Средство гемореологическое, снижающее инсулинорезистентность и восстанавливающее толерантность организма к глюкозе, и фармацевтическая композиция на его основе
Владельцы патента RU 2386634:
Дедов Иван Иванович (RU)
Балаболкин Михаил Иванович (RU)
Спасов Александр Алексеевич (RU)
Вдовина Галина Петровна (RU)
Петров Владимир Иванович (RU)
Анисимова Вера Алексеевна (RU)
Минкин Владимир Исаакович (RU)
Настоящее изобретение относится к применению дигидрохлорида 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а] бензимидазола в качестве соединения, подавляющего агрегацию эритроцитов и снижающего вязкость крови, а также снижающего инсулинорезистентность и восстанавливающего толерантность организма к глюкозе. Также изобретение относится к фармацевтической композиции на основе указанного дигидрохлорида. Технический результат: изучены новые возможности указанного соединения. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 9 ил., 9 табл.
Изобретение относится к фармакологии, а именно к биологически активным веществам и композициям, обладающим одновременно гемореологическими свойствами и свойствами снижать инсулинорезистентность и восстанавливать толерантность организма к глюкозе, которые могут быть использованы при создании препаратов, снижающих инсулинорезистентность и подавляющих агрегацию эритроцитов. Данное сочетание двух видов активности чрезвычайно важно, так как при сахарном диабете на ранних стадиях развития отмечается нарушение микроциркуляции, проявление синдрома повышенной вязкости крови и развития сладж синдрома (Дедов И.И., Фадеев В.В. Введение в диабетологию. - М., 1998. - 199 с.).
Известно, что при сахарном диабете 2 типа ведущим механизмом развития заболевания является снижение чувствительности организма к инсулину - синдром инсулинорезистентности (Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Лечение сахарного диабета и его осложнений. Руководство для врачей. - М.: Медицина, 2005, с.18-21). При этом происходит существенное изменение тромбогенного потенциала крови и ее гемореологических свойств. Так повышается способность тромбоцитов к агрегации, что и определяет высокую способность к тромбообразованию (повышается тромбогенный потенциал крови). Кроме того, повышается способность эритроцитов к агрегации с развитием сладж синдрома, в конечном итоге проявляющегося увеличением вязкости крови и нарушением микроциркуляции (Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Лечение сахарного диабета и его осложнений. Руководство для врачей. - М.: Медицина, 2005, с.283).
Существует ряд синтетических гипогликемических препаратов, снижающих инсулинорезистентность, восстанавливающих толерантность организма к углеводам и предназначенных для лечения сахарного диабета при пероральном применении. Все эти препараты делятся на две основные группы: бигуаниды и производные сульфонилмочевины.
Наиболее близким по выполнению и достигаемому результату является диабетон (гликлазид) 1-(3-азабицикло[3,3,0]октил-3)-3-(пара-толилсульфонил) мочевина (М.Д. Машковский. - Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., исп.и доп.- М.: Новая волна, 2006. - С.561.), разработанный фирмой «Сервье» (Франция). Действие его связано главным образом с восстановлением физиологического профиля продукции инсулина, снижением инсулинорезистентности и снижением агрегации тромбоцитов. Этот препарат уже длительное время используется при сахарном диабете 2 типа не только для сахароснижающего эффекта, но и для стабилизации тромбогенного потенциала крови и гемореологии. Так гликлазид снижает способность тромбоцитов к агрегации, нормализует нарушенный фибринолитический потенциал сосудистой стенки и процесс фибринолиза, замедленный при сахарном диабете. Гликлазид как сахароснижающее средство начинает действовать через 1 час после приема, максимум эффекта наблюдается между 4-м и 8-м часом, продолжительность действия немного меньше 20 часов. Ангиопротективное влияние проявляется лишь после 3-х месяцев лечения и еще более отчетливо через 6-12 месяцев.
Таким образом, применяемые в настоящее время в клинической практике гипогликемические препараты, сочетающие сахароснижающий эффект с микроваскулярным действием, не являются совершенными, так как у некоторых из них ангиопротективное влияние проявляется только после 3-12 месяцев после начала приема (гликлазид) (Балаболкин М.Н., Клебанова Е.М., Креминская В.М. - Лечение сахарного диабета и его осложнений. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.167-177). Поэтому потребность в препаратах, сочетающих сахароснижающий эффект с ангиопротективным действием, но более эффективных, чем уже применяемые в клинической практике, весьма велика, и создание лекарственных средств с подобным оригинальным механизмом действия является актуальным.
Техническим результатом изобретения является повышение эффективности гемореологического действия (способности снижать повышенную вязкость крови и агрегацию эритроцитов), а также проявление свойства снижения инсулинорезистентности и восстановления толерантности организма к глюкозе при сахарном диабете, преддиабете, синдроме инсулинорезистентности и ожирении.
Технический результат достигается дигидрохлоридом 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола (I):
Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола известен как соединение, обладающее гипогликемической (сахаропонижающей) и антиагрегантной активностью (способностью к снижению тромбогенного потенциала крови, т.е. снижению вероятности образования тромбов в кровеносном русле) (Anisimova V.A., Levchenko M.V., Korochina T.B., Spasov A.A., Kovalev S.G., Dudchenko G.P. Fr.Pat. 2691462 (1995), Bull., 95/23; EP 0571253. Ковалев Г.В., Спасов A.A., Анисимова В.А., Вдовина Г.П., Ковалев С.Г., Балаболкин М.И., Мамаева Г.Г., Дудченко Г.П., Левченко М.В. Пат. РФ №206148 (1996); бюл. №20). У соединения выявлена дополнительно гемореологическая активность (способность снижать повышенную вязкость крови, агрегацию эритроцитов и в конечном итоге приводить к восстановлению микроциркуляции), а также активность, снижающая инсулинорезистентность и восстанавливающая толерантность организма к глюкозе при сахарном диабете, преддиабете, синдроме инсулинорезистентности и ожирении.
Технический результат достигается также фармацевтической композицией при следующем соотношении ингредиентов, вес.%:
| дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола | 20-92 |
| крахмал и/или поливинилпирролидон М.м 7800-35000 (ПВП), | |
| и/или натрий карбоксиметилцеллюлоза (NаКМЦ) | |
| или оксипропилметилцеллюлоза (ОПМЦ) | 7-40 |
| кальция и/или магния стеараты | 0,3-1,0 |
| микрокристаллическая целлюлоза (мкц) и/или лактоза | остальное (до 100) |
Крахмал и/или поливинилпирролидон, NаКМЦ, ОПМЦ, мкц, лактозу использовали в качестве наполнителя и связывающего компонента гранул, кальция и/или магния стеарат - в качестве смазывающего антифрикционного компонента (Чуешев В.И., Чернов Н.Е., Хохлова Л.Н. и др. Промышленная технология лекарств, Харьков, Издательство НФАУ МКТ-книга, 2002, т.2, с.330-334). В то же время поливинилпирролидон, NaKМЦ, ОПМЦ и микрокристаллическая целлюлоза использовалась для пролонгирования действия субстанции (Чуешев В.И., Чернов Н.Е., Хохлова Л.Н. и др. Промышленная технология лекарств, Харьков, Издательство НФАУ МКТ-книга, 2002, т.2, с.352-355).
Фармацевтическую композицию получают следующим образом: для этого активное вещество дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола смешивают с рассчитанным количеством лактозы до получения однородной массы, затем увлажняют водным раствором связующего вещества: крахмала, и/или ПВП, и/или (NAKMЦ), и/или ОПМЦ, гранулируют, получая гранулы до 2 мм, сушат при температуре не более 100 градусов, гранулируют, получая гранулы не более 1 мм. Полученные гранулы опудривают антифрикционными веществами: кальция и/или магния стеаратами и мкц. Полученную смесь помещают в твердые желатиновые капсулы с крышечкой или прессуют таблетки массой от 0,1-0,5 г.
Способ получения соединения I заключается в конденсации 2-амино-1-диэтиламиноэтилбензимидазола II с избытком дибромэтана, выделении из образующегося в результате реакции дигидробромида 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола III основания Io действием щелочного агента и последующем переводе последнего в дигидрохлорид I обычными приемами, например действием раствора HCl.
Ниже приведен пример получения соединения I.
Пример 1. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а] бензимидазола (I).
Перемешиваемую суспензию 69,6 г (0,3 моль) 2-амино-1-диэтиламиноэтилбензимидазола (II) в 104 мл (1,2 моль) дибромэтана нагревают 30 мин при 140-145°С. Добавляют 80 мл ДМФА и нагревают смесь еще 10-15 мин. Охлаждают до 20-25°С, осадок отфильтровывают, промывают ДМФА и ацетоном, получая 106 г дигидробромида III (84%). Последний растворяют в 230 мл воды и подщелачивают 40%-ным раствором едкого натра до рН 10. Выделяющееся на поверхности светло-желтое масло (основание Tо) экстрагируют толуолом. Толуольную вытяжку промывают водой и сушат. Толуольный раствор подкисляют добавлением насыщенного раствора хлористого водорода в 2-пропаноле до рН 1. Выделившийся тяжелый бесцветный осадок дигидрохлорида I через 4-5 ч отфильтровывают, промывают ацетоном и высушивают при 100-110°С до постоянного веса. Выход 75 г (90,9%, считая на дигидробромид III, и 75%, считая на исходный амин II). Очищают технический «диабенол» до фармакопейной чистоты перекристаллизацией из 2-пропанола. Т.пл. 258-259°С. Найдено, %: С 54,4; Н 7,2; Cl 21,2; N 16,8. C15H22N4·2HCl. Вычислено, %: С 54,4; Н 7,3; Cl 21,4; N 16,9. УФ-спектр (0,0025%-ный раствор дигидрохлорида I в 95%-ном EtOH), λmax, нм: 217±2, 279±2 и плечо при (282-286)±2. ИК-спектр (ваз. масло) соединения I, см-1: 1665 (C=N). Спектр ЯМР 1Н (D2O), внутренний стандарт - ГМДС, м.д.: 1,29 (6Н, т, 2СН3), 3,35 (4Н, к, 2СН2), 3,69 (2Н, т, CH2N), 4,41 (4Н, с, внутрицикл. (СН2)2), 4,62 (2Н, т, NCH2), 7,41 (4Н, м, аромат. Н).
Реакцию с дибромэтаном можно проводить и в других растворителях, например ксилол, диоксан, диэтиленгликоль, диэтоксиэтан, бензонитрил, пропиленкарбонат, диметилсульфоксид, диметилформамид, однако лучшие результаты все же получены при проведении реакции в избытке дибромэтана.
Ниже приведены примеры получения композиции.
Пример 2. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а] бензимидазола (0,1 г) увлажняют 0,02 г NAKMЦ в виде раствора, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 1 мм. Полученную массу опудривают 0,001 г кальция стеарата с размером частиц не более 0,16 мм и прессуют таблетки на таблеточном прессе.
Пример 3. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола (0,15 г) увлажняют 0,04 г ОПМЦ в виде раствора, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 1 мм. Полученную массу опудривают 0,007 г кальция стеарата с размером частиц не более 0,16 мм и прессуют таблетки на таблеточном прессе.
Пример 4. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]-бензимидазола (0,1 г) смешивают с 0,355 г лактозы, увлажняют 0,04 г ПВП в виде раствора, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 1 мм. Полученную массу опудривают 0,005 г кальция стеарата с размером частиц не более 0,16 мм и прессуют таблетки на таблеточном прессе.
Пример 5. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]-бензимидазола (0,1 г) увлажняют 0,07 г крахмала в виде клейстера, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 2 мм. Полученную массу опудривают 0,004 г магния стеаратом с размером частиц не более 0,16 мм и прессуют таблетки на таблеточном прессе.
Пример 6. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]-бензимидазола (0,15 г) увлажняют 0,06 г ОПМЦ в виде раствора, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 1 мм. Полученную массу опудривают 0,004 г магния стеарата с размером частиц не более 0,16 мм, фасуют и упаковывают в желатиновые капсулы с крышечкой.
Пример 7. Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]-бензимидазола (0,1 г) увлажняют 0,009 г ПВП в виде раствора, гранулируют, сушат, гранулируют и просеивают через сито с диаметром отверстий не более 1 мм, смешивают с 0,09 г мкц до получения однородной смеси. Полученную массу опудривают 0,0017 г магния стеарата с размером частиц не более 0,16 мм, фасуют и упаковывают в желатиновые капсулы с крышечкой. Все полученные таблетки и капсулы дигидрохлорида 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо-[1,2-а]бензимидазола удовлетворяют требованиям ГФ XI издания. Эти данные представлены в табл.1.
| Таблица 1 | |||||
| Показатели качества гранулятов, таблеток и капсул препарата на основе дигидрохлорида 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола, приготовленных с различными вспомогательными веществами | |||||
| Состав | Сыпучесть, г/с | Сила выталкивания, Н | Механическая прочность | Распадаемость, с | |
| сжатие, Н | истирание, % | ||||
| 2 | 6,25±0,23 | 130 | 76,82±1,56 | 99,1±0,4 | 294±19 |
| 3 | 5,63±0,17 | 288 | 82,57±1,92 | 99,3±0,7 | 210±18 |
| 4 | 5,41±0,15 | 171 | 62,93±1,97 | 98,7±0,5 | 222±29 |
| 5 | 6,20±0,34 | 190 | 82,57±2,72 | 99,1±0,6 | 480±11 |
| 6 | 6,39±0,35 | - | - | - | 666±7 |
| 7 | 5,87±0,19 | - | 597±18 |
Предлагаемое соотношение действующих и вспомогательных веществ является оптимальным, обеспечивает получение качественных таблетированных и капсулированных лекарственных препаратов соединения I и достижение необходимого терапевтического эффекта.
Изучение биодоступности фармацевтической композиции
Исследование биодоступности фармацевтической композиции - в соответствии с «Методическими рекомендациями по доклиническому изучению фармакокинетики лекарственных средств» (Фирсов А.А. Методические указания по проведению доклинических исследований фармакокинетики фармакологических веществ и лекарственных средств / А.А.Фирсов, В.П.Жердев и др. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ: под общ. ред. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.217-229).
Эксперименты по изучению фармакокинетики субстанции препарата I и ее фармацевтической композиции с ПВП были выполнены на 100 белых беспородных крысах-самцах массой 160-200 г. Субстанцию и композицию вводили зондом внутрижелудочно в дозе 25 мг/кг (из расчета на субстанцию). Взятие проб крови проводили через 0,5; 1; 2; 3 и 5 часов и мочи через 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 25, 36,48, 60 и 72 часа после введения изучаемого соединения или композиции. Сбор мочи осуществляли в метаболических камерах «Termoplast» (Италия). Кровь стабилизировали 5% раствором цитрата натрия.
Содержание соединения I определяли методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе «HEWLETT PACKARD» (США) серии 1050 с колонкой той же фирмы размером 100×2,1 мм, с сорбентом Hypersil MOS 5 мкм, при помощи элюента, содержащего 30% ацетатного буфера с рН 5.0 и 70% ацетонитрила, со скоростью потока 1 мл/мин, давлением 135 bar и чувствительностью 0,01 AU. Детектирование проводили на УФ-детекторе при длине волны 280 nm. При этих условиях время удержания препарата I - 5 минут. Чувствительность 100 нг/мл. Извлечение данного препарата проводили из цельной крови при экстракции ацетонитрилом в соотношении 1:1. Пробы центрифугировали 15 мин при 3000 об/мин. Концентрацию препарата I определяли с помощью калибровочного графика.
Фармакокинетические параметры рассчитывали методом статистических моментов (Пиотровский В.К. Метод статистических моментов и интегральные модельно независимые параметры фармакокинетики. - Фармакология и токсикология. - 1986. - №5. - т.49. - с.118-127).
Фармакокинетическая кривая (фиг.1) при изучении композиции имеет аналогичный вид по сравнению с кинетикой кривой при введении субстанции соединения I с той лишь разницей, что снижение концентрации происходит не к 3-му, а к 5-му часу. Следует отметить, что при введении субстанции соединения I несколько быстрее достигается максимальная концентрация в крови.
Таким образом, при введении композиции наблюдается увеличение циркуляции соединения I в крови крыс, сопровождающееся увеличением периода полувыведения, временем пребывания молекулы соединения I в организме (MRT) и снижением общего клиренса на 21,4%. Фармакокинетические параметры субстанции I и композиции препарата представлены в табл.2. Относительная биодоступность композиции по отношению к раствору субстанции составляет 127,02%.
Таким образом, можно сделать вывод о биоэквивалентности композиции препарата по отношению к субстанции соединения I и пролонгации терапевтического эффекта этого соединения, связанной с уменьшением клиренса и увеличением периода его полувыведения.
| Таблица 2 | |||||
| Фармакокинетические параметры субстанции соединения и композиции (при пероральном введении в дозе 25 мг/кг) | |||||
| AUC, (мкг/мл) час |
 , час |
Kel, час-1 | Cl, мл/час | MRT, час | |
| Субстанция соединения I | 10,29 | 1,58 | 0,44 | 2,43 | 2,33 |
| Композиция | 13,07 | 1,63 | 0,42 | 1,91 | 3,03 |
При исследовании экскреции соединения I через почки (фиг.2) было отмечено повышение его концентрации в моче со 2-го по 5-й час до максимума, а затем снижение концентрации к 12-му часу после введения субстанции I и к 24-му часу после введения композиции.
При исследовании экскреции соединения с мочой оценивали почечный клиренс (ClR), определяемый отношением кумулятивной экскреции препарата I с мочой к AUC препарата в крови.
Установлено, что почечный клиренс композиции препарата I был ниже данного показателя субстанции I на 26,9% (ClR субст.=2,91 мл/час, ClR лек. формы.=2,91 мл/час).
Таким образом, и по скорости выведения соединения с мочой можно сделать вывод о пролонгации его содержания в организме (при введении в виде композиции) вследствие уменьшения интенсивности выведения через почки.
Фармакологические свойства заявленного соединения
Данное соединение (I) снижает инсулинорезистентность и, тем самым, восстанавливает толерантность организма к глюкозе, подавляет агрегацию эритроцитов и, тем самым, снижает вязкость крови.
1. Влияние соединения на инсулинорезистентность определяли по изменению толерантности животных к глюкозе (пероральная глюкозная нагрузка) (Функциональные методы исследования в эндокринологии / З.И.Цюхно [и др.]. - Киев: Здоровье, 1981. - 240 с.) при:
- латентной форме стрептозотоцинового диабета (преддиабет);
- экспериментальном ожирении;
- экзогенной гиперинсулинемии (инсулинорезистентность)
и по взаимодействию с экзогенным инсулином на собаках с удаленной поджелудочной железой.
2. Влияние соединения на гемореологические свойства крови изучались в опытах при стрептозотоциновом диабете:
- по изменению вязкости крови;
- по подавлению агрегации эритроцитов, вызванной алциановым голубым.
Влияние соединения I на толерантность к глюкозе при латентной форме стрептозотоцинового диабета (преддиабет)
Действие соединения I на содержание глюкозы в крови животных с синдромом измененной толерантности к глюкозе исследовали на животных с латентной формой стрептозотоцинового диабета. Латентную форму стрептозотоцинового диабета воспроизводили по Колесник Ю.М. (Колесник Ю.М. Состояние островкового аппарата поджелудочной железы при экспериментальном сахарном диабете. - Архив патологии. - 1992. - T.54. - 12. - c.24-27) на белых беспородных крысах массой 160-220 г при внутрибрюшинном введении свежеприготовленного на цитратном буфере стрептозотоцина (Sigma) в дозе 30 мг/кг. Не ранее чем через три дня проводили отбор животных с нарушенной толерантностью к глюкозе. Пероральный глюкозотолерантный тест проводили по утрам после ночного (в течение 10-14 ч) голодания животных при интрагастральном введении раствора глюкозы в дозе 3 г/кг. Содержание глюкозы в крови крыс определяли глюкозооксидазным методом, используя наборы Био-Ла-Тест (Чехия, Лахема диагностика). При изучении антигипергликемических эффектов на модели нарушенной толерантности к углеводам у животных с латентной формой стрептозотоцинового диабета предполагалось уточнить влияние вещества на динамику секреции гормона (инсулин). Изучаемое соединение I и препарат сравнения с комбинированным механизмом действия - гликлазид (с выраженным панкреотропным действием) животные получали внутрижелудочно за 2 часа до начала эксперимента в дозах 25 и 50 мг/кг соответственно. По истечении данного времени им перорально вводили раствор глюкозы (3 г/кг) и в течение последующих 2 часов наблюдали за динамикой изменений глюкозы в крови. Для более объективной оценки изменения показателей глюкозной нагрузки считали показатели площади под кривой динамики изменения глюкозы в крови по А.В.Древаль (2005) (Древаль А.В. Анализ результатов перорального нагрузочного теста глюкозой с помощью простой математической модели / А.В.Древаль // Лаб. дело. - 1985. - №12. - С.737-741).
Активность соединений оценивали, принимая во внимание их гипогликемическую активность у животных с латентной формой стрептозотоцинового диабета и фиксируя антигипергликемический эффект исследуемых веществ у этих же животных после пероральной нагрузки глюкозой. Результаты исследования представлены на фиг.1 и в табл.3. Исходное содержание глюкозы у крыс, получавших различные исследуемые вещества, колебалось в пределах от 4,43±0,28 до 5,50±0,29 ммоль/л.
Однако следует отметить, что все животные, которые были взяты в эксперимент, прошли предварительную индивидуальную диагностику (пероральный нагрузочный тест глюкозой). По результатам ее в исследовании были использованы только крысы с нарушенной толерантностью к углеводам. Через два часа после начала эксперимента у животных всех групп, в том числе и контрольных, наблюдалось снижение глюкозы, однако у контрольных крыс эти изменения были статистически не значимы. Вещество I, подобно препарату сравнения гликлазиду, оказывало статистически значимое (Р<0,05) гипогликемическое действие. На фоне экзогенной гипергликемии в группе животных, получавших гликлазид и соединение I, было отмечено достоверное по абсолютным значениям, по сравнению с контрольными животными, снижение уровня глюкозы. Следует отметить, что уменьшение прироста глюкозы в крови в процентах относительно начала проведения глюкозотолерантного теста было зафиксировано у животных, которым вводили гликлазид только через час после углеводной нагрузки. В течение первых 30 минут процентный прирост глюкозы у животных этой группы не отличался от контрольных крыс, получавших растворитель веществ. В то время как соединение I уже на 30 минуте достоверно (Р<0,05) замедляло темпы прироста глюкозы в крови подопытных крыс. По показателям изменения площади под кривой глюкозной нагрузки соединение I превосходило препарат сравнения гликлазид.
| Таблица 3 | ||||||||
| Влияние гликлазида и соединения I при внутрижелудочном введении на уровень глюкозы в крови крыс с экспериментальным сахарным диабетом (стрептозотоцин 30 мг/кг внутрибрюшинно) на фоне пероральной нагрузки глюкозой (3 г/кг) (М±m) | ||||||||
| Исследуемые группы | Ед. изм. | Интервалы времени (мин) | Площадь под кривой (у.е.) | |||||
| -120 | 0 | 30 | 60 | 90 | 120 | |||
| Содержание глюкозы в крови | ||||||||
| Интактные крысы (контр. 1) | мМ | 4,25±0,14 | 3.93±0,08 | 5,19±0,12 | 5,07±0,20 | 4,58±0,15 | 3,95±0,12 | 504,61 |
| % | -7,5 | +32,1 | +29,0 | +16,5 | +0,5 | |||
| Диабет (контр.2) | мМ | 5,50±0,29 | 4,87±0,22 | 8,13±0,38 | 7,93±0,43 | 7,31±0,40 | 6,09±0,26 | 792,28 |
| % к К1 | +29,4 * | +23,9* | +56,6* | +56,4* | +59,6* | +54,1* | ||
| % | -11,4 | +66,9 | +62,8 | +50,1 | +25,1 | |||
| Диабет + Гликлазид (25 мг/кг) | мМ | 4,43±0,28 | 2,78±0,05 | 4,93±0,22 | 4,76±0,14 | 4,31±0,07 | 3,40±0,04 | 595,83 |
| % | -37,2** | +77,34 | +71,22+ | +55,04+ | +22,25+ | |||
| Диабет + соедине- ние I(25 мг/кг) |
мМ | 4,57+0,17 | 3,93±0,13 | 5,87±0,29 | 5,40±0,35 | 4,67±0,26 | 4,37±0,23 | 543,75 |
| % | -14,1** | +49,4+ | +37,4+ | +18,8+ | +11,2+ | |||
| * - изменения достоверны по сравнению с контролем 1 (Р<0,05) + - изменения достоверны по сравнению с контролем 2 (Р<0,05) ** - изменения достоверны по сравнению с исходными данными (Р<0,05) |
По результатам проведенных исследований можно утверждать, что соединение I улучшает сниженные показатели толерантности к глюкозе.
Исследования на животных с экспериментальным ожирением
Ожирение моделировали у старых крыс самцов (возраст 2 года, массой до начала эксперимента 290-350 г), находящихся более трех месяцев на субкалорийной диете с повышенным содержанием жиров (более 80% от общей калорийности рациона и углеводами с высоким гликемическим инсулином. В течение указанного периода животных не ограничивали в пище. В исследование отбирали животных с нарушенной толерантностью к глюкозе и сниженной чувствительностью к инсулину (по пробе Химсворда). Пероральный глюкозотолерантный тест проводили по утрам после ночного (в течение 10-14 ч) голодания животных при интрагастральном введении раствора глюкозы в дозе 3 г/кг. Содержание глюкозы в крови крыс определяли глюкозооксидазным методом, используя наборы Био-Ла-Тест (Чехия, Лахема диагностика).
Животных с ожирением, у которых диагностировали нарушение толерантности к углеводам и синдром инсулинрезистентности, делили на две группы, одна из которых служила контролем, а животным другой вводили исследуемое вещество и наблюдали за изменениями уровня глюкозы в течение двух часов до глюкозной нагрузки и двух часов после нее. Результаты исследования гипо- и антигипергликемического действия изучаемого соединения I представлены на фиг.2 и в табл.4.
Соединение I через 2 часа после введения оказывало гипогликемическое действие в пределах 10%. После нагрузки глюкозой тенденция к снижению уровня глюкозы сохранилась. Следует отметить, что антигипергликемический эффект, наблюдаемый на протяжении всего эксперимента, был стабильным. Достоверные отличия по сравнению с животными контрольной группы наблюдались после 30 минуты перорально введенной глюкозы.
| Таблица 4 | |||||||
| Влияние соединения I (25 мг/кг) при внутрижелудочном введении на уровень глюкозы в крови крыс с нарушенной толерантностью к углеводам и инсулинорезистентностью на фоне пероральной нагрузки глюкозой (3 г/кг) (М±m) | |||||||
| Исследуемые группы | Ед. изм. | Интервалы времени (мин) | |||||
| -120 | 0 | 30 | 60 | 90 | 120 | ||
| Содержание глюкозы в крови | |||||||
| Интактные крысы (контроль 1) | мМ | 4,25±0,14 | 3,93±0,08 | 5,19±0,12 | 5,07±0,20 | 4,58±0,15 | 3,95±0,12 |
| % | -7,5 | +32,1 | +29,0 | +16,5 | +0,5 | ||
| Крысы с нарушенной толерантностью к углеводам (контроль 2) | мМ | 4,15±0,11 | 3,77±0,21 | 4,93±0,21 | 5,22±0,24 | 5,43±0,33 | 5,20±0,15 |
| % | -9,2 | +30,8 | +38,5 | +44,0 | +37,9 | ||
| % к К1 | -2,4 | -4,1 | -5,3 | +2,9 | +18,6* | +31,6* | |
| Крысы с нарушенной толерантностью к углеводам + соединение I (25 мг/кг) | мМ | 4,30±0,17 | 3,87±0,07 | 5,30±0,15 | 4,63±0,19 | 4,23±0,19 | 4,37±0,09 |
| % | -10,0 | +37,0 | +19,6 | +9,3+ | +12,9+ | ||
| * - изменения достоверны по сравнению с контролем 1 (Р<0,05) + - изменения достоверны по сравнению с контролем 2 (Р<0,05) |
Оценка эффективности соединения I у крыс с экзогенной гиперинсулинемией (модель инсулинорезистентности)
Синдром инсулинорезистентности воспроизводили по методу Гордиенко О.Е. с соавторами (Гордиенко О.Е., Мертвецов Н.П., Салганик Р.И. Нарушение толерантности к глюкозе у крыс при длительном введении инсулина - Проблемы эндокринологии. - 1973. - Т.19. - №6. - С.83-91) на белых беспородных крысах массой 160-220 г. Животным на протяжении 27 дней ежедневно подкожно вводили протамин-цинк-инсулин (Elli-Zilly, США) из расчета 2 ЕД/животное. Для исследования отбирали животных с нарушенной толерантностью к глюкозе. Инсулинорезистентность определяли, используя пробу Химсворда (Цюхно З.И., Славнов В.И., Панченко Н.И. и др. Функциональные методы исследования в эндокринологии, Киев: Здоровье. - 1981. - 240 с.). Пероральный глюкозотолерантный тест проводили по утрам после ночного (в течение 10-14 ч) голодания животных при интрагастральном введении раствора глюкозы в дозе 3 г/кг. Содержание глюкозы в крови крыс определяли глюкозооксидазным методом, используя наборы Био-Ла-Тест (Чехия, Лахема диагностика).
Животных с нарушенной толерантностью к углеводам (по результатам проведения глюкозотолерантного теста) и синдромом инсулинрезистентности (диагностика с использованием пробы Химсворда) делили на две группы: первой вводили однократно перорально исследуемое соединение, второй группе - растворитель изучаемого вещества. За динамикой изменений уровня глюкозы в крови начинали наблюдать через 2 часа после введения соединений, а затем на фоне перорального глюкозотолерантного теста глюкозой еще в течение последующих двух часов, отбирая пробы крови через каждые 30 минут.
Результаты по изучению влияния соединения на уровень глюкозы в крови крыс с нарушенной толерантностью к углеводам после длительного введения инсулина представлены на фиг.3 и в табл.5.
По исходному содержанию глюкозы контрольные животные и крысы, получавшие исследуемое вещество, практически не различались (4,15±0,11 ммоль/л, 4,30±0,17 ммоль/л соответственно). При анализе проб крови, которые отбирали через 2 часа после начала эксперимента и через 30 минут после введения глюкозы, достоверных различий у животных контрольной (-9,16% и +18,8%) и опытной групп (-10,0% и +23,26%) также не было обнаружено. Однако по истечение следующих 30 минут было отмечено антигипергликемическое действие соединения I, которое носило достоверный характер (Р<0,05). Прирост глюкозы снизился в 2 раза по сравнению с группой контрольных крыс. Между 60 и 90 минутами эффект продолжал нарастать и к полутора часам после моделирования гипергликемии достигал всего +9,30% против +44,03% в контроле (Р<0,05). К 120 минуте, что соответствовало 4 часу эксперимента, уровень глюкозы стал несколько повышаться, однако разница между приростом глюкозы, в процентном выражении, в группе животных, получавших препарат I, и контрольных крыс по-прежнему оставалась в пределах 60% (Р<0,05). Значения концентрации глюкозы у животных, получавших вещество, практически приблизились к исходным данным, в то время как у крыс контрольной группы превышали на 25% содержание глюкозы, отмеченное в начале эксперимента.
Таким образом, антигипергликемический эффект подтверждает присутствие у вещества I помимо панкреотропного действия, которое не может быть реализовано на данной экспериментальной модели, экстрапанкреатических эффектов.
| Таблица 5 | |||||||
| Влияние соединения I (25 мг/кг) при внутрижелудочном введении на уровень глюкозы в крови крыс с нарушенной толерантностью к углеводам (старые животные с ожирением) после пероральной нагрузки глюкозой (3 г/кг) (М±m) | |||||||
| Исследуемые группы | Ед. изм. | Интервалы времени (мин) | |||||
| -120 | 0 | 30 | 60 | 90 | 120 | ||
| Содержание глюкозы в крови | |||||||
| Интактные крысы (контроль 1) | мМ | 4,25±0,14 | 3,93±0,08 | 5,19±0,12 | 5,07±0,20 | 4,58±0,15 | 3,95±0,12 |
| % | -7,5 | +32,1 | +29,0 | +16,5 | +0,5 | ||
| Крысы с нарушенной толерантностью к углеводам (контроль 2) | мМ | 4,27±0,22 | 4,26±0,29 | 5,51±0,35 | 5,54±0,32 | 5,47±0,37 | 5,23±0,36 |
| % | -0,2 | +29,3 | +30,1 | +28,4 | +22,8 | ||
| % к К1 | +0,5 | +8,4 | +6,2 | +9,3 | +19,4* | +32,4* | |
| Крысы с нарушенной толерантностью к углеводам + соединение I (25 мг/кг) | мМ | 4,75±0,15 | 4,30±0,12 | 4,75±0,25 | 4,70±0,10 | 4,60±0,10 | 4,65±0,25 |
| % | -9,5 | +10,5 | +9,3+ | +7,0+ | +8,1 | ||
| * - изменения достоверны по сравнению с контролем 1 (Р<0,05) + - изменения достоверны по сравнению с контролем 2 (Р<0,05) |
Влияние соединения I на сахароснижающее действие экзогенно введенного инсулина
Одним из косвенных показателей повышения чувствительности тканей организма к инсулину может быть влияние новых веществ на выраженность гипогликемического действия инсулина в опытах на животных с удаленной поджелудочной железой по схеме В.A.Houssay (1960).
Опыты проводили на 5-ти панкреатэктомированных собаках массой 8,6-11,5 кг. Удаление поджелудочной железы проводили под гексеналовым наркозом (50 мг/кг внутрибрюшинно) в асептических условиях. Исследование проводили на 3-4 день после операции, когда содержание глюкозы достигло 23-26 ммоль/л. К этому времени животные худели, у них развивалась полиурия, полидипсия, полифагия, т.е. клинические признаки, характерные для тяжелой формы сахарного диабета, основной причиной развития которого является дефицит инсулина. Влияние соединения I на сахароснижающий эффект инсулина проводили в три этапа.
1. Изучали влияние соединения I на глюкозу крови у панкреатэктомированных собак. Исследуемое вещество I вводили животным однократно внутривенно в дозе 5 мг/кг. Сахароснижающее действие соединения изучали на протяжении 6 часов. Пробы крови забирали через каждый час.
2. Изучали сахароснижающее действие инсулина для инъекций (Минмедпром, Московский эндокринный завод), введенного многократно внутривенно в дозе 0,04 ЕД/кг в течение 3-х часов с 30-минутными интервалами.
3. Изучали влияние инсулина в комплексе с соединением I на содержание глюкозы крови. Вещество в дозе 5 мг/кг вводили внутривенно с первой порцией инсулина. Наблюдение за содержанием глюкозы в крови опытных животных продолжали до исчезновения гипогликемического эффекта. Пробы крови отбирали через каждый час на протяжении всего эксперимента. Обобщенные данные по влиянию инсулина и вещества I, введенным отдельно, и инсулина, введенного в комплексе с соединением I, на концентрацию глюкозы в крови панкреатэктомированных собак приведены на фиг.4.
Соединение не влияло на содержание глюкозы в крови у собак с удаленной поджелудочной железой. Так, изменения концентрации глюкозы колебались в пределах 2,7-4,6% и были статистически не достоверны. После введения инсулина панкреатэктомированным собакам через час гормон снизил содержание глюкозы в крови на 23%. Гипогликемический эффект продолжал нарастать и через 2 часа был максимально выражен, содержание глюкозы в крови собак к этому времени равнялось 16,6 ммоль/л вместо исходных 23,2 ммоль/л, что соответствовало снижению глюкозы в крови опытных животных на 28%. На 3-м часу эксперимента у 3-х из 5-ти собак глюкоза в крови удерживалась на этом уровне, однако (по обобщенным данным) прослеживалась тенденция к ее стабилизации, которая наблюдалась в последующее время. Между 5-м и 6-м часом эксперимента концентрация глюкозы в крови достигла исходного уровня, а через 6 часов у 3-х собак даже несколько превысила концентрацию глюкозы, которая отмечалась в крови животных до начала эксперимента. При совместном введении инсулина для инъекций с соединением I концентрация глюкозы в крови собак через час снизилась на 23%, что соответствовало гипогликемическому эффекту инсулина. Ко 2-му часу эксперимента наблюдалось усиление сахароснижающего действия инсулина, которое к 3-му часу после введения стало статистически значимым. Максимальное снижение глюкозы на 46% отмечалось к 4-5 часу наблюдения. Гипогликемическое действие инсулина, введенного в комплексе с соединением I в 2,7 раза превысило сахароснижающий эффект, который наблюдался при введении одного инсулина. Через 6 часов концентрация глюкозы в крови начала повышаться и к 9-му часу эксперимента содержание глюкозы в крови нормализовалось.
Таким образом, снижение уровня глюкозы в крови панкреатэктомированных собак под влиянием инсулина, введенного вместе с соединением, было более интенсивным и длительным, чем при применении одного инсулина.
Проведенные исследования дают основание сделать заключение, что изучаемое вещество повышает чувствительность тканей к действию инсулина.
Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать вывод о том, что изучаемое соединение I снижает инсулинорезистентность тканей организма и восстанавливает толерантность организма к углеводам в условиях патологии углеводного обмена. Вероятно, выявленный эффект соединения I связан с его свойством повышать чувствительность тканей организма к действию инсулина.
Гемореологические свойства заявленного соединения I
Гемореологические изменения оценивали по двум важным показателям - вязкость крови и способность эритроцитов к агрегации, индуцированной алциановым голубым в условиях экспериментальной патологии - стрептозотоцинового диабета.
Синдром гипервязкости вызывали внутрибрюшинным введением стрептозотоцина («Serva», Германия) в дозе 40 мг/кг (Баранов В.Г. Экспериментальный сахарный диабет. Ленинград: Наука, 1983 - 216 С.). В опыт брали животных, у которых развивалась стойкая гипергликемия (не менее 17 ммоль/л). Исследуемые вещества, растворенные в физиологическом растворе, вводили крысам внутрижелудочно в течение семи дней в дозе 5 мг/кг. Контрольные животные получали эквивалентный объем растворителя. Пробы крови для исследования гемореологических показателей забирали из брюшного отдела аорты крыс, находящихся под тиопенталовым наркозом (40 мг/кг), который по данным литературы не влияет на реологические параметры крови (Галенок В.А., Гостинская Е.В, Диккер В.Е. Гемореология при нарушениях углеводного обмена - Новосибирск: Наука, 1987. - 342.).
Измерение вязкости крови проводили на реологическом анализаторе крови АКР-2 (Россия) при семи скоростях сдвига, моделирующих различную интенсивность кровотока в сосудах (Анализатор вязкости крови / Н.А.Добровольский, Ю.М.Лопухин, А.С.Парфенов и др. // Реологические исследования в медицине: Сб. науч. тр. - М.: НЦХ РАМН, 1998. - С.45-51). Производилась стандартизация образцов крови к единому гематокриту 45% путем добавления или изъятия необходимого количества плазмы.
Индекс агрегации эритроцитов (ИАЭ) получали расчетным путем - отношением вязкости крови при 20°С к вязкости крови при 200 с-1 (Dintenfass L. Modifications of blood rheology during aging and agerelated pathological conditions // Aging (Milano). - 1989. - №1. - P.99-125). Агрегацию эритроцитов изучали на двухканальном лазерном анализаторе агрегации (модель 220LA) научно-производственной фирмы «Биола» (Россия) (Спасов А.А., Островский О.В., Кучерявенко А.Ф., Дегтярев А.Н. Изучение агрегации эритроцитов на лазерном агрегогметре // Клиническая лабораторная диагностика. - 2000. - №5. - С.21-23).
Исследование агрегационной способности эритроцитов проводили на отмытых красных кровяных клетках, используя в качестве агрегирующего агента 50 мкМ водный раствор алцианового голубого («Sigma», США).
Результаты эксперимента представлены в табл.6 и в табл.7.
| Таблица 6 | |||||
| Влияние соединения I и препарата сравнения гликлазида на вязкость крови (сП) крыс со стрептозотоциновым диабетом при различных скоростях сдвига (при семидневном внутрижелудочном введении в дозе 5 мг/кг) (М±m) | |||||
| N п/п | Изучаемые соединения и препараты | Вязкость крови при различных скоростях сдвига | ИАЭ | ||
| 200 с-1 | 100 с-1 | 20 с-1 | |||
| 1. | Контроль | 3,93±0,09 | 4,03±0,09 | 5,95±0,04 | 1,51 |
| 2. | Соединение I | 3,52±0,05* | 3,6±0,06* | 4,45±0,10*♣ | 1,26 |
| 3. | Гликлазид | 3,7±0,06* | 3,77±0,06 | 4,95±0,10* | 1,33 |
| * - данные достоверны по отношению к контролю (р<0,05) ♣ - данные достоверны по отношению к гликлазиду (р<0,05) ИАЭ - индекс агрегации эритроцитов |
| Таблица 7 | ||
| Влияние соединения I и препарата сравнения гликлазида на алциан-индуцируемую агрегацию эритроцитов крови крыс со стрептозотоциновым диабетом (при семидневном внутрижелудочном введении в дозе 5 мг/кг) (М±m) | ||
| №п/п | Изучаемые соединения и препараты | Агрегация эритроцитов, Δ% по отношению к контролю |
| 1. | Соединение I | -78,76±2,05*♣ |
| 2. | Гликлазид | -53,66±2,59* |
| * - данные достоверны по отношению к контролю (р<0,05) ♣ - данные достоверны по отношению к гликлазиду (р<0,05) |
Так, в результате проведенного исследования было показано, что соединение I снижает вязкость крови крыс со стрептозотоциновым диабетом, при этом по активности превосходя препарат сравнения гликлазид.
Таким образом, заявленное соединение I оказывает выраженное гемореологическое свойство, ранее не известное (не описанное), которое заключается в снижении агрегации эритроцитов и нормализации реологических свойств крови (вязкость крови) у крыс с синдромом гипервязкости.
Изучение острой токсичности соединения I и фармацевтической композиции
Среднесмертельную дозу (ЛД50) субстанции и лекарственной формы определяли по Арзамасцеву Е.В. с соавторами (Арзамасцев Е.В., Гуськова Т.А., Березовская И.В. и др. - Методические указания по изучению общетоксичекого действия фармакологических веществ.- Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.170-204). Эксперименты были выполнены на белых нелинейных крысах обоего пола массой 180-200 г. Препарат I вводили однократно перорально, крысам-самцам в дозах 1000, 1500, 3000, 4000, 5000 мг/кг, крысам-самкам в дозах 1200, 1500, 3000, 5000, 6000 мг/кг. Сразу после введения исследуемого вещества животные находились под постоянным наблюдением в течение 4-х часов, в последующие дни за ними наблюдали два раза в сутки: утром и вечером. Длительность эксперимента составила 14 дней. Оценку общего состояния и поведения животных проводили по следующим показателям: характеру двигательной активности, координации движений, наличию судорог и их характеру, наличию тремора, рефлекторных реакций на внешние раздражители - звуковые (постукивание по клетке), тактильные (прикосновение к коже), оценивали состояние шерстяного покрова (шерсть взъерошенная или гладкая, блестящая или тусклая). По окончании срока наблюдения подсчитывали процент павших и выживших животных и вычисляли ЛД50 по методу Litchfild и Wilcoxon (Беленький М.Л. - В кн.: Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1968. - 151 с.).
По результатам исследований острой токсичности вещества I установлены уровни его летальных доз, различные для крыс-самок и самцов, и характерные признаки интоксикации.
Животные начинали гибнуть уже при употреблении ими соединения I в дозе 1500 мг/кг. Однако случаи гибели были единичными, и картина отравления не была четко выражена. Начиная с дозы 3000 мг/кг и заканчивая дозой 6000 мг/кг, у всех животных наблюдались признаки отравления. Картина отравления и гибели животных была примерно одинаковой во всех группах животных. Разница заключалась лишь в количестве погибших животных, зависящем от дозы употребляемого препарата, быстроте развития симптомом отравления и сроках наступления смерти. После введения препарата отмечалась резкая седация, снижение двигательной активности вплоть до полной неподвижности, затем возникали клонические судороги, и животное погибало. У животных, оставшихся в живых, на следующие сутки отмечалась вялость, снижение двигательной и пищевой активности.
На основании полученных данных по изучению острой токсичности субстанции препарата I была рассчитана среднесмертельная доза (ЛД50). Также была определена среднесмертельная доза для лекарственной формы соединения I. Обобщенные данные острой интоксикации, вызываемой у крыс при пероральном введении изучаемого препарата, приведены в табл.8.
По результатам проведенных исследований дигидрохлорид I можно отнести к малотоксичным веществам. По сравнению с противодиабетическими препаратами (табл.9), применяемыми в клинической практике для лечения инсулиннезависимого сахарного диабета, он менее токсичен, чем производные гуанидина - препарата метформина, и практически равен по данному показателю производным сульфонилмочевины I и II генерации.
| Таблица 8 | ||
| Влияние соединения I и фармацевтической композиции при однократном пероральном введении на гибель крыс | ||
| Название препаратов | Среднесмертельная доза (ЛД50) мг/кг | |
| Самки | Самцы | |
| Субстанция соединения I | 2321,0 (1646,27-3273,01) | 2740,91 (2017,54-3723,62) |
| Композиция | 3569,46 (2730,59-4666,05) | 3554,45 (2320,17-5445,33) |
| Таблица 9 | ||
| Среднесмертельная доза (ЛД50) антидиабетических препаратов при пероральном введении (данные литературы) | ||
| Название препарата | ЛД50, мг/кг | Автор |
| Толбутамид | 2500 | Галлер Г. и др., 1973° |
| Хлорпропамид | 2390 | Галлер Г. и др., 1973° |
| Гликлазид | 3000 | Duhault J. et al.,1972°° |
| Метформин | 1000 | Галлер Г. и др., 1973° |
| ° - Галлер Г., Штрауцерберг С. Пероральная терапия диабета. - М.: Медицина, 1973. - 298 с. °° - Duhault J., Baulanger М., Beregi L. The pharmacology of S 1702. A new highly effective oral antidiabetic drug with unusual properties. - Arzneim. Forsch. - 1972. - V.22. - P.1682-1685. |
1. Применение дигидрохлорида 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I
в качестве соединения, подавляющего агрегацию эритроцитов и снижающего вязкость крови, а также снижающего инсулинорезистентность и восстанавливающего толерантность организма к глюкозе.
2. Фармацевтическая композиция, снижающая инсулинорезистентность и восстанавливающая толерантность организма к глюкозе при сахарном диабете, преддиабете, синдроме инсулинорезистентности и ожирении, а также подавляющая агрегацию эритроцитов и снижающая вязкость крови, включающая в качестве активного начала дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I:
взятый в эффективном количестве.
3. Фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит вспомогательные вещества при следующем соотношении ингредиентов, вес.%:
Дигидрохлорид 9-диэтиламиноэтил-2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола, 20-92
| Крахмал, и/или поливинилпирролидон М.м. 7800-35000 (ПВП), | |
| и/или натрий карбоксиметилцеллюлоза (NAKMЦ), | |
| или оксипропилметилцеллюлоза (ОПМЦ) | 7-40 |
| Кальция и/или магния стеараты | 0,3-1,0 |
| Микрокристаллическая целлюлоза (мкц) и/или лактоза | Остальное |
