Препарат и способ профилактики и лечения диареи у телят
Владельцы патента RU 2337709:
Всероссийский научно исследовательский институт пантового оленеводства (ВНИИПО) (RU)
Группа изобретений относится к области ветеринарии. Препарат состоит из вирусно-бактериальной поливалентной сыворотки крови против диареи с титром антител 1:300-1:600 и раствора гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л при соотношении сыворотка: гипохлорит натрия 7:3. Дополнительно содержит сывороточный препарат крови маралов в соотношении 2:1, где 2 части - сывороточный препарат крови маралов. Способ заключается в том, что с профилактической целью препарат инъецируют в дозе 4 мл. С лечебной целью препарат вводят внутримышечно в дозе 4-5 мл на 10 кг 2-х или 3-х кратно с интервалом 48 или 48, 72 часа соответственно. Лекарственный препарат и способ его применения позволяют снизить расход гипериммунной сыворотки при сохранении высокой лечебной профилактической эффективности. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл.
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к комплексному биологическому препарату, который может быть использован для профилактики и лечения телят при диарее вирусно-бактериальной этиологии.
Известен препарат и способ профилактики и лечения диареи у телят (См. Патент РФ №2196591, МКИ А61К 33/14 - прототип). Препарат представляет собой смесь раствора гипохлорита натрия с концентрацией 300-350 мг/л и гипериммунной поливалентной сыворотки крови против диареи с титром антител 1:300-1:600 при следующем соотношении компонентов, мас.%: раствор гипохлорита натрия 30-40, гипериммунная поливалентная сыворотка (далее ГПС) - остальное. Способ профилактики и лечения диареи у телят заключается в том, что с целью профилактики препарат инъецируют новорожденным телятам однократно в дозе 3 мл на 10 кг живой массы или задают внутрь за 20-30 минут до первой выпойки молозива в дозе не менее 50 мл на голову, а телятам с массой выше 50 кг в дозе 15-18 мл на голову. С лечебной целью препарат вводят телятам внутримышечно в дозе 3 мл на 10 кг живой массы двух-трехкратно с интервалом 48-72 ч (в зависимости от тяжести процесса), а при тяжелых формах заболевания по 50 мл/гол внутримышечно в сочетании со 150 мл гемодеза один раз в сутки 2-3 дня. Лечебно-профилактический эффект заявленного препарата высок, однако процесс изготовления ГПС, являющейся основной частью препарата, дорогостоящий вследствие его высокой длительности и трудоемкости. Так, в стационарно - благополучных по заразным болезням хозяйствах готовят (на первом этапе) группу животных доноров (продуцентов), предварительно проверенных на инвазированность гельминтами. Лошадей проверяют на сап, трипонозомоз, бруцеллез, туберкулез, пироплазмидозы и инфекционную анемию, крупный рогатый скот на туберкулез, бруцеллез, лептоспироз и лейкоз. Учитываются также физиологические и морфобиохимические показатели. На втором этапе проводят 3-4-5-6-кратную иммунизацию доноров-продуцентов с интервалами по 7 дней в нарастающих дозах с использованием вакцин, содержащих антигены инфекций, которые циркулируют в условиях хозяйств региона. Так, для антигенов сальмонеллеза и колибактериоза, вводят от 3 до 8 доз, а при вирусной диарее вводят от 10 до 30 доз, при этом взятие гипериммунной крови осуществляют на 28, 35, 55 и 65 дни. «Поливалентность» сыворотки обеспечивается включением ассоциации вирусно-бактериальных возбудителей. Количество забираемой крови у крупного рогатого скота 2,5-3 л, лошадей 5 л от одного продуцента. Далее осуществляется сам процесс производства сыворотки (отслаивание, ретракция, отжатие сгустков, центрифугирование, ультрафиолетовая активизация, консервирование и т.д.). Как видно из вышесказанного, длительность и трудоемкость изготовления данного препарата с учетом эпизоотической ситуации хозяйств региона при массовых вспышках заболевания может привести к большим потерям новорожденного поголовья из-за нехватки имеющегося в данный момент препарата. Тем более, что эпизоотическая ситуация не остается постоянной.
Необходима разработка препарата и способа профилактики и лечения диареи у телят, позволяющих снизить расход препарата по прототипу, а конкретнее, дорогостоящей гипериммунной сыворотки при сохранении высокой лечебно-профилактической эффективности.
Указанный технический результат достигается тем, что препарат для профилактики и лечения диареи у телят, включающий гипериммунную бактериальную поливалентную сыворотку (далее ГПС) против диареи с титром антител 1:300-1:600 и раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л при соотношении сыворотка: гипохлорит натрия 7:3 дополнительно содержит сывороточный препарат крови марала (далее СПКМ) в соотношении 2:1, где 2 части - сывороточный препарат крови марала, 1 часть - препарат по прототипу (далее ППП). Способ профилактики и лечения диареи у телят заключается в введении заявленного препарата по схеме: - с профилактической целью препарат вводится внутримышечно из расчета 4 мл на 10 кг живой массы; - с лечебной целью препарат вводится в дозе 4-5 мл на 10 кг живой массы 2-х кратно с интервалом 48 часов, 3-х кратно с интервалом 48 и 72 часа в зависимости от тяжести процесса.
Изготовление опытных партий СПКМ для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят крупного рогатого скота проведено согласно ТУ - 10.07.072-89 (сыворотка крови коров аллогенная иммунная). Содержание белковых фракций в СПКМ приведено в таблице 1.
| Таблица 1 | ||||
| СПКМ для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят | рН | Общий белок, г/л | Белковые фракции, % | |
| Альбумины | Глобулины | |||
| 33,0 | α | β | γ | |
| 7,0 | 55,9 | 12,8 | 20,8 | 33,4 |
Для установления оптимального сочетания препарата по прототипу далее (ППП) с сывороточным препаратом крови марала (СПКМ) были проведены исследования по профилактической эффективности различных сочетаний СПКМ:ППП (1:1; 2:1; 3:1) в дозах на каждое сочетание 15, 20, 25 мл/гол при внутримышечной однократной инъекции на 180 телятах (9 групп) живой массой 50±1,8 кг по 20 голов в группе. Данные опытов отражены в таблице 2.
| Таблица 2 | |||||||||
| Показатели | Профилактическая эффективность при соотношении СПКМ:ППП и дозах, мл/гол | ||||||||
| Опыт 1 | Опыт 2 | Опыт 3 | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 | |
| 1:1 | 2:1 | 3:1 | |||||||
| 15 | 20 | 25 | 15 | 20 | 25 | 15 | 20 | 25 | |
| Заболело, гол % | 9 | 7 | 6 | 7 | 5 | 4 | 8 | 6 | 6 |
| 45 | 35 | 30 | 35 | 25 | 20 | 40 | 30 | 30 | |
| Продолжительность болезни, дней | 4,4 | 4,2 | 2,2 | 3,0 | 2,1 | 2,0 | 3,9 | 3,2 | 3,1 |
| Форма течения болезни %, легкая | 33,3 | 57,1 | 66,7 | 57,1 | 80 | 75 | 62,5 | 66,6 | 66,6 |
| средняя | 33,3 | 28,6 | 16,7 | 28,6 | 20 | 25 | 12,5 | 16,7 | 16,7 |
| тяжелая | 33,3 | 14,3 | 16,7 | 14,3 | - | - | 25 | 16,7 | 16,7 |
| Пало телят, гол | 3 | 2 | - | 2 | - | - | 3 | 2 | 1 |
| Сохранность, % | 85 | 90 | 100 | 90 | 100 | 100 | 85 | 90 | 95 |
| Среднесуточный прирост, (г) за 30 дней после курса лечения | 342,4 | 360,8 | 401,1 | 370,8 | 418,6 | 420,4 | 351,7 | 379,9 | 393,5 |
| Содержание СПКМ в дозе, мл | 7,5 | 10 | 12,5 | 9,9 | 13,3 | 16,7 | 11,2 | 15,0 | 18,7 |
| Содержание гипериммунной поливалентной сыворотки (ГПС) в дозе, мл | 5,2 | 7 | 8,7 | 3,6 | 4,7 | 5,8 | 2,6 | 3,5 | 4,3 |
| Соотношение СПКМ:ГПС в дозе | 1,4 | 1,4 | 1,4 | 2,8 | 2,8 | 2,8 | 4,3 | 4,3 | 4,3 |
Для профилактики диареи при использовании препарата по прототипу (ППП) доза данного препарата на животное с массой 50 кг составляет (50:10·3)-15 мл, при этом 70% этой дозы (согласно прототипу) приходится на гипериммунную поливалентную сыворотку (ГПС), что составляет 10,5 мл. При соотношении СПКМ:ППП 1:1 содержание ГПС в дозе 15 мл - 5,2 мл, СПКМ - 7,5 мл в дозе 20 мл - 7 и 10, в дозе 25 мл 8,7 и 12 мл соответственно. Аналогично рассчитаны и внесены в таблицу данные по содержанию ГПС и СПКМ при других соотношениях СПКМ:ППП (2:1 и 3:1) при дозах 15, 20, 25 мл/гол, (содержание гипохлорита не указано).
Как видно из таблицы 2, в первом опыте (соотношение СПКМ:ППП 1:1) содержание СПКМ во всех дозах было в 1,4 раза выше содержания ГПС. Из опыта видно, что снижение содержания ГПС с 10,5 мл до 5,2 мл (в дозе 15 мл), до 7 мл (в дозе 20 мл) не восполнило эффективности введением 7,5 и 10 мл СПКМ. Сохранность телят составила 85 и 90% при наличии всех трех форм течения болезни и низких привесах. Однако количественный набор составляющих при дозе 25 мл (12,5 мл СПКМ и 8,7 мл ГПС) обеспечил 100%-ную сохранность животных с более высокими среднесуточными привесами.
Превышение содержания СПКМ над содержанием ГПС в лекарственном препарате в 4,3 раза (опыт 3, соотношение СПКМ:ППП 3:1) снизило (видимо из-за явной нехватки ГПС) профилактическую эффективность при использовании всех трех доз (15, 20, 25 мл). Так в опыте наблюдались все три формы течения болезни, что повлияло в дальнейшем на среднесуточные привесы (351,7-393,5 г), сохранность даже при дозе 25 мл была на уровне 95%.
Во втором опыте (соотношение СПКМ:ППП 2:1) при повышении в дозах содержания СПКМ над содержанием ГПС в 2,8 раза обеспечило высокую профилактическую эффективность при дозах 20 и 25 мл, при этом показатели эффективности были очень близки. Расход ГПС при этом был на уровне 4,7 и 5,8 мл. Среднесуточные привесы 418,6 и 420,4 г, соответственно.
Таким образом, высокая профилактическая эффективность при проведении данных исследований наблюдалось в трех случаях: при соотношении СПКМ:ППП 1:1 и дозе 25 мл (расход ГПС - 8,7 мл), при соотношении СПКМ:ППП 2:1 и дозе 20 мл (расход ГПС 4,7 мл) и дозе 25 мл (расход ГПС 5,8 мл), что выше предыдущего расхода ГПС на 23,4%. Исходя из поставленной задачи по снижению расхода дорогостоящей ГПС для профилактики диареи у телят, путем замены части гипериммунной поливалентной сыворотки (ГПС) на сывороточный препарат крови маралов (СПКМ) оптимальной следует считать дозу 20 мл смеси этих препаратов при соотношении СПКМ:ППП 2:1. Экономия сыворотки (ГПС) составляет 55,6%. Заявленный препарат при соотношении СПКМ:ППП 2:1 содержит 66,5% сывороточного препарата крови марала, 23,5% гипериммунной поливалентной сыворотки и 10% гипохлорита натрия, т.е. 2/3 части препарата по прототипу заменяются на сыворотку крови марала при высокой эффективности. Из расчета того, что на 50 кг живого веса оптимальной для профилактики диареи явилась доза заявленного препарата 20 мл, на 10 кг живого веса следует вводить 4 мл препарата. Опыт на группе (56 голов) с живой массой 28-30 кг при однократной инъекции заявленного препарата в количестве 12 мл на голову (30/10·4) подтвердил высокую профилактическую эффективность препарата (при 12,5% заболевших сохранность была на уровне 98,2%).
Для исследования лечебной эффективности заявленного препарата и способа лечения было сформировано 7 групп больных животных при тяжелой форме течения диареи (вес животных 28-33 кг). Первую и вторую группу больных телят лечили заявленным препаратом в дозе 12 мл (30/10·4) при: 2-х кратной инъекции через 48 часов (1 группа), 2 группа с 3-х кратной инъекцией с интервалом 48 и 72 часа от начала лечения.
Лечение 3 и 4 групп проводили заявленным препаратом в дозе 15 мл (30/10·5), т.е. 5 мл на 10 кг живого веса с аналогичной кратностью и интервалами инъецирования.
Пятая и шестая группы были подвергнуты лечению препаратом, состоящим из 2 частей сывороточного препарата крови крупного рогатого скота, далее (СПК КРС), полученного по аналогичной методике изготовления сывороточного препарата крови марала (ТУ - 10.07.072-89) и 1 части препарата по прототипу (ППП) в дозе 5 мл на 10 кг живой массы при 2-х и 3-х кратном введении. Седьмая группа подвергалась лечению по прототипу.
Результаты лечебной эффективности по данному опыту отражены в таблице 3.
| Таблица 3 | ||||||||
| № п/п | Показатели | Группы, препараты | ||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | ||
| СПКМ:ППП 2:1 | СПККРС:ППП 2:1 | Препарат по прототипу | ||||||
| Способ введения препарата | Внутримышечное введение | |||||||
| 1 | Количество животных, гол | 70 | 70 | 130 | 130 | 56 | 56 | 60 |
| 2 | Живая масса подопытных телят, кг | 30±2 | 31±3,5 | 30±1 | 32±1 | |||
| Доза препарата (мл на 10 кг живой массы) | 4 | 5 | 5 | 3 | ||||
| 2-х кратно через 48 часов | 3-х кратно через 48 и 72 часа | 2-х кратно через 48 часов | 3-х кратно через 48 и 72 часа | 2-х кратно через 48 часа | 3-х кратно через 48 и 72 часа | 2-х кратно через 48 часов | ||
| Средняя продолжительность болезни, дней | 2,5 | 2,4 | 2,5 | 2,5 | 8,4 | 7,1 | 2,5 | |
| Пало, гол | 2 | 2 | 4 | 3 | 18 | 15 | 3 | |
| Сохранность, % | 97,1 | 97,1 | 96,9 | 97,6 | 67,8 | 73,2 | 95,0 | |
| Среднесуточный прирост живой массы телят на 30 сутки после курса лечения, г | 419,8 | 424,4 | 426,1 | 431,6 | 312,8 | 334,3 | 400,7 |
Как видно из таблицы 3, лечебная эффективность заявленного препарата в дозах 4 и 5 мл при 2-х и 3-х кратных инъекциях достоверно не различалась и была недостоверно выше ее параметров при лечении препаратом по прототипу, и значительно выше по всем параметрам по сравнению с лечением при использовании вместо сывороточного препарата крови марала (СПКМ) сывороточного препарата крови крупного рогатого скота (СПК КРС) (сохранность выше на 30%, продолжительность болезни сократилась в 3 раза, увеличение привесов на 24%). Следует отметить так же, что использование СПКМ в составе заявленного препарата повлияло на рост привесов по сравнению с прототипом в среднем от 4,8 до 7,7%.
Возможность использования сывороточного препарата крови марала в составе лекарственного препарата по прототипу с высокой профилактической и лечебной эффективностью, на наш взгляд, связана со значительной биологической активностью крови марала. Так на иммунокомпетентную систему животного влияет состояние крови пантовых оленей, содержащей различные биологические вещества, ферменты, гормоны, белки, фосфолипиды, витамины, минеральные соли, что делает ее сырьем для приготовления различных лекарственных препаратов. Для оценки действия этих препаратов немаловажное значение имеет морфобиохимический состав крови маралов, так в 1 мл крови содержится эритроцитов - 10,2·1012/л, лейкоцитов - 6,7·109/л, гемоглобина - 165 г/л, общего белка - 8,75 г/л, альбуминов - 48,6%, альфа - глобулинов 14,7%, бета - глобулинов - 14,5%, гамма - глобулинов - 22,2%, резервная щелочность составляет 53,9 об.%/CO2.
Организм маралов имеет некоторые особенности, связанные со спецификой обитания вида и физиологии, которые обуславливают необычно высокие концентрации в крови композиций биологически активных веществ, не встречающихся у других животных. Общепризнано, что пантовая продукция, полученная от маралов, обладает мощным адаптогенным и иммуномодулирующим эффектом.
Эффективность использования заявленного препарата подтверждают морфобиохимическими показателями крови (отраженными в таблице 4) телят на фоне профилактического и лечебного его применения.
Анализируя данные таблицы 4, после применения заявленного препарата с целью профилактики диареи у телят отмечено значительное увеличение эритроцитов на 45,5%, гемоглобина - 7%, общего количества белка 11%, белковой фракции гамма - глобулинов на 29%, по сравнению с исходными данными.
Все это свидетельствует об активации обменных процессов в организме животных.
| Таблица 4 | ||||
| № п/п | Показатели | Группы | ||
| 2 опыт 2, профилактика (таблица 2) | 2 лечебная (таблица 3) | 7 лечебная по прототипу (таблица 3) | ||
| Исходные данные (данные через 14 дней) | ||||
| 1 | Общий белок, г/л | 56,9±1,8 | 54,6±2,2 | 55,8±1,8 |
| 63,0±1,5 | 62,4±1,8 | 61,6±1,2 | ||
| 2 | Гамма - глобулин, % | 28,6±0,3 | 13,6±1,1 | 13,2±0,8 |
| 37,0±0,32 | 31,7±0,9 | 22,5±0,3 | ||
| 3 | Гемоглобин, г/л | 89,6±1,5 | 58,7±3,8 | 56,2±4,4 |
| 96,0±0,45 | 88,5±2,5 | 88,6±3,1 | ||
| 4 | Метгемоглобин, % | 22,6±1,4 | 44,4±0,6 | 44,4±0,5 |
| 4,9±0,6 | 9,6±0,4 | 9,8±0,3 | ||
| 5 | Эритроциты, 1012/л | 5,91±0,6 | 6,0±0,3 | 6,2±0,5 |
| 8,6±0,4 | 7,2±0,2 | 6,8±0,7 | ||
| 6 | Лейкоциты, 109/л | 7,36±0,4 | 12,9±0,3 | 13,3±0,3 |
| 8,1±0,4 | 9,6±0,3 | 9,4±0,2 | ||
| 7 | Резервная щелочность, об.% CO2 | 48,5±1,5 | 41,8±6,4 | 41,6±5,2 |
| 54,0±1,7 | 54,5±1,5 | 53,4±4,8 |
На основании результатов клинического испытания заявленного препарата для лечения диареи у телят в сравнительном аспекте с прототипом отмечены незначительные изменения морфобиохимических показателей крови на 14 день после лечения, общего количества белка на 1,3%, резервной щелочности 2,1%, эритроцитов на 5,6%, что говорит о высокой эффективности заявленного препарата. При этом отмечен значительный рост гамма-глобулинов 29%, что еще раз подтверждает иммуностимулирующее действие СПКМ.
Пример. Препарат по прототипу для профилактики лечения диареи у телят получали согласно описанию изобретения по прототипу. Сывороточный препарат крови марала по ТУ - 10.07.072-89. После объединения препаратов в соотношении 2:1 (где 2 части - сывороточный препарат крови марала и 1 часть препарат по прототипу) заявленный препарат фасуют по стерильным флаконам емкостью 50, 100, 250, 500 мл. Обязательным считается контроль за качеством препарата, который осуществляется на всех стадиях его приготовления. Каждая серия проверяется на ее физические качества (цвет, консистенция, стерильность, безвредность). Проводят контроль препарата на содержание общего белка, гамма - глобулинов и на апирогенность. Телятам с профилактической целью внутримышечно, однократно вводят препарат в дозе 4 мл на 10 кг живой массы, с лечебной целью 4-5 мл 2-х кратно с интервалом 48 часов или 3-х кратно с интервалом 48 часов (между первой и второй инъекцией) и 72 часа (между второй и третьей инъекцией) в зависимости от тяжести заболевания.
Таким образом, заявленный препарат является высокоэффективным средством для профилактики и лечения диареи у молодняка крупного рогатого скота по эффективности на уровне прототипа и выше.
Использование препарата позволяет сократить расход гипериммунной поливалентной сыворотки на 55,6%. Так, телятам весом 30 кг доза внутримышечной инъекции препарат по прототипу составляет (30/10·3 мл) = 9 мл, в данной дозе содержится 70% ГПС и 30% гипохлорита натрия, т.е. содержание ГПС составляет 6,3 мл. Доза заявленного препарата из расчета 4 мл на 10 кг живой массы равна (30/10·4 мл) = 12 мл. Из расчета сочетания СПКМ:ППП 2:1 в 12 мл заявленного препарата содержится 8 мл СПКМ и 4 мл ППП (препарата по прототипу), в 4 мл ППП (из расчета содержания в ней 70% ГПС) находится 2,8 мл ГПС, что составляет 44,4% от 6,3 мл ГПС, расходуемой по прототипу. Экономия ГПС в таком случае равна 55,6%. Кроме этого у телят, подвергнутых профилактическому и лечебному воздействию заявленным препаратом, практически отсутствовали респираторные заболевания по сравнению с телятами, не задействованными в опыте и находящимися в тех же условиях, что и опытные. Вследствие чего данный препарат можно рекомендовать в качестве профилактического и лечебного средства при респираторных заболевании ях телят в тех же дозах, что и при лечении диареи.
1. Препарат для профилактики и лечения диареи у телят, включающий гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку крови против диареи с титром антител 1:300-1:600 и раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л при соотношении сыворотка: гипохлорит натрия 7:3, отличающийся тем, что дополнительно содержит сывороточный препарат крови маралов в соотношении 2:1, где 2 части - сывороточный препарат крови маралов.
2. Способ профилактики и лечения диареи у телят, включающий введение биологически активного заявленного препарата, отличающийся тем, что в качестве биологически активного препарата телятам вводят препарат по п.1 в эффективном количестве.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что с профилактической целью заявленный препарат инъецируют в дозе 4 мл на 10 кг живой массы.
4. Способ по п.2, отличающийся тем, что с лечебной целью препарат вводят телятам внутримышечно в дозе 4-5 мл на 10 кг живой массы 2-х или 3-х кратно в зависимости от тяжести болезни с интервалом 48 или 48, 72 ч соответственно.
