2-(бутил-1-сульфониламино)-n-[1(r)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид, его применение в качестве лекарственного средства, а также содержащие его фармацевтические композиции

Изобретение относится к 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамиду формулы (I)

а также к его фармацевтически приемлемым солям, их получению и применению, в особенности для лечения и профилактики предсердных аритмий, как, например, мерцание предсердий (мерцательная аритмия) или трепетание предсердий (предсердное трепетание). Также описана фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) и обладающая антиритмическим действием. Технический результат: получены новые соединения, обладающие полезными биологическими свойствами. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамиду формулы (I), а также к его фармацевтически приемлемым солям, их получению и применению, в особенности в лекарственных средствах.

Соединение формулы (I) и его фармацевтически приемлемые соли могут уменьшать возникновение предсердных аритмий без воздействия на желудочек сердца или без появления других побочных действий. Предлагаемое согласно изобретению соединение и его фармацевтически приемлемые соли поэтому особенно пригодны в качестве антиаритмического активного вещества нового типа, в особенности для лечения и профилактики предсердных аритмий, как, например, мерцание предсердий (мерцательная аритмия, AF) или трепетание предсердий (предсердное трепетание).

Мерцательная аритмия и трепетание предсердий представляют собой наиболее частые длительные сердечные аритмии. Возникновение увеличивается с возрастом и часто приводит к пагубным последствиям, как, например, кровоизлияние в мозг. Мерцательная аритмия поражает примерно 1 миллион американцев ежегодно и приводит к более чем 80000 апоплексических ударов каждый год в США. Вовремя принятые антиаритмические средства класса I и класса III уменьшают быстроту повторного наступления мерцательной аритмии, однако, из-за их потенциальных проаритмических побочных действий находят только ограниченное применение. Поэтому в медицине существует большая необходимость в создании лучших лекарственных средств для лечения предсердных аритмий (S. Nattel, Am. Heart J., 130, 1094-1106 (1995): "Newer developments in the management of atrial fibrillation").

Показано, что в большинстве случаев наджелудочковые аритмии находятся под воздействием волн возбуждения, так называемой "циркуляции возбуждения". Такие циркуляции возбуждения наступают тогда, когда сердечная ткань обладает медленной проводимостью и одновременно очень короткими рефрактерными периодами. Увеличение миокардиального рефрактерного времени за счет удлинения потенциала действия представляет собой признанный механизм для прекращения аритмий или для предотвращения их возникновения (T.J. Colatsky и др., Drug Dev. Res., 19, 129-140 (1990); "Potassium channels as targets for antiarrhythmic drug action"). Продолжительность потенциала действия по существу определяется размером реполяризующих К⁺-потоков, которые вытекают через различные К⁺-каналы из клетки. Особенно большое значение при этом приписывают так называемому "очистителю замедленного действия" IK, который состоит из трех различных компонентов: IK_r, IK_s и IK_ur.

Чаще всего известные антиаритимические средства класса III (например, дофетилид Е4031 и d-соталол) преимущественно или исключительно блокируют быстро активирующийся калиевый канал IK_r, который можно обнаруживать как в клетках желудочка человека, так и в предсердии. Однако, оказалось, что эти соединения при незначительных или нормальных частотах сердечных сокращений обладают повышенным проаритмическим риском, причем наблюдаются в особенности аритмии, которые называют как пируэтные тахикардии (D.M. Roden, Am. J. Cardiol., 72, 44B-49B (1993): "Current status of class III antiarrhythmic drug therapy"). Наряду с этим высоким, отчасти смертельным риском при низкой частоте, для IK_r-блокаторов установлено снижение активности в условиях тахикардии, при которой как раз необходимо действие ("отрицательная зависимость при использовании").

"Особенно быстро" активирующийся и очень медленно инактивирующийся компонент очистителя замедленного действия IK_ur (= сверхбыстро активирующийся очиститель замедленного действия), который соответствует Kv1.5-каналу, играет особенно большую роль в отношении продолжительности реполяризации в человеческом председии. Ингибирование наружного калиевого потока IK_ur, таким образом, по сравнению с ингибированием IK_r, соответственно, IK_s представляет собой особенно эффективный метод удлинения предсердного потенциала действия и тем самым прекращения, соответственно, предотвращения предсердных аритмий.

В противоположность IK_r и IK_s, которые также имеются в человеческом желудочке, IK_ur, правда, играет значительную роль в человеческом предсердии, но не в желудочке. По этой причине при ингибировании IK_ur-потока, в противоположность блокаде IK_r или IK_s, с самого начала должен быть исключен риск проаритмического действия на желудочек (Z. Wang и др., Circ. Res., 73, 1061-1076 (1993): "Sustained Depolarisation-Induced Outward Current in Human Atrial Myocytes"; G.-R. Li и др., 78, 689-696 (1996): "Evidence for Two Components of Delayed Rectifier K⁺-Current in Human Ventricular Myocytes"; G.J. Amos и др., J. Physiol., 491, 31-50 (1996): "Differences between outward currents of humah atrial and subepicardial ventricular myocytes").

Антиаритмические средства, которые действуют через селективную блокаду IK_ur-потока, соответственно, Kv1.5-канала до сих пор, однако, отсутствуют в продаже.

Заявляемый в настоящей заявке энантиомер 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид до сих пор не описан. Соответствующий рацемат указывается в международной заявке WO-02/88073 в качестве примера. Соединение формулы (I) отличается неожиданными преимуществами.

В настоящее время неожиданно обнаружено, что при использовании в качестве модели наркотизированной свиньи антиаритмическое действие предлагаемого согласно изобретению 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида является превосходным, в то время как соответствующий 1(S)-энантиомер обладает более слабой активностью. Далее показано, что соединение формулы (I) не оказывает никакого действия на QTc-интервал и не обладает отрицательно инотропными или гемодинамическими побочными действиями.

Опыты показывают, что соединение формулы (I) можно использовать в качестве антиаритмического средства нового типа с особенно предпочтительным профилем безопасности. Соединение в особенности пригодно для лечения наджелудочковых аритмий, как, например, мерцательная аритмия или трепетание предсердий. Соединение можно использовать для прекращения существующей мерцательной аритмии или существующего трепетания предсердий для восстановления синусового ритма (кардиоверсия). Сверх того, оно уменьшает предрасположенность к возникновению нового явления мерцания (достижение синусового ритма, профилактика).

Настоящее изобретение относится к 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамиду формулы (I), а также к его фармацевтически приемлемым солям.

Так как соединение формулы (I) содержит основной пиридиновый остаток, его также можно применять в форме фармацевтически приемлемых аддитивных солей с неорганическими или органическими кислотами, например, в виде гидрохлорида, фосфата, сульфата, метансульфоната, ацетата, лактата, малеината, фумарата, малата, глюконата и т.д. Присутствующая сульфонамидная группировка, кроме того, делает возможным образование солей щелочных или щелочно-земельных металлов, предпочтительно натриевой или калиевой соли, или аммониевых солей, как, например, соли с органическими аминами или аминокислотами. Фармацевтически приемлемые соли можно получать исходя из соединения формулы (I) обычными способами, например путем соединения с кислотой или основанием в растворителе или диспергаторе, или также путем анионообмена, или катионообмена исходя из других солей.

Предпочтительным является свободное соединение 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид формулы (I).

Соединение формулы (I) получают различными химическими способами, из которых на схеме 1 представлены две возможности получения. Связывание сульфониламинобензойной кислоты формулы (II) с амином формулы (III) можно осуществлять либо исходя непосредственно из кислоты в присутствии обычного реагента связывания, либо, например, исходя из активированного производного кислоты, как хлорангидрид кислоты. При использовании рацемического 1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина формулы (III) на конечной стадии осуществляют расщепление на энантиомеры, например, путем хиральной хроматографии или классического расщепления рацемата. Альтернативно путем использования 1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина формулы (IIIa) можно прямо получать желательный энантиомер. Сульфониламинобензойную кислоту формулы (II) получают известным специалисту образом из коммерчески доступных веществ - аминобензойной кислоты и бутилсульфонилхлорида.

Схема 1

К объекту настоящей заявки также относится используемое в качестве промежуточной стадии соединение 1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламин формулы (III), а также его энантиомеры, в особенности 1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламин формулы (IIIa), и их использование для получения биологически активных веществ лекарственных средств, например, 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида.

1-(6-Метоксипиридин-3-ил)пропиламин формулы (III) получают исходя из коммерчески доступных соединений, различными химическими способами, из которых на схеме 2 представлены в качестве примеров две возможности получения. Во-первых, сначала можно металлировать 5-бром-2-метоксипиридин с помощью бутиллития, затем вводить во взаимодействие с пропионитрилом и после этого восстанавливать с помощью боргидрида натрия до соединения формулы (III). Альтернативно 3-циан-6-метоксипиридин можно вводить во взаимодействие с этилмагнийбромидом и затем восстанавливать с помощью боргидрида натрия. Расщепление на энантиомеры можно осуществлять общепринятыми методами, как, например, хроматографией на хиральной фазе, классическим расщеплением рацемата с помощью хиральной кислоты или ферментативными методами.

Схема 2

Предлагаемое согласно изобретению соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые соли можно применять в случае животного, предпочтительно млекопитающего, и, в особенности в случае человека, в качестве лекарственных средств при использовании индивидуально или в виде фармацевтических композиций. Объектом настоящего изобретения является также соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые соли для использования в качестве лекарственных средств, их применение для терапии и профилактики нарушений ритма сердца, наджелудочковых аритмий, мерцательной аритмии и/или трепетания предсердий и их использование для получения лекарственных средств для этих целей. Далее объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, которые в качестве активного компонента содержат эффективную дозу соединения формулы (I) и/или его физиологически приемлемой соли наряду с обычными фармацевтически приемлемыми носителями и вспомогательными веществами. Фармацевтические композиции обычно содержат 0,1-90 масс.% соединения формулы (I) и/или его физиологически приемлемых солей. Получение фармацевтических композиций можно осуществлять известным специалисту образом. Для этого соединение формулы (I) и/или его физиологически приемлемые соли вместе с одним или несколькими твердыми или жидкими галеновыми носителями и/или вспомогательными веществами и, если желательно, в комбинации с другими биологически активными веществами лекарственных средств доводят до пригодной для введения, соответственно, дозировочной формы, которую можно использовать в качестве лекарственных средств в медицине человека или животного.

Лекарственные средства, которые содержат предлагаемое согласно изобретению соединение формулы (I) и/или его физиологически приемлемые соли, можно применять орально, парентерально, например внутривенно, ректально, путем ингаляции или локально, причем предпочтительное применение зависит от конкретного случая, например от соответствующей картины заболевания, которое нужно лечить.

Какие вспомогательные вещества пригодны для желательной лекарственной формы, специалисту известно на основании его специального знания. Наряду с растворителями, гелеобразователями, основами суппрозиториев, вспомогательными веществами для таблеток и другими носителями биологически активных веществ можно использовать, например, антиоксиданты, диспергаторы, эмульгаторы, антивспениватели, улучшающие вкус вещества, консерванты, способствующие растворению вещества, средства для достижения депо-эффекта, буферные вещества или красители.

Для достижения предпочтительного терапевтического действия соединение формулы (I) также можно комбинировать с другими лекарственными биологически активными веществами. Так, при лечении сердечно-сосудистых заболеваний возможны предпочтительные комбинации с активными в отношении сердечно-сосудистой системы веществами. В качестве такого рода предпочтительных в случае сердечно-сосудистых заболеваний компонентов комбинации используют, например, антиаритмические средства, как антиаритмические средства класса I, класса II или класса III, как, например, блокаторы IK_s- или IK_r-канала, например дофетилид, или, далее, снижающие кровяное давление вещества, как АСЕ-ингибиторы (например, эналаприл, каптоприл, рамиприл), антагонисты ангиотензина, а также активаторы К⁺-канала, также как блокаторы альфа-рецептора, однако, также симпатомиметические и адренергически действующие соединения, а также ингибиторы Na⁺/H⁺-обмена, антагонисты кальциевого канала, ингибиторы фосфодиэстеразы и другие положительно инотропно действующие вещества, как, например, гликозиды дигиталиса, или диуретики.

Для оральных форм применения активное соединение смешивают с пригодными для этого добавками, как носители, стабилизаторы или инертные разбавители, и обычными способами доводят до пригодных форм введения, как таблетки, драже, разъемные капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. В качестве носителей можно использовать, например, гуммиарабик, магнезию, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкозу или крахмал, в особенности кукурузный крахмал. При этом готовую форму можно получать как в виде сухого, так и также в виде мокрого гранулята. В качестве масляных носителей или в качестве растворителей используют, например, растительные или животные масла, как подсолнечное масло или рыбий жир. В качестве растворителей для водных или спиртовых растворов используют, например, воду, этанол или растворы сахара, или их смеси. Другими вспомогательными веществами, также для других форм применения, являются, например, полиэтиленгликоли и полипропиленгликоли.

Для подкожного, внутримышечного или внутривенного применения активное соединение, в желательном случае вместе с обычными для этой цели веществами, как способствующие растворению вещества, эмульгаторы или другие вспомогательные вещества, растворяют, суспендируют или эмульгируют. Соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые соли можно также лиофилизировать и полученные лиофилизаты использовать, например, для приготовления препаратов для инъекций или инфузий. В качестве растворителей используют, например, воду, физиологический раствор хлорида натрия или спирты, например, этанол, пропанол, глицерин, наряду с ними также растворы сахара, как растворы глюкозы или маннита, или также смеси из различных указанных растворителей.

В качестве фармацевтической готовой формы для введения в виде аэрозолей или спреев пригодны, например, растворы, суспензии или эмульсии биологически активного вещества формулы (I) или его физиологически приемлемых солей в фармацевтически приемлемом растворителе, как, например, этанол или вода, или в смеси таких растворителей. Лекарственная форма при необходимости может содержать также еще другие фармацевтические вспомогательные вещества, как поверхностно-активные вещества, эмульгаторы и стабилизаторы, а также пропеллент. Такая готовая форма содержит биологически активное вещество обычно в концентрации от примерно 0,1 до 10 мас.%, в особенности, от примерно 0,3 до 3 мас.%.

Дозировка вводимого биологически активного вещества формулы (I), соответственно, его физиологически приемлемых солей, зависит от конкретного случая и ее, как обычно, приспосабливают для оптимального действия к действительным условиям конкретного случая. Так, она зависит, естественно, от частоты введения, однако, также от рода и интенсивности излечиваемого заболевания, а также от пола, возраста, массы и индивидуальной чувствительности излечиваемого человека или животного и от того, лечат ли острое или хроническое заболевание или используют для профилактики. Обычно суточная доза соединения формулы (I) при введении пациенту массой примерно 75 кг составляет от 0,01 мг/кг массы тела до 100 мг/кг массы тела, предпочтительно, от 0,1 мг/кг массы тела до 20 мг/кг массы тела. Дозу можно вводить в форме разовой дозы или разделять на несколько, например, две, три или четыре, разовых доз. В особенности при лечении острых случаев нарушений ритма сердца, например, в отделении интенсивной терапии, предпочтительным может быть также парентеральное введение путем инъекции или инфузии, например, путем длительного внутривенного вливания.

Экспериментальная часть

Получение 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида

а) 2-(Бутил-1-сульфониламино)бензойная кислота

К суспензии 20 г (146 ммоль) 2-аминобензойной кислоты в 250 мл воды добавляют 20 г (188 ммоль) карбоната натрия. Затем прикапывают 11,4 г (72,8 ммоль) бутилсульфонилхлорида и реакционную смесь перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре. Подкисляют концентрированной соляной кислотой, перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре и выпавший в осадок продукт отфильтровывают под вакуумом. После высушивания в вакууме получают 9,6 г 2-(бутил-1-сульфониламино)бензойной кислоты.

b) 1-(6-Метоксипиридин-3-ил)пропиламин

Способ 1

К раствору 10,2 мл н-бутиллития (2,5 М раствор в гексане; 25,5 ммоль) в 50 мл диэтилового эфира при температуре -70°С добавляют 3 мл (23,2 ммоль) 5-бром-2-метоксипиридина. Спустя 10 минут добавляют 1,4 мл (19,5 ммоль) пропионитрила. После выдерживания в течение 2 часов при температуре -70°С реакционную смесь оставляют медленно возвращаться к комнатной температуре. Затем добавляют 2,2 г декагидрата сульфата натрия и перемешивают в течение 1 часа. После последующей добавки 5 г сульфата магния и после кратковременного перемешивания отфильтровывают от солей и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 70 мл метанола и при температуре 0°С добавляют 1,1 г (28 ммоль) боргидрида натрия. После перемешивания в течение ночи в реакционной смеси устанавливают рН 2 с помощью концентрированной соляной кислоты и концентрируют в ротационном испарителе. Остаток смешивают с 10 мл воды и экстрагируют один раз диэтиловым эфиром. Затем водную фазу насыщают гидрокарбонатом натрия, концентрируют в вакууме и остаток экстрагируют этилацетатом. После высушивания и концентрирования этилацетатных экстрактов получают 1,4 г рацемического 1-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропиламина.

Разделение энантиомеров осуществоляют препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) при использовании колонки с Chiralpak ADH (250 мм х 4,6 мм); элюирующее средство: гептан/этанол/метанол = 50:1:1 с 0,1% диэтиламина; температура: 30°С; объемная скорость потока: 1 мл/мин.

Первым, при времени удерживания 18,4 минут, элюируют 1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламин в количестве 0,45 г. Затем при времени удерживания 21,0 минута получают 0,42 г 1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина.

Способ 2

К раствору 20 г (150 ммоль) 6-метоксиникотиннитрила и 0,62 г (3,3 ммоль) иодида меди-(I) в 125 мл безводного тетрагидрофурана при температуре 0°С и в атмосфере аргона в течение 30 минут прикапывают 170 мл (170 ммоль) 1 М раствора этилмагнийбромида в тетрагидрофуране. Спустя 30 минут реакционную смесь оставляют возвращаться к комнатной температуре и перемешивают еще в течение 3 часов. Затем при температуре -10°С прикапывают 200 мл метанола и потом порциями добавляют 11,3 г (299 ммоль) боргидрида натрия. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре добавляют 300 мл воды и экстрагируют 3 раза по 250 мл этилацетата. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, затем концентрируют и остаток очищают хроматографией. Получают 5,5 г рацемического 1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина.

с) 2-(Бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид и 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид

Способ 1

К раствору 8,0 г (31,1 ммоль) 2-(бутил-1-сульфониламино)-бензойной кислоты в 250 мл тетрагидрофурана добавляют 4,4 г (32,7 ммоль) 1-гидрокси-1Н-бензтриазола и 6,3 г (32,7 ммоль) N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорида и реакционную смесь перемешивают в течение 90 минут. Затем прикапывают раствор 5,4 г (32,7 ммоль) рацемического 1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина в 20 мл тетрагидрофурана и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь смешивают с 250 мл воды и экстрагируют с помощью 300 мл этилацетата. Органическую фазу экстрагируют 5 раз по 100 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и после этого сушат над сульфатом магния. Получают 9,0 г 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]-бензамида.

Разделение энантиомеров осуществоляют путем препаративной ВЭЖХ при использовании колонки с Chiralpak ADH (250 мм × 4,6 мм); элюирующее средство: гептан/этанол/метанол = 10:1:1; температура: 30°С; объемная скорость потока: 1 мл/мин.

Первым, при времени удерживания 5,9 минут, элюируют 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид в количестве 4,0 г. После смешанной фракции при времени удерживания 7,2 мин получают 3,0 г 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида.

Способ 2

Из 0,41 г (2,46 ммоль) 1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропиламина и 0,64 г (2,47 ммоль) 2-(бутил-1-сульфониламино)-бензойной кислоты путем реакции связывания в присутствии 1-гидрокси-1Н-бензтриазола и N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)-карбодиимидгидрохлорида, аналогично способу 1, получают 0,9 г 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамида.

d) 2-(Бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид

2 г полученного по способу 1 или способу 2 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида растворяют при нагревании в 9 мл изопропанола, затем добавляют 8 мл теплой воды и реакционную смесь оставляют медленно охлаждаться в течение ночи. После отфильтровывания под вакуумом при температуре 0°С получают 1,5 г 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида в виде бесцветных иглообразных кристаллов; температура плавления: 97°С. При использовании пригодных монокристаллов путем рентгено-структурного анализа подтверждают абсолютную конфигурацию.

Фармакологические исследования

Kv1.5-Каналы человека экспрессируют в ооцитах Xenopus. Для этого сначала ооциты извлекают из Xenopus laevis и дефлоккулируют. Затем в эти ооциты инъецируют синтезированную in vitro, кодирующую Kv1.5 РНК. После экспрессии Kv1.5-протеина в течение 1-7 дней в ооцитах измеряют Kv1.5-потоки методом фиксированного напряжения смещения с двумя микроэлектродами. Kv1.5-Каналы при этом, как правило, активируют с помощью длящихся 500 миллисекунд скачков напряжения при 0 милливольт и 40 милливольт. Ванну промывают раствором нижеследующего состава: 96 мМ NaCl, 2 мМ KCl, 1,8 мМ CaCl₂, 1 мМ MgCl₂, 5 мМ ГЕПЕСа (оттитровано с помощью раствора NaOH до рН 7,4). Эти эксперименты осуществляют при комнатной температуре. Для сбора данных и анализа используют: усилитель Geneclamp (Axon Instruments, Foster City, США) и преобразователь MacLab D/A и программу обеспечения (ADInstruments, Castle Hill, Австралия). Предлагаемые согласно изобретению вещества тестируют тем, что их добавляют в различных концентрациях в электролит. Действия веществ рассчитывают в виде ингибирования в процентах от контрольного потока Kv1.5, который получают тогда, когда к раствору не добавляют никакого вещества. Данные затем экстраполируют при использовании уравнения Hill в целях определения ингибирующих концентраций IC₅₀ для соответствующих веществ.

Таким образом, для нижеуказанных соединений были определены следующие значения IC₅₀:

2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]-бензамид: IC₅₀ = 2,4 мкМ;

2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид формулы (I): IC₅₀ = 10 мкМ;

2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид: IC₅₀ = 2,4 мкМ.

Исследование рефрактерного времени и ранимости левого предсердия в случае свиньи

Оба энантиомера 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид и 2-(бутил-1-сульфонил-амино)-N-[1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид исследуют в случае предсердия наркотизированной свиньи в отношении удлинения рефрактерного времени и антиаритмической эффективности и сравнивают. При этом определяют рефрактерное время левого предсердия и регистрируют антиаритмическую эффективность, как описано в литературе (Knobloch и др., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 366, 482-487 (2002)). Антиаритмическое действие при этом относится к ингибированию возникновения эпизодов аритмий, которые провоцируются в левом предсердии за счет преждевременно установленного экстрастимула (S2) (= ранимость левого предсердия).

В таблице представлено сравнение 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида формулы (I) и 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(S)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида в отношении рефрактерного времени левого предсердия и антиаритмической эффективности в случае наркотизированной свиньи после введения болюса 3 мг/кг. Величины рефрактерного времени указываются в процентах от базальных значений спустя 10 минут после инъекции. Средние значения рефрактерных времен получают исходя из трех частот (150, 200 и 250/мин). Из представленных в таблице результатов видно, что R-энантиомер вызывает отчетливо гораздо большее удлинение рефрактерного времени, чем S-энантиомер. Провоцированные аритмии можно предотвращать с помощью R-энантиомера на 73,9%, в то время как при использовании S-энантиомера появление аритмий ингибируется только на 27%.

	S-энантиомер	R-энантиомер
	Среднее значение	SEM*	Среднее значение	SEM*
% увеличение рефрактерного времени	8,8	3,4	19	4
% ингибирование аритмий	27,3	2,4	73,9	11
	n=4		n=6
*Стандартное отклонение

Путем неоднократного измерения после введения вещества в случае этой постановки эксперимента можно также определять длительность воздействия вещества на рефрактерное время. R-энантиомер вводят путем внутривенного вливания в дозе 1 мг/кг в течение 100 минут и фармакологическое действие определяют через 280 минут. Как представлено на чертеже, 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамид приводит к продолжительному воздействию на рефрактерное время левого предсердия, которое продолжает оставаться неизмененным также спустя 180 минут по окончании инфузии.

На чертеже даны следующие надписи и обозначения:

Длительность воздействия на рефрактерное время левого предсердия 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропил]бензамида, 1 мг/кг в виде вливания в течение 100 минут внутривенно

Y-ось: % базального рефрактерного времени

Х-ось: время в минутах

2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид

Контроль, без активного вещества

1. 2-(Бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид формулы (I) и его физиологически приемлемые соли

2. 2-(Бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид по п.1.

3. 2-(Бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамид и/или его физиологически приемлемые соли по пп.1 и/или 2 для применения в качестве лекарственного средства для лечения или профилактики нарушений ритма сердца, наджелудочковых аритмий, мерцательной аритмии и/или предсердного трепетания.

4. Применение 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамида и/или его физиологически приемлемых солей по пп.1 и/или 2 для получения лекарственного средства для лечения или профилактики нарушений ритма сердца, наджелудочковых аритмий, мерцательной аритмии и/или предсердного трепетания.

5. Фармацевтическая композиция, обладающая антиритмическим действием, предназначенная для человека или животного, содержащая эффективное количество 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамида формулы (I) и/или его физиологически приемлемых солей по пп.1 и/или 2 вместе с фармацевтически приемлемыми носителями и добавками.

6. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что дополнительно содержит одно или несколько других фармакологических активных веществ.

7. 1(R)-(6-Метоксипиридин-3-ил)пропиламин.

8. Применение 1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)пропиламина в качестве промежуточного продукта для получения 2-(бутил-1-сульфониламино)-N-[1(R)-(6-метоксипиридин-3-ил)-пропил]бензамида и/или его физиологически приемлемых солей.