Пептидные аналоги gh-rh с антагонистическим действием, способ снижения уровня gh, способ снижения уровня igf-i и igf-ii, применение для ингибирования роста раковых клеток, фармакологически приемлемая композиция (варианты)

Авторы патента:

C07K14/60 - фактор роста выделения гормонов (ФР-ВГ) (соматолиберин)

A61K38/25 - фактор высвобождения гормона роста (GH-RF) (соматолиберин)

Владельцы патента RU 2335506:

Дзе Юнайтед Стэйтс оф Америка репрезентид бай дзе Дипартмент оф Ветеранс Аффэрс (US)
ДЗЕ АДМИНИСТРЕЙТОРС ОФ ДЗЕ ТЬЮЛЕЙН ЭДЬЮКЕЙШНЛ ФАНД (US)

Предлагаются новые типы синтетических антагонистических аналогов hGH-RH(1-29)NH₂. Данные аналоги ингибируют взаимодействие эндогенного hGH-RH с гипофизарными рецепторами GH-RH и таким образом препятствуют высвобождению гормона роста. Аналоги также подавляют пролиферацию в раковых тканях человека путем непосредственного воздействия на раковые клетки. Повышенная ингибиторная эффективность новых аналогов, по сравнению с ранее описанными, является следствием замены разных аминокислот. 12 н. и 9 з.п. ф-лы, 15 табл.

Область изобретения

Данное изобретение было сделано отчасти при правительственной поддержке Медицинского исследовательского центра департамента занятости ветеранов. Правительство имеет определенные права на данную заявку (VA №03-084, права переданы 25 июля 2003 г.).

Настоящее изобретение относится к новым синтетическим пептидам, которые ингибируют высвобождение гормона роста из гипофиза млекопитающих и пролиферацию злокачественных опухолей человека путем непосредственного воздействия на раковые клетки, а также к терапевтическим композициям, содержащим указанные новые пептиды.

Предпосылки создания изобретения

Гормон, высвобождающий гормон роста (GH-RH), представляет собой пептид, принадлежащий к секретин/глюкагоновому семейству нейроэндокринных и желудочно-кишечных гормонов, данное семейство также включает в себя вазоактивный интерстициальный пептид (VIP), гипофизарный активирующий аденилатциклазу (РАСАР) и другие. Человеческий пептид GH-RH (hGH-RH) состоит из 44 аминокислотных остатков. Наиболее известным участком продукции GH-RH является гипоталамус, однако обнаружено, что он также синтезируется в разных периферических органах. hGH-RH также продуцируется, иногда в больших количествах, человеческими злокачественными тканями (раковыми) различного происхождения.

GH-RH выполняет разные физиологические и патофизиологические функции. GH-RH гипоталамуса представляет собой эндокринный рилизинг-гормон, который, действуя через специфические рецепторы GH-RH в гипофизе, регулирует секрецию гипофизарного гормона роста (GH). Физиологические функции GH-RH в тканях, отличных от гипофиза, менее ясны. Однако существуют факты, количество которых постоянно возрастает, свидетельствующие о том, что GH-RH выполняет функцию аутокринного/паракринного фактора роста в разных раковых тканях. Описано, что в широком ряде раковых тканей человека, а также в некоторых нормальных периферических органах присутствуют получающиеся в результате сплайсинга вариантные (сплайсинг-вариантные) формы (SV) рецепторов GH-RH, отличные от экспрессирующихся в гипофизе. Опухолевый аутокринный/паракринный GH-RH может оказывать действие через данные рецепторы. Кроме того, мишенями локального GH-RH могут быть рецепторы VIP и другие, еще неидентифицированные рецепторы данного семейства.

Исходя из того, что GH-RH выполняет функцию эндокринного регулятора высвобождения GH, были разработаны новые терапевтические стратегии для лечения различных патологических состояний на основе применения агонистических и антагонистических аналогов GH-RH.

GH представляет собой полипептид, содержащий 191 аминокислоту, который стимулирует продукцию разных факторов роста, например инсулинподобного фактора роста I (IGF-I), и, следовательно, инициирует рост многих тканей (скелетной, соединительной, мышечной и тканей внутренних органов) и стимулирует различные физиологические активности (увеличивает синтез нуклеиновых кислот и белков, и увеличивает липолиз, но снижает секрецию мочевины). Высвобождение гипофизарного GH находится под контролем факторов высвобождения и ингибирования, секретируемых гипоталамусом, причем основными рилизинг-факторами являются GH-RH и грелин, а основным ингибирующим фактором является соматостатин.

GH опосредует ряд заболеваний. Одним из заболеваний, в развитии которых участвует GH, является акромегалия, при которой наблюдаются избыточные уровни GH. Аномальное увеличение костей лица и конечностей, а также сердечно-сосудистые симптомы, наблюдающиеся при данном заболевании, можно лечить путем введения антагониста GH-RH. К заболеваниям, в развитии которых участвует GH, относятся также диабетическая ретинопатия и диабетическая нефропатия. Полагают, что повреждение соответственно сетчатки и почек, имеющее место при данных заболеваниях, происходит в результате повышенной секреции GH и приводит к слепоте или ухудшению функции почек. Данное повреждение можно предотвратить или замедлить путем введения эффективного антагониста GH-RH.

Некоторые исследователи пытались оказывать влияние на протекание данных заболеваний и других состояний, контролируя уровни GH и IGF-I путем применения аналогов соматостатина, ингибитора высвобождения GH. Однако аналоги соматостатина при отдельном введении не снижают в достаточной степени уровни GH или IGF-I. При введении в сочетании с антагонистом GH-RH аналоги соматостатина снижают уровень IGF-I гораздо лучше.

Однако основной областью применения антагонистов GH-RH являются раковые заболевания (см. Schally AV and Varga JL, Trends Endocrinol Metab 10: 383-391,1999; Schally AV et al, Frontiers Neuroendocrinol 22:248-291, 2001; Schally AV and Comaru-Schally AM, in: Kufe DW, Pollock RE, Weichselbaum RR, Bast Jr. RC, Gansler TS, Holland JF, Frei III E, Eds. Cancer Medicine, 6^th ed. Hamilton, Ontario: BC. Decker, Inc., 2003, p. 911-926). Антагонисты GH-RH ингибируют пролиферацию злокачественных тканей посредством косвенных эндокринных механизмов, в основе которых лежит ингибирование высвобождения гипофизарного GH, что приводит к уменьшению сывороточных уровней GH и IGF-I, а также путем непосредственного влияния на опухолевую ткань.

GH-RH и опухолевые сплайсинг-вариантные (SV) формы его рецепторов присутствуют в человеческих раковых тканях при раке легких, простаты, молочной железы, яичников, эндометрия, желудка, кишечника, поджелудочной железы, почек и костей (см. Halmos G et al, Proc Natl Acad Sci USA 97: 10555-10560, 2000; Rekasi Z et al, Proc Natl Acad Sci USA 97: 10561-10566, 2000; Schally AV et al, Frontiers Neuroendocrinol 22: 248-291, 2001; Schally AV and Comaru-Schally AM, in: Kufe DW, Pollock RE,Weichselbaum RR, Bast Jr. RC,Gansler TS, Holland JF, Frei III E, Eds. Cancer Medicine, 6^th ed. Hamilton, Ontario: BC. Decker, Inc., 2003, p. 911-926). Опухолевый GH-RH, как было показано или как ожидалось, действует как аутокринный фактор роста в этих злокачественных опухолях. Антагонистические аналоги GH-RH могут ингибировать стимулирующую активность GH-RH и оказывать непосредственное антипролиферативное действие на раковые клетки in vitro, и на опухоли in vivo. Непосредственные антипролиферативные эффекты антагонистов GH-RH реализуются через опухолевые рецепторы (связывающие участки). Кроме специфических опухолевых SV рецепторов GH-RH, мишенями антагонистов GH-RH также могут являться рецепторы VIP и другие, еще неидентифицированные рецепторы данного семейства.

Было обнаружено, что, кроме эндокринного ингибирования сывороточного уровня GH и IGF-I, антагонисты GH-RH уменьшают аутокринную и паракринную продукцию некоторых опухолевых факторов роста и/или осуществляют понижающую регуляцию их рецепторов. Данные факторы роста включают в себя IGF-I, IGF-II, GH, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и фактор роста фибробластов (FGF). Таким образом, разрыв аутокринных/паракринных стимуляторных цепей, в которых участвуют данные факторы роста, вносит вклад в эффективность антагонистов GH-RH как противоопухолевых средств.

IGF-I и IGF-II представляют собой аутокринные/паракринные факторы роста с потенциальным митогенным действием на разные типы рака. IGF-I также является эндокринным фактором роста, и повышенные уровни сывороточного IGF-I считаются эпидемиологическим фактором риска развития рака простаты, рака легкого и рака ободочной и прямой кишки. Достоверно установлено, что IGF-I (соматомедин-C) участвует в развитии рака молочной железы, рака простаты, рака толстой кишки, опухолей костей и других злокачественных заболеваний. Тем не менее, аутокринный/паракринный контроль пролиферации посредством IGF-II также является основным фактором для многих опухолей. IGF-I и IGF-II оказывают пролиферативное и антиапоптотическое действие через общий рецептор IGF-I. Рецепторы IGF-I присутствуют в тканях первичного рака молочной железы, простаты, легких, толстой кишки, мозга, поджелудочной железы и почечно-клеточного рака человека. Обработка некоторых экспериментальных раковых опухолей, таких как раковые опухоли костей, легких, простаты, почек, молочной железы, яичников, кишечника, поджелудочной железы и мозга, антагонистами GH-RH приводит к уменьшению уровней IGF-I и/или IGF-II, сопровождающемуся ингибированием роста опухоли (как описано в Schally AV and Varga JL, Trends Endocrine) Metab 10: 383-391, 1999; Schally AV et al, Frontiers Neuroendocrinol 22: 248-291, 2001; Schally AV and Comaru-Schally AM, in: Kufe DW, Pollock RE,Weichselbaum RR, Bast Jr. RC, Gansler TS, Holland JF, Frei III E, Eds. Cancer Medicine, 6'h ed. Hamilton, Ontario: BC. Decker, Inc., 2003, p. 911-926). В некоторых случаях в результате действия антагонистов GH-RH также уменьшается экспрессия рецепторов IGF-I. Таким образом, разрыв эндокринных и аутокринных/паракринных стимуляторных цепей, зависимых от IGF-I и IGF-II, вносит вклад в противоопухолевое действие антагонистов GH-RH.

Обработка модели рака молочной железы MXT антагонистами GH-RH приводит к ингибированию роста опухоли, уменьшению уровня мРНК GH и концентрации пептида GH в опухоли, а также к ингибированию экспрессии мРНК рецепторов GH (Szepeshazi K et al, Endocrinology 142: 4371-4378, 2001). Показано, что GH действует как фактор роста клеток карциномы мышиной молочной железы MXT, клеток рака молочной железы человека MCF-7 и других опухолевых клеточных линий. Таким образом, ингибиторное действие антагонистов GH-RH на локальные и сывороточные уровни GH вносит вклад в противоопухолевый эффект.

Показано, что антагонисты GH-RH снижают уровень мРНК и концентрацию белка VEGF у моделей с человеческим андроген-чувствительным и андроген-независимым раком простаты (Letsch M et al, Proc Natl Acad Sci USA 100: 1250-1255, 2003; Plonowski A et al, Prostate 52: 173-182, 2002), что обуславливает их противоопухолевое действие, поскольку VEGF играет важную стимуляторную роль в процессах реваскуляризации и роста различных опухолей. Кроме того, было обнаружено, что антагонист GH-RH ингибирует секрецию VEGF и пролиферацию нормальных эндотелиальных клеток мыши, по-видимому, через непосредственное воздействие на данные клетки in vitro (Siejka A et al, Life Sci 72:2473-2479,2003).

Ученые исследовали разные модификации GH-RH, чтобы выявить взаимосвязь структуры GH-RH и его активности в отношении гипофизарных рецепторов с целью разработки синтетических родственных соединений с улучшенными агонистическими или антагонистическими свойствами. Так, ранее было установлено, что фрагмент GH-RH, содержащий остатки 1-29, или GH-RH(1-29), является минимальной последовательностью, необходимой для проявления биологической активности в гипофизе. Данный фрагмент сохраняет 50% или более активности нативного GH-RH. Затем были получены многочисленные синтетические аналоги GH-RH на основе структуры пептида hGH-RH(1-29)NH₂. hGH-RH(1-29)NH₂ имеет следующую аминокислотную последовательность:

Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile⁵-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr¹⁰-Arg-Lys-Val-Leu-Gly¹⁵-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg²⁰-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp²⁵-Ile-Met-Ser-Arg²⁹-NH₂

Значительное количество патентов и статей, находящихся в открытом доступе, раскрывают аналоги GH-RH, которые действуют на гипофиз либо как агонисты GH-RH (т.е. стимулируют высвобождение GH), либо как антагонисты GH-RH (т.е. ингибируют высвобождение GH). Большинство данных пептидов получают из пептидной последовательности GH-RH(1-29) с использованием конкретных структурных модификаций, которые способствуют усилению агонистических или антагонистических свойств в отношении гипофизарных рецепторов. Однако, за исключением некоторых случаев, неизвестно, как данные аналоги будут влиять на раковые клетки, которые экспрессируют рецепторы GH-RH, отличные от обнаруженных в гипофизе. Только в нескольких опубликованных научных исследованиях были сделаны попытки выявить зависимость активности от структуры и охарактеризовать непосредственное антагонистическое (или агонистическое) действие аналогов GH-RH на раковые клетки и опухоли (см. Rekasi Z et al, Endocrinology 141: 2120-2128, 2000; Halmos G et al, Proc Natl Acad Sci USA 97: 10555-10560, 2000; Rekasi Z et al, Proc Natl Acad Sci USA 97: 10561-10566, 2000; Kiaris H et al, Proc Natl Acad Sci USA 99: 196-200, 2002), и до настоящего времени не существовало выданных патентов, имеющих отношение к данной проблеме. Следовательно, о структурных признаках аналогов GH-RH, необходимых для непосредственного антагонистического действия на опухолевые клетки, известно мало.

Обнаружено, что первый описанный антагонист GH-RH, [Ac-Tyr¹, D-Arg²]hGH-RH(1-29)NH₂, который в литературе обычно называют "стандартный антагонист", препятствует активации крысиной аденилатциклазы в передней доле гипофиза под действием hGH-RH(1-29)NH₂. Тот же пептид блокирует взаимодействие GH-RH с рецепторами в гипофизе и гипоталамусе и ингибирует пульсирующий рост секреции гормонов. Стандартный антагонист также анализировали клинически (Ocampo-Lim B et al, J Clin Endocrinol Metab 81: 4396-4399, 1996; Jaffe CA et al, J Clin Endocrinol Metab 82: 634-637, 1997). Большие дозы данного антагониста (400 мкг/кг) уменьшают ночную секрецию GH у нормальных субъектов и ингибируют ответ на GH-RH. Стандартный антагонист GH-RH также уменьшает уровни GH у пациентов с акромегалией. Однако для клинического применения требуются гораздо более мощные антагонисты GH-RH.

Изобретения, упомянутые ниже, раскрывают аналоги GH-RH с антагонистическими или агонистическими свойствами по отношению к гипофизарным рецепторам GH-RH. Однако не сообщалось, и не исследовалось, могут ли данные аналоги оказывать непосредственное влияние на опухолевые клетки.

Патент США 4659693 раскрывает антагонистические аналоги GH-RH, которые содержат определенные N,N'-диалкил-омега-гуанидино альфа-аминоацильные остатки в положении 2 последовательности GH-RH(1-29).

В опубликованной заявке WO91/16923 описаны более ранние попытки изменить вторичную структуру hGH-RH путем модификации его аминокислотной последовательности. Данные более ранние попытки включают в себя: замену Tyr¹, Ala², Asp³ или Asn⁸ их D-изомерами; замену Asn⁸ на L- или D-Ser, D-Arg, Asn, Thr, Gln или D-Lys; замену Ser⁹ на Ala для увеличения амфифильности участка; и замену Gly¹⁵ на Ala или Aib. Если R² в аналогах представляет собой D-Arg, а R⁸, R⁹ и R¹⁵ замещены, как указано выше, то аналог обладает антагонистической активностью. Как описано, данные антагонистические пептиды подходят для введения в составе фармацевтических композиций для лечения состояний, связанных с повышенными уровнями GH, например, акромегалии.

Антагонистическая активность аналога hGH-RH "[Ser⁹-psi[CH₂-NH]-Tyr¹⁰]hGH-RH(1-29)", описанного в патенте США 5084555, обусловлена псевдопептидной связью (т.е. пептидной связью, восстановленной до [CH₂-NH]) между остатками R⁹ и R¹⁰. Однако [Ser⁹-psi[CH₂-NH]-Tyr¹⁰]hGH-RH(1-29) имеет более плохие антагонистические свойства, чем стандартный антагонист, [N-Ac-Tyr¹, D-Arg²]hGH-RH(1-29)-NH₂.

Патент США 5550212, патент США 5942489 и патент США 6057422, принадлежащие тем же авторам, что и настоящая заявка, раскрывают аналоги hGH-RH(1-29)NH₂, которые в отношении ингибирования высвобождения GH, вызываемого GH-RH, обладают улучшенными антагонистическими свойствами и пролонгированным действием. Считается, что данные свойства являются следствием замены разных аминокислот и ацилирования ароматическими или неполярными кислотами по N-концу GH-RH(1-29)NH₂. Описанные в патенте США 5942489 и патенте США 6057422 свойства антагонистов ингибировать опухоль были продемонстрированы на голых мышах, несущих ксенотрансплантаты экспериментальных моделей рака человека. В патенте США 5550212 и в патенте США 5942489 указано, что R⁹ всегда представляет собой Ser, тогда как R¹¹ и R²⁰ могут обозначать либо Arg, D-Arg, либо Cit. В патенте США 6057422 R⁹ может обозначать либо Arg, Har, Lys, Orn, D-Arg, D-Har, D-Lys, D-Orn, Cit, Nle, Tyr(Me), Ser, Ala, либо Aib, тогда как R¹¹ и R²⁰ всегда обозначают Arg.

Краткое описание изобретения

Предлагается новый ряд синтетических аналогов hGH-RH(1-29)NH₂ и hGH-RH(1-30)NH₂. Данные аналоги ингибируют высвобождение гормона роста из гипофиза млекопитающих, и, кроме того, они ингибируют пролиферацию клеток раковых тканей человека посредством непосредственного воздействия на раковые клетки. Более высокая ингибиторная активность новых аналогов по сравнению с ранее описанными является результатом замены разных аминокислот.

Данное изобретение в основном относится к пептидам, имеющим формулу:

R₁-A⁰-A¹-A²-Asp-Ala-A⁵-A⁶-Thr-A⁸-A⁹-A¹⁰-A¹¹-A¹²-Val-Leu-A¹⁵-A¹⁶-Leu-Ser-A¹⁹-A²⁰-A²¹-A²²-Leu-Gln-Asp-Ile-A²⁷-A²⁸-A²⁹-A³⁰-R₂

где R₁ является членом группы, состоящей из a) PhAc, Hca, Dat, IndAc, Ipa, 1-Nac, 2-Nac, 1-Npr, 2-Npr, Ibu; CH₃(CH₂)_nCO или HOOC(CH₂)_nCO, где n представляет собой целое число от 2 до 20, и b) любой другой линейной, циклической, разветвленной, насыщенной, ненасыщенной или полиненасыщенной алифатической карбоксильной группы, содержащей 6-14 атомов углерода, и любой карбоциклической или гетероциклической ароматической карбоксильной группы, содержащей в гетероциклическом фрагменте 3-8 атомов углерода и до одного атома, выбранного из группы, состоящей из S, N и O,

A⁰ обозначает Phe, D-Phe, Arg, D-Arg или одинарную связь углерод-азот,

A¹ обозначает Tyr или His,

A² обозначает D-Arg или D-Cit,

A⁵ обозначает Ile или Val,

A⁶ обозначает Phe, Tyr, Nal или Phe(Y), где Y = F, Cl, Br или I,

A⁸ обозначает Asn, D-Asn, Cit, D-Cit, Gln, D-Gln, Ser, D-Ser, Thr, D-Thr, Ala, D-Ala, Abu, D-Abu или Aib,

A⁹ обозначает His, D-His, Amp, D-Amp, Gup или D-Gup,

A¹⁰ обозначает Tyr, Tyr(Et), Tyr(Me); Phe(Y), где Y = H, F, Cl, Br или I; Amp, His, Cha, Chg, Bpa, Dip, Trp, Trp(For), Tpi, 1-Nal, 2-Nal, 3-Pal, 4-Pal, Phe(NH₂) или Phe(NO₂),

A¹¹ обозначает His, D-His, Arg, D-Arg, Cit, Har, D-Har, Amp, D-Amp, Gup или D-Gup,

A¹² обозначает Lys, D-Lys, Orn, D-Orn, Har, D-Har, Cit, D-Cit, Nle или Ala,

A¹⁵ обозначает Gly, Ala, Abu, Aib, Nle, Gln, Cit или His,

A¹⁶ обозначает Gln или Arg,

A¹⁹ обозначает Ala или Abu,

A²⁰ обозначает His, D-His, Arg, D-Arg или Cit,

A²¹ обозначает Lys, D-Lys, Orn, D-Orn, Cit или D-Cit,

A²² обозначает Leu, Ala или Aib,

A²⁷ обозначает Met, Leu, Nle, Abu или D-Arg,

A²⁸ обозначает Arg, D-Arg, Har, D-Har, Ser, Asn, Asp, Ala, Abu или Cit,

A²⁹ обозначает Arg, D-Arg, Har, D-Har, Cit, D-Cit или Agm,

A³⁰ обозначает Arg, D-Arg, Har, D-Har, Cit, D-Cit, Agm или одинарную связь углерод-азот или углерод-кислород,

R₂ обозначает -NH₂, -NH-NH₂, -NH-OH, -NHR₃, -NR₃R₄, -OH или -OR₃, где R₃ и R₄ обозначают любой из C_1-10 алкила, C_2-10 алкенила, C_2-10 алкинила, C_7-16 фенилалкила, -C₆H₅ или -CH(C₆H₅)₂;

при условии, что если A²⁹ обозначает Agm, то A³⁰ и R₂ отсутствуют, и если A³⁰ обозначает Agm, то R₂ отсутствует,

и к их фармацевтически приемлемым солям.

К предпочтительным воплощениям относятся пептиды приведенной выше формулы, где один или оба из A¹¹ и A²⁰ отличаются от Arg, D-Arg или Cit.

А именно, к данному семейству в основном относятся следующие пептиды:

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 67

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 68

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, His⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 69

[СН₃(СН₂)₆СО-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 70

[HOOC(CH₂)₈CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 71

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 72

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 73

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 74

[1-Nac-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 75

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 76

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Amp⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 77

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 78

[СН₃(СН₂)₆СО-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 79

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 80

[HOOC(CH₂)₈CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 81

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 82

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 86

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 87

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 88

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 89

[1-Nac-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 91

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 92

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Cit¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 93

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, His¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 94

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 95

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 96

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 97

[CH₃(CH₂)₈CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 98

[CH₃(CH₂)₁₀CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 99

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹ Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 100

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHMe, пептид 101

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 102

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 103

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 104

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 105

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 106

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 107

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 108

[НООС(СН₂)₁₂СО-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 109

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 110

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 111

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 112

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Tyr(Et)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 113

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 114

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, His⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 115

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 116

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 117

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 118

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 119

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Dip¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 120

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Ala⁸, Amp⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, His¹¹, Orn¹², Abu¹⁵, His²⁰, Orn²¹, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 121

Близкородственные пептиды, которые не описываются вышеприведенной общей структурной формулой, включают:

[CH₃(CH₂)₄CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 2

[HOOC(CH₂)₄CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹ Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 3

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 4

[HOOC(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 5

[CH₃(CH₂)₈CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 6

[HOOC(CH₂)₈CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 7

[CH₃(CH₂)₁₀CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 8

[HOOC(CH₂)₁₀CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 9

[CH₃(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 10

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 11

[CH₃(CH₂)₁₄CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 12

[HOOC(CH₂)₁₄CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 13

[CH₃(CH₂)₆CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, Har²⁸, D-Arg²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 14

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, Har²⁸, D-Arg²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 15

[CH₃(CH₂)₁₄CO-Phe⁰, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 16

[CH₃(CH₂)₁₄CO-D-Phe⁰, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 17

[PhAc-Arg⁰, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 18

[PhAc-D-Arg⁰, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 19

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 21

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Cit⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 22

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, Har²⁸, D-Arg²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 23

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Cit⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, Har²⁸, D-Arg²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 24

[HOOC(CH₂)₁₂CO-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁸, Cit⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 25

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, D-Ala⁸, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 26

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Abu⁸, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 27

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Cit⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, Har²⁸, D-Arg²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 28

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Amp¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 30

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Amp¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 31

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, His¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 32

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Cha¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 33

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tpi¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 34

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, 2-Nal¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 35

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Dip¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 36

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Phe(pNH₂)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 37

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Trp¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 38

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Phe(pNO₂)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 39

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, 3-Pal¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 40

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Et)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 41

[PhAc-His¹, D-Arg², Tyr⁶, Har⁹, Bpa¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 42

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 43

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 44

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 45

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 46

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 47

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 48

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Aib¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 49

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Orn¹², Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 50

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Agm²⁹]hGH-RH(1-29), пептид 51

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Agm²⁹]hGH-RH(1-29), пептид 52

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Har³⁰]hGH-RH(1-30)NH₂, пептид 53

[Dat-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Har³⁰]hGH-RH(1-30)NH₂, пептид 54

[Ipa-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Har³⁰]hGH-RH(1-30)NH₂, пептид 55

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NHEt, пептид 56

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har^a, Tyr(Me), Abu, Nle²⁷, D-Arg²⁸, D-Arg²⁹, Har]hGH-RH(1-30)NH₂, пептид 57

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, D-Arg³⁰]hGH-RH(1-30)NH₂, пептид 58

[Hca-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Agm³⁰]hGH-RH(1-30), пептид 59

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹, Agm³⁰]hGH-RH(1-30), пептид 60

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 62

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Har¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 63

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Amp¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 64

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Cit¹¹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 65

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 84

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Har⁹, Tyr(Me)¹⁰, His¹¹, Abu¹⁵, His²⁰, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 85

[PhAc-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Cit¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 90

Отмечено, что в молекуле природного GH-RH аминокислотные остатки 30-44 не существенны для проявления активности, и их идентификация не является критической. Следовательно, добавление некоторых или всех указанных дополнительных аминокислотных остатков к С-концу аналогов hGH-RH(1-29)NH₂ и hGH-RH(1-30)NH₂ настоящего изобретения не влияет на эффективность данных аналогов как антагонистов GH-RH. Если некоторые или все указанные аминокислоты добавить к С-концу аналогов hGH-RH(1-29)NH₂, добавленные аминокислотные остатки могут быть идентичными остаткам 30-44 нативной последовательности hGH-RH или они могут представлять собой их приемлемые эквиваленты.

Способы синтеза

Синтетические пептиды синтезируют подходящим способом, таким как эксклюзивные твердофазные способы, частичные твердофазные способы, способы фрагментной конденсации или классического синтеза в растворе.

При твердофазном синтезе аналогов данного изобретения C-концевой остаток (в данном случае A²⁹ или A³⁰), у которого защищена альфа-аминогруппа (при необходимости, и функциональная группа боковой цепи тоже), соответствующим образом соединяют с инертным твердым носителем (смолой) (или фиксируют на указанном носителе). После завершения данной стадии удаляют защиту с альфа-аминогруппы фиксированного аминокислотного остатка и добавляют следующий аминокислотный остаток, A²⁸ или A²⁹, соответственно, у которого альфа-аминогруппа защищена подходящим образом (как и любая соответствующая функциональная группа боковой цепи), и так далее. N-концевые защитные группы удаляют после добавления каждого остатка, но защитные группы с боковых цепей пока не удаляют. После того, как все желаемые аминокислоты соединяют в подходящей последовательности, пептид отсоединяют от носителя и удаляют все защитные группы с боковых цепей в условиях, минимально деструктивных по отношению к остаткам в последовательности. Затем проводят осторожную очистку и тщательную характеристику продукта синтеза, чтобы подтвердить, что действительно получена желаемая структура.

Особенно предпочтительно, чтобы в процессе стадии конденсации альфа-аминогруппа аминокислот была защищена чувствительной к кислоте или основанию защитной группой. Такие защитные группы должны быть стабильными в условиях образования пептидной связи, и они должны легко удаляться, не вызывая при этом разрушения растущей пептидной цепи и рацемизации содержащихся в ней хиральных центров. Подходящими защитными группами для аминогруппы являются Boc и Fmoc.

Применение в медицине

Антагонистические пептиды hGH-RH, или соли данных пептидов, могут входить в эффективном количестве в состав фармацевтических лекарственных форм, которые вводят людям или животным с целью лечения или диагностики. Данные пептиды можно использовать для снижения уровней GH и для лечения состояний, связанных с избыточными уровнями GH, таких как диабетическая ретинопатия и нефропатия и акромегалия. Также предлагаются способы лечения указанных заболеваний путем введения композиции данного изобретения субъекту, нуждающемуся в таком лечении. Однако основной областью применения антагонистов GH-RH являются раковые заболевания, например рак легких, простаты, молочной железы, яичников, эндометрия, желудка, прямой кишки, поджелудочной железы, почек, костей и мозга человека, при которых присутствуют рецепторы GH-RH, IGF-I/IGF-II или GH, и которые зависят от стимуляции факторами роста, такими как GH-RH, IGF-I, IGF-II, GH или VEGF.

Подробное описание предпочтительных воплощений

A. Сокращенные наименования

Для определения пептидов используют номенклатуру, установленную Комиссией по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB, в соответствии с традиционными положениями данной номенклатуры, аминогруппа N-конца находится слева, а карбоксильная группа C-конца находится справа. Термин "природная аминокислота" в данном описании обозначает одну из распространенных L-аминокислот, встречающихся в природных белках: Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gln, Cys, Met, Phe, Tyr, Pro, Trp и His. Если остаток природной аминокислоты имеет изомерные формы, то, если не указано иначе, подразумевается L-форма аминокислоты.

В состав антагонистов GH-RH также входят некодируемые аминокислоты, или аналоги аминокислот. (К "некодируемым" относятся аминокислоты, которые не входят в число приблизительно 20 природных аминокислот, встречающихся в природных белках.) Если указанные некодируемые аминокислоты, или аналоги аминокислот, имеют изомерные формы, то, если не указано иначе, подразумевается L-форма аминокислоты.

В данном описании используются следующие сокращения:

Abu	альфа-аминомасляная кислота
Ac	ацетил
AcOH	уксусная кислота
Ac₂O	уксусный ангидрид
Agm	агматин
Aib	альфа-аминоизомасляная кислота
All	аллил
Alloc	аллилоксикарбонил
Amp	пара-амидинофенилаланин
Bpa	пара-бензоилфенилаланин
Boc	трет-бутилоксикарбонил
Bom	бензилоксиметил
2BrZ	2-бромбензилоксикарбонил
Bzl	бензил
Cha	циклогексилаланин
Chg	циклогексилглицин
cHx	циклогексил
Cit	цитруллин (2-амино-5-уреидовалерьяновая кислота)
2ClZ	2-хлорбензилоксикарбонил
Dat	дезаминотирозин
DCM	дихлорметан
DIC	N,N'-диизопропилкарбодиимид
DIEA	диизопропилэтиламин
Dip	(3,3-дифенил)аланин
DMF	диметилформамид
Et	этил
Fm	флуоренилметил
Fmoc	флуоренилметоксикарбонил
For	формил
GH	гормон роста
GH-RH	гормон, высвобождающий GH
Gup	пара-гуанидинфенилаланин
Har	гомоаргинин
HBTU	2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат
Hca	гидроциннамоил
Hca-OH	гидрокоричная кислота
hGH-RH	человеческий GH-RH
HOBt	1-гидроксибензотриазол
HPLC	высокоэффективная жидкостная хроматография
Ibu	изобутирил
IndAc	индол-3-ацетил
Ipa	индол-3-пропионил
MBHA	пара-метилбензгидриламин
Ме	метил
МеОН	метанол
MeCN	ацетонитрил
Nac	нафтилацетил
Nal	нафтилаланин
Nle	норлейцин
NMM	N-метилморфолин
Npr	нафтилпропионил
Orn	орнитин
Pal	пиридилаланин
PAM	фенилацетамидометил
Ph	фенил
PhAc	фенилацетил
PhAc-ОН	фенилуксусная кислота
Phe(pCl)	пара-хлорфенилаланин
Phe(pNH₂)	пара-аминофенилаланин
Phe(pNO₂)	пара-нитрофенилаланин
rGH-RH	крысиный GH-RH
RP-HPLC	ВЭЖХ на обращенной фазе
SPA	пара-сульфонилфеноксиацетил
TFA	трифторуксусная кислота
Tos	пара-толуолсульфонил
Tpi	1,2,3,4-тетрагидронорхарман-3-карбоновая кислота
Tyr(Me)	О-метилтирозин
Tyr(Et)	O-этилтирозин
Z	бензилоксикарбонил

B. Аналоги GH-RH

Аналоги hGH-RH настоящего изобретения получали посредством усиления антагонистических эффектов на гипофизарном уровне и/или на опухолевом уровне. Некоторые из этих аналогов, такие как пептид 4, пептид 7, пептид 21, пептид 30, пептид 31, пептид 37, пептид 41, пептид 42, пептид 62, пептид 67 и пептид 69, проявляют высокую эндокринную антагонистическую активность, вызывая высокоэффективное и длительное ингибирование высвобождения GH, стимулированного hGH-RH(1-29)NH₂, in vitro и in vivo, и обладают высоким связывающим сродством к гипофизарным рецепторам GH-RH. Некоторые аналоги, такие как пептид 4, пептид 5, пептид 7, пептид 11, пептид 22, пептид 35, пептид 36, пептид 39, пептид 41, пептид 62, пептид 67, пептид 69, пептид 70, пептид 72, пептид 76, пептид 77, пептид 79, пептид 80, пептид 86, пептид 95, пептид 96 и пептид 97, обладают повышенной активностью в отношении ингибирования опухолей и очень высоким связывающим сродством к опухолевым рецепторам GH-RH. Пептиды настоящего изобретения также обладают повышенной химической и метаболической стабильностью.

Нижеследующие воплощения являются особенно предпочтительными, так как они обладают значительной биологической активностью:

[СН₃(СН₂)₄СО-Tyr¹, D-Arg², Phe(pCl)⁶, Arg⁹, Abu¹⁵, Nle²⁷, D-Arg²⁸, Har²⁹]hGH-RH(1-29)NH₂, пептид 2