Ослабленный живой штамм vibrio cholerae, предназначенный для производства оральной вакцины
Изобретение описывает новые ослабленные живые штаммы холерного вибриона, предназначенные для производства оральных противохолерных вакцин и представленные в лиофилизированных формах с длительным сроком хранения. Штаммы имеют два основных свойства, присущие живым противохолерным вакцинам, - это хорошая переносимость пациентами и достигается за счет мутаций, известных из уровня техники, и повышенная экологическая безопасность, обусловленная отсутствием в генотипе штаммов ДНК фага VGJф и нулевыми мутациями гена mshA либо другими спонтанными мутациями, выражающимися в отсутствии фимбрии MSHA IV типа на поверхности бактерий. Изобретение учитывает тот факт, что VGJф является филаментозным фагом, способным к рекомбинации с СТХф и распространению генов холерных токсинов, и аналогично рекомбинантам VGJф::СТХф использует фимбрии MSHA в качестве реципиентов. Вакцины, лишенные фимбрии MSHA, защищены от приобретения СТХф от рекомбинантного гибрида VGJф::СТХф. Вакцины, лишенные VGJф, защищены от распространения фага СТХф в процессе, опосредованном VGJф. Использование вакцин по изобретению обеспечивает высокую экологическую безопасность и устойчивый иммунитет. 7 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл.
Текст описания приведен в факсимильном виде.
1. Ослабленный живой штамм Vibrio cholerae, предназначенный для производства оральной вакцины, характеризующийся устойчивостью к инфицированию гибридным рекомбинантным фагом VGJф::СТХф (SEC ID: No 1) и к повторному приобретению им вирулентности, а также возможностью предотвращать распространение генома фага СТХф, опосредованное VGJф, при этом в оральной вакцине штамм представлен в лиофилизированной форме в сочетании с дополнительными компонентами: лактоза, пептон, дрожжевой экстракт и сорбитол при их общей концентрации, не превышающей 10% от объема вакцинного препарата.
2. Ослабленный живой штамм по п.1, отличающийся тем, что устойчивость к инфицированию фагом обеспечивается, по крайней мере, одной мутацией, препятствующей правильному построению реципиента фага VGJф, фимбрии MSHA, на поверхности бактерии, возможность предотвращения распространения генома фага СТХф обеспечивается отсутствием в генотипе цепочек фага VGJф, а дополнительные компоненты присутствуют в лиофилизированном препарате в следующих сочетаниях и концентрациях: лактоза 4-6%, пептон 0,5-2,0% и сорбитол 0,5-2,0% или дрожжевой экстракт 0,5-2,0% и сорбитол 1,0-2,0%.
3. Ослабленный живой штамм по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что он характеризуется устойчивостью к инфицированию гибридным рекомбинантным фагом VGJф::СТХф (SEC ID: No 1), благодаря спонтанной и стабильной мутации, препятствующей правильному построению реципиента фага VGJф и фимбрии MSHA на поверхности бактерии.
4. Ослабленный живой штамм по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что он выбран из группы холерных вибрионов серогруппы 01, биотипа Эль-Тор или серотипа Огава, депонированных в Бельгийской Объединенной Коллекции Микроорганизмов (ВССМ) (LMG) как штамм Vibrio cholerae JCG02 (LMG P-22150) или штамм Vibrio cholerae JCG01 (LMG P-22149).
5. Ослабленный живой штамм по п.3, отличающийся тем, что он выбран из группы холерных вибрионов серогруппы 01, биотипа Эль-Тор или серотипа Огава, депонированных в Бельгийской Объединенной Коллекции Микроорганизмов (ВССМ) (LMG) как штамм Vibrio cholerae JCG02 (LMG P-22150) или штамм Vibrio cholerae JCG01 (LMG P-22149).
6. Ослабленный живой штамм по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что в ген mshA введен разрушитель, который препятствует проявлению структурной субъединицы реципиента фага VGJф и фимбрии MSHA на поверхности бактерии.
7. Ослабленный живой штамм по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что он относится к одной из серогрупп 0139 и 01, Эль Тор, Огава или Инаба, и является одним из перечня штаммов, депонированных в коллекции (ВССМ) (LMG):
Vibrio cholerae JCG03 (LMG P-22151),
Vibrio cholerae KMD01 (LMG P-22153),
Vibrio cholerae KMD02 (LMG P-22154),
Vibrio cholerae KMD03 (LMG P-22155),
Vibrio cholerae JCG04 (LMG P-22152),
Vibrio cholerae ESP01 (LMG P-22156),
Vibrio cholerae ESP02 (LMG P-22157),
Vibrio cholerae ESP03 (LMG P-22158),
Vibrio cholerae ESP02 (LMG P-22157),
Vibrio cholerae ESP03 (LMG P-22158),
Vibrio cholerae RAF01 (LMG P-22159),
Vibrio cholerae TLP01 (LMG P-22160),
Vibrio cholerae TLP02 (LMG P-22161),
Vibrio cholerae TLP03 (LMG P-22162).
8. Ослабленный живой штамм по п.5, отличающийся тем, что он относится к одной из серогрупп 0139 и 01, Эль Тор, Огава или Инаба, и является одним из перечня штаммов, депонированных в коллекции (ВССМ) (LMG):
Vibrio cholerae JCG03 (LMG P-22151),
Vibrio cholerae KMD01 (LMG P-22153),
Vibrio cholerae KMD02 (LMG P-22154),
Vibrio cholerae KMD03 (LMG P-22155),
Vibrio cholerae JCG04 (LMG P-22152),
Vibrio cholerae ESP01 (LMG P-22156),
Vibrio cholerae ESP02 (LMG P-22157),
Vibrio cholerae ESP03 (LMG P-22158),
Vibrio cholerae RAF01 (LMG P-22159),
Vibrio cholerae TLP01 (LMG P-22160),
Vibrio cholerae TLP02 (LMG P-22161),
Vibrio cholerae TLP03 (LMG P-22162).
Приоритет по пунктам:
17.04.2003 по пп.1-2;
20.02.2003 по пп.3-8.