на 35 день от начала введения показаны в Таблице 1. В сравнении с уровнями гемоглобина Alc после введения отрицательного образца статистически значимые уменьшения уровней гемоглобина Alc наблюдались после неоднократного введения 5 или 15 мкг испытуемого образца, показывающие наличие контролирующего воздействия на уровень глюкозы в крови на протяжении длительного периода времени. В дальнейшем в течение периода введения не было ни одного случая, показывающего симптомы неблагоприятного побочного эффекта или состояний острой гипогликемии после введения, и не наблюдалось никакой аномалии в весе тела и патологических признаков.

Таблица 1
Образцы	Сравнительные уровни гемоглобина Alc (%) на 35 день от введения	р величина
Образец испытания (1 мкг)	98,6+7,3
Образец испытания (5 мкг)	89,6+7,9*	0,017
Образец испытания (15 мкг)	73,5+8,6*	0,00001
Отрицательный образец	100
*: наблюдалась статистическая значимость.

[Пример испытания 3]

Данное испытание проводилось для того, чтобы исследовать понижающее воздействие на содержание гемоглобина Alc и дозировку экстрагированного сырого продукта очистки А, содержащего 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол из Aloe vera.

(1) Получение образца

Использовался экстрагированный сырой продукт очистки А, содержащий 3-О-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ол, полученный в Примере Получения 1, упомянутом выше.

(2) Способ испытания

В качестве модели мышей с диабетом типа-II использовались самцы мышей 6-недельного возраста db/db (закупаемые у Clea Japan, Inc.). Эти мыши делились на группы, содержащие по 7 животных каждая. Испытуемый образец растворяли в ДМСО, и с помощью физиологического солевого раствора концентрацию сырого продукта очистки А доводили до 25, 100 и 200 мкг/мл. Конечную концентрацию ДМСО доводили до 0,2%. Модели мышей с диабетом типа-II перорально вводили по 1 мл раствора испытуемого образца ежедневно один раз в день с помощью зонда. В качестве отрицательного образца использовали раствор, который не содержал испытуемый образец. На 35 день от начала введения измеряли уровни гемоглобина Alc с использованием DCA 2000 (Bayer-Sankyo Co., Ltd.).

(3) Уровень глюкозы в крови и уровень гемоглобина Alc

Результаты измерения уровней гемоглобина Alc на 35 день от начала введения показаны в Таблице 2. В сравнении с уровнями гемоглобина Alc отрицательного испытания уменьшения уровня гемоглобина Alc наблюдались после неоднократного введения 100 или 200 мкг испытуемого соединения, и таким образом статистически значимо демонстрировалось наличие эффекта контроля уровня глюкозы в крови на протяжении длительного периода времени. В дальнейшем в течение периода введения не было ни одного случая, показывающего симптомы неблагоприятного побочного эффекта или состояний острой гипогликемии после введения, и не наблюдалось никакой аномалии в весе тела и патологических признаков.

Таблица 2
Образцы	Сравнительные уровни гемоглобина Alc (%) на 35 день от введения	р величина
Образец испытания (продукт сырой очистки 25 мкг)	92,5+7,1	0,1571
Образец испытания (продукт сырой очистки 100 мкг)	84,9+8,2*	0,0275
Образец испытания (продукт сырой очистки 200 мкг)	82,0+8,6*	0,0129
Отрицательный образец	100
*: наблюдалась статистическая значимость.

Соединение по настоящему изобретению может безопасно вводиться или потребляться, не вызывая острую гипогликемию и имея длительное действие контроля уровня глюкозы в крови, что приводит к понижению уровня гемоглобина Alc. Далее композиция по настоящему изобретению может быть получена с использованием растений семейства Liliaceae, которые могут, с экспериментальной точки зрения, безопасно потребляться в пищу и являются легко доступными, например растений рода Aloe или Allium. Далее композиция по настоящему изобретению содержит эффективное количество соединения по настоящему изобретению, и в предпочтительном воплощении она не содержит барбалоин или алоэ-эмодин, которые являются неблагоприятными компонентами в качестве лекарственного средства, еды или питья.

Пример получения напитка

После этапа фильтрации через сито 20 меш в бак для приготовления помещали 56 кг экстракта алоэ, содержащего 0,0001 мас.% 3-O-β-D-глюкопиранозил-4-метилэргост-7-ен-3-ола. Далее в бак для приготовления добавили 43,9 кг воды, 80 г лимонной кислоты, 3 г сукралозы и 5 г Sunett (ацесульфама калия) и перемешали до образования смеси. Затем было добавлено 60 г ароматизатора и проведена стерилизация при 97°С в течение 30 с. Стерилизованная смесь была упакована в картосан (цилиндрические картонные контейнеры) по 125 мл в упаковке, с последующей герметизацией. Таким образом был приготовлен сок алоэ для коррекции гипергликемии.

1. Гликозидное производное 4-метилэргост-7-ен-3-ола, представленное следующей химической формулой (1)

2. Композиция для коррекции гипергликемии, содержащая 0,001% или более соединения по п.1 в пересчете на сухую массу.

3. Композиция, содержащая 0,001% или более соединения по п.1 в пересчете на сухую массу, и представляющая собой экстракт растения семейства Liliaceae или его фракцию.

4. Композиция по п.3, где растением семейства Liliaceae является Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

5. Средство для коррекции гипергликемии, которое содержит в качестве активного ингредиента композицию по любому из пп.2-4.

6. Средство для коррекции гипергликемии по п.5, которое содержит 0,001% или более указанного соединения в пересчете на сухую массу.

7. Лекарственное средство, содержащее средство для коррекции гипергликемии по п.5 или 6.

8. Пищевой продукт или напиток, содержащие средство для коррекции гипергликемии по п.5 или 6.

9. Пищевой продукт или напиток, содержащие в качестве активного ингредиента соединение по п.1 или композицию по любому из пп.2-4, проявляющие эффект коррекции гипергликемии, и снабженные указанием, что пищевой продукт или напиток используется для коррекции гипергликемии.

10. Способ получения соединения по п.1, или композиции, содержащей данное соединение, который включает экстрагирование фракции, содержащей соединение из растения семейства Liliaceae, и содержащей соединение по п.1, его часть или продукт его разложения, с использованием органического растворителя или горячей воды, и концентрирование фракции

11. Способ по п.10, в котором растением семейства Liliaceae является Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).

12. Способ коррекции гипергликемии, включающий введение субъекту, состояние гипергликемии которого подлежит коррекции, соединения, имеющего структуру, представленную нижеследующей химической формулой (1), или композиции, содержащей данное соединение

13. Способ по п.12, в котором композиция представляет собой экстракт растения семейства Liliaceae или его фракцию, содержащую 0,001% в пересчете на сухую массу или более указанного соединения.

14. Способ по п.13, в котором растением семейства Liliaceae является Aloe vera (Aloe barbadensis Miller).