Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов с его применением

Изобретение относится к ветеринарии и касается средства, обладающего иммуностимулирующим действием. Биологически активный стимулятор для коррекции вторичных иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных содержит спиртовой экстракт растительного сырья смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки. Способ коррекции вторичных иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных включает внутримышечную инъекцию зоолана в виде 0,3% водного раствора и применения спиртового экстракта равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки в виде водного раствора 7-8% концентрации в дозе 2,5-3,0 мл/кг массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа. Средство является нетоксичным, содержит биодоступные полезные биологически активные вещества, повышающие функциональную активность антиоксидантной и иммунной систем, в частности макрофагальных клеток. 2 н.п. ф-лы, 5 табл.

 

Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов с его применением

Изобретение относится к ветеринарии, касается средства растительного происхождения, обладающего иммуностимулирующим действием, и может быть использовано как основной или дополнительный компонент стимуляции иммунной системы молодняка сельскохозяйственных животных, преимущественно телят, для повышения общей резистентности и иммунологической реактивности к действию различных повреждающих агентов.

Применение иммуномодулирующих препаратов направлено преимущественно на коррекцию вторичных иммунодефицитов, которые проявляются в частых, рецидивирующих, трудно поддающихся лечению инфекционно-воспалительных заболеваний различной локализации. Для молодняка крупного рогатого скота первые дни жизни и начало выпойки сборного молока (в 20-дневном возрасте) являются критическими иммунологическими периодами, что связано с физиологическими особенностями организма телят, в частности иммунодефицитным состоянием организма телят до первой выпойки молозива, а в 20-дневном возрасте - с расходованием молозивных защитных белков при недостаточности собственного иммунопоэза, а также стрессами из-за смены кормления и перехода от индивидуального к групповому содержанию. Так, наши исследования, проведенные в хозяйствах Нижегородской области, длительно неблагополучных по желудочно-кишечным и респираторным инфекциям, выявили иммунодефицитные состояния у клинически здоровых телят как 3-5-, так и 20-дневного возраста (таблицы 1, 2)

Таблица 1. Иммунный статус телят 3-5-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия
Показатели	Клинически здоровые телята	Здоровые телята из благополучного хозяйства
Лейкоциты, 109/л	6,2±0,1	7,1±0,1
Эритроциты, 1012/л	5,7±0,2	6,6±0,2
Функциональная активность нейтрофилов крови, %:
- спонтанный тест	3,2±0,2	4,8±0,4
- индуцированный тест	6,7±0,4	10,4±0,7
Бактерицидная активность сыворотки крови, %	39,4±3,0	52,1±2,4
Лизоцимная активность сыворотки крови, %	1,5±0,2	2,5±0,2
Общий белок, г%	5,0±0,2	6,12±0,1

Таблица 2. Иммунный статус телят 20-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия
Показатели	Клинически здоровые телята 20-дневного возраста	Здоровые телята 20-дневного возраста из благополучного хозяйства
Лейкоциты, 109/л	7,1±0,1	7,5±0,1
Эритроциты, 1012/л	7,6±0,1	8,0±0,1
Функциональная активность нейтрофилов крови, %:
спонтанный тест	3,8±0,2	4,8±0,1
индуцированный тест	12,8±1,0	25,6±1,2
Бактерицидная активность сыворотки крови, %	51,4±1,3	76,0±1,6
Лизоцимная активность сыворотки крови, %	1,5±0,2	3,8±0,1
Общий белок, г%	5,86±0,12	8,36±0,04

Известен ряд неспецифических стимуляторов иммунитета (синтетического, бактериального, растительного происхождения), различающихся по структуре и механизмам действия.

Из известных препаратов растительного происхождения иммуностимулирующие свойства наиболее изучены у препаратов элеутерококка, пустырника, препаратов из семян тыквы, травы эхинацеи пурпурной, левзеи сафлоровидной. Однако данные об иммунотропном действии этих препаратов отличаются противоречивостью [1, 2, 3, 4, 5, 6]

Известен также препарат растительного происхождения тетраиммунофит-фитоэкстракционный препарат из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающий иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ [7].

Наиболее близким к заявленному является средство, обладающее иммуностимулирующим действием, представляющее собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L), тимьяна ползучего (Thymus serpyllum), мяты перечной (Mentha piperita L.) и мать-и-мачехи (Tussilago farfara), взятых в равных количествах [8].

С целью расширения арсенала средств, обладающих иммуностимулирующим действием, предлагается использовать экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной (Echinazea purpurea), листьев мать-и-мачехи (Tussilago farfara), цветов липы мелколистной (Tilia cordata Mill.) и корней солодки (Glycyrrhiza glabra), взятых в равных количествах.

Эхинацея пурпурная (Echinazea purpurea) - многолетнее травянистое растение с коротким корневищем, плод - серовато-бурая семянка. Разводится в южной и средней полосах европейской части России. Собирают цветочные корзинки в июле-августе, корневища с корнями - поздней осенью. Химический состав: эфирное масло (в цветочных корзинках 0,13-0,48%), в состав которого входит нециклический секвитерпен, гликозид, бетаин, смола, органические кислоты (пальмитиновая, линолевая, церотиновая), фитостерины (в корнях).В народной и научной медицине эхинацею пурпурную применяют в комплексной терапии рецидивирующих инфекционно-воспалительных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Противопоказания к применению: гиперчувствительность, аутоиммунные заболевания, туберкулез, лейкоз, беременность, период лактации, детский возраст, хронические заболевания печени.

Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, уроновые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.

Липа мелколистная (Tilia cordata Mill.) - крупное долговечное дерево, растет в зоне широколиственных лесов европейской части России. Собирают соцветия с прицветниками, почки, листья, кору и семена. Химический состав: в цветах липы содержатся эфирное масло (около 0,05%), полисахариды (7-10%), включающие галактозу, глюкозу, рамнозу, арабинозу, ксилозу и галактуроновую кислоту, флаваноиды (4-5%), аскорбиновую кислоту и каротин: в листьях липы - белок, аскорбиновая кислоты (131 мг%), каротин; в плодах - жирное масло (до 60%). В народной и научной медицине настои и отвары соцветий липы применяют в качестве жаропонижающего и противовоспалительного средства при гриппе, простудных и респираторных заболеваниях, бронхитах, инфекционных болезнях у детей, невралгиях, циститах и др. Измельченные свежие почки или свежие и размоченные листья используют как наружное противовоспалительное, болеутоляющее и мягчительное средство, прикладываемое к ожогам, воспалительным уплотнениям и язвам.

Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее корнеотпрысковое травянистое растение семейства. В диком виде произрастает на юге Западной Европы, в Средиземноморье, Передней Азии, Иране, Турции, Афганистане, Китае, в России - на юге европейской части и в Западной Сибири. Собирают корневища с корнями весной или летом. Химический состав: тритерпеновый сапонин глицирризин-кальциевая и калиевая соли глицирризоновой кислоты (23%), флаваноиды, производные флаванона и халкона, полисахариды (крахмал, пектиновые вещества), аскорбиновая кислота. Препараты корня солодки применяют как отхаркивающее и слабительное (порошок, экстракты сухой и густой, сироп, эликсир грудной), как противовоспалительное, спазмолитическое и антисекреторное средство при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, антиаллергическое, противовоспалительное при бронхиальной астме, экземах, аллергических дерматитах.

Экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки готовится фармакопейным способом в соотношении сырья к извлекателю 1:10. В качестве экстрагента используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С. Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.

Пример: 1 стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°С в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье.

Для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят на фоне внутримышечной инъекции зоолана применяют биологически активный стимулятор в виде раствора 7-8% концентрации, который готовят на охлажденной кипяченой воде и дают внутрь в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа в дозе 2,5-3,0 мл/кг массы животного.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 2. Стимулирующее влияние на иммунологический статус новорожденных телят изучали в хозяйстве, длительно неблагополучном по болезням молодняка телят (заболеваемость 50-70%, смертность - 20-40%). В условиях неполноценности (дефицит макро- и микроэлементов) кормления коров-матерей (зимний стойловый период) по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, породы и массы тела формировали 2 группы новорожденных телят живой массой при рождении 28-30 кг для опыта и контроля. Телятам первой группы (опытной - 14 голов) применяли внутрь биологически активный стимулятор в соответствии с изобретением в виде водного раствора концентрацией 7% в дозе 2,0 мл/кг массы животного в течение 10 дней с интервалом в 24 часа. Телята контрольной группы (16 голов) препарата не получали. Параметры иммунологического статуса телят изучали 1, 6 и 12 сутки по общепринятым в биологии современным тестам. Результаты представлены в таблице 3.

При анализе иммунобиологических показателей (таблица 3) подопытных и контрольных телят установили, что в возрасте 1 суток различия практически отсутствовали. У животных опытной группы к 6-дневному возрасту происходило повышение основных показателей клеточного и гуморального иммунитета, которое продолжилось до 12-дневного возраста. Важное практическое значение имело увеличение количества иммуноглобулинов в сыворотке крови подопытных телят, что свидетельствовало о лучшей усвояемости новорожденными молозивных и более раннем начале синтеза собственных иммуноглобулинов.

Пример 3. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят (заболеваемость 50-70%, смертность - 20-40%). По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 1-3-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы: три группы - опытные, одна группа - контрольная. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям, которые определяли по общепринятым в биологии современным тестам (таблица 4).

Как видно из таблицы 4, показатели, характеризовавшие естественную резистентность, повышались у всех животных, что соответствовало возрастной динамике, однако количество общего белка, содержание IgG и IgM оставались выше на протяжении всего опыта у телят первой опытной группы по сравнению с аналогичными показателями у животных не только контрольной, но и других опытных групп. Проявилась тенденция к нормализации иммунобиологических показателей.

Пример 4 Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по респираторным болезням телят вирусно-бактериальной этиологии с заболеваемостью до 50% при летальности 15-19%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 подтвердили их выделением в сыворотках телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 87,5 и 85,7% случаев соответственно. Бактериальная микрофлора была представлена стрептококками, сальмонеллами и протеями. Иммунологический статус характеризовался снижением на 10-12% относительного содержания В-лимфоцитов, популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов с нарушением их соотношений, функциональной активности нейтрофилов, снижением уровня иммуноглобулинов G и М, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 10-15-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы: три группы - опытные, одна группа - контрольная. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 5).

Проведенные нами исследования показали, что экстракт смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки обладает иммуностимулирующей активностью, которая может быть использована для коррекции вторичных иммунодефицитов и стимуляции естественной резистентности при инфекционных заболеваниях, патогенетически связанных с недостаточностью иммунной системы. Эффективность заявленного биологически активного стимулятора обеспечивается наличием в его составе веществ, повышающих функциональную активность антиоксидантной и иммунной систем, в частности, макрофагальных клеток. Средство является нетоксичным, содержит биодоступные полезные биологически активные вещества, включающие, например, эфирное масло, флавоноиды, картиноиды, фитостерин, сапонины, обладает экологической чистотой.

Источники информации

1. А.Д.Алтунин и др. Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: Материалы 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000.

2. И.Ф.Горлов и др. Ветеринария, 1996, №7.

3. А.А.Ивановский. Ветеринарный врач, 2000, №2.

4. А.В.Коробко. Ветеринария, 2000, №5.

5. В.П.Николаенко. Ветеринария, 1990, №4.

6. Ш.Б.Садыков. Ветеринария, 1990, №4.

7. Л.А.Макарадзе. Ветеринария, 1999, №3.

8. RU 22501101 C1, 2005.

1. Биологически активный стимулятор для коррекции вторичных иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных, содержащий спиртовой экстракт растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют смесь равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки.

2. Способ коррекции вторичных иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных, включающий внутримышечную инъекцию зоолана в виде 0,3%-ного водного раствора, отличающийся тем, что дополнительно применяют спиртовой экстракт равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, цветов липы мелколистной и корней солодки в виде водного раствора 7-8%-ной концентрации в дозе 2,5-3,0 мл/кг массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 ч.