Способ диагностики устойчивости мембран эритроцитов в периферической крови беременных при герпес-вирусной инфекции
Владельцы патента RU 2367953:
Государственное учреждение Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (RU)
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на устойчивость мембран эритроцитов. Предложен способ диагностики устойчивости мембран эритроцитов периферической крови беременных при обострений герпес-вирусной инфекции, характеризующийся тем, что у здоровых беременных и беременных при обострении герпес-вирусной инфекции в мембранах эритроцитов методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном 10% геле с додецильсульфатом натрия определяют содержание α-спектрина, β-спектрина и белка полосы-4.1, и при уменьшении значения α-спектрина до 6,8±6,02 усл. ед., β-спектрина до 7,1±0,08 усл. ед. и белка полосы-4.1 до 3,2±0,05 усл. ед. диагностируют неустойчивость мембран эритроцитов, приводящей к увеличению числа дегенеративных форм эритроцитов. Изобретение позволяет проследить повреждающее действие токсинов вируса герпеса во время обострения инфекции на цитоскелет эритроцитов периферической крови.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на устойчивость мембран эритроцитов периферической крови беременной.
Под влиянием вируса герпеса во время вспышки инфекции токсины возбудителя активно действуют на цитоскелет мембран эритроцитов, снижая содержание белков спектринового «узлового комплекса».
α-спектрин - 6,8±0,02 усл. ед. (контроль - 8,2±0,07 усл. ед.)
β-спектрин - 7,1±0,08 усл. ед. (контроль - 8,84±0,07 усл. ед.)
белок полосы-4.1 - 3,2±0,05 усл. ед. (контроль - 5,19±0,02 усл. ед.)
Титр антител к вирусу герпеса - 1:12800.
Нарушение структуры цитоскелета мембран эритроцитов влечет за собой нарушение их устойчивости вследствие значительного увеличения процентного содержания дегенеративных форм до 18,3±1,7% (контроль - 81,30±1,1%).
Предложенный способ позволяет проследить повреждающее действие токсинов вируса герпеса во время обострения инфекции на цитоскелет эритроцитов периферической крови, что, в свою очередь, влечет за собой нарушение целостности их мембраны и снижение общего числа дискоцитов, выполняющих в ответственный период жизнедеятельности организма беременной, процессы, направленные на газообмен.
Цель достигается тем, что в периферической крови беременной в период вспышки герпес-вирусной инфекции забирается кровь из вены, в которой одновременно определяется титр антител к вирусу герпеса на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA), проводится в мембранах эритроцитов методом диск-электрофореза на полиакриламидном геле определение спектра белков мембраны эритроцитов, а на монослойном мазке, приготовленном на центрифуге, производится автоматический с помощью компьютера процентный состав эритроцитов различной морфологической формы. Аналогов определения эритроцитов в периферической крови беременных при герпес-вирусной инфекции в зависимости от спектра мембран эритроцитов в литературе не обнаружено.
Заявленный способ имеет следующие приемы.
1. В периферической крови беременной в мембранах эритроцитов методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном геле (10%) с додецилсульфатом натрия были выявлены α-спектрин, β-спектрин, белок полосы-4.1. Эти же исследования проводились и на здоровых беременных.
2. Титр антител к вирусу герпеса определялся иммуноферментным методом на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA).
3. На монослойном мазке периферической крови, полученном с помощью центрифуги «Stat Spin» (USA) производили подсчет на цитфотометрической установке «Mekos» формулу состава морфологических эритроцитов (на 1000 в каждом случае). Программа Mekos-AMK (Анализ Мазка Крови) (Регистрационное удостоверение МЗ РФ 29/10010198/1282-01).
Пример 1
Д. 20 лет, диагноз: беременность 38 недель. Беременность протекала без осложнений. При анализе белкового состава мембран эритроцитов периферической крови методом гель-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном 10% геле с додецилсульфатом натрия обнаружено:
| α-спектрин | 8,4±0,3 усл. ед. |
| β-спектрин | 9,1±0,09 усл. ед. |
| белок полосы 4.1 | 5,9±0,1 усл. ед. |
В периферической крови содержится 93,1±2,9% дискоцитов и 7,0±0,4% дегенеративных форм эритроцитов.
Пример 2
В. 21 года, диагноз: беременность 37 недель. В третьем триместре беременности отмечалась вспышка герпес-вирусной инфекции (титр антител к вирусу герпеса - 1:6400). При анализе белкового состава мембран эритроцитов периферической крови методом гель-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном 10% геле с додецилсульфатом натрия обнаружено:
| α-спектрин | 6,9±0,08 усл. ед. |
| β-спектрин | 7,8±0,15 усл. ед. |
| белок полосы 4.1 | 3,9±0,06 усл. ед. |
В периферической крови содержится 84,5±3,1% дискоцитов и 15,5±0,095% дегенеративных форм эритроцитов.
Способ диагностики устойчивости мембран эритроцитов периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции, характеризующийся тем, что у здоровых беременных и беременных при обострении герпес-вирусной инфекции в мембранах эритроцитов методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном 10% геле с додецильсульфатом натрия определяют содержание α-спектрина, β-спектрина и белка полосы-4.1, и при уменьшении значения α-спектрина до 6,8±0,02 усл. ед., β-спектрина до 7,1±0,08 усл. ед. и белка полосы-4.1 до 3,2±0,05 усл. ед. диагностируют неустойчивость мембран эритроцитов, приводящую к увеличению числа дегенеративных форм эритроцитов.
