Применение гесперидина или одного из его производных для изготовления лекарственного средства, предназначенного для стимуляции костеобразования

Настоящее изобретение касается использования гесперидинового соединения или одного из его производных, выбранного из группы, состоящей из гесперетина, α-гликозил-гесперидина, метилгесперидина, конъюгата гесперетина и сульфата или глюкуронида, в качестве активного соединения, которое стимулирует костеобразование и ингибирует костную резорбцию, для получения композиции, предназначенной для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции у человека или животного. Показано снижение костной деминерализации и улучшение биомеханических свойств бедренной кости под действием гесперидина. 18 з.п. ф-лы, 4 табл., 14 ил.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области поддержания или восстановления равновесия костного метаболизма у человека или животного, в частности оно применяется для профилактики или лечения расстройств, связанных с нарушением костного метаболизма, путем добавления в пищу или терапевтического приема композиции, стимулирующей костеобразование и/или замедляющей костную резорбцию.

Уровень техники

Кость не является статичной тканью. Происходит постоянное ремоделирование кости, заключающееся в деструкции и синтезе de novo костной ткани в ходе сложного процесса, в котором участвуют два основных типа клеток, соответственно остеобласты, продуцирующие новую костную ткань, и остеокласты, рассасывающие кость.

Деятельность этих клеток регулируется большим количеством цитокинов и факторов роста, большинство из которых были идентифицированы и клонированы, что описано в общем обзоре Мунди (Mundy, 1996, G.R., Clin. Orthop., vol.324: 24-28; Mundy, G.R., 1993, J. Bone Miner Res, vol.8: S505-S510).

Остеобласты, являющиеся клетками, отвечающими за костеобразование, дифференцируются из зародышевых клеток (клеток предшественников), они выделяют и секретируют многочисленные энзимы и многочисленные протеины структуры костного матрикса, включая коллаген типа I, остеокальцин, остеопонтин и щелочную фосфатазу (Stein G. Et al., 1990, Curr. Opin Cell Biol., vol.2: 1018-1027; Harris S. Et al., 1994, J. Bone Miner Res, Vol.9: 855-863).

Остеобласты также синтезируют многочисленные пептиды, - регуляторы роста, - включая пептиды BMPs (сокращение от "Bone Morphogenetic Proteins"), накапливающиеся в костном матриксе и, по всей видимости, отвечающие за нормальное формирование кости.

Как и щелочная фосфатаза, остеокальцин и остеопонтин, пептиды BMPs выделяются остеобластами в культуре в момент пролиферации и дифференциации этих клеток.

Остеокласты являются полинуклеарными клетками, отвечающими за рассасывание кости в ходе процесса, принятого называть костной резорбцией.

У здорового индивида, взрослого человека или животного, совместное действие остеобластов и остеокластов обеспечивает поддержание во времени костной массы и одновременное ремоделирование костной ткани при помощи резорбции и синтеза de novo кости.

У здорового взрослого субъекта скорость образования остеокластов и остеобластов должна быть такой, чтобы сохранялось равновесие между костеобразованием и костной резорбцией. Однако у индивидов, страдающих остеопорозом, происходит нарушение равновесия в процессе костного ремоделирования, что приводит к костной потере, происходящей с более высокой скоростью, чем скорость костеобразования. Хотя это нарушение равновесия в определенной степени присутствует у большинства индивидов по мере их старения, оно является гораздо более выраженным и происходит в более молодом возрасте у больных остеопорозом.

Так, у человека и у других млекопитающих многочисленные расстройства связаны с анормальным метаболизмом при костной резорбции или костеобразовании, приводящим к нарушению метаболизма костного ремоделирования.

В частности, наблюдают большой разброс пика костной массы в зависимости от индивидов, причем этот разброс вызван большими изменениями в процессе роста кости с самого раннего возраста. Так, максимальная костная масса, достигнутая в начале взросления, называемая также пиком костной массы, значительно отличается от одного индивида к другому. С возрастом индивиды, отличающиеся небольшим пиковым значением костной массы и подверженные костной потере, связанной со старением, оказываются в невыгодном положении по сравнению с другими людьми. Поэтому, независимо от индивида, предписывается профилактическое лечение костной потери, чтобы максимально снизить непатологические нарушения равновесия костного ремоделирования, возникающие при старении, в частности преждевременные риски переломов костей.

Среди патологических расстройств, связанных с нарушением костного метаболизма, можно, в частности, указать расстройства или патологии, такие как остеопороз, болезнь Педжета, костная потеря или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические поражения кости, гиперкальциемия, вызванная раком, различные миеломы и периодонтальные заболевания.

Некоторые расстройства или патологии костного метаболизма могут быть вызваны длительной неподвижностью, например, при длительной госпитализации или в результате длительного пребывания в состоянии невесомости.

Среди расстройств, связанных с анормальной костной резорбцией, наиболее распространенным является остеопороз, чаще всего наблюдаемый у женщин после начала менопаузы. Остеопороз является системным заболеванием костей скелета, характеризующимся сокращением костной массы и разрушением микроархитектуры костной ткани, сопровождающимися повышением хрупкости кости и ее предрасположением к переломам.

Существуют другие факторы, которые могут привести к костной потере, приводящей к остеопорозу, такие как табакокурение, злоупотреблением алкоголем, сидячий образ жизни, недостаток кальция, неправильное питание или недостаток витамина D.

Поскольку остеопороз, как и другие расстройства, связанные с костной потерей, является хроническим заболеванием, то его профилактика и лечение должны строиться на долгосрочной основе.

Общепризнано, что особое внимание должно уделяться ранней профилактике, поскольку для костной массы критическими являются две фазы:

- период роста, обеспечивающий приобретение максимальной костной массы (пик костной массы);

- старение, обуславливающее скорость потери костной массы.

По этой же причине профилактика остеопороза не противопоказана и пожилым людям.

Кроме того, у человека и у животного возникают многочисленные состояния, отличающиеся потребностью повышения костеобразования. Например, в случае перелома кости необходимо стимулировать рост кости, чтобы ускорить ее полное восстановление. Эта потребность возникает также при периодонтальных заболеваниях, метастатических заболеваниях кости, остеолитических заболеваниях и при состояниях, в которых требуется восстановление соединительной ткани, например для зарубцовывания или регенерации при дефектах или травмах хрящей. Стимуляция роста также необходима в случае первичного или вторичного гиперпаратиреодизма, а также при остеопорозе, связанном с диабетом, и при остеопорозе, связанном с глюкокортикоидами.

На сегодняшний день существует много активных соединений для стимуляции костеобразования или замедления костной резорбции, среди которых можно указать семейство полифосфонатных соединений (ЕР 210728), оксазолидиноны тиоамида (патентная заявка США, опубликованная под №2002/0010341), амино-бис-фосфонатные соединения (патентная заявка США, опубликованная под №2001/0046977) или изофлавоновые соединения (патентная заявка США, опубликованная под №2002/0035074). Предложено также использовать экстракт растения рода Lycopersicon (патентная заявка США, опубликованная под №2002/0009510).

Хотя в настоящее время существует большое разнообразие активных соединений для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции, постоянно требуются новые активные соединения, в частности, в силу ограниченности современных методик лечения.

Кроме того, учитывая хронический характер некоторых заболеваний, вызванных нарушением костного метаболизма, существует потребность в новых активных соединениях, которые могут применяться в течение длительного периода для человека или животного в виде пищевых добавок, например в виде питательной композиции.

Раскрытие изобретения

Неожиданно для себя заявитель обнаружил, что гесперидин, являющийся соединением из семейства флаваноидов, обладает способностью воздействия на костный метаболизм, стимулируя костеобразование и замедляя костную резорбцию.

Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предлагается питательная композиция и фармацевтическая композиция для медицинских или ветеринарных целей, содержащие в качестве активного соединения гесперидиновое соединение или одно из его производных.

Настоящее изобретение относится также к применению гесперидинового соединения или одного из его производных для изготовления композиции, предназначенной для стимуляции костеобразования и/или для замедления костной резорбции у человека или животного, в частности у собаки, кошки или лошади.

Согласно первому аспекту упомянутое применение характеризуется тем, что упомянутая композиция является питательной композицией, предназначенной для орального приема.

Согласно второму аспекту упомянутое применение характеризуется тем, что упомянутая композиция является фармацевтической композицией, предназначенной для орального приема, парентерального введения или внутривенного введения.

Краткое описание фигур

На фиг.1 показано поддержание эквивалентного состава тела (% жиров по отношению к весу тела) у различных групп животных, соответственно у нормальных животных (TSH), стерилизованных животных (TOVX), нормальных животных, получающих гесперидин (HpSH), и стерилизованных животных, получающих гесперидин (HpOVX). На оси ординат показано процентное содержание жиров.

На фиг.2 показано увеличение метафизарной феморальной плотности у нормальных или стерилизованных крыс, получающих курс гесперидина, по сравнению с крысами, получающими стандартное питание. На оси ординат показана костная плотность в г/см³.

Фиг.3 иллюстрирует профилактический курс лечения при помощи гесперидина, предназначенный для предупреждения увеличения костной резорбции, вызванной стерилизацией, оцениваемого измерением выделения в мочу дезоксипиридинолина. На оси ординат показано измерение молярного соотношения дезоксипиридинолин/креатинин в моче.

Фиг.4 иллюстрирует стимуляцию остеобластичной активности (определяемую измерением уровня остеокальцина в плазме) у подвергаемых курсу лечения крыс-самок по отношению к контрольным животным. На оси ординат показан уровень остеокальцина в плазме, выраженный в мг/л.

Фиг.5 показывает кинетику остеобластичной дифференциации (повышение активности щелочной фосфатазы), стимулируемой гесперидином 10 и 50 мкМ на клетках hPOB-tert на 31-м пассаже. На оси ординат активность щелочной фосфатазы выражена в мкМ паранитрофенола/час/мг белка. На оси абсцисс время выражено в днях.

Фиг.6 иллюстрирует стимуляцию накопления кальция в клетках hPOB-tert (на 31-м пассаже) гесперидином (50 мкМ) после 21 дня инкубации. На оси ординат показано измерение соотношения кальций Са⁼⁼/белок, выраженное в мкСа⁺⁺/мг белка.

Фиг.7 иллюстрирует контроль за потреблением пищи в течение времени у стерилизованных крыс-самок, не получающих лечения (OVX Témoin) или получающих гесперидин (OVX Hesp), и у контрольных нормальных крыс-самок (SH Témoin) или нормальных крыс-самок, получающих гесперидин (SH Hesp). На оси абсцисс: время через каждые два дня; на оси ординат: граммы потребляемой пищи.

Фиг.8 показывает график изменения веса крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: число дней. На оси ординат: средний вес животных +/- стандартное отклонение.

Фиг.9 показывает состав тела в виде процентного содержания жиров у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: состав тела, выраженный в процентах жиров.

Фиг.10 показывает вес матки у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: средний вес матки в граммах.

Фиг.11 показывает общую феморальную плотность (T-BMD) у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: феморальная минеральная плотность в г/см².

Фиг.12 показывает минеральную плотность феморального проксимального метафиза (M-BMDp) у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: минеральная плотность феморального проксимального метафиза в г/см².

Фиг.13 показывает минеральную плотность феморального проксимального диафиза (M-BMDp) у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: минеральная плотность феморального проксимального диафиза в г/см².

Фиг.14 показывает нагрузку феморального разрыва у крыс-самок в группах (SH), (SH Hesp), (OVX) и (OVX Hesp). На оси абсцисс: группы животных; на оси ординат: нагрузка феморального разрыва в ньютонах (Н).

Осуществление изобретения

Настоящим изобретением предлагаются питательная композиция и фармацевтическая композиция для медицинских и ветеринарных целей, предназначенные для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции и содержащие в качестве активного соединения гесперидин или одно из его производных.

Гесперидин является природным гликозидным соединением, содержащимся в основном в цитрусовых, то есть фруктах рода Citrus. Главным образом гесперидин присутствует в кожуре плодов, но он также содержится в больших количествах в мякоти и, следовательно, в соке цитрусовых, в том числе в апельсинах и лимонах.

Гесперидин является гликозилсодержащим соединением, включающим в себя флаваноновое ядро гесперетина (3',5',5-тригидрокси-4'-метоксифлаванон), с которым ковалентно связана гликозидная часть рутинозы (L-рамнозил-(α1→6)-глюкоза), закрепленная на гидроксильной группе, присутствующей на углероде в положении 7 гесперидина.

Гесперидиновое соединение является соединением семейства флаваноидов, часто применяемым в сочетании с витамином С для повышения потенциала биологической активности витамина С, в частности, путем понижения денатурации окислением витамина С. В этом варианте применения гесперидин предлагается в качестве вспомогательного средства при лечении патологий сердечно-сосудистой системы, в частности гипертензии и кровоизлияний.

Гесперидин был также описан как хондрозащитное средство с учетом его способности задерживать разрушение матрикса производных хондроцитов хряща (ЕР 633022).

В предшествующем уровне техники гесперидин был также предложен в качестве средства для предупреждения пигментации кожи (германская патентная заявка № DE 19742025), в качестве средства ингибирования HMG-CoA редуктазы (патент US №5763414) или ацил СоА-холестерол-O-ацил трансферазы (заявка РСТ № WO 99/21.549) или агрегации тромбоцитов (корейская патентная заявка № KR 276979).

Неожиданным образом настоящим изобретением показано, что гесперидин стимулирует костеобразование и замедляет костную резорбцию.

Как показано на примерах, гесперидин способствует повышению плотности метафизарной костной ткани (трабекулярная кость) и плотности диафизарной кости (кортикальная кость), обеспечивая, таким образом, костную минерализацию.

Гесперидин также стимулирует костную аккрецию, о чем свидетельствует значительное повышение плазматического уровня остеокальцина, наблюдаемое у животных, получавших это соединение в виде пищевой добавки.

Было также показано, что гесперидин вызывает остановку размножения клеток предшественников остеобластов, а также их дифференциацию в виде зрелых остеобластов, что проявляется в повышении активности щелочной фосфатазы. Точно также гесперидин способствует повышению накопления кальция в остеобластах.

Кроме того, гесперидин замедляет костную резорбцию у стерилизованных крыс, которые являются контрольной животной экспериментальной моделью, имитирующей остеопороз человека.

В частности, согласно изобретению показано, что гесперидин способствует поддержанию костной массы во время старения индивидов, рост которых прекратился, в частности у особей с гормональной недостаточностью, что наблюдается у стерилизованных крыс-самок в возрасте 6 месяцев, которые являются моделью, имитирующей физиологическое состояние менопаузы.

Эти два совместных вида активности гесперидина, соответственно костеобразование и замедление костной резорбции, обуславливают его полезность в качестве активного соединения для человека или животного, предназначенного для поддержания или восстановления равновесия костного метаболизма, то есть:

- либо для поддержания на постоянном уровне в течение времени с возрастом активности клеток остеобластов и остеокластов и, следовательно, предупреждения нарушений костного метаболизма;

- либо для лечения нарушений костного метаболизма, например, при таких заболеваниях, как остеопороз, или для стимуляции костной регенерации, например, в случае трещины или перелома кости.

В этой связи объектом настоящего изобретения является использование гесперидинового соединения или одного из его производных для получения композиции, способствующей поддержанию или восстановлению равновесия костного метаболизма у человека или животного путем стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции.

Под гесперидином понимают соединение (S)-7-[[6-0-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси]-2,3 -дигидро-5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-4Н-1бензопиран-4-он.

Под "производным" гесперидина в соответствии с настоящим изобретением следует понимать следующие соединения:

- гесперетиновое соединение, включающее в себя не содержащее гликозила флаваноновое ядро гесперидина, имеющее следующую формулу:

(S)-2,3дигидро-5,7-дигидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-4Н-1-бензопиран-4-он; 3',5,7-тригидрокси-4'-метоксифлаванон;

- α-глюкозил-гесперидин, который содержит цепочку из 1-20 остатков глюкозы, связанных между собой связью 1,4, при этом сама цепочка остатков глюкозы связана связью типа 1,4 в положении 4 остатка глюкозы гесперидина; эти производные гесперидина и способ их получения описаны, в частности, в патентной заявке № ЕР 0825196 и в патенте US №6048712;

- соединения метилгесперидина, в частности соединение 3¹-метил-7-(рамнозил-2-метилглюкозил)гесперидин и соединение 3¹-метилгесперидин; эти соединения и способ их получения описаны в патенте US №858784;

- конъюгаты гесперетина и сульфата или глюкоронида, которые вместе с гесперетином были обнаружены в виде продуктов метаболизма гесперидина в кровообращении.

Под "стимуляцией костеобразования" в соответствии с настоящим изобретением следует понимать свойство гесперидина или одного из его производных стимулировать активность остеобластов и способствовать, таким образом, синтезу протеиновой соединительнотканной опорной структуры кости и осаждению минералов, особенно кальция, на эту протеиновую опорную ткань, то есть стимуляции минерализации кости, называемой также костной аккрецией.

Для того чтобы проверить, действительно ли добавление гесперидина человеку или животному, в частности млекопитающему, стимулирует костеобразование, специалист может прибегнуть к известным денситометрическим измерениям и убедиться, что добавление гесперидина или одного из его производных в заданной дозе приводит к повышению костной плотности.

Специалист может также прибегнуть к любым другим тестам, описанным в примерах, таким как измерение прочности на разрыв кости или измерение активности щелочной фосфатазы и измерение накопления кальция в клетках остеобластов.

Под "замедлением костной резорбции" в соответствии с настоящим изобретением следует понимать замедление деструкции костной ткани клетками остеокластов. Для того чтобы проверить, действительно ли добавление гесперидина человеку или животному, в частности млекопитающему, приводит к замедлению костной резорбции, специалист может измерить уровень выделения дезоксипиридинолина в моче, как описано в примерах, при этом снижение содержания дезоксипиринолидина отражает замедление костной резорбции.

Введение гесперидина или одного из его производных в животный организм одновременно приводит к стимуляции костеобразования и к замедлению костной резорбции, при этом результатом приведения в действие этих двух механизмов является общий рост костной минерализации и, следовательно, повышение плотности кости.

Чтобы определить уменьшение костной массы у субъекта и, следовательно, необходимости в приеме гесперидина или одного из его производных, специалист может обратиться к докладу Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) за 1994 год под заголовком "Assessment of fracture risk and its application to screening for post-menopausal osteoporosis" WHO Technical Series-843).

Питательная композиция или лекарственная композиция, содержащая гесперидин или одно из его производных в качестве активного соединения, прежде всего предназначена для профилактики потери костной массы по причине нарушения равновесия в ремоделировании костной ткани у человека или животного, в частности у млекопитающего животного, в частности у домашнего млекопитающего, такого как собака или кошка, или лошадь, в частности чистокровная лошадь.

Определенная выше композиция предназначена также для поддержки роста костей у молодых индивидов, чтобы обеспечить у них в дальнейшем высокую костную плотность и, если возможно, сопутствующий ей повышенный пик костной массы. В частности, композиция в соответствии с настоящим изобретением может применяться во время фазы роста человека, а также других млекопитающих, в частности чистопородных собак или собак с родословной, или скаковых лошадей.

Композиция, содержащая гесперидин или одно из его производных, предназначена также для индивидов, у которых проявляются симптомы костного дефицита или предрасположенных к костному дефициту, то есть к нарушению соотношения между костеобразованием и костной резорбцией, которое в дальнейшем может привести к уменьшению костной массы. Композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена также для индивидов с симптомами костного дефицита в результате перелома, хирургической операции или заболевания зубов.

В частности, питательная и фармацевтическая композиции в соответствии с настоящим изобретением, предназначенные для медицинских или ветеринарных целей, могут применяться для лечения таких патологий, как остеопороз, болезнь Педжета, костная потеря или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические заболевания кости, гиперкальциемия, появляющаяся при раковых заболеваниях, различные миеломы, периодонтальные заболевания, а также остеоартрит.

Композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнена в виде питательной композиции или в виде фармацевтической композиции, что будет описано ниже.

В соответствии с настоящим изобретением было также показано, что гесперидин способствует прекращению размножения и вызывает дифференциацию клеток остеобластов, при этом не требуется присутствие вспомогательных агентов, таких как факторы дифференциации остеобластов, такие как витамин D3 и дексаметазон, в отличие от многочисленных известных соединений, применяемых для лечения остеопороза. Этот экспериментальный вывод подчеркивает преимущество гесперидина и его производных для стимуляции костеобразования и замедления костной резорбции, так как его соединения сами являются биологически активными и не требуют введения в организм комбинации гесперидина или одного из его производных с другими соединением, таким как витамин.

Кроме того, гесперидин способствует не только повышению плотности трабекулярной кости, но также и плотности кортикальной кости, что доказывает высокий уровень биологической активности этой молекулы. Действительно, трабекулярная кость, образующая головку кости и насыщенная кровеносными сосудами, является основным местом обмена кальцием между костью и системой кровообращения, тогда как кортикальная кость, образующая прямое тело кости и в меньшей степени содержащая кровеносные сосуды, менее подвержена изменениям в процессе минерализации.

Питательные композиции, содержащие гесперидин или одно из его производных

Как уже упоминалось выше, многочисленные расстройства, связанные с нарушением костного метаболизма, такие как остеопороз, постепенно прогрессируют в течение длительного периода времени и требуют длительного лечения. Поэтому их профилактику или лечение необходимо осуществлять при помощи регулярного приема гесперидина или одного из его производных, предпочтительно в виде питательной композиции.

Точно также, регулярное введение гесперидина в виде пищевых добавок молодым индивидам в ходе роста, будь то человек или животное, позволяет достичь высокой костной плотности и повышенного пика костной массы путем стимуляции костеобразования, когда эти индивиды достигают зрелого возраста.

Регулярный прием гесперидина с пищей способствует также профилактике возрастной костной потери.

Объектом настоящего изобретения является также питательная композиция, предназначенная для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции, отличающаяся тем, что в качестве активного соединения пищи содержит гесперидиновое соединение или одно из его производных.

В соответствии с настоящим изобретением под "питательной композицией" понимают композицию, содержащую гесперидин или одно из его производных и являющуюся пищевой композицией или пищевой добавкой, не обладающей характеристиками лекарственного средства.

Различные варианты использования гесперидинового соединения или одного из его производных для получения питательной композиции будут описаны ниже вместе с описанием технических характеристик упомянутой питательной композиции.

Питательную композицию в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно выполняют с возможностью орального введения.

Согласно первому аспекту питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением является диетическим пищевым продуктом, применяемым для поддержания здоровья потребляющего его человека или животного. Такую питательную композицию называют также "функциональным пищевым продуктом", который предназначен для потребления либо в качестве неотъемлемой части пищевой диеты, либо в качестве пищевой добавки, при этом содержание гесперидина или одного из его производных играет в нем физиологическую роль, выходящую за рамки удовлетворения базовых нужд питания.

Согласно первому аспекту упомянутая питательная композиция предназначена для стимуляции костеобразования молодых индивидов в фазе роста.

Согласно второму аспекту упомянутая питательная композиция предназначена для профилактики костной убыли, проявляющейся при старении.

Согласно третьему аспекту упомянутая питательная композиция предназначена для профилактики или лечения расстройств, связанных с нарушением соотношения между костеобразованием и костной резорбцией.

Согласно четвертому аспекту упомянутая питательная композиция предназначена для лечения костного дефицита, проявляющегося в результате перелома.

Согласно еще одному аспекту упомянутая питательная композиция предназначена для профилактики или лечения патологий, таких как остеопороз, болезнь Педжета, костная убыль или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические заболевания кости, гиперкальциемия, сопровождающая раковые заболевания, многочисленные миеломы, периодонтальные заболевания или остеоартрит.

Питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением характеризуется тем, что содержит гесперидиновое соединение или одно из его производных в качестве активного соединения, может быть выполнена в самых разнообразных формах пищевых композиций или напитков, включая соки, предпочтительно фруктовые соки, йогурты, мороженое, сыры, термически приготовленные продукты, такие как хлеб, печенье и пирожные, молочные продукты, десерты, конфеты, палочки или хлопья из злаковых культур, приправы к пище (в частности, специи и соусы), фруктовые салаты, фруктовые компоты и т.д.

Питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением характеризуется тем, что содержит гесперидиновое соединение или одно из его производных в качестве активного соединения, может быть выполнена в самых разнообразных формах продуктов питания для животных, в частности собак или кошек, во влажном виде, полувлажном виде или в сухом виде, в частности в виде крокетов.

Как уже было указано выше, гесперидин является соединением, в природе содержащимся во фруктах рода Citrus, в частности в апельсинах и лимонах, при этом упомянутое соединение в основном содержится в кожуре фруктов, однако в значительном количестве может также содержаться в мякоти, что описано, в частности, Манселлом и соавторами (MANSELL R L et al., 1983, J. Agric. Food Chem., vol.31: 156-162), Рузеффом и соавторами (ROUSEFF R L et al., 1987, J. Agric. Food Chem., vol.35: 1027-1030), а также ДЖИЛЬ-ИЗКЬЕРДО и соавторами (GIL-IZQUIERDO А et al., 2001, J. Agric. Food Chem., vol.49: 1035-1041).

Согласно первому аспекту питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть получена в виде сока цитрусовых, в частности апельсинового сока или лимонного сока, в случае необходимости, в виде концентрированного сока цитрусовых.

Согласно второму аспекту питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнена в виде пищевой композиции, обогащенной цитрусовыми или экстрактом цитрусовых, в частности апельсина или лимона.

Согласно третьему аспекту питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнена в виде любого продукта, в частности любого напитка, ароматизированного цедрой цитрусовых, соком цитрусовых, мякотью цитрусовых или любым другим экстрактом цитрусовых, в том числе апельсина и лимона.

Таким образом, питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением, выполненная в жидком виде или в твердом виде, может быть продуктом экстракции, полученным из кожуры или мякоти цитрусовых, или может содержать продукт экстракции, полученный из кожуры или мякоти цитрусовых.

В частности, питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть выполнена в виде напитка, например минеральной воды, в которую добавляют экстракт кожуры или мякоти цитрусовых, в том числе апельсина или лимона.

Согласно еще одному аспекту продукт экстракции может быть первоначально обогащен гесперидином, если применяют способ экстракции, специально предназначенный для решения такой задачи, например способ, описанный в японской патентной заявке №JP 8188593, в котором продукт выжимки фруктов рода Citrus доводят до значения рН 11,5-12,5, затем жидкость, полученную после выжимки и корректировки рН, центрифугируют перед второй корректировкой рН до 5-5,5, после чего осуществляют нагрев и второй этап центрифугирования перед извлечением продукта, обогащенного гесперидином. Другой способ экстракции, который может применяться для получения экстракта, обогащенного гесперидином, описан в патентной заявке Великобритании № GB 486898.

Для получения продукта экстракции, обогащенного гесперидином, из цитрусовых, в частности из апельсинов или лимонов, специалист может также обратиться к способам, соответственно описанным в патенте US №2400693 и US 2442110.

Согласно еще одному аспекту питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит гесперидин или одно из его производных, полученные при помощи химического синтеза.

Предпочтительно питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит количество гесперидинового соединения или одного из его производных, предусмотренное для ежедневного орального приема и составляющее от 0,01 мг до 500 мг.

Для потребления человеком питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит количество активного соединения, соответствующее ежедневной потребности в гесперидине или в одном из его производных, содержащемся в упомянутой композиции, составляющее от 0,01 мг до 500 мг, предпочтительно от 0,1 мг до 500 мг и еще предпочтительнее от 1 мг до 500 мг.

Для введения животному, в частности млекопитающему животному, в том числе собаке, кошке или лошади, питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением соответствует ежедневной дозе активного соединения, содержащегося в упомянутой композиции, составляющей от 1 мг до 500 мг, предпочтительно от 10 мг до 500 мг, гесперидина или одного из его производных.

В качестве примера можно указать, что минеральная вода с добавкой гесперидина или одного из его производных должна содержать от 0,01 до 500 мг активных соединений на литр, если считать, что среднее ежедневное потребление человеком минеральной воды составляет примерно 1 литр.

Согласно другому аспекту вышеупомянутая питательная композиция может содержать другие нутриционные соединения в сочетании с гесперидином или одним из его производных.

Так, питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может также содержать источник кальция, например, в виде физиологически приемлемого органического или неорганического соединения, такого как неорганические соли кальция (хлорид кальция, фосфат кальция, сульфат кальция, оксид кальция, гидроксид кальция или карбонат кальция) или органические компоненты, содержащие кальций, такие как порошок обезжиренного молока, казеинат кальция или органические соли кальция (цитрат кальция, малеат кальция или их смеси).

Количество кальция, содержащееся в питательной композиции в соответствии с настоящим изобретением, предусмотренное для приема ежедневной дозы, содержащейся в упомянутой композиции, составляет от 100 мг до 1000 мг, предпочтительно от 200 мг до 700 мг и еще предпочтительнее от 300 мг до 600 мг, кальция.

Питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может также содержать витамины, такие как витамин А, витамин D, витамин Е, витамин K, витамин С, фолиевая кислота, тиамин, рибофлавин, витамин B₆, витамин В₁₂, ниацин, биотин или пантотеновая кислота.

Питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может также содержать минеральные элементы и микроэлементы, такие как натрий, калий, фосфор, магний, медь, цинк, железо, селен, хром и молибден.

Она может также содержать растворимые волокна, такие как агар-агар, альгинат, цератония, карраген, гуммиарабик, камедь гуара, смола карайя, пектин или ксантеновая смола, причем эти растворимые волокна содержатся в гидролизованном или не гидролизованном виде.

Она может также содержать соединения-источники энергии, в частности один или несколько источников углеводов, выбранных из группы, в которую входят мальтодекстрин, крахмал, лактоза, глюкоза, сахароза, фруктоза, ксилит и сорбит.

Кроме того, питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может также содержать природные или искусственные ароматические вещества, например ароматические вещества фруктов, таких как банан, апельсин, персик, ананас или малина, или другие растительные ароматические вещества, такие как ваниль, какао, кофе и т.д.

Как уже было указано выше, композиция, предназначенная для стимуляции костеобразования или для замедления костной резорбции, в соответствии с настоящим изобретением может также быть выполнена в виде фармацевтической композиции, которая будет описана ниже.

Медицинские или ветеринарные фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Объектом настоящего изобретения является также фармацевтическая композиция для использования в медицинских или ветеринарных целях, предназначенная для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции, характеризующаяся тем, что в качестве активного начала содержит гесперидиновое соединение или одно из его производных.

В частности, настоящее изобретение касается применения гесперидина или одного из его производных для получения фармацевтической композиции для медицинского или ветеринарного применения, предназначенной для профилактики или лечения патологии, связанной с нарушением костного метаболизма, то есть фармацевтической композиции, выполненной с возможностью стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции.

Варианты использования гесперидина для получения фармацевтической композиции будут описаны в соответствии с техническими характеристиками упомянутой фармацевтической композиции.

В качестве активного начала фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит гесперидин или одно из его производных в количестве, необходимом для стимуляции костеобразования или замедления костной резорбции у индивидов, нуждающихся в приеме такой композиции.

Согласно первому аспекту упомянутая фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена для стимуляции костеобразования у молодых индивидов, людей или животных, в фазе роста с целью повышения костной плотности, достигнутой в начале зрелого возраста, и увеличения максимальной костной массы (пик костной массы) в начале зрелого возраста.

Согласно второму аспекту упомянутая медицинская или ветеринарная фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена для профилактики костной потери, проявляющейся с возрастом при старении.

Согласно третьему аспекту упомянутая медицинская или ветеринарная фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена для профилактики или лечения расстройств или патологий, связанных с нарушением соотношения между костеобразованием и костной резорбцией.

Согласно четвертому аспекту упомянутая медицинская или ветеринарная фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена для лечения костного дефицита, проявляющегося в результате перелома.

Согласно пятому аспекту упомянутая медицинская или ветеринарная фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предназначена для лечения патологий, таких как остеопороз, болезнь Педжета, костная потеря или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические заболевания кости, гиперкальциемия, сопровождающая раковые заболевания, многочисленные миеломы, периодонтальные заболевания или остеоартрит.

Речь может идти о фармацевтической композиции, медицинской или ветеринарной, в частности, для собаки или кошки, или лошади, в частности чистокровной лошади.

Фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением выполняют в форме, предназначенной для орального, парентерального или внутривенного введения.

В форме, предназначенной для медицинских целей, фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно содержит количество гесперидина или одного из его производных, соответствующее ежедневной дозе активного соединения, содержащегося в упомянутой композиции, составляющее от 0,01 мг до 500 мг.

В форме, предназначенной для введения животному, в частности домашнему млекопитающему, такому как собака или кошка, фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит количество гесперидина или одного из его производных, соответствующее ежедневной дозе активного соединения, содержащегося в упомянутой композиции, составляющее от 1 мг до 500 мг.

Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит гесперидин или одно из его производных в сочетании, по меньшей мере, с одним эксципиентом, выбираемым из группы, в которую входят фармацевтически приемлемые эксципиенты.

Технологии получения фармацевтических композиций в соответствии с настоящим изобретением доступны для специалистов, например, в труде "Remmingston's Pharmaceutical Sciences", Mid. Publishing Co, Easton, PA, USA, Mid. Publishing Co, Easton, PA, USA.

Адъюванты, наполнители и физиологически приемлемые эксципиенты описаны также в труде под названием "Handbook of Pharmaceutical Excipients", Seconde edition, American Pharmaceutical Association, 1994.

По вопросам рецептуры фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением специалист может обратиться к последнему изданию Европейской фармакопеи или Фармакопеи Соединенных Штатов Америки (USP).

В частности, специалист может обратиться к четвертому изданию "2002" Европейской фармакопеи или к изданию USP 25-NF 20 Американской фармакопеи (U.S. Pharmacopeia).

Предпочтительно определенная выше фармацевтическая композиция предназначена для орального, парентерального или внутривенного введения.

Если фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит, по меньшей мере, один фармацевтически или физиологически приемлемый эксципиент, то речь идет, в частности, об эксципиенте, предусмотренном для орального введения композиции, или об эксципиенте, предусмотренном для парентерального введения композиции.

Настоящее изобретение относится также к способу профилактики или лечения расстройства, связанного с нарушением костного метаболизма, в частности расстройства, сопровождающегося потерей костной массы, при этом упомянутый способ включает в себя этап, в ходе которого пациентам назначают терапевтически эффективное количество гесперидина или одного из его производных или фармацевтическую композицию, содержащую гесперидин или одно из его производных.

Фармацевтическая композиция, содержащая гесперидин или одно из его производных в соответствии с настоящим изобретением, может быть выполнена как в твердой форме, так и в жидкой форме.

Для орального приема предпочтительнее твердая фармацевтическая композиция, выполненная в виде таблеток, капсул или желатиновых капсул.

В жидкой форме фармацевтическую композицию предпочтительно выполняют в виде водной суспензии или неводной суспензии или в виде эмульсии "вода в масле" или "масло в воде".

В качестве наполнителей, адъювантов или эксципиентов твердые фармацевтические формы могут содержать, по меньшей мере, один разбавитель, одно ароматическое вещество, один диспергатор, одно средство для смазки, один суспендирующий агент, одно связующее, один разрушающий реагент и одно инкапсулирующее средство.

Такими соединениями являются, например, карбонат магния, стеарат магния, тальк, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатин, целлюлозосодержащие вещества, масло, какао и т.д.

Композиции в жидкой форме могут также содержать воду, в случае необходимости, в смеси с пропиленгликолем или полиэтиленгликолем, а также, в случае необходимости, красители, ароматизаторы, стабилизирующие добавки и загустители.

Для получения фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением гесперидин или одно из его производных может быть получен в соответствии со сведениями из различных патентных документов, указанных ранее в описании.

Предпочтительно в качестве источника гесперидина можно использовать продукт фармацевтического ряда, содержащий гесперидин в чистом или практически чистом виде, такой как гесперидин, выпускаемый компанией NINGBO LIWAH PHARMACEUITICAL Со Ltd., входящей в группу SANJU ENTERPRISE GROUP, и содержащий 95% по весу гесперидина в этилацетате.

Настоящее изобретение подкреплено нижеследующими примерами, приведенными в неограничительном порядке.

Пример 1: Действие гесперидина на костный метаболизм у стерилизованной крысы-самки.

Целью данного эксперимента являлась проверка действия гесперидина на костный метаболизм у стерилизованной (овариэктомированной) крысы-самки (OVX) в сравнении с контрольными псевдооперированными крысами-самками (SH). Гесперидин является флаваноновым соединением, гликозилсодержащая форма которого содержится в цитрусовых, в частности в апельсинах. Этот флавоноид отсутствует в других растительных продуктах. Экспериментальные режимы питания состояли именно во введении добавок в виде гесперидина.

А. Материалы и методы

Для изучения возможного воздействия этой молекулы на костную ткань отобрали 40 крыс Wistar в возрасте 3 месяцев (266±2 г). Эти животные прошли адаптацию к полусинтетическому базовому режиму питания в течение 7 дней, предшествовавших началу экспериментального периода. В день J0 20 крыс были псевдооперированы, и 20 крыс стерилизованы. Их распределили на группы по 10 крыс и содержали на разных режимах питания в течение 3 месяцев, после чего умертвили. Во время последней недели перед умертвлением, с J85 по J90, крыс обследовали и произвели анализ мочи (за период времени в 24 часа). Был также измерен состав тела крыс. При умертвлении для проведения различных анализов были взяты пробы плазмы и бедренной кости [Бедренная кость: прочность на разрыв, денситометрия; Плазма: остеокальцинемия (показатель остеобластической активности), уровень гесперетина; Моча: дезоксипиридинолин (показатель костной резорбции)]. В течение всего времени проведения эксперимента один раз в неделю проводилось взвешивание крыс. Ежедневная норма потребления пищевого продукта каждым животным составляла 20 г.

Распределение по группам

10 Т SH и 10 T OVX: псевдооперированные или стерилизованные крысы, получавшие стандартный контрольный режим питания в течение 3 месяцев.

10 Нр SH и 10 Hp OVX: псевдооперированные или стерилизованные крысы, получавшие стандартный контрольный режим питания с добавкой гесперидина (0.5%) в течение 3 месяцев.

В. Результат

B.1 Изменение веса и состава тела

Результаты показаны на фиг.1. Значения выражены в средних величинах ± среднестатистическая погрешность (ССП). У крыс отмечалось обычное изменение веса. Несмотря на то, что в конце экспериментального периода вес тела (г) животных OVX значительно превышал вес тела псевдооперированных животных [Т SH: 326,6±9,4; Т OVX: 363,3±7; Hp SH: 335,4±15,4; Hp OVX: 406±12,7], никаких значительных различий в составе тела (% жиров по отношению к общему весу тела) между группами не наблюдалось.

В.2 Вес матки

Измерение веса матки проводилось для оценки результатов кастрирования. Стерилизация действительно привела к атрофии этого органа (мг) по сравнению с SH (р<0,01). Поскольку от потребления гесперидина этот параметр не изменился, то, по всей видимости, эта молекула не вызывает эффекта маточной атрофии.

Таблица 1
T SH	T OVX	Hp SH	Hp OVX
1031.9±82.3	139.6±10.2**	659.4±8.96	238.6±2.23**

В.3 Феморальная биомеханика

Диаметр и длина (мм) бедренных костей в результате лечения не претерпели значительных изменений.

Таблица 2
Прочность на разрыв бедренной кости
T SH	T OVX	Hp SH	Нр OVX
109.5±3.3	102.2±2.9	106.3±5.3	112.4±3.4

Несмотря на то, что стерилизация не привела к значительному уменьшению прочности на разрыв бедренной кости (Н), у стерилизованных крыс, получавших режим питания с добавкой гесперидина, проявилась тенденция к улучшению этого параметра.

В.4 Денситометрия

Значения плотности выражены в г/см².

Таблица 3
Общая плотность бедренной кости (T-BMD)
T SH	Т OVX	Hp SH	Hp OVX
0.2262±0.0056	0.2143±0.0025ab	0.2501±0.0028c	0.2445±0.0052

Стерилизация приводит к значительному уменьшению общей плотности феморальной ткани у крыс, получавших контрольный режим питания, по сравнению с псевдооперированными крысами. Однако введение гесперидина позволяет полностью избежать такой деминерализации и, кроме того, значительно улучшает этот параметр у группы SH.

Метафизарная феморальная плотность (M-BMD) (фиг.2)

Результаты, относящиеся ко всей бедренной кости, были также проверены на уровне метафизарной зоны, в основном состоящей из трабекулярной кости. Отмечается также улучшение минерализации у некастрированных животных, которым вводилась молекула (по сравнению с T SH).

Диафизарная феморальная плотность (M-BMD):

Диафизарная зона состоит из кортикальной кости.

Таблица 4
T SH	T OVX	Hp SH	Нр OVX
0.2019±0.0044	0.2003±0.0032	0.2245±0.0020*	0.2258±0.0055*

Введение гесперидина значительно улучшает (р<0,05) этот параметр по сравнению с другими группами животных, получавших стандартный режим питания, как у крыс OVX, так и у SH.

В.5 Костные биопоказатели

Содержание дезоксипиридинолина в моче (фиг.3)

Стерилизация приводит к значительному увеличению костной резорбции (р<0,01 по сравнению с Т SH). Этого явления удалось избежать при помощи введения гесперидина крысам OVX. Точно также у крыс Нр SH выделение ДПД с мочой значительно уменьшилось по сравнению с Т SH.

Плазматический уровень остеокальцина (фиг.4)

Введение гесперидина стимулирует костную аккрецию (Нр SH по сравнению с Т SH; Нр OVX по сравнению с Т OVX; р<0,05), при этом остеокальцин является показателем остеобластической активности.

Текущие показатели гесперетина.

В сущности, гесперидин является гликозидом гесперетина (гесперетин-7-рамноглюкозид). Средний плазматический уровень агликона у крыс OVX, которые, как и SH, получали режим питания с добавкой гесперидина, составил 12,53±2,48 мкМ. Что же касается крыс, получавших контрольный режим питания, то у них не обнаружилось никаких следов гесперетина.

Вывод из Примера 1

Совокупность результатов этого эксперимента указывает на то, что гесперидин способствует предупреждению костной потери, проявляющейся в результате снижения продукции эстрагонных гормонов, у стерилизованных крыс-самок. Этот эффект, по всей видимости, обеспечивается снижением костной резорбции в сочетании с повышением остеобластической активности. Благотворный эффект этого флаванонового соединения наблюдался даже у нетронутых крыс (псевдооперированных), то есть имеющих нормальные гормональный статус и костный метаболизм.

Пример 2: Действие гесперидина на клетки hPOB-tert ("Бессмертное поколение остеобластов надкостницы человека". Даримон и соавторы, 2002 г.)

Были рассмотрены три случая содержания гесперетина в культурной среде hPOB при конфлюируюущем посеве: 1, 10 и 50 мкМ. В этих средах, кстати, отсутствовали факторы остеобластической дифференциации (витамин D и дексаметазон). Контрольный раствор содержал DMSO (гесперетин был растворен в DMSO) при концентрации 0,1%. Период инкубации клеток в этих средах составил 35 дней. Активность щелочной фосфатазы, являющейся показателем остеобластической дифференциации, была измерена на клеточном лизате с использованием выпускаемого в торговле набора (Sigma №247). Сбор клеток производился в дни инкубации 0, 4, 8 и 12. Содержание кальция, являющееся показателем минерализации, было количественно определено на клеточном лизате после 21 дня инкубации в различных средах при помощи выпускаемого в торговле набора (Sigma №587).

Результаты

Активность ALP

Активность щелочной фосфатазы и, следовательно, остеобластическая дифференциация были простимулированы присутствием гесперетина в среде при зависимом дозировании. Дозы 10 и 50 мкМ повышают этот процесс, начиная с 4-го дня эксперимента, при этом плато было достигнуто на 8-й день инкубации. Если при концентрации 50 мкМ гесперетин проявил наибольшую эффективность, то при концентрации 1 мкМ, наоборот, не наблюдалось никакого эффекта по сравнению с не обработанными гесперетином клетками.

Накопление кальция в клетках

После 21 дня инкубации только доза с концентрацией 50 мкМ показала эффект стимуляции осаждения кальция по сравнению с содержанием кальция в контрольных клетках (0,1% DMSO).

Пример 3: Действие гесперидина на костный метаболизм у шестимесячной стерилизованной крысы-самки

А.

Материалы и методы

Эксперимент проводился на 48 шестимесячных крысах-самках Wistar, из которых 24 крысы стерилизованы (овариэктомированы) (OVX) и 24 крысы псевдооперированы (SH).

Животные были помещены в отдельные клетки с регулируемой температурой при 21±1°С с суточным циклом 12 ч-12 ч.

После хирургического вмешательства в день J0 животные прошли семидневный период привыкания. По завершении этого периода адаптации грызуны были распределены в зависимости от весовых параметров на 4 однородные группы и ежедневно получали в течение 72 дней 22 г следующих режимов питания:

- группа SH: 12 псевдооперированных крыс-самок - контрольный режим

- группа OVX: 12 стерилизованных крыс-самок - контрольный режим

- группа SH Нр: 12 псевдооперированных крыс-самок - гесперидиновый режим

- группа OVX Нр: 12 стерилизованных крыс-самок - гесперидиновый режим.

При умертвлении (J90) животные были анестезированы при помощи внутрибрюшинной инъекции хлораля (Fluka; 8%-й раствор; 0,4 мл/100 г живого веса). На уровне брюшной полости были взяты пробы крови. Произведено взвешивание матки.

Бедренные кости были извлечены и очищены от смежных мягких тканей, а затем консервированы в 80%-м растворе этилового спирта для определения костной плотности.

В. Результаты

1. Прием пищи

Количество принимаемой пищи было рассчитано на основании самого низкого уровня потребления в течение недели, предшествующей эксперименту (группа SH).

Результаты показаны на фиг.7.

Представленные на фиг.7 результаты показывают, что на уровне питания животных не наблюдалось никаких значительных различий.

2. Изменение веса

Результаты изменения веса показаны на фиг.8.

Весовой профиль животных всех групп претерпевает аналогичное изменение, а именно увеличение между началом и концом эксперимента независимо от рассматриваемой группы.

3. Состав тела

Результаты измерения состава тела показаны на фиг.9.

Состав тела животных в различных группах не претерпел существенных изменений, независимо от лечения, проводившегося на особях.

4. Вес матки

Результаты показаны на фиг.10.

Потребление гесперидина не оказало влияния на маточную атрофию, появившуюся в результате удаления яичника.

Представленные на фиг.10 результаты показывают, что гесперидин не обладает эффектом влияния на маточную атрофию.

5. Костная минеральная плотность

Результаты измерения костной минеральной плотности показаны на фиг.11, 12 и 13. Результаты измерения общей феморальной минеральной плотности показаны на фиг.11. Результаты измерения минеральной плотности феморального проксимального метафиза показаны на фиг.12. Результаты измерения феморальной диафизарной минеральной плотности показаны на фиг.13.

Кастрирование выразилось в деминерализации бедренной кости, проявившейся в снижении общей костной минеральной плотности (г/см²). Этого процесса можно избежать (по меньшей мере, частично) при помощи введения гесперидина.

Аналогичный профиль проявился на трабекулярном уровне (фиг.12), а также в кортикальной кости (фиг.13).

6. Биомеханические свойства

У различных групп животных были исследованы механические свойства бедренной кости. Результаты показаны на фиг.14.

В результате снижения продукции эстрагенных гормонов произошло ухудшение биомеханических свойств бедренной кости. Введение гесперидина (OVX Нр) способствовало сохранению и даже улучшению этих свойств у непрооперированных животных.

Можно сделать вывод, что совокупность результатов примера 3 показывает, что гесперидин обладает остеозащитной активностью в экспериментальной модели костной потери, связанной со старением.

1. Применение гесперидинового соединения или одного из его производных, выбранного из группы, состоящей из гесперетина, α-гликозил-гесперидина, метил-гесперидина, коньюгата гесперетина и сульфата или глюкуронида, в качестве активного соединения, которое стимулирует костеобразование и ингибирует костную резорбцию, для получения композиции, предназначенной для стимуляции костеобразования и/или замедления костной резорбции у человека или животного.

2. Применение по п.1, отличающееся тем, что упомянутая композиция является питательной композицией, предназначенной для орального приема.

3. Применение по п.2, отличающееся тем, что упомянутая питательная композиция предназначена для стимуляции костеобразования молодых особей в фазе роста.

4. Использование по п.2, отличающееся тем, что упомянутая нутриционная композиция предназначена для профилактики костной потери, проявляющейся при старении.

5. Применение по п.2, отличающееся тем, что упомянутая питательная композиция предназначена для профилактики или лечения расстройств, связанных с нарушением соотношения между костеобразованием и костной резорбцией.

6. Применение по п.2, отличающееся тем, что упомянутая питательная композиция предназначена для лечения костного дефицита, проявляющегося в результате перелома.

7. Применение по п.6, отличающееся тем, что упомянутая питательная композиция предназначена для профилактики или лечения патологий, таких как остеопороз, болезнь Педжета, костная потеря или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические заболевания кости, гиперкальциемия, сопровождающая раковые заболевания, многочисленные миеломы, периодонтальные заболевания или остеоартрит.

8. Применение по одному из пп.2-7, отличающееся тем, что питательную композицию выполняют в виде напитков, включая соки, предпочтительно фруктовые соки, йогуртов, мороженого, сыров, термически приготовленных продуктов, таких как хлеб, печенье и пирожные, молочных продуктов, десертов, конфет, палочек или хлопьев из злаковых культур, приправ к пище (в частности, специй и соусов), фруктовых салатов, фруктовых компотов.

9. Применение по одному из пп.2-7, отличающееся тем, что питательную композицию выполняют в виде продуктов питания для животных во влажном виде, полувлажном виде или сухом виде.

10. Применение по одному из пп.2-9, отличающееся тем, что гесперидиновое соединение или одно из его производных является продуктом экстракции, полученным из кожуры или мякоти цитрусового плода.

11. Применение по одному из пп.2-10, отличающееся тем, что упомянутая питательная композиция предназначена для орального приема ежедневного количества гесперидинового соединения или одного из его производных, составляющего от 0,01 до 500 мг.

12. Применение по п.1, отличающееся тем, что упомянутая композиция является медицинской или ветеринарной фармацевтической композицией.

13. Применение по п.12, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для стимуляции костеобразования у молодого индивида в фазе роста.

14. Применение по п.12, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для профилактики костной потери, проявляющейся во время старения.

15. Применение по п.12, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для профилактики или лечения патологии, связанной с нарушением соотношения между костеобразованием и костной резорбцией.

16. Применение по п.12, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для лечения костного дефицита, возникающего в результате перелома.

17. Применение по п.12, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для профилактики или лечения патологий, таких как остеопороз, болезнь Педжета, костная потеря или остеолизис, наблюдаемый вблизи протеза, метастатические заболевания кости, гиперкальциемия, сопровождающая раковые заболевания, многочисленные миеломы, периодонтальные заболевания или остеоартрит.

18. Применение по одному из пп.12-17, отличающееся тем, что упомянутую фармацевтическую композицию выполняют в виде формы для орального, парентерального или внутривенного введения.

19. Применение по одному из пп.12-17, отличающееся тем, что упомянутая фармацевтическая композиция предназначена для орального приема ежедневного количества гесперидинового соединения или одного из его производных, составляющего от 0,01 до 500 мг.