Пептидный экстракт плаценты и способ его изготовления

Изобретение относится к области лекарственных и косметических препаратов и может быть использовано для изготовления экстракта плаценты. Предложен пептидный экстракт плаценты, содержащий белки, при получении которого используют тритон X100 и полиглюкин, при этом экстракт содержит 5,0-35,0 мг/мл белка, 2,0-5,0 мг/мл гликопротеинов и 0,5-1,0 мг/мл тритона X100. Предложен способ изготовления пептидного экстракта плаценты, включающий измельчение плаценты, экстракцию биологического материала солевым раствором, нагревание, центрифугирование, отделение осадка и последующую очистку экстракта фильтрованием, при этом перед измельчением предварительно замороженную плаценту оттаивают, заливают фосфатным буферным раствором, в полученный гомогенат добавляют тритон Х100, перемешивают, выдерживают 3 часа при 4°С, центрифугируют при 15000g при 4°С, затем к экстракту добавляют активированный уголь и полиглюкин, перемешивают, нагревают при непрерывном перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, после чего прекращают перемешивание, охлаждают до +4°С, отделяют осадок, а экстракт, содержащий целевой продукт, перед фильтрованием центрифугируют. Изобретение обеспечивает расширение области применения. 2 н.п. ф-лы.

 

Изобретение относится к области лекарственных и косметических препаратов и может быть использовано для изготовления экстракта плаценты.

Известен препарат, представляющий собой пептидный комплекс с гиалуроновой кислотой и глиозоаминогликанами [Серия препаратов «Плазан». Изготовитель ООО НПП «Жеспар-Биос», г.Уфа, сайт www.plazan.ru].

Недостатком известного препарата является то, что он является гормональным. Это ограничивает его применение.

Наиболее близким по сущности к предлагаемому является пептидный экстракт плаценты, содержащий белки, нуклеиновые кислоты, аминокислоты, витамины, минералы и ферменты [Серия препаратов «Плацентоль». МНПК Биотхиндустрия. Москва, www.placentol.ru].

Недостатком наиболее близкого решения также является ограниченная область применения, вызванный тем, что препарат является гормональным.

Требуемым результатом относительно лекарственного препарата является расширение области применения.

Требуемый результат относительно лекарственного препарата достигается тем, что при получении экстракта плаценты, содержащего белки, используют тритон X100 и полиглюкин, при этом экстракт содержит 5,0-35,0 мг/мл белка, 2,0-5,0 мг/мл гликопротеинов и 0,5-1,0 мг/мл тритона Х100.

Известны также способы изготовления биологически активных продуктов и лекарственных препаратов.

Известен способ, основанный на экстракции биологического материала путем выделения ядер Drosophila melanogaster, где используется Triton Х-100 с конечной концентрацией 0,1% [Drosophila. A practical approach. Edited by D.B.Roberts. Oxford. England. 1986, p.282].

Этот способ позволяет при дальнейшей экстрагировании получить отдельные фракции белков, полисахаридов и нуклеопротеидов, но имеет ограниченное применение, поскольку не позволяет гарантированно получить безгармональные лекарственные препараты.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ получения пептидного экстракта плаценты, включающий измельчение плаценты, экстракцию биологического материала солевым раствором, нагревание, центрифугирование, отделение осадка и последующую очистку экстракта фильтрованием [US 4054648 А, 18.10.1977].

Недостатком наиболее близкого способа является его относительно узкая область применения, поскольку он не может быть использован для изготовления безгармонального лекарственного препарата

Требуемым результатом относительно способа является расширение области применения за счет обеспечения возможности изготовления безгормонального препарата.

Требуемый результат достигается тем, что по способу, включающему измельчение плаценты, экстракцию биологического материала солевым раствором, нагревание, центрифугирование, отделение осадка и последующую очистку экстракта фильтрованием, перед измельчением предварительно замороженную плаценту оттаивают, заливают фосфатным буферным раствором, в полученный гомогенат добавляют тритон X100, перемешивают, выдерживают 3 часа при +4°С, центрифугируют при 15000g при +4°С, затем к экстракту добавляют активированный уголь и полиглюкин, перемешивают, нагревают до +40…+45°С при непрерывном перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, после чего прекращают перемешивание, охлаждают до +4°С, отделяют осадок, а экстракт, содержащий целевой продукт, перед фильтрованием центрифугируют при 15000g в течение 30 минут при комнатной температуре.

Приведем пример реализации предложенного способа для частного случая получения лекарственного препарата пептидного экстракта плаценты из 10 предварительно законсервированных плацент:

- следует взять 10 плацент, законсервированных при температуре -20°С, и оттаить их при комнатной температуре в течение примерно 8 часов;

- после оттаивания измельчить плаценты и полученную массу разделить на 10 равных частей;

- каждую часть перенести в сосуд (емкостью от 2-х литров) и залить 1200 мл фосфатного буфера (+4°С) (10 мМ Na-фосфатный буфер рН 7.0, 1 мМ ЭДТА);

- в полученный гомогенизат следует добавить 5.5 мл Triton X-100, тщательно перемешать и выдержать 3 часа при +4°С;

- после выдержки полученную смесь следует центрифугировать 15 минут со скоростью 9000 об/сек (15000g) при той же температуре +4°С;

- полученный пептидный экстракт следует слить в отдельную емкость (объемом, например, по 5 л);

- если экстракт не будет обрабатываться сразу, то его следует хранить при -20°С;

- следующая операция направлена на чистку экстракта от прогестерона, для чего необходимо взвесить навеску активированного угля, например ОУ-Б весом 300 г, и залить 600 миллилитрами полиглюкина (m.v.60000-80000) с последующим перемешиванием полученной смеси в течение 3-х часов при одновременном размораживании экстракта (если он предварительно был заморожен), который вместе со смесью следует перелить в термостойкую емкость и нагреть до 42°С при непрерывном помешивании;

- после нагрева полученную смесь с экстрактом следует продолжать помешивать при естественном снижении температуры до комнатной в течение 4-х часов с дальнейшем охлаждением до +4°С и выдержкой при этой температуре в течение 8-ми часов;

- далее экстракт следует снять с осадка и центрифугировать в режиме 9.000 об/сек (15000g) в течение 30 минут при комнатной температуре;

- окончательную очистку экстракт следует производить, фильтруя его через 0.45 мкм обеспложивающий фильтр.

Для дальнейшего использования в профильтрованный экстракт следует добавить консервант, например KatonCG - конечная концентрация 0.05% (при использовании в несмываемой косметике) или 0.1% (смываемая косметика).

В физиологических концентрациях в профильтрованном экстракте содержание белка составляет 5.0-35,0 мг/мл, гликопротеинов - 2,0-5,0 мг/мл, тритона Х100 - 0,5-1,0 мг/мл. Такой экстракт оказывает ярко выраженное биологическое действие и является не аллергенным.

Возможно несколько методов применения пептидного экстракта плаценты.

Один из рекомендуемых и проверенных методов заключается в следующем.

1. Нанесите на ватный тампон 3-7 капель пептидного экстракта плаценты, протрите выбранный участок лица.

2. Добавьте до 5% пептидного экстракта плаценты в обычно используемую косметику (крем, бальзам, шампунь и т.д.) и размешайте до однородной массы.

3. Разведите в прохладной кипяченой воде в соотношении 3 части пептидного экстракта плаценты на одну часть воды и наносите на корни волос или протрите проблемные участки кожи с помощью ватного тампона.

В результате проведенных исследований пептидного экстракта плаценты было выявлено, что пептидный экстракт плаценты усиливает периферическую циркуляцию крови и улучшает кровоснабжение волосяных фолликулов, активизирует клеточное дыхание, нормализует выработку кожного сала. Аллергизирующего и сенсибилизирующего действия пептидного экстракта плаценты не выявлено.

1. Пептидный экстракт плаценты, содержащий белки, отличающийся тем, что при получении экстракта используют тритон X100 и полиглюкин, при этом экстракт содержит 5,0-35,0 мг/мл белка, 2,0-5,0 мг/мл гликопротеинов и 0,5-1,0 мг/мл тритона Х100.

2. Способ изготовления пептидного экстракта плаценты, включающий измельчение плаценты, экстракцию биологического материала солевым раствором, нагревание, центрифугирование, отделение осадка и последующую очистку экстракта фильтрованием, отличающийся тем, что перед измельчением предварительно замороженную плаценту оттаивают, заливают фосфатным буферным раствором, в полученный гомогенат добавляют тритон Х 100, перемешивают, выдерживают 3 ч при 4°С, центрифугируют при 15000g при 4°С, затем к экстракту добавляют активированный уголь и полиглюкин, перемешивают, нагревают до 40-45°С при непрерывном перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, после чего прекращают перемешивание, охлаждают до +4°С, отделяют осадок, а экстракт, содержащий целевой продукт, перед фильтрованием центрифугируют при 15000g в течение 30 мин при комнатной температуре.