Способ повышения противоопухолевого эффекта химиотерапии

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и касается повышения противоопухолевого эффекта химиотерапии. Для этого введение противоопухолевого препарата чередуют по дням с введением озонированного физиологического раствора с концентрацией озона в озон-кислородной смеси 0,2 мг/л и скоростью газотока 0,5 л/мин, общим курсом 10 дней. Введение физиологического раствора с такими характеристиками в разработанном режиме позволяет значительно повысить эффективность противоопухолевой химиотерапии. 4 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии, а именно экспериментальной онкологии, и может использоваться в ветеринарной практике для лечения злокачественных новообразований. В перспективе (после проведения соответствующих доклинических и клинических исследований) возможно использование способа в клинике онкологических заболеваний.

Цитостатическая терапия до настоящего времени остается одним из основных методов лечения злокачественных новообразований [23, 25, 31].

Препараты, оказывающие цитостатический эффект, применяются как в режимах моно-, полихимиотерапии [4, 6, 8, 17, 18, 19, 22, 26, 30, 34, 36], так и в сочетании с облучением организма [5].

Известен способ повышения противоопухолевой активности химиопрепаратов за счет блокирования малыми дозами авермектинов или их комплексов в условиях in vitro в концентрациях 0,01-10 нг/мл и в условиях in vivo в дозах от 0,01 до 1 мг/кг выхода химиопрепаратов из опухолевых клеток [20].

Известен способ повышения противоопухолевого действия циклофосфана, для этого лабораторным животным с индуцированной опухолью каждые три дня внутрибрюшинно вводят индометацин суммарной дозой 6 мг, после чего в селезенку по оригинальной методике в рамках изобретения вводят циклофосфан в общетерапевтических дозах [7].

Высокий опухолетоксический эффект достигается при введении максимально переносимых доз противоопухолевых препаратов [25]. При этом многие пациенты получают неоправданно большую цитостатическую нагрузку [3]. Такая агрессивная противоопухолевая химиотерапия, как правило, приводит к повреждению быстро обновляющихся клеточных систем (эпителия полости рта и желудочно-кишечного тракта, волосяных фолликулов, репродуктивных органов, кроветворной ткани и т.д.) [25]. Однако снижение дозы препарата, наряду со снижением токсических эффектов, может вызывать также и снижение терапевтического эффекта.

Терапевтический индекс, который определяется отношением эффективности лечения противоопухолевыми препаратами к токсическому действию данных веществ на организм [25], пытаются повысить с помощью модификаторов, воздействующих как на опухолевые клетки, так и на регуляторные системы организма [25, 21, 24, 29, 32, 35]. В настоящее время в клинической практике используются следующие препараты группы модификаторов биологических реакций: цитокины (интерфероны и интерлейкины) и неспецифические иммуномодуляторы, а также бисфосфонаты [25]. Кроме того, в качестве модификаторов химиотерапии используются методы оксигенации опухолевой ткани [12, 13, 14]. В ряде работ показано антибластомное действие активных форм кислорода (АФК). J.Mo с соавторами (1998) показали усиление противоопухолевого эффекта супероксидгенерирующих агентов угнетением СОД в опухолевых клетках [42]. G.Lenaz и соавторы (1998) обрабатывали в течение 24-72 ч клетки нейробластомы водорастворимым инициатором радикалов азотсоединением (2-амидинопропан гидрохлорид), вызывая значительное увеличение АФК. При этом они установили усиление липидной пероксидации и апоптоз после 24 ч, значительно увеличивающийся к 48-72 ч [41]. К. Фукузава и соавторы (2004) обнаружили, что внутривенное введение везикулы сукцината α-токоферола, который усиливает образование оксида азота и супероксида, полностью подавляло рост клеток меланомы B16-F1, привитой на мышей, и увеличивало их продолжительность жизни [33]. Н.Ф. Шор с соавторами (2004) применяли для лечения нейробластомы генератор радикалов кислорода 6-гидроксидопамин совместно с избирательным антиоксидантом нормальных клеток 4-гидрокси-2,2,6,6,-тетераметилпиперидин-Н-оксилом [37].

Принцип фотодинамической терапии злокачественных новообразований также основан на избирательном торможении опухолевого роста с участием АФК за счет развития фотохимической реакции при локальной активации лазерным излучением накопившегося в опухоли фотосенсибилизатора [16]. Известен способ тепловой деструкции раковых клеток посредством воздействия на патологически измененный участок биоткани лазерным излучением с плотностью мощности 0,5-2 Вт/см², с длиной волны (1,264±0,01) мкм и с частотой следования импульсов (22,5±1) кГц [11].

Таким образом, известные противоопухолевые физико-химические воздействия направлены на изменение кислородного, свободнорадикального гомеостаза. На наш взгляд, озонотерапия - один из методов окислительной терапии, при котором в качестве источника АФК применяется озон (трехатомная аллотропная модификация кислорода, окислительная способность которого, обусловленная полярным строением его химической молекулы, обеспечивает высокую реакционную способность) - наиболее физиологический, эффективный и доступный метод, позволяющий воздействовать на свободнорадикальные процессы.

Так, в культурах клеток рака кожи in vitro в результате применения озона была достигнута сенсибилизация к воздействию ионизирующего излучения (1999). Собственные исследования, выполненные на нелинейных крысах с перевивными штаммами саркома-45 и лимфосаркома Плисса, выявили, что озон в высоких концентрациях порядка 5 мг/л при локальном введении обладает антиканцерогенным действием (1996) [40], а в комбинированном использовании с ионизирующим излучением повышает эффективность противоопухолевой терапии (2000) [39].

Ценкер и сотрудники доказали синергетичное действие озона и химиотерапевтического препарата 5-фторурацила на клеточные культуры рака толстой кишки и рака молочной железы [27]. В данной работе также использовались высокие концентрации озона.

В ряде клинических работ показано применение озона в составе комплексного и комбинированного лечения злокачественных новообразований. Так, в наших совместных работах 2000 г. [38] и в работах наших коллег в 2005 г. [9] показано, что применение внутривенных инфузий озонированного физиологического раствора с концентрацией озона 1,5 мг/л оказывает регулирующее действие на этапе подготовки к проведению общей управляемой гипертермии с полихимиотерапией и позволяет уменьшить дисбаланс клеток в постгипертермическом периоде [9, 15].

Гречканевым Г.О. показано применение ректальных инсуфляций озонокислородной смеси (1-2 мг/л) в лечении больных раком яичников ежедневно в течение 3-5 дней после введения химиопрепаратов, что позволило уменьшить токсические эффекты цитостатиков [10].

Алясовой А.В. с соавторами в 2004 г. показано, что использование ОФР в лечении больных раком молочной железы достоверно снижало проявления эндогенной интоксикации на фоне полихимиотерапии [2].

Таким образом, в известных клинических работах использование озона в составе противоопухолевой терапии направлено на снижение токсических проявлений химиотерапии, именно поэтому его вводят после курса химиопрепаратов.

В известных же экспериментальных работах озон, как правило, применяется в высоких концентрациях порядка 10 мг/л в основном. Действие его исследовалось только на культурах клеток.

Работ по использованию озона во время проведения цитотоксической терапии как средства, усиливающего противоопухолевую активность, не было обнаружено.

В связи с этим в качестве прототипа наиболее близкий по технической сущности (введение во время курса химиотерапии средства, усиливающего действие противоопухолевого химиопрепарата) и по достигаемому эффекту (торможение роста опухоли) нами выбран известный способ усиления эффективности действия противоопухолевого химиопрепарата, включающий введение противоопухолевого лекарственного средства, а также средства, усиливающего действие противоопухолевого препарата (патент Ru №2112983 С1. Способ усиления эффективности действия противоопухолевого химиопрепарата. G01 N33/48, А61К 31/00).

В способе-прототипе проводят курс химиотерапии с использованием противоопухолевого препарата, определяют время достижения максимальной концентрации препарата в крови при введении его в организм и с учетом этого времени воздействуют на организм фактором лимфостимуляции, в качестве которого используют или гипоксию, или гипербарическую оксигенацию (ГБО), или даларгин, или реополиглюкин.

К недостаткам способа-прототипа относится определенная трудоемкость и сложность (необходимо предварительное исследование динамики концентрации препарата в крови, введение дополнительного средства в строго определенное время; сложность, трудоемкость и дороговизна выполнения процедур ГБО), а также недостаточная эффективность.

В задачу предлагаемого изобретения положено прежде всего расширение арсенала средств усиления эффективности действия противоопухолевых препаратов, а также упрощение способа и повышение его эффективности.

Поставленная задача достигается тем, что что введение противоопухолевого препарата чередуют по дням с введением озонированного физиологического раствора с концентрацией озона в озон-кислородной смеси 0,2 мг/л и скоростью газотока 0,5 л/мин, общим курсом 10 дней.

Необходимость использования озона в концентрации 0,2 мг/л обоснована ранее установленным нами дозозависимым эффектом действия озонированного физиологического раствора на организм животных-опухоленосителей [1].

Необходимость использования скорости газотока 0,5 л/мин обоснована нами при анализе способов и методов введения озона [1].

Продолжительность общего курса 10 дней обоснована нами при анализе способов и методов озонотерапии [1].

Разовые дозы противоопухолевых препаратов выбирались с учетом Рекомендаций по доклиническому изучению новых фармакологических веществ [28].

В перспективе способ может использоваться в клинике.

Эксперимент выполнен на 50 белых беспородных крысах, которые были разделены на три группы: контрольная, опытная 1 и опытная 2.

1 группа - контрольная (10 крыс с гепатомой 27);

2 группа - опытная 1 (10 крыс с гепатомой 27, получавшие курс 5-фторурацила);

3 группа - опытная 2 (10 крыс с гепатомой 27, получавшие 5-фторурацил и озонированный физиологический раствор);

4 группа - опытная 3 (10 крыс с гепатомой 27, получавшие курс циклофосфана);

5 группа - опытная 4 (10 крыс с гепатомой 27, получавшие циклофосфан и озонированный физиологический раствор).

Воздействия на животных контрольной и опытных групп начинали на 9 сутки после трансплантации опухоли. Животные контрольной группы получали инъекции физиологического раствора - 0,3 мл внутрибрюшинно 5 раз через день. Для животных обеих опытных групп была использована курсовая схема введения препарата - по 10 мг/кг веса внутримышечно, 5 воздействий через день [45]. Животные опытной группы «5-ФУ+ОФР» дополнительно получали ОФР (5 инъекций через день) таким образом, что введение озона чередовалось с введением химиопрепарата.

Концентрация озона в озон-кислородной смеси составила 0,2 мг/л, скорость газотока 0,5 л/мин (озонатор АОТ-НСК-01-«С (А-16)», РФЯЦ-ВНИИЭФ, Саров).

Оценку противоопухолевого эффекта химиопрепарата и его комплекса с ОФР осуществляли по проценту торможения роста опухоли [28].

Степень ингибирования роста опухоли определяли по показателю торможения роста опухоли (ТРО), вычисляемого по формуле [28]:

ТРО = (Vконтроля - Vопыта)/Vконтроля · 100%,

где V - средний объем опухоли (мм³) в подопытной и контрольной группах соответственно на конкретный срок.

Количественные критерии оценки ингибирующего эффекта

ТРО≤20%	0
ТРО≤20-50%	+-
ТРО≤51-80%	+
ТРО≤81-90%	++

В соответствии с литературными данными достоверным считается 40%-ное торможение роста опухоли при условии, что введение препаратов было начато на ранних этапах опухоленосительства. Необходимо отметить, что в данном исследовании результат был получен на 19-м дне роста гепатомы 27, что соответствует позднему сроку развития опухоли в организме, а вес опухоли в пересчете на вес тела человека (70 кг) составляет 550 г. В связи с чем полученные данные демонстрируют высокую опухолетоксическую эффективность озона.

При статистической обработке результатов для оценки значимости цифровых данных использовали t-критерий Стьюдента, используя поправку Бонферонни.

Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1
Торможение роста гепатомы 27 на фоне комплексного введения химиопрепаратов и озонированного физиологического раствора
Группы животных	ТРО, %
опытная 1	31,5%
опытная 2	53,5%
опытная 3	30,0%
опытная 4	65,8%
- различия достоверны при р≤0,05 по сравнению с контрольной группой.

Таким образом, полученные результаты показали, что комплексное введение 5-фторурацила в дозе 10 мг/кг веса внутримышечно и озонированного физиологического раствора по 0,3 мл внутрибрюшинно крысам с перевитой гепатомой 27 общим курсом 10 дней тормозит рост гепатомы 27 в среднем на 53,5%, а комплексное введение циклофосфана в дозе 20 мг/кг веса внутримышечно и озонированного физиологического раствора по 0,3 мл внутрибрюшинно крысам с гепатомой 27 общим курсом 10 дней тормозит рост гепатомы 27 в среднем на 65.8% (табл.1), что позволяет предложить применение данного способа для разработки способов торможения и лечения онкологических заболеваний.

Пример 1.

Крысе №3 весом 162 г ввели подкожно в область правого бедра 0,3 инокулема опухолевого штамма гепатома 27, приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г.Москва).

На девятые сутки развития опухоли (размер ее к этому времени составил 0,4 см в диаметре) крыса стала получать инъекции физиологического раствора 0,3 мл внутрибрюшинно. Физиологический раствор вводили в 12.00 часов 5 раз через день.

Через 19 дней после перевивки опухолевого штамма гепатома 27 и 5 инъекций физиологического раствора провели декапитацию крысе под эфирным наркозом. Масса животного на тот момент составила 207 г. Опухоль была 2×3 см, весом 9,24 г.

Пример 2.

Крысе №22 весом 147 г ввели подкожно в область правого бедра 0,3 инокулема опухолевого штамма гепатома 27, приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г.Москва).

На десятые сутки развития опухоли (размер ее к этому времени составил 0,4 см в диаметре) крыса стала получать инъекции 5-фторурацила (5-ФУ) в дозе 10 мг/кг внутримышечно. 5-ФУ вводили в 12.00 часов 5 раз через день.

Через 19 дней после перевивки опухолевого штамма гепатома 27 и 5 инъекций 5-ФУ провели декапитацию крысе под эфирным наркозом. Масса крысы на тот момент составила 216 г. Опухоль была 1,8×1,8 см, весом 6,33 г.

Оценку противоопухолевого эффекта осуществляли по проценту торможения опухоли, который высчитывали по формуле:

Средний показатель массы опухоли в контроле - средний показатель массы опухоли в опытной группе / средний показатель массы опухоли в контроле × 100% (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ).

Процент торможения роста опухоли составил 31,5%, что свидетельствует о противоопухолевом эффекте 5-ФУ.

Пример 3.

Крысе №35 весом 148 г ввели подкожно в область правого бедра 0,3 инокулема опухолевого штамма гепатома 27, приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г.Москва).

На девятые сутки развития опухоли (размер ее к этому времени составил 0,4 см в диаметре) крыса стала получать инъекции озонированного физиологического раствора (ОФР) 0,3 мл внутрибрюшинно в 12,30 дня. На следующий день животное получало 5-ФУ в дозе 10 мг/кг внутримышечно. ОФР и 5-ФУ вводили таким образом, что введение ОФР чередовалось с введением 5-ФУ. Количество сеансов - 5.

Концентрация озона в озоно-кислородной смеси составила 0,2 мг/л, скорость газотока 0,5 л/мин (озонатор АОТ-НСК-01-«С (А-16)», РФЯЦ-ВНИИЭФ, Саров).

Через 19 дней после перевивки опухолевого штамма гепатома 27 и 5 инъекций 5-ФУ провели декапитацию крысе под эфирным наркозом. Масса крысы на тот момент составила 216 г. Опухоль была 1,2×1,2 см, весом 4,23 г.

Оценку противоопухолевого эффекта осуществляли по проценту торможения опухоли, который высчитывали по формуле:

Средний показатель массы опухоли в контроле - средний показатель массы опухоли в опытной группе / средний показатель массы опухоли в контроле × 100% (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ).

Процент торможения роста опухоли составил 54%. Таким образом, в случае применения 5-ФУ в комплексе с ОФР противоопухолевый эффект усиливается, что выражается в повышении процента торможения роста опухоли.

Пример 4.

Крысе №41 весом 148 г ввели подкожно в область правого бедра 0,3 инокулема опухолевого штамма гепатома 27, приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г.Москва).

На десятые сутки развития опухоли (размер ее к этому времени составил 0,4 см в диаметре) крыса стала получать инъекции циклофосфана (Цф) в дозе 20 мг/кг внутримышечно. Цф вводили в 12.00 часов 5 раз через день.

Через 19 дней после перевивки опухолевого штамма гепатома 27 и 5 инъекций Цф провели декапитацию крысе под эфирным наркозом. Масса крысы на тот момент составила 200 г. Опухоль была 1,8×1,9 см, весом 6,59 г.

Оценку противоопухолевого эффекта осуществляли по проценту торможения опухоли, который высчитывали по формуле:

Средний показатель массы опухоли в контроле - средний показатель массы опухоли в опытной группе / средний показатель массы опухоли в контроле × 100% (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ).

Процент торможения роста опухоли составил 28,7%.

Пример 5.

Крысе №58 весом 158 г ввели подкожно в область правого бедра 0,3 инокулема опухолевого штамма гепатома 27, приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г.Москва).

На девятые сутки развития опухоли (размер ее к этому времени составил 0,4 см в диаметре) крыса стала получать инъекции озонированного физиологического раствора (ОФР) 0,4 мл внутрибрюшинно в 12.30 дня. На следующий день животное получало внутримышечно Цф в дозе 20 мг/кг. ОФР и Цф вводили таким образом, что введение ОФР чередовалось с введением Цф. Количество сеансов - 9.

Концентрация озона в озоно-кислородной смеси составила 0,5 мг/л, скорость газотока 0,5 л/мин (озонатор АОТ-НСК-01-«С (А-16)», РФЯЦ-ВНИИЭФ, Саров).

Через 19 дней после перевивки опухолевого штамма гепатома 27 и 9 инъекций ЦФ провели декапитацию крысе под эфирным наркозом. Масса крысы на тот момент составила 218 г. Опухоль была 1,0×1,1 см, весом 3,12 г.

Оценку противоопухолевого эффекта осуществляли по проценту торможения опухоли, который высчитывали по формуле:

Средний показатель массы опухоли в контроле - средний показатель массы опухоли в опытной группе / средний показатель массы опухоли в контроле × 100% (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ).

Процент торможения роста опухоли составил 66%. Таким образом, в случае применения Цф в комплексе с ОФР противоопухолевый эффект усиливается, что выражается в повышении процента торможения роста опухоли.

Литература

1. Алехина С.П., Щербатюк Т.Г. Озонотерапия: клинические и эксперимениальные аспекты. Н.Новгород: Литера. - 2003. - 240 с.

2. Алясова А.В., Конторщикова К.Н. К вопросу озонотерапии при раке молочной железы. / Приложение к нижегородскому медицинскому журналу. «Озонотерапия». - 2003. С.190-191.

3. Астрелина Т.А. Значение кинетических параметров опухолевого роста в чувствительности лейкемической популяции к химиотерапии при острых лейкозах у детей. М., 2006, 55 с.

4. Ауэ Беата, Бааснер Сильке, Бахер Геральд и др. Производные индола, способ их получения, лекарственное средство и способ ингибирования роста опухолевых клеток. Патент RU №2270196.

5. Балканов А.С., Поляков П.Ю. Способ лечения больных с глиальной опухолью головного мозга. Патент RU №2261740.

6. Богер Дейл Л., Череш Дэвид А. Способы ингибирования аггиогенеза и роста опухолей. Патент RU №2269339.

7. Бордюшков Ю.Н., Кирсанова Л.Д. Способ повышения противоопухолевой эффективности в эксперименте. Патент RU №2135178.

8. Гиго Эцио, Дегенги Романо, Муччоли Джампьеро и др. Способ снижения или ингибирования пролиферации онкогенных клеток и используемое в нем соединение (варианты). Патент RU №2240133.

9. Горячев М.Е, Г.А.Бояринов, Бричкин Ю.Д., Скачков Н.В., Шарапова А.Г., Смирнова Н.Н. Коррекция озоном уровня перекисного окисления липидов при проведении общей управляемой гипертермии у онкологических больных. / Приложение к нижегородскому медицинскому журналу. «Озонотерапия». - 2003. С.129-130.

10. Гречканев Г.О., Качалина Т.С. Озонотерапия в гинекологии (современное состояние вопроса). / Приложение к нижегородскому медицинскому журналу «Озонотерапия». - 2003. С.112-115.

11. Загускин С.Л. и др. Способ избирательной деструкции раковых клеток. Патент RU №2147847.

12. Коган А.Х., Грачев С.В., Елисеева С.В. Модулирующая роль СO₂ в действии активных форм кислорода. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 224.

13. Колганов А.С. Способ усиления эффективности противоопухолевого химиопрепарата. Патент RU №2112983.

14. Колганов А.С. Способ усиления эффективности действия противоопухолевого химиопрепарата. Патент RU №97103883.

15. Конторщикова Е.Ю., Качалина Т.С., Гречканев Г.Ю. Изменение показателей перекисного окисления липидов под влиянием озона у онкогинекологических больных в послеоперационном периоде. / Приложение к нижегородскому медицинскому журналу «Озонотерапия». - 2003. С.125-126.

16. Куценюк В.В., Гамалея Н.Ф. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей // Онкология; 2003; 5 (1): 69-72.

17. Лазарев А.Ф., Шойхет Я.П., Карпенко А.А., Мамонтов К.Г., Игитов В.И., Порунов В.Ю, Понамаренко А.А. Способ лечения больных колоректальным раком с метастазами в печень, заявка 2005109750.

18. Лог Уолтер Е. Способ ингибирования роста опухолей головного мозга с помощью отобранных антагонистов интегринов. Патент RU №2255765.

19. Масуда Акира, Сува Масато, Сузуки Масанобу. Производные фенантридиния, фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, способ ингибирования роста раковых клеток. Патент RU №2183626.

20. Мосин В.А., Дриняев В.А., Кокоз Ю.М., Корыстов Ю.Н., Новик Т.С., Кругляк Е.Б., Стерлина Т.С., Шапошникова В.В., Корыстова А.Ф. Средство, усиливающие противоопухолевую активность химиопрепаратов, и способ лечения онкологических заболеваний. Заявка 2002129390.

21. Наполеон Феррара, Кюнг Дзин Ким. Композиция для ингибирования ангиогенеза, моноклональное антитело, полипептид, способ ингибирования роста опухоли (варианты). Патент RU №2170589.

22. Островская Л.А., Блюхтерова Н.Ф., Фомина М.М. и др. Сверхмалые дозы доксорубицина: ингибирование опухолевого роста в эксперименте // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины; 2002; 4: 52-54.

23. Переводчикова Н.И. Противоопухолевая химиотерапия - современные возможности и проблемы. Медицинский вестник, №36 (379), 2006, с.12-13.

24. Помыткин И.А., Соловьев С.П. Способ лечения новообразований. Патент RU №2275920.

25. Разина Т.Г. Фитопрепараты и биологически активные вещества лекарственных растений в комплексной терапии злокачественных новообразований (экспериментальное исследование), автореферат, Томск, 2006, 47 с.

26. Редди Премкумар Э., Редди Рамана М.В. Стирилсульфоновые соединения, фармацевтические композиции на их основе, способ ингибирования роста опухолевых клеток, способ индукции апоптоза опухолевых клеток и способ лечения. Патент RU №2201919.

27. Риллинг З., Фибан Р. Практика озонокислородной терапии. Н.Н.: Ассоциация Российских озонотерапевтов. - 152 с.

28. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: ИИА "Ремедиум". - 2004. - С.106.

29. Сидоренко Ю.С., Франциянц Е.М., Зинькович С.А., Ткаля Л.Д. Способ профилактики опухолевой болезни в эксперименте. Патент RU №2268070.

30. Спектор Т., Портер Д.Д.Т., Рахим С.Д. Применение 5-этинилурацила в качестве инактиватора урацилредуктазы, фармацевтическая композиция, способ ее получения, фармацевтическая композиция для усиления действия или снижения токсичности 5-фторурацила. Патент №2194511.

31. Трещалина Е.М. Противоопухолевая активность веществ природного происхождения. - М.: Практическая медицина. - 2005. - 272 с.

32. Фишман Пнина, Гиргиз Рауф. Очищенный регулятор роста клеток, способ его получения (варианты), способ лечения, профилактики и диагностики рака, состав для ингибирования роста клеток. Патент RU №2199327.

33. Фукузава К., Когуре К., Морита М. Увеличение образования оксида азота и супероксида под действием сукцината α-токоферола, его способность вызывать апоптоз и противораковые свойства // Биохимия. - 2004. - Т.69, №1. - С.64-73.

34. Холтон Роберт А. Таксан, фармацевтическая композиция на его основе и способ ингибирования роста опухоли. Патент RU №2264400.

35. Хохнекер Джон Артур, Макшини П.М.Дж., Ротермел Д.Д. Комбинации, включающие эпотилоны и антиметаболиты. Заявка 2004124943.

36. Цетезис С.п.А., Барторелли А., Конкас Д., Аркаи Кира А., Мор К. Противоопухолевые комбинации, содержащие белки и химиотерапевтические средства. Заявка 2005113167.

37. Шор Н.Ф., Каган В.Е., Лианг И.И. Использование окислительного стресса и механизма передачи сигналов при лечении новообразований, устойчивых к химиотераии // Биохимия. - 2004. - Т.69, №1. - С.48-56.

38. Щербатюк Т.Г., Бояринов Г.А., Горячев М.Е., Самохвалова ЮВ., Полынкина Е.В. Свободнорадикальное окисление липидов в плазме крови при терапии онкологических больных // Тезисы II Российского конгресса по патофизиологии. - Москва, октябрь 2000. С.203.

39. Щербатюк Т.Г., Иванова И.П., Синелыциков А.Д., Баюра О.Б., Потехина Ю.П. Комбинированное использование озона и гамма-излучения в условиях экспериментального онкогенеза // Тезисы докладов 4 Всероссийской конференции "Озон и методы эфферентной терапии в медицине". - Н. Новгород, 2000. С.13-14.

40. Щербатюк Т.Г., Конторщикова К.Н. Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте // Патент на изобретение №213748196 124 167, приоритет от 24.12.96.

41. Lenaz G., Genorva M.L, Merio Pich М., Cavazzoni М. Mitochondria, oxidative stress and aging // The first regional meeting on medical sciences: The role of free radicals in health and disease. - Jerusalem, 1998. - P.188.

42. Mo J., Sun S.F., Wang D.N. Enhancing the antitumor effect of superoxide-gfneratin agents by inhibiting superoxide dismutase in tumor cell. // The first regional meeting on medical sciences: The role of free radicals in health and disease. - Jerusalem, 1998. - P.138.

43. Mo J., Sun S.F., Wang D.N. Enhancing the antitumor effect of superoxide-gfneratin agents by inhibiting superoxide dismutase in tumor cell. Enhancement of the antitumor effect of ionizing radiation by pretreating the tumor with DDC //. - Ibid.- 1998. - P.145.

1. Способ повышения противоопухолевого эффекта химиотерапии, включающий введение во время курса химиотерапии средства, усиливающего действие противоопухолевого препарата, отличающийся тем, что введение противоопухолевого препарата чередуют по дням с введением озонированного физиологического раствора с концентрацией озона в озон-кислородной смеси 0,2 мг/л и скоростью газотока 0,5 л/мин, общим курсом 10 дней.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве противоопухолевого препарата используют 5-фторурацил или циклофосфан.

3. Способ по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что 5-фторурацил используют в разовой дозе 10 мг на 1 кг веса.

4. Способ по любому из пп.1 и 2, отличающийся тем, что циклофосфан используют в дозе 20 мг на 1 кг веса.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что озон вводят внутрибрюшинно.